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AD494(DE3)感受态细胞使用说明

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AD494(DE3)感受态细胞
AD494(DE3) Competen94(DE3)感受态细胞
北京华越洋 WR4468 AD494(DE3)感受态细胞
规格
单位
20×100ul 包
20×100ul 包
AD494(DE3)感受态细胞基本信息： AD494(DE3) 基因型:
Rosseta(DE3) Stbl2 Stbl3 Stbl3 Ultracompetent Cells Sure SURE，SURE T1 TB1 TG1 TKB1 TOP10 TOP10 UltraCompetent Cells TOP10F' ,TOP10F' TOP10F` TOP10F′ UltraCompetent Cells Tuner Tuner(DE3) Tuner(DE3)，Tuner(DE3) Tuner(DE3)pLacI Tuner(DE3)pLysS XL10-Gold XL10-Gold UltraCompetent Cells XL1-Blue XL1-Blue UltraCompetent Cells XL2-Blue Y187 Y1HGold Y2HGold
菌株类型: E.coli
培养基: LB 培养基
生长条件: 37 ℃, 有氧
抗性: 卡那霉素
应用: 蛋白表达
质粒转化条件： 42 ℃热激
诱导方法: IPTG
菌株特点: 1. AD494 菌株含有 thioredoxin reductase (TrxB)基因突变，有利于细菌胞内的二硫键形
成，能够帮助蛋白形成正确的三维折叠，形成有功能活力的蛋白。 2. AD494 菌株来源于 K12 菌，有助于蛋白的形成正确的三维结构。 3. AD494 菌株中的 thioredoxin reductase (TrxB)突变具有卡那霉素抗性，因此该宿主菌
只能用于氨苄或者其他非卡那霉素抗性的质粒，进行基因蛋白表达。 4. DE3 是溶源性的 λ DE3, 所以带有 T7 RNA 聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于 pET 系
列载体，及其他 T7 启动子系列载体。能够利用 IPTG 直接进行蛋白的诱导表达。
华越洋其他感受态细胞： AD494 AD494(DE3) AD494(DE3)pLysS AGL1 AH109 B834 B834(DE3) B834(DE3)pLysS B834，B834(DE3) ，B834(DE3)pLysS BJ5183 BL21 BL21 Star(DE3) BL21 Star(DE3)pLySs BL21 trxB(DE3) BL21 trxB(DE3)pLysS BL21(DE3) BL21(DE3)pLacI BL21(DE3)pLySs BL21-AI BL21-Gold(DE3) BL21-SI BLR BLR(DE3) BLR(DE3)pLysS C41(DE3) C41(DE3), C41(DE3)PlysS C41(DE3)pLysS C43(DE3) OverExpress Competent Cells C43, C43(DE3) DB3.1 DH10B DH10B UltraCompetent cells DH10Bac DH10MultiBac DH5α DH5α- T1 UltraCompetent Cells DH5α UltraCompetent cells DMT
EGY48 EHA101 EHA101,EHA101 EHA103 EHA105 ER2566 ER2738 ET12567(pUZ8002) GV3101 HB101，HB101 Competent Cell HMS174 HMS174(DE3) HMS174(DE3)pLysS JM109 JM109 UltraCompetent Cells JM110 JM83 KM71H LBA4404 M15 M15[pREP4] Mach1-T1 Phage Resistant Mach1-T1 UltraCompetent Cells MC1061 NMY51 NovaBlue NovaBlue T1 NovaBlue(DE3) NovaF-
OmniMAX2-T1 Ultracompetent cells Origami Origami 2 Origami 2(DE3) Origami 2(DE3)pLacI Origami 2(DE3)pLysS Origami B Origami(DE3) Origami(DE3)pLacI Origami(DE3)pLysS OrigamiB(DE3) OrigamiB(DE3)pLacI OrigamiB(DE3)pLysS RN4220 Rosetta Rosetta 2 Rosetta 2(DE3)pLySs Rosetta(DE3) Rosetta(DE3)pLacI Rosetta(DE3)pLySs Rosetta2(DE3) Rosetta2(DE3)pLacI RosettaBlue RosettaBlue(DE3) RosettaBlue(DE3)pLacI RosettaBlue(DE3)pLysS Rosetta-gami Rosetta-gami 2 Rosetta-gami 2(DE3) Rosetta-gami 2(DE3)pLysS Rosetta-gami B Rosetta-gami B(DE3) Rosetta-gami B(DE3)pLacI Rosetta-gami B(DE3)pLysS Rosetta-gami(DE3) Rosetta-gami(DE3)pLacI Rosetta-gami(DE3)pLysS Rosetta-gami2(DE3)pLacI

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LBA4404感受态细胞使用说明

LBA4404感受态细胞使用说明

LBA4404感受态细胞LBA4404Competent Cell规格:LBA4404 ：10×100μlpCAMBIA2301（control vector）：10ng/ul 10ul保存条件：-80℃说明：华越洋生产的LBA4404 农杆菌感受态细胞具有链霉素和利福平抗性，适用于玉米、烟草等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301 质粒检测转化效率高达103cfu/μg。

操作方法:1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上或室温融化。

2. 每100μl 感受态加1ug 质粒DNA 混匀，依次于冰上静置10 分钟、液氮 5 分钟、37℃ 5 分钟、冰浴5 分钟。

3. 加入700μl 无抗生素的2YT 或LB 液体培养基，于28℃振荡培养2~3 小时。

4. 5000rpm 离心1 分钟收菌，留取100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的2YT或LB 平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3 天。

注意事项:1. 感受态细胞最好在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

关联推荐大肠杆菌感受态细胞TOP10 感受态细胞XL1-Blue 感受态细胞XL10-Gold 感受态细胞Stbl3 感受态细胞DB3.1 感受态细胞DH10BAC 感受态细胞DH5α 感受态细胞JM109 感受态细胞BL21(DE3) 感受态细胞BL21(DE3)plysS 感受态细胞M15 感受态细胞Mach1-T1 Phage Resistant 感受态细胞 Rosetta(DE3) 感受态细胞DH10B 感受态细胞OrigamiB(DE3) 感受态细胞OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞 JM110 感受态细胞 农杆菌感受态细胞LBA4404 感受态细胞AGL1 感受态细胞EHA105 感受态细胞 GV3101 感受态细胞 酵母感受态细胞Y1HGold感受态细胞 AH109感受态细胞 Y187感受态细胞 EGY48感受态细胞 NMY51感受态细胞 KM71感受态细胞。

感受态细胞转化操作步骤

感受态细胞转化操作步骤

感受态细胞转化（一）实验准备：1.Amp母液：称取氨苄青霉素100mg溶于1ml dd H2O中。

0.22μm滤器过滤除菌，用EP管分装后储存于-20℃冰箱.2.X-Gal溶液（2%，m/v）称取20mg X-Gal溶于1ml二甲基甲酰胺（DMF）中。

用玻璃试管或聚丙烯管分装后储存于-20℃冰箱,装有X-Gal溶液的试管须用铝箔包裹以防因光照而被破坏.（无须过滤）3.IPTG（20%,m/v,0.8mol/L）称取IPTG2g溶于8ml dd H2O中。

用蒸馏水定容至10mL。

0.22μm 滤器过滤除菌，用EP管分装成1mL一小份后储存于-20℃冰箱. （二）操作步骤“质粒pBS SK(-)的转化1.取感受态细胞置于冰浴中，待感受态细胞融化后，分别在100μl 感受态细胞悬液中加入下列DNA质粒或水，轻轻摇匀后冰上放置30分钟。

感受态细胞+pBS SK(-)质粒2μl (含量不超过50ng,体积不超过10μl)感受态细胞+无菌水2μl （阴性对照）2. 热击：42℃水浴中热击90秒（注：精确计算时间，过长将对细胞造成伤害）,热击后立即置于冰上冷2-5分钟（禁止摇动）。

3. 复苏：向每管中加入400μl LB液体培养基(注：不含Amp),混匀后37℃轻摇培养1~1.5小时,使细菌恢复正常生长状态,并表达质粒编码的抗生素抗性基因(Ampr )。

涂布平板筛选转化质粒方法一（《分子克隆实验指南》标准方法）1.将溶化的顶层琼脂分装于17*100mm试管，将试管置于45℃的加热块槽内备用。

（90mm培养板用3mL顶层琼脂；150mm培养板用7mL顶层琼脂）2．从加热块取出一支试管，快速加入活菌含量不多于3000（90培养基）或10000（150培养基）的细菌悬液0.1mL。

盖紧试管盖颠倒数次。

以使细菌在琼脂中混匀。

3.按下表加入：4. 快速将溶化的顶层琼脂倾入含有适当抗生素的凝固琼脂板的中部，旋转培养板使琼脂散匀。

DH10B 电击感受态细胞使用说明

DH10B 电击感受态细胞使用说明

DH10B 电击感受态细胞DH10B Electroporation Competent CellDH10B 电击感受态细胞基因型F- mcr A ∆(mr r-hsd RMS-mcr BC) φ80lac Z∆M15 ∆lac X74 rec A1 end A1 ara D139 ∆(ara, leu)7697 gal E15 gal K λ- rps L nup GDH10B 电击感受态细胞说明DH10B菌株来源于MC1061菌株，mcrA、mcrBC及mrr突变使DH10B菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA (无论真核生物还是原核生物的基因组DNA都能被高效的转入DH10B中)。

recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

φ80dlacZ∆M15标记的存在使DH10B可用于蓝白斑筛选，rpsL赋予其链霉素抗性。

High5TM系列DH10B感受态细胞适用于大质粒的构建或者各种文库构建。

High5TM系列DH10B感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测，转化效率>1010cfu/μg。

注意：DH10B 电击感受态细胞只能用于电击转化而不能用于热激转化。

DH10B 电击感受态细胞操作方法1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟，待其沥干水分，正置5分钟，使乙醇充分挥发，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。

2. 取-80℃保存的High5TM 系列DH10B感受态细胞放入冰浴中融化，加入1 μl目的DNA (质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀立即插入冰中。

A. 测定转化效率使用1 μl 10 pg/μl的对照质粒pUC19；B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀DNA后适量TE缓冲液(10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬，保证DNA浓度不超过100 ng/μl。

Agl1农杆菌感受态细胞使用说明书

Agl1农杆菌感受态细胞使用说明书

华越洋⽣生物提供 QQ: 1733351176A GL1农杆菌感受态细胞使⽤用说明书编号 名称 产品规格北京华越洋生物GX9131-­‐100s AGL1农杆菌感受态细胞 10*100UL北京华越洋生物GX9131-­‐100 AGL1农杆菌感受态细胞 20*100UL基本信息：AGL1农杆菌感受态细胞基因型:C58 R ecA (rif R/carb R) T i p TiBo542DT-­‐DNA (strep R) S uccinamopine产品说明：AGL1菌株为C58, RecA型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif和羧苄青霉素抗性基因carb，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型Ti质粒 pTiBo542DT-­‐DNA，此质粒含有vir 基因（vir基因是T-­‐DNA插入植物基因组必需的元件， pTiBo542DT-­‐DNA 质粒自身的T-­‐DNA转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体T-­‐DNA 顺利转移）。

pTiBo542DT-­‐DNA型Ti质粒含有筛选标签：strep，赋予AGL1菌株链霉素抗性，适用于水稻、拟南芥、杨树等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率可达5×103cfu/μg。

操作⽅方法:1. 取-­‐80℃保存的农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。

每100μl感受态加1ug（体积不大于10ul）质粒DNA，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。

2. 加入700μl无抗生素的LB或YEB液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时。

3. 6000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-­‐3天。