秋水仙素诱导产生花生早熟突变体

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5450 安徽农业科学 2oo6年 
直至滤纸完全浸润。根尖接触到处理液,室温放置,处理时 
间分别设置为T_(12 h)、T2(24 h)、T3(36h),以未做处理的材 
料作为对照。 
1.2.3细胞学观察。处理结束后,将萌发种子取出,用清水 
反复冲洗以除去多余的秋水仙素溶液。切取一些根尖顶端 
分生组织置95%酒精:冰醋酸=3:l的固定液中过夜;反复水 
洗除去残留固定液后置于1 mol/L的HC1液中,在6o℃水浴 
条件下水解l0 12 rnin;水洗后用卡宝品红染色,压片镜检, 
统计染色体数目。 
1.2.4变异植株的获得。处理后的幼芽转移到保持湿润的 
培养皿中,室温条件下培育1周.测量幼根的长度,随后转入 
营养钵中砂培。待长至数片真叶以后,标记单个处理幼苗 
(如T_ 代表T】处理的幼苗m),切取各幼苗的部分根尖分 
生组织置于0.1%的8一羟基喹啉溶液中预处理3 h左右,而后 
同前步骤进行固定、染色、压片和染色体计数,以明确其染色 
体数目。所有幼苗均移栽至安徽省农科院试验田(合肥),覆 
膜,观察处理植株的田间性状表现。 
2003年秋收获的处理植株,按单株分别收获种子;2(304 
年春将其按单株播种,筛选并标记熟期提前的单株材料(如 
Tl ,代表T1. 处理幼苗的单株后代植株n)。 
2OO4年秋收获的熟期提前的处理单株后代材料于2005 
年春种植成单株系,熟期变异性状稳定的单株系收获后,于 
2OO6年春种植成品系,继续从中筛选变异稳定、其他综合农 
艺表现优异的改良品系。 
2结果与分析 
2.1秋水仙素诱导的染色体加倍效果研究结果表明,花 
生萌发初期的幼苗对秋水仙素诱导处理比较敏感,以0,l% 
秋水仙素处理萌发2 3 d、长度约l em左右的花生根尖12 h 
就可以获得较高的加倍频率(2 n=8 x=80的根尖获得频率 
>80%,正常花生体细胞染色体数2 n=40);处理时间达到或 
超过24 h则可以获得大量染色体数目超过80的根尖细胞, 
如2 n=120、2 n:160,甚至经多次加倍而成为2 n=240的染 
色体组成。 
2.2诱导处理幼苗的生长情况 由表l可见,花生萌发种 
芽经秋水仙素处理后,幼苗的生长受到阻碍。处理后的幼根 
尖伸长生长受到抑制。速度明显减慢,根顶端发生膨大,并且 
随着处理时间的延长抑制效果越明显,当诱变处理时间超过 
12 h,幼苗培育1周后幼根的长度较对照减少l/2以上。 

表1 秋水仙素处理对花生幼苗根长的影响 

2.3花生变异单株的获得在2003年度移栽至大田的100 
个诱变处理幼苗中,发现一些性状表现异常,其中许多表现 
为植株瘦小、结实率差,因不符合育种选择的需要及品种改 
良的目标而被淘汰,仅保留那些熟期有所提前的处理后代材 
料。经过2003—2005年生育期变异的定向筛选,获得一些熟 

期不同程度提前的株系(表2)。 
表2 秋水仙素诱变处理获得的早熟株系材料 

熟期较对照 株系代号 
熟期略早T1 15.5;T1.1}6;T 粤;T1.15-9;Tl-ls.13;Tl_l7 ;T1.17-6;Tl、17+8; 
Tl_l 7_li;T3. 2等 
明显 熟T1_11.3;T1.11_4;TI一15.2;TI.15.7;TI,15.14;TI 21 2;TI 21,3;T24l1; 

1 l;T2_7_1; .21 1;T2.∞.1等 

结果显示,T1.15的处理材料后代中出现8个熟期提前的 
单株系,T1.17处理后代中出现4个熟期提前的单株系,显示T_ 
处理可以有效诱导该性状变异的产生。较长时间的处理并 
没有出现更高频率的熟期变异,如 一 处理的后代群体中 
共计只获得6个熟期变异的后代,而T1处理的后代群体中则 
获得l6个熟期有所提前的单株系。 
3讨论 
诱导作物新性状的产生是作物育种的一种基本方法,秋 
水仙素是作物诱变育种常用的诱变剂之一。该试验结果显 
示,采用秋水仙素处理可以有效诱导花生幼根尖细胞的染色 
体加倍.但是这种加倍结果的稳定性较差。处理结束一段时 
期后移栽至大田的处理幼苗根尖并没有发现加倍的染色体 
(结果未公布),尽管在处理结束时测定显示出非常高的加倍 
频率。经秋水仙素处理后的幼苗可能由于主根的伸长受到 
阻碍,导致一些未加倍的正常根组织细胞发育成侧根,造成 
许多处理单株中存在混倍的嵌合体以及未能有效地保持其 
加倍效果。在幼根随后的生长过程中染色体加倍的细胞可 
能由于某种机制的作用而使其染色体数目回复正常,因此如 
何获得稳定的加倍植株有待进一步研究。 
有证据表明,二倍体野生种花生染色体直接加倍后形成 
的同源四倍体中有许多都表现为不育 J。在该研究中,“皖 
花4号”花生经秋水仙素处理的群体中同样也发现一些育性 
降低的材料(表现为单株结实率低),但是由于对其根尖进行 
的细胞学检测没有发现加倍染色体组成,因此这种育性变化 
可能是来源于秋水仙素的诱变作用或毒性作用,而非染色体 
加倍。 
秋水仙素对正在萌发的花生种子进行一定时间的处理 
可以诱导出熟期提前的突变体,该方法对于增加作物种质遗 
传资源的多样性或定向筛选一些性状变异具有一定意义。 
但是该处理的诱变效率并非表现为与处理的时间长短呈直 
接正相关关系,该研究中采用0.1%秋水仙素溶液处理12 h 
的诱变效率明显高于24和36 h的处理。如何最大限度地提 
高秋水仙素诱导花生性状变异的频率仍需进一步探讨。 
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