淀粉酶抑制剂

南京工业大学硕士学位论文小麦α-淀粉酶抑制剂的药理药效研究姓名：陈宁申请学位级别：硕士专业：生物化工指导教师：陈国广;张琪20060601摘要目的：为了进一步的研究和了解由我校生化中心采用专利技术从小麦粉中分离纯化的α-淀粉酶抑制剂的化学成分和作用机理，以便更全面的开发和利用这种资源，本课题进行了小麦α-淀粉酶抑制剂的降糖﹑调脂和减肥功能的作用研究，并且系统研究了α-淀粉酶抑制剂的作用机理，从而为今后把α-淀粉酶抑制剂开发成保健品或药品提供依据和参考。

方法：（1）α-淀粉酶抑制剂降血糖作用的实验研究：四氧嘧啶性糖尿病小鼠灌胃给予α-淀粉酶抑制剂45 mg·kg-1，测定其淀粉耐量和糖耐量；四氧嘧啶性糖尿病小鼠灌胃给予α-淀粉酶抑制剂（5、15、45 mg·kg-1），连续21d后，测定血糖值和小肠内二糖酶活性。

（2）α-淀粉酶抑制剂的调脂作用：采用不同剂量α-淀粉酶抑制剂（5、15、45 mg·kg-1）分别对高脂血症大鼠进行预防性给药和治疗性给药，给药结束后测定其血液中的TC﹑TG﹑HDL－C和LDL－C含量，称取大鼠肝脏并称肝重，并测定肝脏TC、TG含量，同时对肝脏进行常规切片、HE染色后在光镜下观察组织形态改变。

（3）α-淀粉酶抑制剂的减肥作用：以肥胖模型大鼠为研究对象，通过对肥胖大鼠灌胃不同剂量的α-淀粉酶抑制剂（5、15、45 mg·kg-1），连续28d，动态监测大鼠体重变化，并测定lee指数和脂肪湿重。

结果：（1）α-淀粉酶抑制剂能够增加小鼠的淀粉耐量而对其葡萄糖耐量没有影响；糖尿病小鼠灌服α-淀粉酶抑制剂45 mg·kg-1和15 mg·kg-1后，血糖值均明显低于模型对照组，结果有显著性差异；α-淀粉酶抑制剂能有效抑制小鼠小肠内各部分的麦芽糖酶和蔗糖酶活性，尤其是对前段小肠内二糖酶的活性抑制较强。

（2）α-淀粉酶抑制剂在对高脂血症大鼠进行预防性给药时可以明显抑制TC、TG、LDL-C及AI的升高，抑制HDL-C的降低，特别是高剂量组，而且可以降低肝脂含量，减轻肝脏脂肪病变。

淀粉老化延缓措施介绍淀粉老化是指淀粉长时间储存后发生的物理和化学变化。

淀粉是植物主要的能量储存物质，也被广泛用于食品和工业生产中。

然而，淀粉的老化会导致其质量下降，从而影响其应用性能。

为了延缓淀粉的老化过程，需要采取一些措施来保持其质量和功能。

本文将介绍一些常见的淀粉老化延缓措施，包括存储条件的控制、添加剂的使用以及物理和化学方法的应用。

存储条件的控制淀粉的老化与环境条件密切相关，因此，控制存储条件是延缓淀粉老化的重要措施之一。

1.湿度控制：高湿度是淀粉老化的主要促进因素之一。

因此，在存储和处理淀粉时，应尽量降低湿度，避免出现露点温度，以减少水分侵入淀粉中的可能性。

2.温度控制：温度也是淀粉老化的重要因素。

一般情况下，降低存储温度可以延缓淀粉的老化过程。

因此，在淀粉的储存和运输过程中，应尽量保持低温环境。

3.光照控制：光照也可促进淀粉的老化。

因此，在淀粉的储存和包装过程中，应避免阳光直射，尽量减少光照时间。

添加剂的使用添加剂是延缓淀粉老化的常见方法之一。

以下是一些常用的添加剂和其作用：1.抗氧化剂：抗氧化剂可以降低淀粉与氧气接触后发生氧化反应的可能性，从而延缓淀粉的老化过程。

常用的抗氧化剂有BHA、BHT、维生素C等。

2.酶抑制剂：一些特定的酶可以催化淀粉的分解反应，促进淀粉老化。

因此，使用酶抑制剂可以有效抑制这些酶的活性，延缓淀粉的老化过程。

例如，抑制淀粉酶的α-淀粉酶抑制剂可以延缓淀粉的降解。

3.肽和蛋白质：添加适量的肽和蛋白质可以与淀粉形成复合物，从而减缓淀粉的老化过程。

需要注意的是，在使用添加剂时应遵守相关法规和规定，确保添加剂的安全性和适用性。

物理和化学方法的应用除了控制存储条件和添加剂的使用，还可以采用一些物理和化学方法来延缓淀粉老化过程。

1.包装：采用适当的包装材料可以提供一定程度的屏障效应，减少氧气和水分的进入，从而保持淀粉的质量和功能。

2.干燥：通过对淀粉进行干燥处理，可以降低其含水量，减缓淀粉老化的速度。

鹰嘴豆α-淀粉酶抑制剂的提取及性质研究刘晓洁;刘同祥;张宗申【期刊名称】《时珍国医国药》【年(卷),期】2011(22)7【摘要】目的从鹰嘴豆中分离纯化得到α-淀粉酶抑制剂(α-AI),研究其抑制动力学特征及其化学稳定性,为其开发为降糖减肥药物提供依据。

方法采用硫酸铵分级沉淀、CM-52纤维素离子交换柱层析及凝胶柱层析分离纯化α-AI;通过在不同底物及抑制剂浓度下的酶反应速度,研究其抑制动力学特征;通过在不同温度及pH条件下的抑制活性,研究其对温度及pH的稳定性。

结果纯化得到一相对分子质量约为40.4 Da的α-AI糖蛋白,其对α-淀粉酶的抑制为非竞争性抑制,抑制常数Ki=3.14×10-6mol.L-1;鹰嘴豆α-AI在pH3.0～11.0,在80℃下作用30 min后其抑制活性仍保持85%左右。

结论从鹰嘴豆中分离得到的α-淀粉酶抑制剂对α-淀粉酶具有较高的抑制活性,对温度及pH具有较高的稳定性,其作为一种安全、天然降糖药物具有良好的开发前景。

【总页数】3页(P1580-1582)【关键词】α-淀粉酶抑制剂;鹰嘴豆;提取【作者】刘晓洁;刘同祥;张宗申【作者单位】大连工业大学生物工程学院;中央民族大学中国少数民族传统医学研究中心【正文语种】中文【中图分类】R283【相关文献】1.鹰嘴豆中α-淀粉酶抑制剂抗氧化特性研究 [J], 郝小燕;崔竹梅;麻浩;顾爱星2.鹰嘴豆种子发芽和成熟过程中α-淀粉酶抑制剂的活性研究 [J], 郝小燕;顾爱星;刘众悦;麻浩3.白豆中α-淀粉酶抑制剂的提取及其酶学性质的研究 [J], 杨秀芳;吴明鑫;刘晓桓4.紫冠豆角(Phaseolus vulgaris L.)种子中α-淀粉酶抑制剂的提取及其性质研究[J], 孙庆申;朱国庆;王璇;冯国军;宋永5.鹰嘴豆α-淀粉酶抑制剂的提取工艺研究 [J], 刘晓洁;刘同祥;张宗申因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

522020年第24期中国饲料为了面对饲用抗生素禁用后的严峻形势，推进新型饲料资源的开发和利用，本文综述了杂粮作物红芸豆的特点及其营养价值，以及其中的活性物质α-淀粉酶抑制剂的特点，并通过检索到的相关文献探讨了红芸豆α-淀粉酶抑制剂和中草药组合饲料在实际生产中的应用价值。

1　红芸豆的特点及营养价值芸豆原产于美洲大陆，属于蝶形花科菜豆属植物，约在16世纪末引入我国，目前是我国一类比较重要的小杂粮（陈振家等，2009）。

芸豆根据种皮颜色可分为红芸豆、白芸豆、黑芸豆等多个品种，具有耐干旱耐贫瘠、适应性强、生育期短等特点，在我国很多省市都有种植。

红芸豆产量高，价格便宜，常以原料的形式大量出口，以红芸豆淀粉为原料的各种食品生产也在不断增长，进一步提高了红芸豆的经济价值。

此外，据中医药本记载，芸豆性温、味略甘平，是一种具有滋补效果的食物（赵蓉等，2008），近些年的研究表明，红芸豆具有降血糖、润肺消肿、提高人体免疫力的效果，逐渐得到人们的认可（冯源，2019；杜双奎等，2012）。

红芸豆的主要营养成分是淀粉，含量在45%左右，蛋白含量约为22%、脂肪含量在3%左右（陈晓萌，2015）。

此外，红芸豆的铁、钙、B族维生素都比较丰富，特别适合低血钾症患者、心脏病患者食用，是比较难得的高钾、低钠、高镁食物（王竹怡等，2014）。

红芸豆还含有许多活性成分，如花色苷和皂苷，具有一定的抗炎作用，对关节炎患者有缓解疼痛的效果（陈晓萌，2015）；红芸豆中含有的植物凝集素、尿素酶、球蛋白等活性成分能激活淋巴细胞，提高人体免疫力和抗病力（吴叶，2008）。

红芸豆通常作为原料出口，能增加外汇，提高农民收入。

市场上的红芸豆除了直接食用外，通过不同的淀粉提取工艺还可制成豆馅、豆沙、豆粉、豆酥等产品。

除此以外，目前还有对红芸豆的深加工利用研究，主要集中在植物凝集素和α-淀粉酶抑制剂上。

植物凝集素是一类糖蛋白，能特异性识别细胞表面的糖类，在自然界广泛存在，能促进哺乳动物的红血球凝集，促进白细胞的有丝分裂；α-淀粉酶抑制剂作为一种具有抑制淀粉酶活性的物质，可以降低人的血糖和血脂，具有预防和治疗糖尿病、肥胖症的效果（张佰鹏等，2008）。

实验六淀粉酶的专一性和温度、pH、激活剂及抑制剂对酶活性的影响实验类型：验证型目的和要求1.通过本实验观察、验证酶的专一性和温度、pH、激动剂及抑制剂对酶活性的影响。

2.熟悉淀粉及其酶解产物的特殊显色方法；电热恒温水浴的使用。

3.了解唾液淀粉酶的收集与预处理。

原理酶具有高度专一性，一种酶只能催化一种或一类底物发生反应，如淀粉酶只能水解淀粉，不能水解蔗糖。

当淀粉被淀粉酶彻底水解为还原性麦芽糖和葡萄糖时，能使班氏试剂的Cu2+还原成Cu1+，生成砖红色Cu2O沉淀。

淀粉酶的活性受温度、pH、激动剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素影响，因而水解淀粉生成一系列分子大小不同的糊精。

不同程度的水解糊精可与碘反应生成紫色、棕色或红色络合物。

通过上述特征性反应，并以蔗糖等作对照，便可观察、验证淀粉酶是否具有专一性以及它的催化活性是否受到影响。

操作方法一、唾液淀粉酶的收集与处理1.制备唾液实验者先将痰咳尽，用自来水漱口，以清除口腔内食物残渣，再在口腔内含蒸馏水约15ml，并作咀嚼咕漱运动，3分钟后吐入垫有两层经润湿处理的脱脂纱布的漏斗内，过滤于小烧杯中备用，为与下面稀释唾液相区别，此称制备唾液。

2.煮沸唾液取上述唾液约2ml，盛入1中号试管中,置沸水浴煮沸5分钟备用。

3.稀释唾液调整唾液淀粉酶活性，使之在pH6.8、37℃和既无激动剂又无抑制剂条件下，作用5min，水解淀粉至红色糊精为宜。

具体做法是取12凹白瓷反应板一块，按下列步骤操作：①第1排每凹各加1滴制备唾液，12、13、14凹分别加生理盐水1、2、3滴，用滴管采用抽吸法，由稀到浓（14→12）小心混匀各凹，勿使溅入相邻凹中。

每混匀一凹便取其1滴放入同列的2排凹中，剩余稀释唾液应全部放回原凹中。

②在盛有不同稀释度唾液的第2排各凹中，均加入4滴缓冲液（pH6.8），2滴1%的淀粉液和2滴蒸馏水，用①混匀法充分混匀，置37℃下5min。

③在第2排各凹中加I液一滴，混匀，观察比较各凹颜色，以浅棕-红色对应的稀释倍数，用生理盐水稀释3ml制备唾液备用。

血清淀粉酶的测定方法
血清淀粉酶是一种催化分解淀粉的酶，通常用于检测炎症和组织损伤。

以下是常用的血清淀粉酶测定方法:
1.试纸条法：将待测血清与一种试纸条接触，试纸条上含有一种特定的淀粉酶抑制剂，如果血清中的淀粉酶活性较高，则会使得试纸条上的划线更为明显，通过观察试纸条的颜色变化可以判断淀粉酶活性的高低。

2.酶标法：将待测血清与一种酶标抗体接触，酶标抗体可以与淀粉酶抗原结合，如果血清中的淀粉酶活性较高，则会使得结合的酶标抗体更为稳定，通过测量吸光度的变化可以判断淀粉酶活性的高低。

3.化学发光法：将待测血清与一种化学发光剂接触，化学发光剂可以与淀粉酶活性相关的产物结合，如果血清中的淀粉酶活性较高，则会使得化学发光信号更为强烈，通过测量化学发光信号可以判断淀粉酶活性的高低。

需要注意的是，不同的测定方法可能会有不同的灵敏度、特异性和精度，因此在实际应用中需要根据具体情况选择最合适的测定方法。

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111*通讯作者葛根、桑叶、山药3种天然产物对α -淀粉酶抑制作用研究刘文虎，王斯慧，曾凡骏*四川大学轻纺与食品学院（成都 610065）摘要研究了葛根、桑叶、山药3种天然产物的提取溶液对α-淀粉酶活性的抑制作用。

结果显示除了山药对α-淀粉酶无明显抑制作用，葛根、桑叶对α-淀粉酶均有显著抑制作用，对α-淀粉酶半抑制浓度(IC 50)分别为56.72，46.57 mg/mL，抑制效果可分别达到现有α-淀粉酶抑制剂拜糖平的1.12，1.36倍。

关键词天然产物；α-淀粉酶；抑制剂α -amylase Inhibitory Activities of Radix Puerariae, Folium Mori and YamLiu Wen-hu, Wang Si-hui, Zeng Fan-jun *Department of Food Engineering, Sichuan University (Chengdu 610065)Abstract The α-amylase inhibitory activities of the extracts from Radix Puerariae, Folium Mori and yam was studied. The results showed that, except the extracts of yam the rest of two natural products have obvious effect on inhibiting α-amylase, and the 50% inhibiting concentration (IC 50, mg/mL) is 56.72, 46.57 mg/mL, respectively, which is 1.12, 1.36 times stronger than that of acarbose.Keywords natural products; α-amylase; inhibitor糖尿病高脂血症的发病率呈逐年上升趋势并严重危害人类健康，现代中医药试验研究表明，众多天然产物具有降血糖的功效。