（1）优点：免疫电泳技术是将免疫扩散和电泳相结合的一种免疫学分析技术，既有抗
原抗体反应的高度特异性，又有电泳分离技术的快速、灵敏和高分辨力，广泛应用于牛物医
学领域。
（2）用途：
①纯化抗原或抗体的成分分析，分析其纯度；
②正常及异常体液中蛋白质成分的分析，如无丙种球蛋白血症、冷球蛋白血症、多发性骨髓
瘤、白血病、系统性红斑狼疮、肝病等病人的血清蛋白成分的分析，多发性骨髓瘤血清M蛋
白的检测和鉴定；
③免疫后不同抗体组分的动态变化研究。
第七章免疫电泳技术本章考点1.概述2.免疫电泳技术3.应用免疫电泳技术是根据抗原及抗体反应的高度特异性，电泳技术的高分辨力和具有微量、快速的特点，将凝胶内电泳与免疫扩散相结合的一项免疫学技术。
第一节基本原理一、原理免疫电泳技术实质上是在直流电场作用下的凝胶扩散试验。
它的原理是将凝胶扩散置于直流电场中，在一定的条件下，抗原及抗体离解成为带正电或负电的电子，在电场中向异相电荷的电极移动，所带净电荷量越多、颗粒越小，泳动速度越快，反之则慢。
由于电流加速了抗原、抗体的运行速度，缩短了两者结合的时间，加快了沉淀现象的产生。
当有多种带电荷的物质电泳时，由于静电荷不同，而区分成不同区带，使抗原决定簇不同的成分得以区分。
影响因素有：①电场强度；②溶液pH；③离子强度；④电渗等。
二、电解质和蛋白质的电离特性、电泳迁移率、电渗蛋白质的基本单位是氨基酸，在水溶液中具有两性电离特性，当缓冲液pH与蛋白质等电点（PI）相当时呈电中性，无电泳迁移性；缓冲液pH大于蛋白质等电点（PI）时带正电荷，向阴极端移动；缓冲液pH小于蛋白质等电点（PI）时带负电荷，向阳极端移动。
在同一电场条件下，各种带电粒子在单位时间内的移动距离称电泳迁移率。
在电场中液体对固体可出现相对移动，产生电渗现象。
电渗不影响蛋白质的分离，但影响其原点位置。
影响因素有：①电场强度；②溶液pH；③离子强度；④电渗。
三、常用载体有琼脂和琼脂糖凝胶。
其特点是提高了敏感性及反应速度，并可将带电性不同的组分区分开。
第二节常用技术免疫电泳常用技术有：1.对流免疫电泳：对流免疫电泳原理是将双向扩散试验与电泳相结合的定向加速的免疫扩散技术。
在琼脂板上打两排孔，左侧各加入待测抗原，右侧孔内加入相应抗体，抗原在阴极侧，抗体在阳极侧。
通电后，在pH8.4缓冲液中带负电荷的蛋白质抗原泳向阳极抗体侧，而抗体借电渗作用流向阴极侧，在两者之间或抗体侧形成沉淀线。
本法敏感度比双向扩散试验高8～16倍。
免疫电泳欧洲药典方法免疫电泳是一种常用的生化技术，主要用于检测和分离生物物质中的蛋白质。
它利用特定的抗体与目标蛋白质结合，然后将混合物经过电泳分离，最终可以得到目标蛋白质的电泳带。
1.实验材料和仪器：(1)免疫反应液：包括抗体和相应的检测抗体。
抗体应根据检测对象而定。
(2)电泳缓冲液：主要成分为三种：阴极缓冲液、阳极缓冲液、以及样品缓冲液。
(3)聚丙烯酰胺凝胶：通常使用的是聚丙烯酰胺胶。
根据目的不同，可以使用不同的凝胶浓度。
(4)电泳槽：通常使用平行电泳槽，根据凝胶的大小而定。
(5)电源：应根据凝胶的大小和浓度而定。
(6)图像分析装置：可以使用特定的电泳成像系统或扫描仪。
2.操作流程下面按照方法的不同部分来介绍免疫电泳的操作流程：(1)制备聚丙烯酰胺凝胶将所需的丙烯酰胺浓度(通常为5-15%)的缓冲液混合并加入过氧化物溶液，用n-丙基氨基甲酸酯作为交联剂，混合均匀后倒入模板中，待凝固后取出。
(2)制备免疫反应液先制备检测蛋白质的抗体。
一般来说，公司会提供来自不同物种的抗体，可以根据需要选择。
取抗体适当稀释后，加入检测蛋白质，进行共价结合。
将合成的免疫反应液加入到聚丙烯酰胺凝胶中，等待反应。
(3)电泳操作准备好阴极和阳极缓冲液以及样品缓冲液，根据需要加入适当的试剂比如十二烷基磺酸钠等，混合均匀。
将聚丙烯酰胺凝胶浸泡在样品缓冲液中，待浸透后放入电泳槽中。
准备好电源，先进行预运行(pre-run)，预运行时，将电压调至适当值，电泳板子在有效距离内开启电源，维持约30分钟(根据不同的操作，时间需调整)。
预运行完成后，准备抗体，向凝胶中注入抗体，然后开始运行电泳。
(4)电泳后的分析和影像运行电泳后，需要进行染色和成像(通过特定的电泳成像系统或扫描仪)。
将凝胶浸泡在染色缓冲液中，待染色足够后(根据染色液种类，时间需要调整)，将凝胶安装在导轨上，进行成像。
3.免疫电泳的优点免疫电泳是温和的，不会破坏蛋白质分子结构，也能检测蛋白质的质量和纯度。
