为了提高荷叶生物碱的提取率, 诸多学者对其提纯工艺进行了实验研究。赵骏等[5][ 5] 赵骏, 王洪章, 齐喜红, 等荷叶中荷叶碱提取工艺的研究[ J] 中草药, 2003, 34( 10) : 916研究了不同溶媒及不同溶媒浓度对提取率的影响。结果显示, 以高浓度的乙醇和05%盐酸为溶媒,采用加热回流法和超声提取, 大孔吸附树脂纯化技术为较佳工艺。李宇亮等[6] [ 6] 李宇亮, 吴雅睿荷叶总生物碱的提取与纯化研究[ J] 应用化工, 2007, 36( 1) : 4分别就提取剂、温度、时间、提取次数等因素对提取率的影响进行了研究, 结果与前者相似, 提取最佳条件为:以90%乙醇为提取剂, 经大孔吸附树脂用乙醇洗脱提取率为946%。肖文军等[7] [ 7] 肖文军, 胡祥文, 胡云铃, 等荷叶生物碱柱分离纯化技术研究[ J] 食品科学, 2007, 28( 6) : 120则研究了不同大孔树脂对生物碱提取率的影响, 结果表明, 使用树脂D101 效果最好。为了解决有机溶剂萃取时目标成分的大量损失、终产品含杂质较多等难题, 梁锋等[8][ 8] 梁锋, 张成功, 马铭, 等乳状液膜分离提取荷叶中3种生物碱[ J] 精细化工, 2007, 24( 6) : 565建立了用水/ 油( W/ O) 型乳状液膜分离提取荷叶中3 种生物碱( N - 去甲基荷叶碱、O- 去甲基荷叶碱和荷叶碱) 的方法。通过对迁移时间、表面活性剂Span80 用量、载体D2EHPA 浓度、油内比、乳水比和内水相盐酸浓度的优化, 获得了高效的液膜体系为: 迁移时间2 5 min,表面活性剂Span 80 的质量分数为310%, 载体D2EHPA 的浓度为001 mol L - 1, 油内比为10 6, 乳水比为10 60, 内水相盐酸浓度为0 2 mol L - 1。在优化的试验条件下, 对荷叶中3 种
生物碱的萃取率分别达到了956%、100%和979%。刘淑
萍[9 ][ 9] 刘淑萍荷叶中生物碱的制备及其药理学活性研究[ D] 石家庄: 河北医科大学, 2004
以稀盐酸为提取溶剂, 采用阳离子交换树脂进行生物总碱的提取,
同时, 采用反相高效液相色谱( RP- HPLC) 法测定了荷叶中荷叶碱的含量, 有效改善了以往提取方法的不足。
酸性染料比色法最大吸收波长扫描取1.0mL 氯仿溶液为空白，取黄色玛咖总生物碱提取液0.5mL 和对照品溶液0.5mL，加氯仿至1.0mL，分别在空白、对照和样品溶液中加入2.0 × 10-4mol/L 溴麝香草酚蓝显色剂6.0mL，氯仿5.0mL，密塞振摇2min，倒入分液漏斗中，静置2h，取氯仿层4 . 0mL，在氯仿溶液中加入无水硫酸钠(1 0 5℃干燥4 h )0 .
2 g ，摇匀，放置10min，于300～700nm 范围内扫描测定最大吸收波长。
1.3.4.2 溴麝香草酚蓝显色剂pH 值的确定
取样品溶液6 份，每份1.0mL，分别加入pH 值为6.8、7.0、7.2、7.4、7.6 的2.0 × 10-4mol/L 溴麝香草酚蓝显色剂6.0mL，氯仿5.0mL，密塞振摇2min，倒入分液漏斗中，静置2h，取氯仿层4.0mL，在氯仿溶液中加入无水硫酸钠0.2 g，摇匀，放置10min，于最大吸收波长处测定吸光度。溴麝香草酚蓝显色剂用量的确定取样品溶液7 份，每份
1.0mL，分别加入pH7.0 的
2.0 × 10-4mol/L 溴麝香草酚蓝显色剂
2.0、
3.0、
4.0、
5.0、
6.0、
7.0mL，氯仿5.0mL，密塞振摇2min，倒入分液漏斗中，静置2h，取氯仿层4.0mL，在氯仿层中分别加入无水硫酸钠0. 2g ，摇匀，放置10min，于最大吸收波长处测定吸光度。
