肺癌组织凋亡相关基因的表达意义(一)

CD31与CD34在肺腺癌中的表达及临床意义发表时间：2016-03-23T10:15:40.033Z 来源：《中国慢性病预防与控制》2015年8月第2期供稿作者：苏睿谭明旗[导读] 1.沈阳市第五人民医院呼吸内科 2.中国医科大学附属盛京医院呼吸内科近年来肺癌的发病率在我国呈上升趋势，肺癌的发病率已位居男性肿瘤的首位。

（1.沈阳市第五人民医院呼吸内科辽宁沈阳 110023）（2.中国医科大学附属盛京医院呼吸内科辽宁沈阳 110020）【中图分类号】R734.2 【文献标识码】A 【文章编号】1004-6194（2015）02-0360-02前言近年来肺癌的发病率在我国呈上升趋势，肺癌的发病率已位居男性肿瘤的首位。

由于早期诊断不足致使预后差，因此肺癌的早期诊断和系统的治疗方法对肺癌的临床治疗起着重要作用，有效的延长肺癌的生存率。

近年来在肿瘤领域研究的重大进展之一就是确立了肿瘤血管生成在肿瘤发展中的重要地位与抗血管生成治疗肿瘤的意义，尤其是对非小细胞肺癌的微血管密度（MVD）的研究日益受到人们的重视。

目前，通过探讨血管内皮标记物CD34 与CD31 在显示非小细胞肺癌微血管密度（MVD ）中的差异，以及MVD 与淋巴结转移的关系,进一步了解肿瘤组织内的微血管形态、分布、数量及血液循环等对于肿瘤的形成、治疗和预后判定有着十分重要的意义，为肺腺癌的治疗提供新的思路。

1 材料与实验方法1.1 组织标本取自中国医科大学附属盛京医院肺腺癌切除手术病例标本，术前均未接受放疗或化疗。

时间：2003年1月至2008年12月，共90例，其中男性42例，女性48例，年龄：44岁至85岁，组织类型均为腺癌。

其中高分化：28例，中分化：34例，低分化：28例，有淋巴结转移44例，无淋巴结转移：46例，经福尔玛林固定，石蜡包埋。

1.2 主要药品，试剂与仪器（1）即用型CD31 、CD34 单克隆抗体(北京中杉金桥公司)（2）即用型DAB显色液(北京中杉金桥公司)（3）石蜡切片机，高压锅，温箱，光学显微镜，图像采集系统，显微图像分析系统等。

非小细胞肺癌患者病理组织中MTH1的表达及临床意义研究杜凤华; 闵旭红; 孔维博; 孔祥舟; 梅晓冬【期刊名称】《《重庆医学》》【年(卷),期】2019(048)014【总页数】7页(P2386-2392)【关键词】MutT同源物1; 癌;非小细胞肺; 氧化性应激; 预后; 无病生存【作者】杜凤华; 闵旭红; 孔维博; 孔祥舟; 梅晓冬【作者单位】安徽医科大学附属省立医院呼吸内科合肥233001; 安徽省胸科医院放射介入科合肥233003【正文语种】中文【中图分类】R734.2肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因，发病率高且严重危及人类的健康[1]。

随着现代分子肿瘤学的进步，各种分子靶向治疗取得了较大进步，但肺癌的预后仍然很差[2]，亟须寻找新的肺癌预后分子标志物和治疗靶点。

有学者认为癌症的发生是细胞在各种内外环境刺激下导致原癌基因和抑癌基因平衡失调、细胞增殖失控的过程[3]。

氧化应激、缺氧和表观遗传障碍在癌症的发生、发展中起到重要的作用。

呼吸、正常代谢和炎性反应过程均产生活性氧(ROS)[4]，ROS可氧化核苷酸和蛋白质，诱导基因突变和导致细胞衰老[5]。

ROS可氧化核苷酸库中的dGTP或直接氧化DNA中的鸟嘌呤碱基而产生8-氧代-鸟嘌呤(8-氧-G)。

在DNA复制过程中，DNA聚合酶通常在模板DNA中插入8-氧代-dGTP，从而导致A到C或G到T 的颠换突变[6]。

MutT同系物1(MutT homolog 1，MTH1)是一种氧化型嘌呤核苷三磷酸酶，将8-氧代-dGTP水解成其单磷酸形式，从而阻止DNA聚合酶将8-氧代-dGTP插入基因组[8]，对细胞基因组的稳态起到保护作用。

暴露于烟草烟雾或电离辐射，会增加正常细胞中的ROS水平[7]，这可能导致核苷酸库中的8-氧-G积累。

DNA 中8-氧-G的过度积累可诱导细胞凋亡，因此癌细胞可能获得防止DNA中8-氧-G 积累机制。

事实上，MTH1在脑癌、乳腺癌和胃癌中表现丰富[8-9]。

硕士学位论文P38MAPK 在肺鳞癌组织和细胞中的表达和意义常蕊静培 养 类 别 全日制 学位类型专业学位 一级学科(专业类) 临床医学 二级学科(专业) 内科学（呼吸系病） 研究方向 肺癌的早期发现和治疗 指导教师 金发光 教授（主任医师） 培养单位第四军医大学唐都医院二O 一三年五月第四军医大学The Fourth Military Medical University分类号 R734.2 U D C 616.2密级 公开独创性声明秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。

尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。

与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。

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论文作者签名：日期：保护知识产权声明本人完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位为第四军医大学。

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论文作者签名：导师签名：日期：目录缩略语表 (1)中文摘要 (3)英文摘要 (6)前言 (9)文献回顾 (10)正文 (23)实验一P38MAPK在肺鳞癌组织中的表达和意义 (23)1 实验材料 (23)2 实验方法 (26)3 实验结果 (32)4 讨论 (37)实验二P38MAPK在肺鳞癌细胞中的表达以及对增殖和周期的影响 (40)1 实验材料 (40)2 实验方法 (41)3 实验结果 (43)4 讨论 (44)小结 (46)参考文献 (47)个人简历和研究成果 (57)致谢 (58)缩略语表缩略词英文全称中文全称3D-CRT Three dimensional conformal radiationtherapy三维适形放疗4D-CRT Four dimensional conformal radiation therapy 四维适形放疗ALK anaplastic large cell lymphoma 间变淋巴瘤激酶CA125 cancer antigen 125 肿瘤相关抗原125 CEA carcino embryonie antigen 癌胚抗原CRCT concurrent radiochemotherapy 同步放化疗DLCO diffusing capacity of the lung for carbonmonoxide一氧化碳弥散量EGFR epidermal growth factor receptor 表皮生长因子受体EML4 echinoderm microtubule associated proteinlike 4棘皮动物微管相关蛋白样4ERK extracelluar signal regulated protein kinase 细胞外信号调节激酶FEV1 forced expiratory volume in one second 一秒钟用力呼气容积FQ-PCR fluorescence quantitative PCR 荧光定量PCR GRAP2 GRB2-related adaptor protein GRB2相关接头蛋白GSK glycogen synthase kinase 糖原合成酶激酶HPK haemopoietic progenitor kinase 造血祖细胞激酶JNK c-Jun amino (N)-terminal kinases C-Jun氨基末端激酶MAPKAPK MAPK-activated protein kinase MAPK活化蛋白激酶MAPKKK MAPK kinase kinase MAPK激酶激酶MAPKKK MAPK kinase MAPK激酶MAPKs Mitogen activated protein kinases 丝裂原活化蛋白激酶家族MK mitogen-activated protein kinase activatedprotein kinaseMAPK活化蛋白激酶MKP mitogen activated protein kinase phosphatase 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酯酶MMPs matrix metalloproteinases 基质金属蛋白酶Mnk MAP kinase interacting kinase MAPK相互作用的激酶MSK mitogen and stress activated protein kinase 应激激活蛋白激酶NLK Nemo-like kinase Nemo/Nmo类似的激酶NLS nuclear localization sequence 核酸定位序列NSCLC non-small cell 1ung cancer 非小细胞肺癌NSE neuron specific enolase 神经元特异性烯醇化酶RSK ribosomal S6 kinase 核糖体蛋白质s6激酶SAPK stress-activated protein kinase 应激活化蛋白酶SCCAg squamous cell carcinoma antigen 鳞状细胞癌相关抗原SCLC small cell lung cancer 小细胞肺癌TAD transacti- vation domain 反式激活结构域TBNA transbronchial needle aspiration 经支气管针吸活检术TK tyrosine kinase 酪氨酸激酶VEGF vascular endothelial growth factor 血管内皮生长因子P38MAPK在肺鳞癌组织和细胞中的表达和意义硕士研究生：常蕊静导师：金发光教授辅导教师：南岩东副教授第四军医大学唐都医院呼吸内科，西安710038中文摘要关键词：肺鳞癌；P38MAPK；周期；增殖研究背景肺癌作为全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，严重威胁人类的健康。

目 录英文缩略词表………………………………………………………………………………………………… 中文摘要…………………………………………………………………………………………………………… Abstract ……………………………………………………………………………………………………………正文 TLR4与NF-κB 在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义……… 1 前言……………………………………………………………………………………………………………… 2 材料与方法………………………………………………………………………………………………… 2.1 材料…………………………………………………………………………………………………… 2.1.1 材料来源……………………………………………………………………………… 2.1.2 临床及病理资料…………………………………………………………………… 2.1.3 主要试剂……………………………………………………………………………… 2.1.4 主要仪器……………………………………………………………………………… 2.1.5 试验相关试剂的配置…………………………………………………………… 2.2 试验方法…………………………………………………………………………………………… 2.2.1 HE 染色……………………………………………………………………………………2.2.2 免疫组化SP 法操作步骤………………………………………………………2.2.3 免疫组化结果判定……………………………………………………………… 2.3 统计学分析………………………………………………….…………………………………… 3 结果………………………………………………….……………………………………………………………3.1 正常肺组织和NSCLC 组织中TLR4、NF-κB 表达……………………… 3.2 TLR4与NF-κB 在NSCLC 中的表达与临床病理之间的关系3.3 NSCLC 组织中TLR4与NF-κB 蛋白表达之间的相关性………… 4 讨论……………………………………………………………………………………………………………… 5 结论……………………………………………………………………………………………………………… 6 创新与不足之处………………………………………………………………………………………… 6.1 创新点……………………………………………………………………………………………20 1 3 58 8 101010101010111111 12 1213 131315 16 16 19 19206.2 不足之处 (20)7 继续研究方向 (20)参考文献 (21)附录 (24)致谢 (25)综述 (26)英文缩略词表（Abbreviation）英文缩写英文全称中文名称NSCLC non-small cell lung cancer 非小细胞肺癌receptors Toll样受体TLRs Toll-likeNF-κB nuclearfactor-kappaB 核因子-κBreceptor 病原模式识别受体PRR PatternrecognitionPAMPs pathogen associated molecular patterns病原相关分子模式repeat 亮氨酸的重复序列richLRR leucineTH Toll homolgy domain Toll同源结构域receptor 白细胞介素-1受体IL-1R interleukin-1LPS Lipopolysaccharide 脂多糖proteins 热休克蛋白HSP heat-shockdomain Rel同源区RHD RelhomologyIL interleukin 白细胞介素IFN-γ interferon-γ干扰素-γTNF-αTumor necrosis factor-α肿瘤坏死因子-αTRAIL TNF-relatedapoptosis inducing ligand TNF相关的凋亡诱导配体MyD88 Myeloid differentiation factor 88 髓系分化因子88TGF-βTransforming growth factor-β转移生长因子-βVEGF Vascularendothelial growth factor 血管内皮生长因子IKK IκB kinase IκB激酶matrix 细胞外基质ECM extracellularu-PA urokinase plasminogen activator 尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂cell 树突状细胞DC dendriticAPC antigen presenting cell 抗原呈递细胞NK natural killer cell 自然杀伤细胞IRAK IL-1 receptor associated kinase, 白细胞介素-1受体相关蛋白激酶TRAF6 TNF receptor-associated-factor 6 肿瘤坏死因子受体相关因子6 NIK NF-κB inducing kinase 核因子-κB诱导激酶TIRAP TIR domain containing adaptor protein TIR包含蛋白分子MAL MyD88 adaptor like MyD88样分子domain TIR结构域TIR Toll/IL-1RMAPK migoten-activated protein kinase 丝裂原活化蛋白激酶JNK c-Jun N-terminal kinase c-Jun氨基末端激酶signal-regulated kinase 细胞外信号调节激酶ERK extracellularprotein-1 活化转录因子-1AP-1 activatorCpG-ODN CpG-oligodeoxynucleotides 磷酸胞苷酰-寡脱氧核苷酸synthase 一氧化氮合酶iNOS nitricoxidedsDNA double stranded DNA 双链脱氧核糖核酸lymphocyte 细胞毒性T淋巴细胞CTL cytotoxicityTTLR4与NF-κB在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义摘要研究背景：肺癌是目前人类最为常见的恶性肿瘤之一，进展迅速，预后差，已严重威胁到人类的健康。

CHPF通过激活MAPK信号通路影响非小细胞肺癌的增殖和凋亡CHPF通过激活MAPK信号通路影响非小细胞肺癌的增殖和凋亡肺癌作为全球最常见的恶性肿瘤之一，严重危害着人类健康。

尽管在治疗方面取得了一些进展，但仍然存在一定的局限性和挑战。

因此，寻找新的治疗靶点和策略对于非小细胞肺癌的治疗非常迫切和重要。

近年来，MAPK信号通路被证实在肿瘤发生和发展中起着关键作用。

该信号通路参与调节细胞的增殖、分化、凋亡等生物学过程，对于维持正常细胞生理功能至关重要。

然而，在某些情况下，MAPK信号通路的异常激活会导致肿瘤的产生和恶化。

CHPF（Chondroadherin-like Protein），作为一种新型的细胞外基质蛋白质，最近的研究表明，它在非小细胞肺癌中起到了调控MAPK信号通路的重要作用。

通过激活MAPK信号通路，CHPF能够影响肺癌细胞的增殖和凋亡。

首先，CHPF的过表达与非小细胞肺癌患者的预后密切相关。

一项研究发现，CHPF在非小细胞肺癌组织中的表达水平较正常组织明显升高。

另外，CHPF的高表达与肿瘤的分期、转移和复发等重要临床指标密切相关。

这些结果暗示着CHPF可能在非小细胞肺癌中发挥着重要的作用。

进一步的研究表明，CHPF通过激活MAPK信号通路来调控肺癌细胞的增殖。

MAPK信号通路主要包括ERK、JNK和p38三个重要的分子级联反应。

实验结果显示，CHPF可以增强ERK、JNK和p38的磷酸化水平，从而促进非小细胞肺癌细胞的增殖。

此外，抑制MAPK信号通路可以部分逆转CHPF对肺癌细胞增殖的促进作用。

此外，CHPF还通过调节MAPK信号通路影响肺癌细胞的凋亡。

凋亡是一种细胞程序性死亡方式，在肿瘤的治疗中具有重要意义。

实验结果显示，CHPF能够抑制MAPK信号通路的激活，并增加肺癌细胞的凋亡率。

进一步的分子机制研究表明，CHPF 可能通过调节Bcl-2家族和Caspase家族等凋亡相关基因的表达来实现这一作用。