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荧光素激发发射波长

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370-415
520-540
?
5-Hydroxy Tryptamine (HAT)
370-415
520-540
?
5-ROX (carboxy-X-rhodamine)
578
567
604
591
?
5-TAMRA (5-Carboxytetramethylrhodamine)
548
542
552
568
?
6-Carboxyrhodamine 6G
492
518
?
5-Carboxynapthofluorescein?(pH 10)
512/598
563/668
Ratio Dye, pH
5-Carboxytetramethylrhodamine (5-TAMRA)
542
568
?
5-FAM (5-Carboxyfluorescein)
492
518
?
5-HAT (Hydroxy Tryptamine)
480
520
Cell Proliferation Assay
Dabcyl
453
?
?
Dansyl
340
578
?
Dansyl Amine
337
517
?
Dansyl Cadaverine
335
518
?
Dansyl Chloride
372
518
?
Dansyl DHPE
336
517
?
Dansyl fluoride
Blue Fluorescent Protein
381, 382, 383
445, 447, 448
blue shifted GFP (Y66H)
Blue Fluorescent Protein
BFP/GFP FRET
?
?
?
Bimane
398
490
?
Bisbenzamide
360
461
?
Bisbenzimide (Hoechst)
580, 624-645
?
Alizarin Red
530-560
580
?
Allophycocyanin (APC)
630, 645
655, 660
?
AMC, AMCA-S
345
445
?
AMCA (Aminomethylcoumarin)
345
347
425
444
?
AMCA-X
353
442
?
Aminoactinomycin D
360
461
?
bis-BTC = Ratio Dye, Zn2+
455/405
529/505
Ratio Dye, Zn2+
Blancophor FFG
390
470
?
Blancophor SV
370
435
?
BOBO? -1
462
481
?
BOBO? -3
570
602
?
Bodipy 492/515
490
515
442
Ca2+ Dye, bioluminescence
Coelenterazine f
(437)
473
Ca2+ Dye, bioluminescence
Coelenterazine fcp
?
452
Ca2+ Dye, bioluminescence
Coelenterazine h
(437)
464
Ca2ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ Dye, bioluminescence
505
534
?
Di-4-ANEPPS
496
705
?
Di-8-ANEPPS (non-ratio)
488
498
605
713
?
DiA (4-Di-16-ASP)
505
511
?
Bodipy R6G SE
528
547
?
Bodipy TMR
542
574
?
Bodipy TMR-X conjugate
544
573
?
Bodipy TMR-X, SE
544
570
?
Bodipy TR
589
617
?
Bodipy TR ATP
591
620
?
Bodipy TR-X SE
588
616
Ratio Dye, Zn2+
Calcein
494
517
?
Calcein Blue
373
440
?
Calcium Crimson?
588, 589
611, 615
?
Calcium Green
501, 506
531
?
Calcium Green-1 Ca2+ Dye
506
531
Ca2+ Dye
Calcium Green-2 Ca2+
460
575
?
Coumarin Phalloidin
387
470
?
C-phycocyanine
?
?
?
CPM Methylcoumarin
384
469
Methylcoumarin
CTC
400-450
602
?
CTC Formazan
?
?
?
Cy2?
489
506
?
8
554
568
?
?
581
598
?
Cy3?
514
518
543
?
6-CR 6G
518
543
?
6-JOE
520
548
?
7-Amino-4-methylcoumarin
351
430
?
7-Aminoactinomycin D (7-AAD)
546
647
?
7-Hydroxy-4-methylcoumarin
360
449, 455
?
9-Amino-6-chloro-2-methoxyacridine
555
655
?
Aminocoumarin
346
350
442
445
?
Aminomethylcoumarin (AMCA)
345
347
425
444
?
Anilin Blue
?
600
?
Anthrocyl stearate
360-381
446
?
APC (Allophycocyanin)
630, 645
655, 660
506/503
536
Ca2+
Calcium Green-5N Ca2+
506
532
Ca2+
Calcium Green-C18 Ca2+
509
530
Ca2+
Calcium Orange
549
575
576
?
Calcofluor White
385, 395, 405
437, 440, 445
?
Carboxy-X-rhodamine (5-ROX)
460
650
?
Acridine Orange, both DNA & RNA
440-480
520-650
?
Acridine Red
455-600
560-680
?
Acridine Yellow
470
550
?
Acriflavin
436
520
?
Acriflavin Feulgen SITSA
355-425
Alexa Fluor 594?
590, 594
617, 618
?
Alexa Fluor 633?
632
650
?
Alexa Fluor 647?
647
666
?
Alexa Fluor 660?
668
698
?
Alexa Fluor 680?
679
702
?
Alizarin Complexon
530-560, 580
412, 430
471, 474
?
ABQ
344
445
?
Acid Fuchsin
540
630
?
ACMA (9-Amino-6-chloro-2-methoxyacridine)
412, 430
471, 474
?
Acridine Orange + DNA
502
526
?
Acridine Orange + RNA
?
BO-PRO? -1
462
481
?
BO-PRO? -3
544
570
?
Brilliant Sulphoflavin FF
430
520

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6-羧基荧光素吸收光谱

6-羧基荧光素吸收光谱

6-羧基荧光素吸收光谱
6-羧基荧光素（FAM）是一种常用的荧光染料，广泛应用于生物分子的标记和检测。

其吸收光谱是指在不同波长的光照射下，6-羧基荧光素能够吸收光能并转化为激发态电子的能量。

6-羧基荧光素的吸收光谱范围较窄，主要在紫外光区域。

根据实验数据，6-羧基荧光素的最大吸收波长约为490 nm。

在这个波长下，6-羧基荧光素能够吸收最多的光能，从而产生最强的荧光信号。

需要注意的是，6-羧基荧光素的吸收光谱可能会受到溶液中的其他物质、pH值等因素的影响。

因此，在进行实验时，需要根据实际情况调整实验条件，以获得最佳的荧光信号。

6-羧基荧光素的发射光谱也是非常重要的。

在最大吸收波长处，6-羧基荧光素的发射波长约为518 nm。

这意味着当6-羧基荧光素被激发后，它会发出波长为518 nm的荧光信号。

这种荧光信号可以被荧光显微镜或流式细胞仪等设备检测到，从而实现对生物分子的定量分析。

6-羧基荧光素作为一种重要的荧光染料，其吸收光谱和发射光谱对于生物分子的标记和检测具有重要的意义。

通过研究和应用这些光谱信息，可以更好地理解6-羧基荧光素的性质和应用，为生物医学研究和临床诊断提供有力的支持。

常用染料的激发与发射

常用染料的激发与发射

常用荧光染料的激发和发射波长备注：发射波长的颜色及频率荧光染料的使用吖啶橙：吖啶橙是最经典的灵敏的荧光染料，它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光，DNA呈绿色荧光，RNA呈橙红色荧光。

EB:染色DNA和RNA 荧光素双醋酸酯(FDA)：FAD本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。

一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生具有荧光的极性物质荧光素。

它不能自由出入原生质膜，因此有活力的细胞能产生荧光,无活力的原生质体不能分解FAD无荧光产生。

5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用时取贮存液加入L甘露醇中.使用时,使最终浓度为%。

荧光染料Ho33342和若丹明123:活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。

一般的生物染料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性，染料才能进入细胞内。

但有些活体染料能进入活细胞，并对细胞不产生毒性作用。

荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。

Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合，若丹明123能与线粒体进行特异的结合。

采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。

荧光组化实验中应注意的几个问题：1．每种荧光染料，均有自己的最适PH值，此时荧光最强。

当pH改变时，不仅荧光强度减弱，而且波长将有所改变，因此荧光检测时要在一定的PH值的缓冲液中进行。

2．一放荧光染色在20℃以下时荧光比较稳定，温度升高常出现温度猝灭。

3．在荧光观察中，常因激发光的增强而使样品荧光很快衰竭，造成观察和照相困难。

为此最好用能量小的长波长光进行观察，需照相时再适当增强激发光。

4．一般荧光染液的浓度在万分之一以下，甚至亿万分之一，也能使标本着色。

在一定的限度内，荧光强度可随荧光素的浓度增加而增强，但超过限度，荧光强度反而下降，这是由于荧光分子间的缔合而使自身荧光猝灭所致。

apc荧光蛋白分子量

apc荧光蛋白分子量

apc荧光蛋白分子量
荧光素APC（Allophycocyanin，简称APC）是一种荧光染料，通常用于细胞生物学、免疫学和流式细胞仪等领域中的细胞标记和分析。

它是一种藻类色素，最初从蓝藻（cyanobacteria）和红藻（red algae）中分离出来，后来被广用于生物学研究中。

APC具有强烈的吸收和荧光发射特性，通常在流式细胞仪分析、immunity染色和细胞成像等生物学应用中用作荧光标记物。

以下是有关荧光素APC的一些重要信息：
1. 荧光性质：APC具有较长的激发波长和发射波长，通常在可见光和近红外光谱区域。

它的激发波长通常在600-650纳米范围内，而发射波长在650-680纳米范围内。

这使得APC的荧光在红色和近红外光谱中可见。

2. 应用领域：荧光素APC广用于分子生物学、细胞生物学和免疫学研究中，用于标记抗体、蛋白质、生物分子等，以便进行细胞表面标记、蛋白质定量、细胞分析和分选等实验。

它特别适用于多色标记实验，因为可以与其他荧光染料（如FITC、PE等）一起使用，以同时检测多个分子。

3. 分子量：荧光素APC的分子量较大，通常在650至660纳米范围内发射荧光。

这种染料的吸收峰位于约650纳米附近，因此它通常用于红色激光的激发光源下进行流式细胞仪分析。

4. 高摩尔吸光系数：APC具有高摩尔吸光系数，这意味着它在光谱上吸收光的能力很强。

这使得APC在生物学实验中具有更高的灵敏
度和更低的背景噪声。

常见荧光素

常见荧光素

常见荧光素：（1）异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC) ：FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和酒精溶剂。

有两种异构体，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性与蛋白质结合力等方面都更优良。

FITC分子量为389.4，最大吸收光波长为490～495nm，最大发射光波长为520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。

FITC在冷暗干燥处可保存多年，是目前应用最广泛的荧光素。

其主要优点是人眼对黄绿色较为敏感，通常切片标本中的绿色荧光少于红色。

（2）四乙基罗丹明(rhodamine, RB200) ：RB200为橘红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮，性质稳定，可长期保存。

最大吸收光波长为570nm，最大发射光波长为595～600nm，呈现橘红色荧光。

（3）四甲基异硫氰酸罗丹明(tetramethyl rhodamine isothiocynate, TRITC)：TRITC为罗丹明的衍生物，呈紫红色粉末，较稳定。

最大吸收光波长为550nm，最大发射光波长为620nm，呈现橙红色荧光，与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。

因其荧光淬灭慢，也可用于单独标记染色。

（4）镧系：镧系螯合物某些3价稀土镧系元素如铕（Eu3）、铽（Tb3）、铈（Ce3）等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光，其中以Eu3 应用最广。

Eu3螯合物的激发光波长范围宽，发射光波长范围窄，荧光衰变时间长，最适合用于分辨荧光免疫测定。

（5）藻红蛋白（P-phycoerythrin，PE）：PE是在红藻中所发现的一种可进行光合作用的自然荧光色素，分子量为240kD的蛋白，最大吸收峰为564 nm，当使用488 nm激光激发时其发射荧光峰值约为576 nm，对于单激光器的流式细胞仪来说，推荐使用585±21nm的带通滤光片，双激光器的流式细胞仪推荐使用575±13nm的带通滤光片。