秋水仙素诱导产生花生早熟突变体
- 格式:pdf
- 大小:174.20 KB
- 文档页数:2
维普资讯 http://www.cqvip.com
5450 安徽农业科学 2oo6年
直至滤纸完全浸润。根尖接触到处理液,室温放置,处理时
间分别设置为T_(12 h)、T2(24 h)、T3(36h),以未做处理的材
料作为对照。
1.2.3细胞学观察。处理结束后,将萌发种子取出,用清水
反复冲洗以除去多余的秋水仙素溶液。切取一些根尖顶端
分生组织置95%酒精:冰醋酸=3:l的固定液中过夜;反复水
洗除去残留固定液后置于1 mol/L的HC1液中,在6o℃水浴
条件下水解l0 12 rnin;水洗后用卡宝品红染色,压片镜检,
统计染色体数目。
1.2.4变异植株的获得。处理后的幼芽转移到保持湿润的
培养皿中,室温条件下培育1周.测量幼根的长度,随后转入
营养钵中砂培。待长至数片真叶以后,标记单个处理幼苗
(如T_ 代表T】处理的幼苗m),切取各幼苗的部分根尖分
生组织置于0.1%的8一羟基喹啉溶液中预处理3 h左右,而后
同前步骤进行固定、染色、压片和染色体计数,以明确其染色
体数目。所有幼苗均移栽至安徽省农科院试验田(合肥),覆
膜,观察处理植株的田间性状表现。
2003年秋收获的处理植株,按单株分别收获种子;2(304
年春将其按单株播种,筛选并标记熟期提前的单株材料(如
Tl ,代表T1. 处理幼苗的单株后代植株n)。
2OO4年秋收获的熟期提前的处理单株后代材料于2005
年春种植成单株系,熟期变异性状稳定的单株系收获后,于
2OO6年春种植成品系,继续从中筛选变异稳定、其他综合农
艺表现优异的改良品系。
2结果与分析
2.1秋水仙素诱导的染色体加倍效果研究结果表明,花
生萌发初期的幼苗对秋水仙素诱导处理比较敏感,以0,l%
秋水仙素处理萌发2 3 d、长度约l em左右的花生根尖12 h
就可以获得较高的加倍频率(2 n=8 x=80的根尖获得频率
>80%,正常花生体细胞染色体数2 n=40);处理时间达到或
超过24 h则可以获得大量染色体数目超过80的根尖细胞,
如2 n=120、2 n:160,甚至经多次加倍而成为2 n=240的染
色体组成。
2.2诱导处理幼苗的生长情况 由表l可见,花生萌发种
芽经秋水仙素处理后,幼苗的生长受到阻碍。处理后的幼根
尖伸长生长受到抑制。速度明显减慢,根顶端发生膨大,并且
随着处理时间的延长抑制效果越明显,当诱变处理时间超过
12 h,幼苗培育1周后幼根的长度较对照减少l/2以上。
表1 秋水仙素处理对花生幼苗根长的影响
2.3花生变异单株的获得在2003年度移栽至大田的100
个诱变处理幼苗中,发现一些性状表现异常,其中许多表现
为植株瘦小、结实率差,因不符合育种选择的需要及品种改
良的目标而被淘汰,仅保留那些熟期有所提前的处理后代材
料。经过2003—2005年生育期变异的定向筛选,获得一些熟
期不同程度提前的株系(表2)。
表2 秋水仙素诱变处理获得的早熟株系材料
熟期较对照 株系代号
熟期略早T1 15.5;T1.1}6;T 粤;T1.15-9;Tl-ls.13;Tl_l7 ;T1.17-6;Tl、17+8;
Tl_l 7_li;T3. 2等
明显 熟T1_11.3;T1.11_4;TI一15.2;TI.15.7;TI,15.14;TI 21 2;TI 21,3;T24l1;
1 l;T2_7_1; .21 1;T2.∞.1等
结果显示,T1.15的处理材料后代中出现8个熟期提前的
单株系,T1.17处理后代中出现4个熟期提前的单株系,显示T_
处理可以有效诱导该性状变异的产生。较长时间的处理并
没有出现更高频率的熟期变异,如 一 处理的后代群体中
共计只获得6个熟期变异的后代,而T1处理的后代群体中则
获得l6个熟期有所提前的单株系。
3讨论
诱导作物新性状的产生是作物育种的一种基本方法,秋
水仙素是作物诱变育种常用的诱变剂之一。该试验结果显
示,采用秋水仙素处理可以有效诱导花生幼根尖细胞的染色
体加倍.但是这种加倍结果的稳定性较差。处理结束一段时
期后移栽至大田的处理幼苗根尖并没有发现加倍的染色体
(结果未公布),尽管在处理结束时测定显示出非常高的加倍
频率。经秋水仙素处理后的幼苗可能由于主根的伸长受到
阻碍,导致一些未加倍的正常根组织细胞发育成侧根,造成
许多处理单株中存在混倍的嵌合体以及未能有效地保持其
加倍效果。在幼根随后的生长过程中染色体加倍的细胞可
能由于某种机制的作用而使其染色体数目回复正常,因此如
何获得稳定的加倍植株有待进一步研究。
有证据表明,二倍体野生种花生染色体直接加倍后形成
的同源四倍体中有许多都表现为不育 J。在该研究中,“皖
花4号”花生经秋水仙素处理的群体中同样也发现一些育性
降低的材料(表现为单株结实率低),但是由于对其根尖进行
的细胞学检测没有发现加倍染色体组成,因此这种育性变化
可能是来源于秋水仙素的诱变作用或毒性作用,而非染色体
加倍。
秋水仙素对正在萌发的花生种子进行一定时间的处理
可以诱导出熟期提前的突变体,该方法对于增加作物种质遗
传资源的多样性或定向筛选一些性状变异具有一定意义。
但是该处理的诱变效率并非表现为与处理的时间长短呈直
接正相关关系,该研究中采用0.1%秋水仙素溶液处理12 h
的诱变效率明显高于24和36 h的处理。如何最大限度地提
高秋水仙素诱导花生性状变异的频率仍需进一步探讨。
参考文献
f1]安徽省农业委员会.安徽花生 M].北京:中国农业出版社,20O2.
f2]刘诅洞.遗传学[M].2版.北京:高等教育出版社,199o.
E3]S1NGH A K,MOSS J P.uiK m 0f Wild耐atives in 面c i 州0f
Arad ̄hypog ̄a L.2.Qlrol1 ̄ome T ㈣ts speci ̄inⅡ1e section
Ara出s[J].1heor C,enet,1982,61:305—314.
E4]SIMPSON C E,STARR J L,CktURCH G T,d a1.Registrati ̄ ‘N' ̄a'fAM’
Pea,lut EJ].Crop sdence,2O03,43:1 561.
[5]孙大骞.花生育种学[M].北京:中国农业出版社,l998.
E6]IⅥIIKIY U R.专论细胞遗传学研究在花生育种中的应用[J].花生科技,
1982(1):49—51.
[7]T1WARI S P,KHANOP,K ̄S M.Colchlcine induced true breeding ahⅡe
n ̄lant in groundnutEJ].Current Science,1984,53(23):1 262—1 263.
[8]封海胜.花生育种与栽培[M].北京:农业出版社,1993.
维普资讯 http://www.cqvip.com