大鼠心脏TNNT2基因的克隆及表达研究_李兆阳

平无显著差异 （ ０ ０ ） Ｐ＞ ．５ 。结论 ： Ｔ Ｒ基因在体转染可抑制球 囊损伤后大 鼠颈动脉 平滑 肌细胞增 殖 和新 生 内膜 Ａ２
增生 ， Ｔ Ｒ基因转染后表达并发挥其生物学作用 时 ，Ｔ Ｒ和 Ａ ２ Ａ２ Ａ１ Ｔ Ｒ之 间不存在表达量 上此起彼伏 的关 系， 可能 是
建立在信号转导基础上的功能调节关系 。
作用 。方法 ： 鼠颈 动脉 球囊 损 伤后 ， 大 局部 转 染 Ａ ２ Ｔ Ｒ重组 腺 病毒 载体 （ Ａ Ｃ ／ Ｔ Ｒ） 空病 毒载 体 （ Ａ ｐ ｄ ＭＶ Ａ ２ 或 ｐ ｄ— ＧＰ ， Ｆ ） 于术后 ７ ｌ ‘ ２ 、４和 １ｄ用 Ｒ Ｔ—Ｐ Ｒ、 Ｃ 免疫组织化学及 Ｈ Ｅ染色方法 ， 进行 Ａ ２ Ａ ｇ １型受体 （ Ｔ Ｒ 、Ｃ Ａ Ｔ Ｒ、 ｎ Ⅱ Ａ １ ）ＰＮ
［ 关键词 】 基因 ； Ｔ Ｒ； 因转染 ； Ａ２ 基 血管 内膜 ［ 中图分 类号】 Ｒ ６ ３３ ［ 文献标识码】 Ａ
ＡＴ２Ｒ ｅ ｅ ｔ ａ ｓ ｅ ｏ ｒ ｔｃ ｒ ｔｄ ａ ｔ ｒｅ ｎｈ ｂｉｓｎ ｏ ｎ ｉ ａ ｐ ｒ ｌｓａ ｇ ｎ ｒ ｎ ｆ ｒ ｔ ａ ａ ｏ ｉ ｒｅ ｉｓｉ ｉ ｔ ｅ ｉ ｔｍ ｌｈｙ ｅ ｐ ａ ｉ
ｙｘ ｋ ｙ ｈ ｏ ｃｒ． ａ ｙ ｎ＠ ａｏ．ｏ ｃ ） ｎ
［ Ｓ Ｒ Ｔ］ ＡＩ ： ｏｓ ｄ ｅｅ ｅｔ ｏ ｇ ｔ ｓ Ⅱ ｔ ｅ２ ｒ ｅｔｒ（ Ｔ Ｒ）ｇｎ ａｓ ｒ ｎｎｏｎｉａ ＡＢ Ｔ ＡＣ Ｍ Ｔ ｔ ｙｔ ｆ ｃ ｆ ｎ ｉ ｅ ｉ ｕ ｈ ｓ ａ ｏｎｎ ｙ ｅ ｐｏ Ａ ２ ｐ ｃ ｅｅｔ ｎｆ ｅｉ ｍ ｒ ｅｏ ｔｌ
ａ ｔ ｒ ｂａ ｌ ｏ ａ ｇ ｏ ｌ ｓ ｙ ｆ ｅ ｌｏ ｎ ｎ ｉ ｐ ａ ｔ

恩格列净灌胃对高血压大鼠心室舒张功能障碍的改善作用及其机制姚卫杰1，2，3，4，于翔1，2，3，41 天津医科大学朱宪彝纪念医院心内科，天津300134；2 天津市内分泌研究所；3 国家卫健委激素与发育重点实验室；4 天津市代谢性疾病重点实验室摘要：目的　观察恩格列净灌胃对高血压大鼠心室舒张功能障碍的改善作用，并探讨其可能作用机制。

方法　25只雄性SD 大鼠，其中5只分离腹主动脉后关闭腹腔（假手术组），另20只采用腹主动脉缩窄术制备高血压心室舒张功能障碍模型（术后第8周末测量血压、超声心动图检测大鼠心室结构及功能指标，评价模型是否成功，结果造模成功15只）。

15只高血压心室舒张功能障碍模型大鼠随机分为A 、B 、C 三组（各5只）并再次实施超声心动图检查（给药前）：A 组大鼠恩格列净10 mg /（kg ·d ）灌胃，1次/天，连续灌胃4周（给药后）；B 组大鼠生理盐水灌胃，1次/天，连续灌胃4周；C 组不做特殊处理。

A 组和B 组大鼠给药结束即刻超声心动图检查后、C 组同期脱颈处死并留取心肌组织，分别采用ELISA 法及WESTERN Blotting 法检测三组大鼠心肌组织炎症因子、氧化应激指标、胶原纤维指标。

结果　与B 组比较，A 组大鼠左心室等容舒张时间（IVRT ）短、左心室质量（LVM ）及左室收缩末期内径（LVIDs ）下降（P 均<0.05）。

与给药前比较，第28天时A 组大鼠IVRT 短、LVM 及LVIDs 下降（P 均<0.05）。

与B 组比较，给药后A 组心肌组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、丙二醛（MDA ）、转化生长因子β（TGF -β）含量低，超氧化物歧化酶（SOD ）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH -PX ）含量高，NOD 样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）相对表达量低（P 均<0.05）。

结论　恩格列净灌胃可减轻高血压大鼠的心室舒张功能障碍，其机制可能为恩格列净降低心肌组织MDA 、TGF -β、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及NLRP3表达，促进SOD 、GSH -PX 表达。

血管紧张素Ⅱ对乳大鼠心肌细胞时钟基因表达的影响黄新艳;魏立;李晓林;朱东亚;李庆平【期刊名称】《中国药理学与毒理学杂志》【年(卷),期】2005(19)3【摘要】目的为研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致左心室肥厚是否与时钟机制有关.方法分离纯化培养的7 d龄乳大鼠心肌细胞,分别加入AngⅡ和(或)替米沙坦(Tel)处理,然后提取总RNA,用RT-PCR检测评价心肌细胞时钟基因(Bmal1, mPer2, Dbp)的转录水平.结果与对照组心肌细胞相比,0.1 μmol·L-1 AngⅡ处理72 h使心肌细胞时钟基因转录水平显著上调;0.1 μmol·L-1 Tel能拮抗0.1 μmol·L-1 AngⅡ对心肌细胞时钟基因转录上调的作用.结论在正常培养乳大鼠心肌细胞中,时钟基因以日周期节律方式振荡表达,AngⅡ诱导其表达增强,Tel从受体水平拮抗AngⅡ的诱导作用.【总页数】5页(P194-198)【作者】黄新艳;魏立;李晓林;朱东亚;李庆平【作者单位】南京医科大学,心血管药理学研究室,江苏,南京,210029;南京医科大学,心血管药理学研究室,江苏,南京,210029;南京医科大学,心血管药理学研究室,江苏,南京,210029;南京医科大学,药学院药理学教研室,江苏,南京,210029;南京医科大学,心血管药理学研究室,江苏,南京,210029【正文语种】中文【中图分类】R96【相关文献】1.血管紧张素Ⅱ对培养新生大鼠心肌细胞MHC基因表达的影响 [J], 吴扬2.血管紧张素1-7对培养心肌细胞血管紧张素转换酶2基因表达的影响 [J], 王江;宋熔;聂凌;田颖;谭红梅;李楠;祝善俊3.广西中华眼镜蛇的蛇毒蛋白natrin对过氧化氢损伤乳大鼠原代心肌细胞钙超载及相关基因表达的影响 [J], 梁永红;苏延旭;马兴才;张洪也;蒋兴明;陆世银;苏志恒;郑华;宋慧4.人参总皂苷对血管紧张素Ⅱ所致乳大鼠心肌细胞肥大的抑制作用 [J], 吕昕瞳;杨丹莉;邓江;黄燮南5.苯那普利对5/6肾切除大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ及时钟基因表达节律的影响 [J], 黄小妹;陈文莉;袁静萍;杨月红;王银;胡晓松;曾星若;方询因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

ｂｇ ｆａ ｍｅ ｔｆｏ ｐ ｉ ｇ ｎ ｒｍ ＥＧＦ － ｄ ａ２． ｂ ｆａ ｒ Ｐ Ｎ１ａ ２ ｋ ｇｍｅ ｔｆｏ ｍｆ ２ ｇ ｎ Ｔｈ ｉ ｒｇ ｎ ｄ ｔｅ２． ｂ ｆａ ｍｅ ｔｗｅｅ ｒｃ ｍｂ ｎ ｄ． ｅ ｎ ｒ ｎ ｍ ｎ ｅ ｅ． ｅ ｂｇｆａ ｍｅ ｔａ ｈ ２ ｋ ｒｇ ｎ ｒ ｅ ｏ ｉ ｅ Ｔ ｒ ｎ ｈ
２ ｍ ｎ）ｃ Ｎ ｅｈ ｒ ｙ ｔ ｉｉ ｒ ｃｖｔ ｇ ｒｔ ｎｏｅｅ． ｔｏ ｓ Ｔ ｅ Ｎ ａ ｅｔ ｃ ｄ ｒ ｔ ａｃ ａ ｓ ｏ出 ｍ ｓ ｅ （ｆ ２ Ｄ Ａ ｎｉ ｅ ｃｔｏ ｃｙ ｏ ｔ ａｎ ｏ ｏｃｇｎｓＭｅｈｄ ｈ Ａｗ ｓ ｘａｔ ｏ ｒ ｕ ｒｍ ｏ ｕｃ ｔ ｏ ｘ ｔｎ ａ ｉ ｉ ｐ — Ｒ ｒ ｅ ｆ ｍ ａｖ ｌ ｓ ｌ
中 图分 类 号 ： ７ Ｑ ｉ Ｍｅｉ ｌ ｎ ｅ ｉ ，． ｅｒｃ ｔ ，ｈ ２ ａ ｄ ａ Ｕ ｉ ｒｔ ２ Ｈ ａ ｎ ｒ ｔ ｃ ｖ ｓｙ ｔｅｅ ｅ 文 献 标 识码 ： Ａ Ｈ ｓｔ ｉ ｘ ｄ ａ Ｕ ｖ ｓｙ Ｙ ｃｕｎ７００ ， ｈ ａ ｏ ｉ ｏ ｎ ｉ Ｍｅｉ ｌ ｎ ｒｔ， ｉ ｈａ ５０４ Ｃ ｉ ） ｐ ａ ｆＮ ｇ ａ ｌ ｃ ｉ ｉ ｅ ｎ ｎ
者纯化 回收大片段 ， 后者纯化 回收 ２ ２ｋ 片段 ， ． ｂ 再将 回收的 ｐ Ｇ ＰＮ 大片段与 ｎ ｎ 因片段 （ ． ｂ 重组 。对重 组 Ｅ Ｆ－１ ｆ２基 ２２ｋ ）
ｐＧ Ｐ ｆ Ｅ Ｆｍ ｎ 粒 进 行 Ｐ Ｒ和 双 酶 切 鉴 定 并 测 序 。结 果 ２质 Ｃ 载 体 的 真 核 表 达 质 粒 。结 论 达 与 心 血 管 疾 病 发 生 的关 系奠 定 基 础 。 关 键 词 ： 因克 隆 ； 粒 体 融 合 蛋 白 ２ 因 ； 核 表 达 质 粒 载 体 基 线 基 真

麝香保心丸下调代谢综合征大鼠心肌组织尾加压素Ⅱ及其受体表达的实验研究廖丛娟1,张旭升1,黄战军1,樊小容1,谭小青1,蔡博治2摘要:目的观察麝香保心丸对代谢综合征(MS)大鼠心肌组织尾加压素Ⅱ(UⅡ)及其受体(UT)的影响㊂方法取雄性SD大鼠24只,先随机分成正常对照组(8只)和MS组(16只),分别用普通饲料和高果糖饲料喂养,用高果糖饮食诱导MS大鼠模型后,随机分为模型对照组和麝香保心丸组,取大鼠心肌组织应用Masson染色观察血管胶原沉积情况,比较心肌肥厚指数,应用放射免疫法检测大鼠血浆和心肌组织UⅡ含量,应用免疫组化法检测心肌组织UT表达㊂结果高果糖饮食可成功诱导典型MS大鼠模型,与正常对照组相比,Masson染色可见MS组大鼠心肌组织有明显胶原沉积,心肌肥厚指数增加,UⅡ/UT表达亦同步上调㊂用麝香保心丸干预后,心肌组织胶原沉积和心肌肥厚指数改善,UⅡ/UT表达下调㊂结论麝香保心丸可下调UⅡ/UT表达,改善心肌重构㊂关键词:代谢综合征;麝香保心丸;心肌重构;尾加压素Ⅱ;实验研究中图分类号:R542.2 R285.5文献标识码:A d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2020.15.009Experimental Research of Shexiang Baoxin Pill on Lowering Myocardial Tissue Tail UrotensinⅡand Its Receptor in Rats with Metabolic SyndromeLIAO Congjuan,ZHANG Xusheng,HUANG Zhanjun,FAN Xiaorong,TAN Xiaoqing,CAI BozhiLonggang District People's Hospital of Shenzhen,Shenzhen518172,Guangdong,ChinaCorresponding Author:HUANG ZhanjunAbstract:Objective To investigate the effect of Shexiang Baoxin Pill(SXBXP)on myocardial tissue tail urotensinⅡand its receptor in rats with metabolic syndrome(MS).Methods After inducing an MS rat model with a high-fructose diet,the rats were randomly divided into model control group and SXBXP group.The expression of collagen was determined by Masson staining and myocardial hypertrophy index was compared.The urotensinⅡcontents were detected by radioimmunoassay,and the expressions of urotensinⅡreceptor were determined by immunohistochemistry.Results The MS model of rats were induced by high-fructose diet pared with normal control group,Masson staining showed that there were collagen deposited in myocardial tissue of MS group,and myocardial hypertrophy index was increased.The expression of urotensinⅡand its receptor also increase simultaneously.Conclusion Shexiang Baoxin Pill could reduce the expression of urotensinⅡand its receptor,and improve the myocardial remodeling.Keywords:metabolic syndrome;Shexiang Baoxin Pill;vascular remodeling;urotensinⅡ;experimental research代谢综合征(MS)包括高血压和血脂㊁血糖及尿酸代谢异常等临床表现,作为与心血管系统疾病密切相关的多种危险因素,可损伤血管内皮功能㊁促进动脉粥样硬化㊁细胞增殖及胶原沉积等病理过程,最终引起心肌及血管重构发生[1]㊂MS诱导心肌重构的机制相当复杂,研究发现高血压导致血流高剪切力㊁血脂和尿酸代谢异常及胰岛素抵抗等作用扮演了重要角色㊂心肌局部炎症反应㊁氧化应激及脂肪细胞因子等活性因子作者单位 1.深圳市龙岗区人民医院(广东深圳518172);2.汕头大学医学院第一附属医院通讯作者黄战军,E-mail:******************引用信息廖丛娟,张旭升,黄战军,等.麝香保心丸下调代谢综合征大鼠心肌组织尾加压素Ⅱ及其受体表达的实验研究[J].中西医结合心脑血管病杂志,2020,18(15):2414-2417.的作用均参与了心肌重构等过程,而血管活性多肽的生物学效应也越来越受到关注[2-4]㊂尾加压素Ⅱ(UⅡ)是一种类生长抑制素的血管活性多肽,UⅡ特异受体(UT)为GRP14,属G蛋白耦联受体,两者在心血管组织中均有表达,UⅡ通过结合UT而发挥强烈收缩血管㊁促进胶原沉积㊁心肌细胞增殖及血管钙化等生物学效应[5-6]㊂因此,防治MS诱导的心肌重构除了控制相应的危险因素,还需要应用针对其分子机制的药物,麝香保心丸具有抑制炎症反应及抑制细胞凋亡等作用[7],本课题组早期研究发现,麝香保心丸可抑制MS 诱导的心肌重构[8],但分子机制未进一步探讨,为此,本实验观察麝香保心丸对MS大鼠模型心肌重构的变化,同时观察心肌组织UⅡ/UT表达的变化,探讨麝香保心丸的分子作用机制㊂1材料与方法1.1实验动物㊁药品及仪器设备实验动物为8周龄雄性SD大鼠㊂鼠尾动脉测压仪由汕头大学医学院实验动物中心提供,高果糖饲料(60%)由北京华阜康生物科技有限公司配制提供;Beckman Coulter AU5800生化仪购自美国,由汕头大学医学院第一附属医院检验科提供;血糖试纸及快速血糖仪购自美国雅培;UⅡ放射免疫试剂盒由北京华英生物研究所提供;UT一抗(多克隆)购自北京博奥森生物技术有限公司,二抗购自武汉博士德公司;麝香保心丸购自上海和黄药业有限公司㊂1.2MS大鼠模型建立及分组取雄性SD大鼠24只,先随机分成正常对照组(8只)和MS组(16只),分别用普通饲料和高果糖饲料喂养,8周后检测大鼠空腹血糖㊁血清三酰甘油浓度和尾动脉压,以确定MS模型建立成功㊂然后再将MS组大鼠随机分成模型对照组(8只)和麝香保心丸组(8只),麝香保心丸组予麝香保心丸25mg/kg灌胃,每天1次㊂两组均继续高果糖饲料喂养,饲养4周㊂1.3标本收集及处理3组大鼠均禁食㊁禁水8h以上,常规称重麻醉,剪开胸腔暴露心脏取血,取一部分血置于普通试管,静置凝固析出血清;一部分血置于含有EDTA和抑肽酶的试管中,低温离心分离血浆,-80ħ保存㊂摘取心脏,称重后切取部分心肌组织,4%多聚甲醛固定,制作蜡块,用锡纸包裹其余心肌组织,于-80ħ保存㊂1.4大鼠空腹血糖㊁血清三酰甘油和尾动脉压测定采用快速血糖仪检测血糖;采用Beckman Coulter AU5800生化仪检测血清三酰甘油浓度;采用鼠尾动脉测压仪测量血压㊂1.5心肌肥厚指数测定和心肌组织Masson染色心肌肥厚指数=心脏重量/体重;取大鼠心肌组织蜡块,制作4μm厚切片,脱蜡㊁水化㊁脱水,滴入Masson复合染色液进行染色(按照说明书操作),脱水㊁透明㊁封片,在光镜下观察㊂1.6大鼠血浆和心肌组织UⅡ含量测定采用放射免疫法测定UⅡ含量,具体步骤按试剂盒说明书操作㊂1.7心肌组织UT表达测定制作切片,脱蜡入水,5%胎牛血清封闭非特异性抗原,滴加UT一抗(浓度1ʒ200)过夜,滴加二抗,DAB显色,具体步骤按说明书进行㊂1.8统计学处理应用GraphPad Prism4统计软件㊂计量资料以均数ʃ标准差(xʃs)表示,两组比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析法,两两比较采用q检验㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1大鼠MS模型的特点与正常对照组相比,MS 组大鼠血糖㊁三酰甘油和尾动脉平均压水平均明显升高(P<0.01)㊂详见表1㊂表1两组空腹血糖、三酰甘油和尾动脉平均压水平比较(xʃs)组别只数血糖(mmol/L)三酰甘油(mmol/L)尾动脉平均压(mmHg)正常对照组80.87ʃ0.44 2.75ʃ0.62102.54ʃ6.55 MS组16 1.99ʃ0.72①8.25ʃ0.68①138.55ʃ7.82①注:1mmHg=0.133kPa㊂与正常对照组比较,①P<0.01㊂2.2心肌组织胶原染色对比MS大鼠心肌组织心肌细胞排列紊乱,细胞间质可见明显胶原沉积,心脏肥厚指数较正常组明显增加㊂详见图1㊂图1大鼠心肌组织Masson染色(ˑ40)(蓝色为胶原成分)2.3大鼠血浆和心肌组织UⅡ含量变化与正常对照组相比,模型对照组大鼠血浆UⅡ含量差异无统计学意义,心肌组织UⅡ含量㊁心脏肥厚指数明显增加,用麝香保心丸干预后,心肌组织中UⅡ含量㊁心脏肥厚指数有所下降(P<0.01)㊂详见表2㊂表2各组大鼠血浆㊁心肌组织UⅡ含量和心脏肥厚指数比较(xʃs)组别只数血浆UⅡ含量(μmol/L)心肌组织UⅡ含量[pg/(g㊃pro)]心脏肥厚指数(mg/g)正常对照组872.45ʃ4.58 5.85ʃ0.45 2.98ʃ0.15模型对照组880.02ʃ4.8511.25ʃ0.55① 4.88ʃ0.12①麝香保心丸组878.77ʃ4.45 6.34ʃ0.62② 3.17ʃ0.16②与正常对照组比较,①P<0.01;与模型对照组比较,②P<0.01㊂2.4大鼠心肌组织UT的表达MS大鼠心肌组织UT表达明显上调,用麝香保心丸干预后,UT表达有所下调㊂详见图2㊂图2大鼠心肌组织UT免疫组化染色(ˑ100)(棕黄色为阳性表达)3讨论MS包括高血压㊁尿酸及糖脂代谢异常等多种心血管危险因素,这些均可导致血管损伤㊁细胞增殖㊁胶原沉积及心肌肥厚等作用,最终导致心血管重构的发生,病理表现在平滑肌细胞㊁心肌细胞及心肌成纤维细胞等增殖明显㊁细胞排列结构紊乱㊁细胞间质胶原明显沉积等,主要分子机制包括血管活性因子作用㊁炎症反应㊁脂肪因子效应及氧化应激作用等[1-2,9]㊂而肥胖是导致MS的重要因素,近年来因生活方式的改变,肥胖人群明显增多,导致MS发病率升高,因此,防治MS诱导的心肌重构已成为主要治疗目标㊂本实验结果显示,高果糖饲料饲养大鼠8周后可诱导具有典型MS特征的大鼠模型,并且MS大鼠心肌组织出现心肌细胞增殖㊁排列紊乱,胶原蛋白明显沉积等,心脏肥厚指数较正常对照组大鼠明显增加,提示大鼠心肌发生重构,与其他学者研究结果[4]一致㊂进一步研究发现MS大鼠心肌组织UⅡ/UT表达明显增加,与心肌重构的程度相关,而3组大鼠血浆UⅡ水平比较差异无统计学意义,提示UⅡ/UT可能通过自分旁分泌的方式参与了MS大鼠心肌重构的过程㊂UⅡ是近些年来发现的最强血管收缩物质,UⅡ主要分布在心血管组织㊁神经组织及内分泌系统,研究发现UⅡ/UT系统在心血管上的效应主要是引起细胞增殖㊁迁移,促进心肌细胞胶原蛋白合成,加重心血管重构的发生与发展,与钙离子㊁钙调素㊁蛋白激酶C㊁丝裂素活化蛋白激酶及ERK/NF-κB等信号转导通路相关[10-12]㊂本研究发现UⅡ/UT在正常生理状态下在心血管组织的表达很少,但在高血压㊁高脂血症及胰岛素抵抗等病理状态的刺激和诱导下,UⅡ在心血管组织局部大量表达,同时UT表达上调并与UⅡ结合,从而发挥其促心肌细胞增殖㊁胶原蛋白沉积等生物学效应,结合外周血液UⅡ表达,但差异无统计学意义,考虑UⅡ/UT以自分泌/旁分泌的方式发挥作用可能性较大㊂有研究发现,麝香保心丸具有保护血管内皮功能㊁稳定动脉粥样硬化斑块㊁抑制炎症反应及血管钙化[13-15]等作用㊂本实验用麝香保心丸干预后,MS大鼠心肌组织UⅡ和UT表达明显下降,同时心肌组织胶原沉积和心脏肥厚指数有所减轻,提示麝香保心丸可抑制UⅡ/UT表达,改善心肌重构,可能是改善心肌重构的重要分子机制之一,这将为心肌重构的机制研究及防治提供新的思路和作用靶点㊂参考文献:[1]NIKOLOPOULOU A,KADOGLOU N P.Obesity and metabolicsyndrome as related to cardiovascular disease[J].Expert Rev Cardiovasc Ther,2012,10(7):933-939.[2]樊小容,张旭升,黄战军,等.醛固酮致心肌纤维化作用及机制的研究进展[J].中西医结合心脑血管病杂志,2018,16(16):2333-2336.[3]韩露,王彬,牟晓梅,等.代谢综合征患者心脏损害与脂肪因子变化的临床研究[J].山东大学学报(医学版),2011,9(46):63-67. [4]罗玉梅,姜德谦,万新红,等.吡格列酮和非诺贝特在调节代谢综合征大鼠主动脉重构中的作用[J].中国动脉硬化杂志,2009,17(12): 966-970.[5]张旭升,张勇刚.尾加压素Ⅱ与冠心病[J].中国心血管病研究杂志,2007,5(4):303-305.[6]张勇刚,张旭升,魏睿宏,等.大鼠钙化血管尾加压素Ⅱ及其受体上调[J].中国动脉硬化杂志,2010,18(7):505-509.[7]许昌声,宁若冰,柴大军,等.麝香保心丸对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及炎症因子表达的影响[J].中国动脉硬化杂志, 2011,19(10):813-818.[8]郭洪波,李奕升,张旭升,等.麝香保心丸干预对代谢综合征大鼠心肌重构的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志,2015,13(14):1614-1615.[9]WELTY F K,ALFADDAGH A,ELAJAMI T K.T argeting inflammation inmetabolic syndrome[J].Transl Res,2016,167(1):257-280. [10]邵志凌,何学心,向谨逸.尾加压素Ⅱ诱导心肌细胞肥大及对ERK/NF-κB通路的影响[J].医药导报,2011,30(5):566-569. [11]刘文媛,韩清华,刘青华,等.尾加压素Ⅱ诱导乳鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的信号转导机制研究[J].中国现代应用药学,2016,33(7):862-866.[12]WATANABE T,KANOME T,MIYAZAKI A,et al.Human UrotensinⅡas a link between hypertension and coronary artery disease[J].Hypertension Research,2006,29(6):375-387.[13]张旭升,朱平先,黄战军,等.麝香保心丸对实验大鼠血管钙化的作用[J].中西医结合心脑血管病杂志,2015,13(1):52-54. [14]沈伟,范维琥,施海明,等.麝香保心丸对动脉粥样硬化斑块和缺血心肌中血管新生的实验研究[J].中国中西医结合杂志,2010,30(12):1284-1287.[15]车贤达,钱琳艳,高瑞兰.麝香保心丸预防冠心病PCI术后再狭窄的临床疗效观察[J].中华中医药学刊,2008,26(4):765-766.(收稿日期:2019-02-01)(本文编辑王雅洁)自发性高血压大鼠发病机制及与血管内皮生长因子和成纤维细胞生长因子关系的实验研究刘长召1,王玲1,卢新林2,陈文江3摘要:目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和成纤维细胞生长因子(FGF)是否参与自发性高血压大鼠(SHR)高血压的发生及其与靶器官心脏损害的关系㊂方法将20只雄性SHR分为SHR模型组和氨氯地平10mg/(kg㊃d)喂养的模型对照组,每组10只;另取10只WKY作为正常对照组㊂共喂养12周,每周测量1次血压㊂于12周实验结束时,先采集3组大鼠全血2mL,并分离血浆进行VEGF和FGF的ELISA检测;再获取3组大鼠心脏组织,进行实时荧光定量检测VEGF和FGF的基因表达和Western Blot检测二者蛋白的表达㊂结果SHR进行氨氯地平喂养后,血压明显下降,与SHR模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),而与WKY 正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);ELISA检测发现,SHR模型组VEGF和FGF的表达较WKY正常对照组和氨氯地平模型对照组升高(P<0.05);荧光定量检测发现SHR模型组VEGF和FGFmRNA较氨氯地平模型对照组与WKY正常对照组的表达明显增加(P<0.05);而SHR模型组VEGF和FGF蛋白水平表达较氨氯地平模型对照组与WKY正常对照组明显增加(P<0.05)㊂结论VEGF和FGF参与了SHR靶器官心脏的损害,可能在高血压的发展中扮演着重要角色㊂关键词:高血压;血管内皮生长因子;成纤维细胞生长因子;自发性高血压大鼠;发病机制中图分类号:R544.1 R285.5文献标识码:A d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2020.15.010Experimental Study of the Pathogenesis in Spontaneous Hypertension Rats and Its Relationship with Vascular Endothelial Growth Factor and Fibroblast Growth FactorLIU Changzhao,WANG Ling,LU Xinlin,CHEN WenjiangThe Central Hospital of Enshi Tujia and Miao Autonomous Prefecture,Enshi445000,Hubei,ChinaCorresponding Author:CHEN Wenjiang(The Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University,Chongqing400010,China)作者单位 1.湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院(湖北恩施445000);2.郴州市第四人民医院;3.重庆医科大学附属第二医院(重庆400010)通讯作者陈文江,E-mail:****************引用信息刘长召,王玲,卢新林,等.自发性高血压大鼠发病机制及与血管内皮生长因子和成纤维细胞生长因子关系的实验研究[J].中西医结合心脑血管病杂志,2020,18(15):2417-2422.。

大鼠损伤神经组织中睫状神经节营养因子的基因表达
顾晓松;丁斐
【期刊名称】《南通医学院学报》
【年(卷),期】1999(019)003
【摘要】探索大鼠损伤神经组织中ＣＮＴＦ基因表达，方法采用ＲＴ－ＰＣＲ，半定量分析大鼠正常坐神经与坐骨神经横断损伤１周、２周、４周远侧端中ＣＮＴＦ的基因表达。

结果在正常大鼠坐骨神经组织中，ＣＮＴＦ基因呈低表达。

【总页数】2页(P241-242)
【作者】顾晓松;丁斐
【作者单位】南医学院神经科学研究所;南医学院神经科学研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R745.402
【相关文献】
1.电针对坐骨神经损伤大鼠背根神经节中神经营养因子-3及其受体TrkC的影响[J], 潘璠;于天源;吴剑聪;高玉峰;鲁梦倩;李小琴;于跃;耿楠;冼思彤
2.大鼠睫状神经节神经营养因子真核表达载体转染成肌细胞并促其分化 [J], 段大波;张树鹰;王伟
3.人骨髓间充质干细胞的体外培养及睫状神经节神经营养因子诱导其向神经元样细胞分化的研究 [J], 赵书鹤;汤永红;周琼
4.睫状节神经营养因子在大鼠损伤坐骨神经中的表达变化 [J], 崔学芝;邱一华
5.睫状神经节神经营养因子基因克隆 [J], 谭湘陵;曹铮;刘炎;刘梅;顾晓松
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芪参益气滴丸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制研究陈君;李蕾;陈国华;刘传亮;李文通【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2017(027)012【摘要】目的探讨芪参益气滴丸(QS)对大鼠心肌缺血再灌注时,心肌细胞尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)长链非编码RNA、凋亡及凋亡相关基因表达的影响.方法结扎SD大鼠冠状动脉左前降支,造成心肌缺血40 min后剪断结扎线,再灌注120 min,复制实验性心肌缺血再灌注模型,将36只大鼠随机分为假手术组(只穿刺不结扎,Control组)、缺血再灌注组(I/R组)、QS干预组(QS+I/R组),术后采用原位末端标记法检测心肌细胞凋亡指数,采用荧光定量聚合酶链反应分析并检测3组大鼠心脏组织中UCA1的表达,Western blot检测p27蛋白表达水平.结果QS+I/R组的细胞凋亡数与I/R组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与I/R组比较,QS+I/R组UCA1整体表达水平上升,而p27蛋白减少(P<0.05);并且UCA1与p27蛋白的表达呈负相关.结论QS能降低大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡率,其可能通过上调UCA1水平,减少p27蛋白表达,保护损伤的心肌细胞.%Objective To investigate the effect of Qishenyiqi Dripping Pills on urothelial carcinoma antigen 1 (UCA1) LncRNA, apoptosis and apoptosis related gene expression of myocardial cells in rats with myocardial ischemia reperfusion. Methods Ischemia reperfusion injury model of SD rats was established by ligating left anterior descending branch of coronary artery for 40 min followed by reperfusion for 120 min. Thirty-six rats were randomly divided into sham operation group (only puncture wihout ligation), ischemia-reperfusiongroup (IR group) and Qishenyiqi intervention group (QS+IR group). After operation, the apoptosis index was detected by TUNEL method; fluorescence quantitative PCR technique and Western blot were used to detect the expression levels of UCA1 and p27 protein respectively. Results The number of apoptosis in the QS+IR group was significantly smaller than that in the IR group (P<0.05). The overall level of UCA1 expression significantly increased and p27 protein markedly decreased in the QS+IR group compared with the IR group (P<0.05); and the expression of UCA1 was negatively correlated with the expression of p27 protein. Conclusions Qishenyiqi Dripping Pills can reduce myocardial apoptosis rate in rats with myocardial ischemia and reperfusion, which may protect the injured myocardial cells by increasing the level of UCA1 and reducing the expression of p27 protein.【总页数】5页(P30-34)【作者】陈君;李蕾;陈国华;刘传亮;李文通【作者单位】潍坊医学院研究生院,山东潍坊 261042;山东省潍坊市人民医院保健三科,山东潍坊 261041;山东省潍坊市人民医院健康管理中心,山东潍坊261041;山东省潍坊市人民医院保健三科,山东潍坊 261041;潍坊医学院研究生院,山东潍坊 261042【正文语种】中文【中图分类】R285【相关文献】1.银杏黄酮对心肌缺血再灌注损伤大鼠的心肌保护作用及其作用机制研究 [J], 赵艳荣;张国斌;邴飞虹2.芪参益气滴丸对大鼠心肌缺血再灌注损伤的MAPK/p38/JNK/ERK信号通路的研究 [J], 陈家显;刘先霞;陈跃武;陈磊;张远生3.阿里红多糖对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究 [J], 姜晓杰;吉家兴4.阿里红多糖对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究 [J], 姜晓杰;吉家兴5.芪参益气滴丸对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究 [J], 陈景瑞;魏静;倪晶宇;李敏;樊官伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

ｗｅｅ ｕ ｅ ａｎ ｉｇ ｎ ｈ ｔ ｅ ｉｈ ｓ ｄｉ ｘ ｅｉ ｎ ｂ ｅ ｖ ｔ ｎｆｏ ｅｃ ｒ ｕ ） Ｆ ｕ ｒ ｕ ｓｗｅｅａ ｏ－ ｒ ｓｄ ｉ ｐ ｉｔ ｓａ ｄ ｔ ｅｏ ｈ ｒｅｇ ｔｕ ｅ ｅ ｐ ｒ ｎ ｎ ｎ ｍｅ ｔ ｓ ｒ ａｉ ｒ ｍ ａ ｈ ｇ ｏ ｐ ． ｏ ｒｇ ｏ ｐ ｒ ｓｆ ｌ ｏ ｏ
ｊｃｉｎｏ ｉｈ ｄ ｓ ｒ ｕ ． Ｔｈ ｄ ｌｏ ｃ ｔ ｏ ａｄａ ｓｈ ｍｉ ｒ ｔｗａ ｂ ａｎ ｄ ｂ ｅ ａｉｇ ｔ ｅｌｆ ｎｅ ｉｒｄ — ｅｔ ｆｈｇ －ｏ ｅｇ ｏ ｐ ｏ ｅｍｏ ｅ ｆａ ｕ ｅｍｙ ｃｒ ｉｌ ｃ ｅ ａ ａ ｓｏ ｔ ｉｅ ｙ ｌｇ ｔｎ ｈ ｅｔａ ｔｒｏ ｅ ｉ
Ｄｏ ：１ ． ９ ９ ｊ ｉｓ ． ０ ８ ０ ７ ． ０ ０ ０ ． ０ ｉ ０ ３ ６ ／．ｓｎ １ ０ － ０ ４ ２ １ ． １ ３
中 图 分 类 号 ：Ｒ５２ ２ ４．２
文 献标 识 码 ：Ａ
Ｐ ｏ ｃ ｖ ｆ ｃ ｆ ｕ ｎ ｉｎｎ ｊ ｃ ｏ ｎｍｙ ｃ ｒ ｉｌｓｈ ｍｉ／ｅ ｅｆｓ ｎｉｊ ｒ ｔ Ｙ ａ ，ＷＡ Ｇ Ｘ ａ ｇ Ｕ ｒ ｔ ｔ ｅ ｆ ｔ ｏ ａ ｘｎ ｉｇｉ ｅ ｔ ｎｏ ｏ ａ ｄａ ｉ ｅ ａ ｒｐ ｒｕ ｉ ｕ ｙｉ ｒ ｓ Ｕ Ｈ ｏ ｅｉ ｅｅｓ ｇ ｎ ｉ ｃ ｏ ｎ ｎ ａ ／ Ｎ ｉ ，Ｔ ｎ
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四逆汤对大鼠心肌纤维化模型的保护作用及其机制陈宇;石月萍【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2015(000)014【摘要】目的：观察四逆汤对异丙肾上腺素引起大鼠心肌纤维化的保护作用及其作用机制。

方法 Wistar大鼠背部皮下注射异丙肾上腺素5 mg・ kg－1・ d－1，连续8 d，建立心肌纤维化模型，于第9天开始给予四逆汤灌胃6．06 g／kg，1次／d，连续4 w。

实验结束后计算大鼠心脏重量指数，分光光度法测定心肌组织羟脯氨酸含量，Masson染色图像分析心肌间质胶原容积分数，酶联免疫吸附法检测血浆细胞间黏附分子（ICAM）1和转化生长因子（ TGF）β1水平，Western 印迹检测心肌组织过氧化物酶体增殖物激活受体（ PPAR）蛋白表达。

结果四逆汤组大鼠心肌间质胶原容积分数、心肌羟脯氨酸含量、心脏重量指数明显低于模型组（P＜0．05）。

四逆汤组大鼠血浆ICAM1和TGF－β1水平显著低于模型组（P ＜0．05）。

四逆汤组心肌组织中PPARα、PPARγ蛋白表达量高于模型组（P＜0．05）。

结论四逆汤能够改善异丙肾上腺素引起的心肌纤维化，其机制可能与其抑制大鼠心肌组织内PPAR蛋白表达下降、降低ICAM1水平和TGF－β1水平有关。

【总页数】4页(P3813-3816)【作者】陈宇;石月萍【作者单位】辽宁医学院，辽宁锦州 121000;辽宁医学院，辽宁锦州 121000【正文语种】中文【中图分类】R54【相关文献】1.荞麦花叶总黄酮对2型糖尿病大鼠心肌纤维化的保护作用及其机制 [J], 勾向博;郭静;白静2.百里香醌对脂多糖诱导大鼠心肌纤维化的保护作用及机制研究 [J], 蔡伟;杨佳丹;高珊;李世琴;王述蓉3.阿格列汀对2型糖尿病模型大鼠心肌纤维化的保护作用及其机制 [J], 张毅;孟祥雯4.伊伐布雷定通过调控TIMP-1表达对冠心病大鼠抗心肌纤维化和心肌保护作用的机制 [J], 白延平;陈俊民;刘智娜5.安立生坦对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌纤维化保护作用及机制研究 [J], 邓晓娴;夏成;周红梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

蒙药新Ⅱ号对扩张型心肌病大鼠心功能、心肌细胞内质网应激及凋亡的作用陈少青;王伊林;曹宪玉;张青山;柴花;陶谢鑫;赵明【摘要】目的:探讨蒙药新Ⅱ号对阿霉素性扩张型心肌病大鼠心功能、心肌病理、心肌细胞内质网应激及凋亡作用.方法:30只SD雄性大鼠分为3组(n=10):正常对照组、模型组(腹腔注射阿霉素2mg/kg体重,1次/周,用药4周后观察4周)和蒙药新Ⅱ号组(腹腔注射阿霉素2 mg/kg体重,1次/周,用药4周后,给予蒙药新Ⅱ号30 mg/kg·d灌胃,共4周).观察大鼠的一般情况,8周后行高频超声心动图检查,测定各项心功能指标,检查结束后处死大鼠,取心脏,行HE染色、VG染色及电镜观察.用TUNEL法检测各组大鼠心肌细胞凋亡,Western blot检测各组大鼠心肌细胞内质网伴侣蛋白GRP78、GRP94及促凋亡因子CHOP、caspase-3表达.结果:与模型组相比较,①蒙药新Ⅱ号组大鼠心脏左室结构及血流动力学各项指标均有明显改善(P＜0.05).②蒙药新Ⅱ号组大鼠心肌病理积分明显下降(P＜0.01).③蒙药新Ⅱ号组大鼠心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78、GRP94、CHOP、caspase-3表达及细胞凋亡明显减少(P＜0.01).结论:蒙药新Ⅱ号可改善扩张型心肌病大鼠心脏功能,减轻心肌病理变化,缓解内质网应激,减少心肌细胞凋亡.这一实验结果可能是蒙药新Ⅱ号治疗扩张型心肌病作用机制之一.【期刊名称】《中国应用生理学杂志》【年(卷),期】2016(032)005【总页数】6页(P419-423,后插3)【关键词】蒙药新Ⅱ号;扩张型心肌病;内质网应激;凋亡;阿霉素;大鼠【作者】陈少青;王伊林;曹宪玉;张青山;柴花;陶谢鑫;赵明【作者单位】内蒙古民族大学附属医院,通辽028000;内蒙古民族大学附属医院,通辽028000;内蒙古民族大学附属医院,通辽028000;内蒙古民族大学附属医院,通辽028000;内蒙古民族大学附属医院,通辽028000;内蒙古民族大学附属医院,通辽028000;内蒙古民族大学附属医院,通辽028000【正文语种】中文【中图分类】R331.3;R-332扩张型心肌病为病因还不明确的一侧或双侧心腔扩大，并且出现心肌肥厚、心肌收缩期的泵血功能性障碍[1]，进而发生充血性心力衰竭的一种心脏疾病。

同型半胱氨酸诱导基因HCY-2在大鼠体内的表达与分布李英;吕丹瑜;毕振伍;陈光慧;刘斌【期刊名称】《北京大学学报（医学版）》【年(卷),期】2002(034)004【摘要】目的:研究同型半胱氨酸诱导基因(homocysteine induced gene,HCY-2)在大鼠体内的表达及分布,为进一步探讨该新基因的功能奠定形态学基础.方法:用免疫组织化学ABC法染色,对成年Wistar大鼠心、肝、脾、肺、肾、大脑、小脑及脊髓等器官中HCY-2基因的表达与分布状况进行形态学观察与半定量分析. 结果:发现心脏中HCY-2阳性反应物质主要在心肌纤维、Pukinje纤维、大动脉中膜平滑肌和外膜营养血管平滑肌中;肾中HCY-2表达强烈,分布较广泛;脊髓前脚运动神经元和中央管室管膜细胞、肺内小支气管至肺泡管上皮及肺泡Ⅱ型细胞HCY-2均高表达;肝、大脑、小脑中表达很弱;胰腺和脾几乎没有表达.结论:同型半胱氨酸诱导基因在大鼠体内分布广泛,但在不同器官中的表达强弱不甚相同,同一器官内HCY-2分布也有极大差异.【总页数】4页(P333-336)【作者】李英;吕丹瑜;毕振伍;陈光慧;刘斌【作者单位】北京大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系;北京大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系;北京大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系;北京大学心血管研究所,北京,100083;北京大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系【正文语种】中文【中图分类】Q343.1【相关文献】1.同型半胱氨酸、同型半胱氨酸诱导基因抗体及叶酸对人胚心肌细胞同型半胱氨酸诱导基因的表达及细胞增殖的影响 [J], 王光明;吴俊;李英;毕振武;吕丹瑜;董静霞2.光线诱导下大鼠体内Gnb211基因及其蛋白节律性表达的研究 [J], 张宇;薛建新;汪宇辉;刘延友;王正荣3.外源pcD2/VEGF基因在大鼠体内的表达、分布及其持续时间 [J], 盛琴慧;朱小君;牛大地;冷冰;周爱儒;朱国英4.一种新的细胞凋亡相关基因——高同型半胱氨酸诱导基因HCY-2的功能初探[J], 陈光慧;高炜;李勇5.运用体内表达技术筛选霍乱弧菌感染成年小鼠体内诱导表达基因 [J], 陈建东;张竞;阚飙;钟增涛;朱军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

患者治疗效果及能否达到临床治 愈的关键 。本 研究采用免疫 组织化学方法 观察 了高 血糖引起 的心肌细 胞 的凋 亡作用 ， 旨
抗体盒 （ 北京 中山生物技术 有限公司）； 敏即用型 ＳＰ通用 超 － 型免疫组织化学试剂盒（ 北京 中山生物技术有 限公司）； 显色 试盒及多 聚赖氨酸 （ 京中山生物技术有 限公 司） 北 。
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数理 医药学杂志
２ ０ 年第 ２ 卷 第 １ ０８ １ 期
文章编号 ：０ ４４ ３ （０ ８ ０－０ １０ １ ０—３ ７８ ．
文献标识码 ： Ａ
・基础 医学研究 ・
糖尿病大 鼠心肌组织中 ｃｓａｅ８ ａｐ ｓ一 表达的研究
洗 ４ ｍｉ； ×５ ｎ ⑧ＤＡ Ｂ显色 液显色 ， 自来水 冲洗终止 反应 ； 苏 ⑨ 木精复染 ， 脱水 ， 透明 ， 封片 。
（０只） １ 和糖尿病组 （０只）， 组大 鼠禁食 １ ｈ后 ， ２ 各 ２ 实验组大
鼠 以 ６ ｍｇ ｋ 剂量 一次 性 腹 腔 注射 链 脲 佐 菌 （ｔ ｐｏｏｏ ０ ／ ｇ的 ｓｒ ｔｚｔ— ｅ
关键词 ： 糖尿病 ； 心肌 ； ｃｓａｅ ； 免疫组化 ａｐ ｓ ８ －
糖尿病（ｄａ ｅ ｓｍｅ ｉ ｓ， ｉ ｔ ｌｔ ＤＭ） 一组 由多种病 因引起 ｂｅ ｌｕ 是 的以慢性高血糖为 特征 的代 谢性疾病群 。作 为一 种常见 病、 多发病 ， 其患病率 正随人 民生活水 平的提 高、 １老龄 化、 人２ １ 生 活方式的改变而迅速增加 ， 对人类健康有极大的威胁。ＤＭ发 病逐年增多 ， 为世界上继肿瘤、 已成 心血管病后 第 ３位严重 的 慢性病［ ， １ 因而早期 发现 、 期确诊 、 ］ 早 早期 治疗 是决定 糖尿病
的构橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成 １ｍ ／ 的 Ｓ Ｚ溶液） 正常对照组大 鼠（ ｃ 注射 等体 积的枸橼酸盐缓 冲液 ， ｌ ｇ ｍｌ Ｔ ， Ｎ ） 观察动物饮水 、 进

卡维地洛对RyR2介导的自发性钙振荡的抑制作用肖建民;付晖【摘要】目的:探讨并比较卡维地洛和其它β受体阻滞剂对兰尼定受体2(RyR2)介导的自发性钙振荡的抑制作用.方法:采用Flp-In T-REx Core Kit构建可以稳定诱导表达RyR2的HEK293细胞株,采用酶解方法分离大鼠单个心肌细胞.逐步提高细胞外钙离子浓度,诱发细胞自发性钙振荡.单细胞钙影像技术记录并检测卡维地洛等β受体阻滞剂对HEK293细胞株及心肌细胞自发性钙振荡的作用.结果:卡维地洛30.μmol/L可明显抑制心肌细胞和表达RyR2的HEK293细胞株的自发性钙振荡,其抑制率分别为(65.30±2.30)％和(69.08±5.30)％；而美托洛尔、索他洛尔、阿替洛尔等常用的14种β受体阻滞剂对心肌细胞及HEK293细胞株的自发性钙振荡均无明显作用.结论:卡维地洛是唯一可以抑制RyR2介导的自发性钙释放的β受体阻滞剂,这可能是卡维地洛在降低心衰死亡率上优于其它β受体阻滞剂的机制之一.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2013(029)010【总页数】5页(P1788-1792)【关键词】卡维地洛;心肌细胞;HEK293细胞;自发性钙振荡【作者】肖建民;付晖【作者单位】东莞市太平人民医院心血管内科,广东东莞523905;广东医学院药理教研室,广东东莞523808【正文语种】中文【中图分类】Q46越来越多证据显示，自发性钙振荡是心衰时发生心律失常及泵衰竭的重要机制之一。

心衰时经心肌细胞肌浆网上的钙释放通道——兰尼定受体2(ryanodine receptor 2，RyR2)产生的自发性钙释放(spontaneous calcium release)明显增多［1-2］。

增强的自发性钙释放活性能激活内向电流，如Na+/Ca2+交换电流，这种钙激活的内向电流能改变细胞膜电位，进而产生延迟后除极(delayed afterdepolarization，DAD)及触发性心律失常，诱发恶性心律失常［3］。

麝香通心滴丸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制李蒙1,刘用2,张健真2,郝学增1,张立晶1摘要目的:观察麝香通心滴丸预处理对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤后心肌细胞和血管的保护作用及潜在机制㊂方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)㊁I/R组㊁麝香通心滴丸组(SXTX组)和阳性组,每组15只㊂SXTX组以18.90mg/(kg㊃d)的浓度灌胃;阳性组以尼可地尔1.35mg/(kg㊃d)的浓度灌胃;Sham组和I/R组给予等体积去离子水灌胃㊂各组均灌胃1周后,行冠状动脉前降支结扎-松解手术,除Sham组外其余各组大鼠结扎左冠状动脉前降支30min后,再灌注120min,构建心肌I/R模型㊂通过心肌苏木精-伊红(HE)染色㊁心肌Masson染色观察大鼠心肌组织及血管改变;电镜观察心肌细胞和血管的超微结构改变;免疫组织化学法观察血管相关蛋白低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达情况㊂结果:与Sham组比较,I/R组大鼠心肌细胞坏死和血管损伤明显,心肌组织中HIF-1α表达增加;与I/R组相比,SXTX组心肌细胞和血管病理结构损伤减轻,缺血区心肌组织VEGF含量明显增加㊂结论:麝香通心滴丸预处理可保护大鼠心肌细胞和血管I/R损伤,可能与上调VEGF蛋白表达㊁促进缺血区微血管新生有关㊂关键词缺血/再灌注损伤;麝香通心滴丸;保护作用;低氧诱导因子-1α;血管内皮生长因子;实验研究d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2024.02.008Protective Effect of Shexiang Tongxin Dropping Pill Pretreatment on Myocardial Ischemia-reperfusion Injury in RatsLI Meng,LIU Yong,ZHANG Jianzhen,HAO Xuezeng,ZHANG LijingDongzhimen Hospital,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing100700,ChinaCorresponding Author ZHANG Lijing,E-mail:****************Abstract Objective:To observe the protective effect of Shexiang Tongxin Dropping Pills on myocardial cells and blood vessels after myocardial ischemia-reperfusion(I/R)injury in rats.Methods:Sixty male SD rats were randomly divided into sham operation group (Sham group),I/R group,Shexiang Tongxin Dropping Pills group(SXTX group),and positive control group,with15rats in each group.The rats in SXTX group were given SXTX18.90mg/(kg㊃d)by gavage,and the rats in positive control group were given nicorandil1.35 mg/(kg㊃d)by gavage.The rat in Sham group and I/R group were given the same volume of deionized water by gavage.After one week of gavage,the rats left anterior descending coronary artery was ligated for30min and then reperfused for120min to build the myocardial I/R model except for the Sham group.The changes of myocardial tissue and blood vessels in rats were observed by myocardial hematoxylin-eosin(HE)staining and myocardial Masson staining.The ultrastructural changes of cardiomyocytes and blood vessels were observed by electron microscope.The expressions of hypoxia-inducible factor-1α(HIF-1α)and vascular endothelial growth factor (VEGF)were observed by immunohistochemistry.Results:Compared with Sham group,the myocardial cell necrosis and vascular injury of the rats in I/R group were obvious,and the expression of HIF-1αin the myocardial tissue pared with I/R group,the myocardial cell and vascular pathological structural damage in SXTX group alleviated,and the protein expressions of VEGF in the ischemic area significantly increased.Conclusion:Shexiang Tongxin Dropping Pills pretreatment can protect myocardial cells and vascular I/R injury in rats,which may be related to the up-regulation expression of VEGF protein and the promotion of microangiogenesis in ischemic areas.Keywords ischemia/reperfusion injury;Shexiang Tongxin Dropping Pills;protective effect;hypoxia-inducible factor-1α;vascular endothelial growth factor;experimental study急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)是心血管疾病的最危重类型之一,其发病急㊁预后差㊁病死率高,是急性心源性致死性疾病的主因㊂无论是药物溶栓㊁冠状动脉支架植入,还是冠状动脉旁路移植术,再灌注治疗都是其必然过程[1]㊂然而,心肌再灌注基金项目2021年度北京中医药大学新教师启动基金项目(No.2021-JYB-XJSJJ057);中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(No. 2020-YJB-ZDGG-116)作者单位 1.北京中医药大学东直门医院(北京100700);2.北京中医药大学通讯作者张立晶,E-mail:****************引用信息李蒙,刘用,张健真,等.麝香通心滴丸预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用机制[J].中西医结合心脑血管病杂志,2024, 22(2):250-253.过程本身可诱导心肌细胞损伤㊁坏死进一步加重,这一过程即为缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)损伤[2]㊂因此,预防和治疗再灌注损伤尤为关键㊂麝香通心滴丸由‘太平惠民和剂局方“中至宝丹衍生而来,具有芳香益气通脉㊁活血化瘀止痛的功效㊂前期研究发现麝香通心滴丸对经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后慢血流病人的有效性及安全性较好[3]㊂关于麝香通心滴丸对I/R后心肌细胞和血管的保护作用及作用机制尚未明确㊂本研究通过构建I/R损伤大鼠模型,观察麝香通心滴丸预处理对大鼠心肌I/R损伤后心肌细胞和血管的保护作用,以及对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)㊁血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,进而探讨其保护I/R的潜在作用机制,为麝香通心滴丸防治I/R的临床应用提供实验依据㊂1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠60只,9~ 10周龄,体质量(250ʃ10)g,购自北京华阜康生物科技股份有限公司㊂实验操作通过北京中医药大学东直门医院动物伦理的要求,伦理号(No):21-49㊂1.1.2实验药物麝香通心滴丸,规格:35mg,批准文号:国药准字Z20080018,由内蒙古康恩贝药业有限公司提供,以去离子水配成[18.90mg/(kg㊃d)]溶液,超声溶解,高压灭菌后于-20ħ贮存备用㊂尼可地尔片,规格:每片5 mg,批准文号:国药准字H20160540,由Nipro Pharma Corporation Kagamiishi Plant生产,使用去离子水配制成1.35mg/(kg㊃d)的混悬液保存备用㊂1.1.3实验试剂及仪器实验试剂:苏木素染液(武汉市皮诺飞生物科技有限公司生产),HIF-1α抗体(28b)(Santa,sc-13515-200μg/mL),VEGF Rabbit Polyclonal Antibody(proteintech, 19003-1-AP-150μL),过氧化氢溶液(国药集团化学试剂有限公司生产,10011218),牛血清白蛋白(BSA) (Solarbio,A8020),包埋液(环氧树脂Epon812),二抗[辣根过氧化物酶(HRP)标记山羊抗兔/鼠通用二抗] (DAKO,K5007),组化试剂盒二氨基联苯胺(DAB)显色剂(DAKO,K5007)㊂实验仪器:超薄切片机(徕卡ULTRACUT R),光学显微镜(CIC,XSP-C204),透射电镜(日本日立H-7650),正置光学显微镜(日本尼康),成像系统(日本尼康)㊂1.2实验方法1.2.1动物造模对SD大鼠进行冠状动脉前降支结扎松解手术构建心肌I/R模型㊂将SD大鼠以4%戊巴比妥钠(0.4mL/100g)腹腔麻醉注射,之后气管插管,接动物呼吸机和心电图机,于左侧第三肋与第四肋间切开皮肤,钝性分离肌层,打开胸腔,充分暴露心脏,用带线缝合针在左心耳与肺动脉圆锥之间,于左心耳根部下方约2mm处进针,将左前降支连同少量的心肌组织一起结扎,先缺血30min㊁再灌注120min制备大鼠心肌I/R模型㊂抬高的ST段下降1/2以上为大鼠心肌I/R 模型造模成功㊂1.2.2分组及给药适应性喂养1周,采用随机数字表法将60只SD 大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)㊁I/R组㊁麝香通心滴丸组(SXTX组)和阳性组,每组15只㊂所有用药剂量按照人与大鼠体表面积换算,SXTX组按成人用量的2倍,给予麝香通心滴丸18.90mg/(kg㊃d)灌胃,阳性组以尼可地尔1.35mg/(kg㊃d)灌胃,Sham 组和I/R组给予等体积去离子水灌胃㊂每日1次,连续灌胃1周,末次灌胃1h后构建大鼠I/R模型㊂1.3观察指标1.3.1心肌苏木精-伊红(HE)染色实验结束后取出心脏,立即将10%多聚甲醛溶液50mL注入离体心脏主动脉内,5min后将左心室前壁心肌组织中间层切成条状,放在上述固定液中固定48h 后,蒸馏水清洗㊁梯度乙醇脱水,后制作病理切片,切片厚度为4μm,脱蜡㊁复水后行HE染色,封固,光镜下观察大鼠心肌组织及血管改变㊂1.3.2心肌Masson染色取出甲醛中固定24h后的心肌组织,按乙醇浓度由低至高脱水,石蜡包埋,切片,脱蜡后蒸馏水水洗㊂Weiger氏铁苏木素染色5~10min后流水充分水洗,再用1%的盐酸乙醇分化,再用丽春红酸性品红染液染色5~10min后用蒸馏水水洗,加1%磷钼酸水溶液5min,后苯胺蓝液复染5min,随后1%冰醋酸即刻洗涤后用95%乙醇多次脱水,后置于二甲苯透明,中性树胶封片,光镜下观察心脏组织纤维化情况㊂1.3.3电镜观察心肌血管内皮细胞超微结构留取再灌注末左心室梗死周边缺血区心肌体积约1mm3的标本,放置于4%戊二醛内固定,0.1mol/L二甲膦酸钠缓冲液漂洗,1%四氧化锇固定,然后梯度丙酮脱水,使用环氧树脂进行包埋㊁聚合,制作超薄切片,最后用醋酸双氧铀㊁柠檬酸铅染色,在透射电镜下观察并拍照㊂1.3.4免疫组织化学法检测血管相关蛋白HIF-1α㊁VEGF的表达情况取10%甲醛固定梗死周边缺血区心肌组织,并进行常规石蜡包埋及心肌切片(5μm),石蜡切片脱蜡至水,抗原修复,阻断内源性过氧化物酶,3%牛血清白蛋白室温封闭30min,加一抗(HIF-1α1ʒ50稀释,VEGF 1ʒ200稀释),4ħ孵育过夜,加HRP标记山羊抗兔二抗孵育30min,DAB显色,复染细胞核,脱水封片,光镜下分别观察HIF-1α㊁VEGF蛋白的表达情况㊂1.4统计学处理采用SPSS20.0统计软件进行数据分析㊂正态分布的定量资料以均数ʃ标准差(xʃs)表示,组间比较采用单因素方差分析,方差齐性采用Student-Newman-Keuls检验,方差不齐用Tamhane's T2检验㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1HE染色结果Sham组心肌组织结构正常㊁完整,心肌细胞分布均匀㊁有序,轮廓清晰可见,胞核与胞质边缘分明,血管管腔完整㊂I/R组心肌组织染色着色较浅,有细胞轮廓不清及破碎现象,组织排列异常紊乱㊁呈无序状,并伴有炎性细胞浸润,坏死区充血出血㊂阳性组心肌细胞部分相互连接,排列整齐,心肌细胞形态正常,心肌纤维中少量心肌纤维变性坏死及脂肪变性,伴少量炎性细胞浸润㊂与I/R组比较,SXTX组心肌组织排列较为整齐,着色相对更均匀,有炎性细胞浸润,血管管腔完整度较好㊂详见图1㊂图1各组大鼠心肌组织病理变化比较(HE染色,ˑ400)2.2Masson染色结果Sham组Masson染色心肌纤维无纤维化,仅在血管壁周边有着色㊂I/R组显示紫红色的心肌组织明显减少,存在大量呈蓝色的胶原纤维,血管破碎,部分血管呈管腔狭窄和闭合㊂与I/R组相比,阳性组㊁SXTX 组Masson染色显示以紫红色心肌组织为主,蓝色胶原纤维增生沉积现象显著减轻㊂详见图2㊂图2各组大鼠心肌组织病理变化比较(Masson染色,ˑ400)2.3透射电镜观察心肌血管内皮细胞超微结构Sham组微血管基底膜未见增厚,内弹性膜未见变窄,管腔规整,内皮细胞排列整齐,内皮细胞胞质和核仁结构清楚,周围心肌细胞形态完整,未见脂质沉积;I/R组内膜下结缔组织肿胀,内弹性膜局部变窄,管腔严重变形,内皮细胞胞质肿胀,可见胞质碎片,核膜部分缺失,周围心肌细胞出现明显损伤,细胞破碎严重,大量的脂质沉积;与I/R组相比,SXTX组微血管基底膜轻度增厚,内弹性膜局部变窄,管腔稍有变形,内皮细胞排列较整齐,可见内皮细胞质和核仁结构,周围心肌细胞形态基本完整,少量脂质沉积㊂详见图3㊂2.4免疫组织化学法检测心肌中HIF-1α㊁VEGF的蛋白表达与Sham组比较,I/R组心肌组织中HIF-1α表达增加,提示在缺血㊁缺氧状态下HIF-1α蛋白反应性增加㊂与I/R组比较,SXTX组心肌组织HIF-1α表达下降,VEGF蛋白表达增加,提示麝香通心滴丸可促进VEGF蛋白的生成,进而促进缺血区血管形成,改善心肌组织乏氧环境㊂详见图4㊁图5㊂图3各组大鼠心肌细胞及血管超微结构变化比较图4麝香通心滴丸对HIF-1α蛋白表达的影响(ˑ100)图5麝香通心滴丸对VEGF蛋白表达的影响(ˑ100)3讨论时间就是心肌 ,由于心肌组织细胞对缺氧㊁缺血的敏感性高,尤其是其具有不可再生的特性,因此,在AMI的救治过程中,及时再灌注治疗是挽救濒死心肌细胞的关键㊂然而缺血再灌注治疗必然会造成再灌注损伤,是AMI不可避免的风险事件㊂保护心肌I/R损伤可防止心肌梗死后不良重塑和更差的临床结果㊂研究发现持续的心肌I/R可诱导各种形式的心肌细胞死亡和冠状动脉微血管损伤[4]㊂麝香通心滴丸由人工麝香㊁蟾酥㊁人工牛黄㊁冰片㊁人参茎叶㊁丹参㊁熊胆粉组成,具有芳香益气通脉㊁活血化瘀止痛之功效㊂多项研究表明麝香通心滴丸可减轻心肌缺血损伤,可能通过升高内源性一氧化氮水平,抑制炎症反应,改善冠状动脉微循环等[5-7]㊂本研究亦发现麝香通心滴丸可保护心肌I/R引起的心肌细胞和血管损伤㊂王伟等[8]对麝香通心滴丸组方入血成分进行网络药理学研究,发现VEGF/血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路可能为麝香通心滴丸治疗冠心病的信号通路㊂本研究结果同样发现麝香通心滴丸可促进缺血区心肌组织VEGF蛋白的生成,并提示可能与HIF-1α介导的信号通路有关㊂HIF-1α是一种关键的氧敏感转录因子,心肌组织细胞缺血缺氧时,诱导HIF-1α表达增加,进而调控多种基因表达,发挥机体对低氧或缺血的保护性适应[9]㊂VEGF与血管生成密切相关㊂在心肌I/R损伤中,增加血管生成可有效改善病灶缺氧状态,从而保护心脏[10]㊂本研究发现心肌I/R损伤时HIF-1α的表达增加以适应乏氧环境,麝香通心滴丸可能通过促进VEGF蛋白的生成,促进缺血心肌血管新生,改善乏氧环境,参与大鼠心肌I/R心肌保护的过程㊂综上所述,麝香通心滴丸可有效保护大鼠心肌I/R 的细胞和血管损伤,减轻心肌组织病理损伤,其作用机制可能与上调心肌组织VEGF蛋白的表达及促进缺血区微血管新生有关,从而达到保护心脏㊁抗心肌I/R损伤的作用㊂参考文献:[1]ZHU S S,XU T D,LUO Y Y,et al.Luteolin enhances sarcoplasmicreticulum Ca2+-ATPase activity through p38MAPK signalingthus improving rat cardiac function after ischemia/reperfusion[J].Cellular Physiology and Biochemistry,2017,41(3):999-1010.[2]LAHNWONG S,PALEE S,APAIJAI N,et al.Acute dapagliflozinadministration exerts cardioprotective effects in rats with cardiacischemia/reperfusion injury[J].Cardiovascular Diabetology,2020,19(1):91.[3]韩松洁,张晓雨,张立晶,等.麝香通心滴丸对PCI术后患者慢血流的临床证据评价[J].世界科学技术-中医药现代化,2018,20(10):1772-1777.[4]HEUSCH G.Myocardial ischaemia-reperfusion injury and cardioprotectionin perspective[J].Nature Reviews Cardiology,2020,17(12):773-789.[5]张艳达,施珊岚,厉娜,等.麝香通心滴丸改善心肌梗死小鼠微循环障碍的作用机制[J].中西医结合心脑血管病杂志,2017,15(23):2969-2972.[6]LIU H H,ZHAO J J,PAN S L,et al.Shexiang Tongxin Dropping Pill(麝香通心滴丸)protects against sodium laurate-inducedcoronary microcirculatory dysfunction in rats[J].J Tradit ChinMed,2021,41(1):89-97.[7]王华伟,金丹丹,潘海华.麝香通心滴丸通过p-Akt/p-GSK3β/GSK3β通路对心肌梗死小鼠的心肌保护作用研究[J].中国中医药科技,2020,27(3):352-355.[8]王伟,刘星雨,尚云龙,等.基于血清药物化学与网络药理学探究麝香通心滴丸治疗冠心病的机制[J].中成药,2020,42(10):2768-2777.[9]ZHENG J,CHEN P E,ZHONG J F,et al.HIF-1αin myocardialischemia-reperfusion injury(review)[J].Molecular MedicineReports,2021,23(5):352.[10]LI J,ZHOU W J,CHEN W,et al.Mechanism of the hypoxiainducible factor1/hypoxic response element pathway in ratmyocardial ischemia/diazoxide post conditioning[J].MolecularMedicine Reports,2020,21(3):1527-1536.(收稿日期:2022-03-31)(本文编辑王丽)。

生脉解毒通络胶囊对实验性糖尿病大鼠心肌超微结构的保护作用王聃红;邓悦;南征;王龙;杨艳春【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2008(28)20【摘要】目的研究中药生脉解毒通络(SJTA)胶囊对链脲佐菌素(STZ)糖尿病(DM)大鼠心肌局部血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量和超微结构的影响及相关机制.方法 STZ 诱导建立DM模型,成模2W后分别灌服依那普利和SJT胶囊低、中、高剂鼍连续12 w,于第14周末应用放射免疫法检测心肌局部AngⅡ含量,并在电镜下观察心肌超微结构的变化.结果与正常对照组比较,DM模型组心肌局部AngⅡ含量明显增加(P＜0.01),sJT胶囊中、高剂量治疗组及依那普利对照组均可使DM大鼠心肌局部AngⅡ含量下降(P＜0.05,P＜0.01),并可使电镜下心肌超微结构得到改善,低剂量组无显著效果.结论 SJT胶囊可对DM大鼠心肌超微结构损害起到保护作用,其作用机制可能与抑制DM大鼠心肌局部AngⅡ的激活有关.【总页数】3页(P1983-1985)【作者】王聃红;邓悦;南征;王龙;杨艳春【作者单位】辽源市中医院,吉林,辽源,136200;长春中医药大学附属医院;长春中医药大学附属医院;辽源市中医院,吉林,辽源,136200;辽源市中医院,吉林,辽源,136200【正文语种】中文【中图分类】R587.1【相关文献】1.生脉解毒通络胶囊干预糖尿病大鼠心肌纤维化作用的实验研究 [J], 齐锋;邓悦2.解毒通络保肾胶囊对实验性糖尿病大鼠肾脏NF-κB表达的影响 [J], 朴春丽;杨叔禹;仝小林3.解毒通络保肾胶囊对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用 [J], 赵金祥;赵丽艳;王秀阁;高林花;南征4.解毒通络保肾胶囊对糖尿病大鼠肾脏的保护作用 [J], 赵贤俊;李才;南征;邓悦5.生脉解毒通络胶囊对糖尿病大鼠心肌组织ECM积聚的影响 [J], 闫凤杰;邓悦;朴春丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。