一株微生态制剂菌株的筛选、鉴定及其对南美白对虾的生长影响研究

江苏农业学报（Jiangsu J．of Agr．Sci．），2011，27（1）：164 168赵海鹏，谢晶，严文蓉．南美白对虾冷藏过程中的细菌分离、初步鉴定及菌相分析［J ］．江苏农业学报，2011，27（1）：164-168．南美白对虾冷藏过程中的细菌分离、初步鉴定及菌相分析赵海鹏，谢晶，严文蓉（上海海洋大学食品学院，上海201306）收稿日期：2010-04-10基金项目：2010年国家农业成果转化基金项目（2010GB2C000148）；2009年上海市优秀学科带头人计划项目（09XD1402000）；上海市教育委员会重点学科建设项目（J50704）作者简介：赵海鹏（1984-），男，山东曲阜人，硕士研究生，主要从事水产品加工及贮藏工程方向研究。

通讯作者：谢晶，（E-mail ）jxie@shou．edu．cn 摘要：为了明确南美白对虾在冷藏过程中细菌的组成，为开发新的保鲜剂提供指导，利用生理生化检验和16S rDNA 序列分析对分离纯化的菌株进行了鉴定，并结合生理生化检验结果和系统进化树进行了分析。

结果表明：南美白对虾冷藏期间有8种典型菌株，它们在货架期结束时所占的比例分别为腐败希瓦氏菌36%、嗜水气单胞菌26%、恶臭假单胞菌15%、蜡样芽孢杆菌7%、嗜冷杆菌10%、不动杆菌2%、金黄色葡萄球菌2%、微小杆菌1%，其中腐败希瓦氏菌为南美白对虾冷藏后期的主要优势腐败菌。

关键词：南美白对虾；腐败菌；16SrDNA ；保鲜中图分类号：TS254．4文献标识码：A文章编号：1000-4440（2011）01-0164-05Isolation and identification of bacteria in Penaeus vannammei during cold storage and analysis of composition of microorganismZHAO Hai-peng ，XIE Jing ，YAN Wen-rong（College of Food Science ＆Technology ，Shanghai Ocean University ，Shanghai 201306）Abstract ：To identify the bacterial composition during cold storage of Penaeus vannammei and providing guidancefor the new natural preservative ，identification of microorganism strain was performed by using the physiological and biologi-cal test ，and 16S rDNA sequence analysis．Combined with physiological and biochemical test results and phylogenetic tree analysis ，the result demonstrated that there were eight typical microorganism strains in Penaeus vannammei under cold stor-age．The eight microorganism strains （and the proportion in the end of shelf life ，respectively ）were as follows ：Shewanella putrefaciens （36%），Aeromonas hydrophila （26%），Pseudomonas putida （15%），Bacillus cereus （7%），Psychrobacter sp．（10%），Acinetobacter （2%），Staphyloccocus aureus （2%），Microbacterium （1%）．Shewanella putrefaciens could be considered as dominated strains during cold storage of Penaeus vannammei．Key words ：Penaeus vannammei ；spoilage bacterium ；16S rDNA ；preservation南美白对虾（Penaeus vannamei ）学名凡纳对虾，原产于南美地区，自1988年引入中国以来，经过淡化养殖，目前其产量已经跃居中国三大主产经济虾之首。

【开题报告】南美白对虾大棚养殖池弧菌检测与分析开题报告水产养殖学南美白对虾大棚养殖池弧菌检测与分析一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义(一) 国内外研究动态本课题主要研究南美白对虾大棚养殖池在养殖过程中弧菌数目和种类的变化，从而进一步了解南美白对虾致病原因。

南美白对虾是当今世界养殖产量最高的三大虾类之一。

南美白对虾原产于南美洲太平洋沿岸海域，在20世纪80年代，对虾养殖业的发展曾给我国的水产养殖业写下辉煌的一笔，极大地带动了沿海地区的经济发展。

可是，进入90年代，特别从92年起，由于对虾病毒病在全国各地的蔓延，水产工作者一时又找不出合适的对策，导致对虾养殖业大伤元气，经济效益一落千丈。

因此，水产工作者们一方面刻苦钻研对虾病毒病，另一方面探索对虾养殖业新的替代品种、新的经济增长点，中国科学院海洋研究所张伟权教授率先由美国引进此虾，并在一九九二年突破了育苗关，从小试到中试直至在全国各地推广养殖。

南美白对虾体内很重要的一种物质就是虾青素，就是表面红颜色的成分，虾青素是目前发现的最强的一种抗氧化剂，颜色越深说明虾青素含量越高。

广泛用在化妆品、食品添加、以及药品。

日本大阪大学的科学家最近发现，虾体内的虾青素有助于消除因时差反应而产生的“时差症”。

随着海水养殖业的蓬勃发展,特别是高密度养殖模式的推广,养殖生物的水体环境要求变高，细菌性疾病发生频率和范围逐渐增大。

在细菌性疾病中,弧菌属细菌所引起的疾病占有很大比重。

弧菌属细菌广泛存在于沿岸海水、沉积物和海洋动物体中,被认为是海水鱼、虾、贝类的一种常见致病菌。

弧菌属细菌中的一些种群也是引起人类急性肠胃炎的主要病原生物。

它们可在人群中引起暴发性食物中毒,造成散发性米泔样腹泻和痢疾等中毒症状。

因此,在水产品卫生标准中对弧菌菌数都有严格的规定。

进一步研究表明弧菌的致病菌在于它们产生一些胞外毒和具有酶作用的物质，如肠毒素、溶血素、凝血素、细胞毒素等，并伴有致病作用。

南美白对虾养殖系统中氨氧化菌群分子生态学研究的开题
报告
一、选题背景和意义
南美白对虾是世界上重要的水产养殖品种之一，其养殖产值和市场价值较高。

但是南美白对虾养殖过程中，养殖水体中的氨氮含量较高，容易导致虾类生长迟缓、死
亡率上升等问题，对养殖效益造成严重影响。

因此，对南美白对虾养殖系统中氨氧化
菌群的分子生态学研究，对于提高虾类养殖环境的质量，改善养殖效益具有重要意义。

二、研究目的和内容
本研究旨在通过对南美白对虾养殖系统中氨氧化菌群的分子生态学研究，探究不同环境因素如水温、养殖密度等对氨氧化菌群的影响，以及测定其数量和多样性以及
群落结构等生态指标，为养殖系统的设计和管理提供理论基础和参考。

具体研究内容包括：
1.采集南美白对虾养殖系统中不同位置和深度的养殖水样，提取环境DNA;
2.利用PCR扩增RNA和DNA样品中的氨氧化菌相关基因序列，如amoa、amob 等;
3.运用高通量测序技术对样品中的氨氧化菌群进行系统发育、群落结构和多样性分析;
4.根据分析结果，深入探讨南美白对虾养殖系统中氨氧化菌群的多样性、数量、结构和生态功能等方面的特征，以及其与环境因素之间的关系。

三、研究意义和预期结果
本研究通过对南美白对虾养殖系统中氨氧化菌群的分子生态学研究，对于养殖效益的提高和对养殖环境的合理管理具有重要意义。

预期结果包括：
1.清晰了解南美白对虾养殖系统中氨氧化菌群的多样性和数量，以及其与环境因素之间的关系;
2.解析养殖系统中氨氧化菌群的生态功能，以及其对水质的影响;
3.为养殖系统的设计和管理提供理论基础和参考，提高虾类养殖的效益和可持续性发展。