NMDA受体拮抗剂APV抑制福尔马林诱导的大鼠伤害性行为反应

预先鞘内注射氯诺昔康对福尔马林致痛大鼠行为学及脊髓c-Fos蛋白表达的影响陈旭;杨勇;刘慧;肖红;杨邦祥【期刊名称】《四川大学学报：医学版》【年(卷),期】2008()1【摘要】目的通过观察比较福尔马林致痛大鼠行为学和脊髓背角c-Fos样免疫反应神经元(FLIN)数量的变化,探讨预先鞘内注射氯诺昔康的镇痛效能与其剂量的关系。

方法雄性SD大鼠42只,随机平均分为7组,生理盐水组(NS组)、福尔马林组(FOR组)和5个实验组(L60组、L120组、L180组、L240组、L300组),行清醒鞘内穿刺,注入NS或不同剂量的氯诺昔康(60μg、120μg、180μg、240μg、300μg),10min后足底皮下注射NS或5%福尔马林100μL,观察行为表现,计算5min内伤害反应指数(NBI),连续60min。

足底注射后2h取脊髓L4～L6节段做c-Fos免疫组化染色,计数FLIN数量。

结果1第一相(致痛后0～5min)NBI,L240、L300组较其他组低(P<0.01),二者组间差异无统计学意义。

2随着氯诺昔康剂量的增加,第二相(致痛后15～60min)NBI累加值有下降的趋势,但L180～L300三组间比较差异无统计学意义。

3随着氯诺昔康剂量的增加,致痛侧脊髓背角浅层和深层FLIN数量有下降的趋势,但L180～L300三组的浅层及L240组、L300组的深层FLIN数量比较差异均无统计学意义。

4大鼠1h的NBI累加值与致痛侧脊髓背角浅层和深层c-Fos蛋白表达的相关系数分别为0.865、0.855(P均<0.001)。

结论预先鞘内注射氯诺昔康能有效抑制大鼠的伤害性行为和致痛侧脊髓背角c-Fos蛋白的表达,且该作用与剂量有关,并存在封顶效应。

【总页数】5页(P89-93)【关键词】鞘内注射;氯诺昔康;福尔马林模型;行为学;c-Fos【作者】陈旭;杨勇;刘慧;肖红;杨邦祥【作者单位】四川大学华西医院麻醉与危重病学实验室;四川省红十字骨科医院骨科【正文语种】中文【中图分类】R614.41【相关文献】1.丙帕他莫对福尔马林致痛大鼠行为学及脊髓c-fos蛋白表达的影响 [J], 刘德宝;程桥2.鞘内注射氟柠檬酸对福尔马林致痛大鼠脊髓c-Fos和GFAP、OX42表达变化的影响 [J], 秦明;黄裕新;饶志仁;王景杰;赵曙光;杨琦;段丽;曹荣3.预先鞘内给予氯诺昔康对福尔马林致痛大鼠行为学的影响 [J], 邓纯勇;杨邦祥;刘慧4.鞘内注射咪唑安定对福尔马林致痛大鼠脊髓c-fos表达的影响 [J], 郝利军;程桥;南小芳5.鞘内注射阿米替林对福尔马林致痛大鼠行为学及脊髓Fos表达的影响 [J], 张健;聂鑫;冯智英因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

杏仁核脑片场电位的记录及其应用【摘要】目的：探讨基底外侧杏仁核离体脑片场电位的记录及其应用. 方法：制备杏仁核脑片，在脑片上记录场电位,观察其药理学特性并引导杏仁核的长时程增强. 结果：在脑片保持良好活性及记录系统噪音幅度小于 mV的前提下，应用国产微电极放大器及记录系统即可记录到稳定可靠的杏仁核场电位,大小约为海马CA1场电位的1/10；在灌流液中加入α氨基羟甲基恶唑丙酸受体拮抗剂氰基硝基喹啉，二酮10 μmol/L和甲基天冬氨酸受体阻断剂D，氨基磷酸基戊酸(APV)100 μmol/L后，场电位几乎完全被阻断. 应用两串高频刺激刺激外囊，在BLA可引导LTP. 结论：杏仁核脑片可记录到稳定可靠的场电位，适用于研究杏仁核的突触可塑性等功能及探讨杏仁核在神经疾病中的作用及其机制.【关键词】杏仁核；场电位；长时程增强 0引言杏仁核与学习记忆、情绪、情感密切相关［1］，而且参与精神分裂症、抑郁、癫痫和创伤后应激障碍等多种神经系统疾病的病理过程［2-3］. 然而杏仁核深藏于大脑深部，被复杂精细的神经结构包绕［4］，很难直接探测到杏仁核神经元的活动. 脑片是研究杏仁核功能比较理想的标本. 脑片上记录神经细胞的活动方式主要有膜片钳、传统的细胞内和场电位记录，前两者对仪器设备要求较高，而场电位记录对设备要求相对简单，并可以反映神经细胞的功能状态，易于推广. 我们采用国内的设备系统，制备杏仁核脑片，在脑片上记录场电位,观察其药理学特性并引导杏仁核的长时程增强，以探讨杏仁核场电位的记录及其应用.1材料和方法材料健康SD大鼠24只，雄性，体质量200～250 g，所有动物均在12 h光照/黑暗周期环境中饲养，自由摄食及饮水. D，氨基磷酸基戊酸(APV), 氰基硝基喹啉，二酮(CNQX),谷氨酸(美国Sigma公司)；微电极放大器,RM 6240数据采集系统，其余化学产品均为国产分析纯. 方法杏仁核脑片制备将SD大鼠以氟烷麻醉后断头，迅速取脑，放置在低于4℃的冰冷人工脑脊液中并进行修块. 人工脑脊液中各种离子成分及其浓度(mmol/L)为：NaCl 124，KCl ，CaCl2 ，MgCl2 ，NaH2PO3 ，NaHCO3 25,葡萄糖11. 人工脑脊液始终充以950 mL/L O2和50 mL/L CO2，～用振动切片机把含有杏仁核或海马的大脑部分切成脑片，厚度500 μm. 脑片实验记录前在常温人工脑脊液中孵育至少1 h.杏仁核脑片场电位记录将脑片移至界面型记录槽(自制)，通过尼龙网与槽内人工脑脊液接触，以1～2 mL/min持续灌流脑片,脑脊液温度控制在(30±1)℃，用950 mL/L O2和50 mL/L CO2混合气体弥散在脑片周围. 在解剖显微镜下将双极不锈钢刺激电极置于外囊，记录微电极置于基底外侧杏仁核(basolateral amygdale, BLA)区，其尖端置于脑片表面下约200 μm处. 刺激电极与记录部位之间的距离约为2 mm. 微电极内充灌3 mol/L NaCl溶液，阻抗为2～5 MΩ. 场电位经微电极放大器放大后，输出信号用数据采集系统RM6240进行信号的记录、分析和处理. 场电位记录基线稳定20 min后才开始下一步的实验. 场电位的斜率用平均基础值标准化. 常规刺激的单相方波信号由RM6240的程控刺激器产生. 刺激方波的波宽为 ms，频率为 Hz，并调整刺激强度使突触反应等于最大突触电位的一半. LTP的引导应用两串频率为100 Hz的高频刺激，每串持续1 s，串间隔为10 min. 记录海马场电位时刺激电极放置于海马区的Schafer侧支通路上，记录电极位于海马CA1区.药物加入实验过程中应用的药物均加入到灌流脑片的人工脑脊液中.统计学处理:采用统计分析软件进行数据录入和整理，实验数据用x±s表示，组间采用方差分析. 为差异具有统计学意义.2结果杏仁核与海马场电位的比较海马CA1区场电位的幅度为(±) mV. BLA的电位为(±) mV，其放大倍数为海马的10倍，杏仁核的场电位只有海马CA1场电位的1/10.杏仁核场电位的药理学特性在灌流的人工脑脊液中加入μmol/L谷氨酸,可见场电位明显增大，洗去谷氨酸后场电位基本恢复至基线的水平(图2A). 灌流液中加入α氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体拮抗剂CNQX 10 μmol后，场电位的幅度显着下降，进一步加入甲基天冬氨酸(NMDA)受体阻断剂APV100 μmol后，场电位几乎消失,洗去CNQX和APV后，场电位基本恢复至加药前的水平(图 2B).杏仁核LTP的诱导在场电位记录稳定10 min后，间隔10 min应用两串高频刺激外囊，同时观察场电位幅度和斜率的变化情况. BLA场电位的幅度和斜率的变化趋势一致(表1)，两串高频刺激后，场电位明显增大，之后场电位逐渐下降，高频刺激15 min后场电位基本稳定，但仍显着大于基础值,这种增强作用持续30 min以上. 通过对场电位斜率用基础值标准化后，可见两串高频刺激后30 min增强的场电位的斜率仍然维持在基础值的(±)％(n=9, ，图3).表1两串。

麻醉药理问答题总结麻醉药理问答题总结1.全麻四个分期：镇痛期：从麻醉开始到意识消失，痛、触、听觉依次消失；兴奋期：从意识消失到眼睑反射消失，病人出现兴奋状态，例如：各种反射亢进、血压上升等。

外科麻醉期（维持期）：从兴奋期末到自主呼吸接近停止。

病人由兴奋转入安静，肌张力逐渐减弱。

延髓麻醉期（麻醉中毒期）：病人所有反射消失，呼吸、心跳停止2.当吸入浓度恒定时，易溶性麻醉药经肺循环迅速从肺泡被移走，大量溶解在血液中。

醒；②苯二氮卓类药过量中毒的诊断和解救。

对于可疑为药物中毒的昏迷病人，可用此鉴别。

如果有效，基本上肯定是苯二氮卓类中毒；③对ICU中长时间用苯二氮卓类控制躁动、施行机械通气的病人，如果要求恢复意识，停用机械通气，可用此药拮抗苯二氮卓类作用。

11．巴比妥类的不良反应主要有：①后遗效应；②呼吸抑制；③耐受性、依赖性；④变态反应。

PA、Pa、Pbr上升慢，则麻醉诱导期延长，苏醒也慢。

3.血/气分配系数小者，如难溶性的N2O，PA、Pa、Pbr上升快则麻醉诱导期短，苏醒快。

3.血容量扩充剂主要用途和不良反应有哪些？血容量扩充剂：是一类高分子物质构成的胶体溶液，具有近似或高于生理值的胶体渗透压，进入血液后可起暂时替代和扩充血浆容量的作用。

不良反应：1.类变态反应或变态反应2.降低机体抵抗力3.凝血障碍4.热源反应5.肝功能损害5.麻醉前用药：1.防止迷走神经反射引起的心率减慢；2.抑制腺体分泌（唾液腺、呼吸道腺体等）；3.一定程度防止喉痉挛和支气管痉挛；4.降低胃肠道张力，减少肠蠕动。

6.拮抗新斯的明引起的心率减慢：非去极化性肌松药（泮库溴胺、哌库溴胺）过量（呼吸抑制），可用新斯的明解救，但可引起心动过缓。

可事先或同时使用阿托品对抗。

7.试述局麻药中毒反应的临床表现及预防措施表现:局麻药的毒性反应主要表现在中枢神经系统，心血管系统和肌肉系统。

中枢神经系统的早期表现有头昏、眼花、耳鸣、目眩等，如不尽快发现及处理可导致神志很快消失。

药理学实验指点实验一药物的感化方法【实验目标】懂得药物的局部感化和全身感化,并懂得高兴感化.克制造用及拮抗感化.【实验道理】普鲁卡因为局部麻醉药,克制中枢神经元,起首克制对药物迟钝的中枢克制性神经,引起脱克制而消失高兴现象,表示为不安.震颤,甚至惊厥.而戊巴比妥钠为沉着催眠.抗惊厥药,跟着药物剂量的增长,对中枢的克制造用逐渐加强,分别产生沉着.催眠.麻醉和抗惊厥的感化.【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材：1ml打针器.钟罩.镊子2．药品：3%普鲁卡因溶液.0.5%戊巴比妥钠溶液【实验步调】1．取小白鼠1只,称重标识表记标帜,并不雅察一般活动情形及痛觉反响.2．在小白鼠一后肢股骨粗隆下危坐骨神经四周,打针3%普鲁卡因溶液0.1ml/10g,随即不雅察小白鼠阁下后肢的活动情形及全身情形.3．待小白鼠抽搐显著时,立刻腹腔打针0.5%戊巴比妥钠溶液0.1ml/10g并持续不雅察小白鼠全身情形.4．填表小白鼠用普鲁卡因后表示用戊巴比妥钠后表示左后肢全身左后肢全身【留意事项】1．请求打针部位要准确.2．留意挽救时光.【思虑题】1．小白鼠的那些表示各属于局部.全身.高兴.克制和拮抗感化？2．本次实验队临床用药有何指点意义？实验二药物剂量对药物感化的影响【实验目标】控制药物剂量与药物感化的关系【实验道理】戊巴比妥钠为沉着催眠.抗惊厥药,跟着药物剂量的增长,药物感化越显著,对中枢的克制造用逐渐加强,分别产生沉着.催眠.麻醉和抗惊厥的感化.【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材：1ml打针器.钟罩.镊子2．药品：0.1%,1%,2%戊巴比妥钠溶液【实验步调】1．取性别雷同,体重邻近小白鼠3只,分别称重.记号（1.2.3号）,不雅察精力状况.痛觉反射及翻正反射.2．3．用大烧杯罩住小白鼠,并随时不雅察用药后各小鼠的精力状况.痛觉反射.翻正反射.4．填表小白鼠号用药用药后的表示（3′6′9′12′15′）精力状况痛觉反射翻正反射1号2号3号【留意事项】1．改换药物冲要洗打针器.2．小白鼠体重相差应小于两克.【思虑题】1．药物剂量和药物感化的关系？2．评论辩论3只小白鼠用药今后表示为何不合？实验三给药门路对药物感化的影响及药物的拮抗感化【实验目标】不雅察不合给药门路对药物感化的影响及药物的拮抗感化【实验道理】硫酸镁不合的给药门路产生不合的药物感化：1．口服导泻的感化 2．肌肉打针抗惊厥降血压硫酸镁肌肉打针时,Mg2+占领了Ca2+的感化位点,导致不克不及触发囊泡里的乙酰胆碱释放,不克不及与接头后膜的N2受体产生联合,使肌细胞不克不及压缩,最终导致肌无力.【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材：1ml打针器.钟罩.灌胃针头2．药品：10%硫酸镁溶液.3%氯化钙溶液.心理盐水【实验步调】1．取体重邻近小白鼠3只,分别称重.记号（1.2.3号）,不雅察一般活动情形.精力状况.翻正反射,肌张力.2．3．用钟罩罩住小白鼠,随时不雅察各小鼠的活动情形.精力状况.翻正反射,肌张力.不雅察到显著后果为止.4．待 2.3小白鼠瘫痪后,给2号小白鼠腹腔打针氯化钙溶液0.1ml/10g,给3号小白鼠腹腔打针心理盐水0.1ml/10g.5．填表小白鼠号用药给药门路活动情形翻正反射1号2号第一次第二次3号第一次第二次【留意事项】1．肌注药液可注入两后肢肌肉中.2．灌胃药液不成外溢.【思虑题】1．简述硫酸镁引起肌肉无力的感化机制？2．简述药物的拮抗感化对临床用药有何意义？实验四药物剂型对药物感化的影响【实验目标】不雅察药物剂型对药物接收的影响【实验道理】药物剂型对药物接收的影响很大,氯丙嗪心理盐水溶液为小分子晶体水溶液,氯丙嗪阿拉伯胶溶液为大分子胶体溶液,阿拉伯胶为大分子物资,而细胞膜是一种半透膜,它对小分子水溶性物资通透性高,而对大分子胶体物资接收较慢,是以,氯丙嗪心理盐水溶液接收快,起感化也快.【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材：1ml打针器.钟罩.镊子2．药品：0.1%氯丙嗪心理盐水溶液.0.1%氯丙嗪阿拉伯胶溶液【实验步调】1．取性别雷同,体重邻近的小白鼠2只,分别称重.记号（1.2号）,不雅察一般活动情形及精力状况等.2．3．用钟罩罩住小鼠,不雅察各小鼠的活动及精力状况的变更. 4．填表小白鼠号用药活动情形精力状况1号2号【留意事项】1．两只小鼠同时打针药物.2．记载从给药到消失症状的时光.【思虑题】1．简述药物剂型对药物感化有何影响？2．依据今天的实验成果请你谈谈抽烟的伤害？实验五药物对兔瞳孔的感化【实验目标】不雅察拟胆碱.抗胆碱药及拟肾上腺素药对瞳孔的感化【实验道理】硫酸阿托品是抗胆碱药物阻断外周M受体,竞争性拮抗ACh对M受体的冲动感化.硝酸匹鲁卡品为拟胆碱药,可选择性冲动M受体,产生M样感化.新福林为拟肾上腺素药,水杨酸毒扁豆碱为胆碱酯酶克制药.【实验对象】家兔(体重2.5kg阁下)【实验材料】1．器材：兔盒.尺子.手电筒2．药品：1%硫酸阿托品溶液（A药）.1%硝酸匹鲁卡品溶液（B 药）.1%新福林溶液（C药）.0.5%水杨酸毒扁豆碱溶液（D药）【实验步调】1．取家兔2只标识表记标帜（甲.乙）,于恰当强度光线下,用尺子测出两兔的双瞳孔大小（mm）,再用手电筒测定两兔双侧的瞳孔对光反射消失于否,并记载.（用灯光敏捷从正面照耀兔眼.不雅察瞳孔变更）2．按下列安插该给兔滴眼药左眼右眼甲兔 A药2滴 B 药2滴乙兔 C药2滴 D 药2滴滴药请求：拉开下眼睑,使之成杯状,并榨取鼻泪管再滴药,使药物在眼睑中保存一分钟,然后撒手即可.3．15分钟后,在同前光线强度下,再次测瞳孔大小和对光反射,若滴B药和滴D药的瞳孔已缩小,则在这两眼中再滴入A药2滴后再次不雅察这两眼瞳孔大小和对光反射.4．用实验成果来剖析药物对瞳孔大小对光反射的影响.5．填表-------------------------------------------------------------------------------------------------------兔号药物用药前用药后瞳孔（mm)对光反射瞳孔（mm）对光反射-------------------------------------------------------------------------------------------------------左眼阿托品甲兔右眼匹鲁卡品匹鲁卡品+阿托品-------------------------------------------------------------------------------------------------------左眼新福林乙兔右眼毒扁豆碱毒扁豆碱+阿托品-------------------------------------------------------------------------------------------------------【留意事项】1．瞳孔大小时不克不及刺激角膜.2．在每次测瞳孔大小和对光反射时前提药一致,如光强度和光源角度等.【思虑题】1．何谓配伍禁忌？2．从以上实验所不雅察到的现象中可获得哪些启发？在药物配伍运用时需留意些什么问题？实验六烟的毒性实验【实验目标】不雅察烟对小鼠的毒性,解释抽烟对人体的伤害.【实验道理】烟叶中含烟碱.焦油等有害物资,个中烟碱是重要成分,毒性感化很庞杂,即感化于N1受体,也感化于N2受体,此外尚可感化于中枢神经体系,并且有小剂量冲动.大剂量阻断N受体的双相感化.烟碱为烟草成品所含毒物之一,在抽烟的毒理中有十分重要的意义.【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材：1ml打针器.钟罩.镊子2．药品：烟浸液【实验步调】1．取体重邻近的小白鼠2只,分别称重,记号（1.2号）,不雅察一般活动情形及精力状况等.2．给1号腹腔打针烟浸液0.1ml/10g,给2号腹腔打针心理盐水0.1ml/10g尴尬刁难比.3．用钟罩罩住小白鼠,不雅察各小白鼠的活动及精力状况的变更.4．填表小白鼠号用药活动情形精力状况1号2号【留意事项】注药后立刻不雅察症状,超出5分钟症状不显著.【思虑题】1．简述烟碱引起小白鼠的表示及其产活力制？2．依据今天的实验成果请你谈谈抽烟的伤害？实验七镇痛药的镇痛感化【实验目标】不雅察比较镇痛药与解热镇痛药在镇痛感化方面的不痛.【实验道理】1．镇痛药的镇痛感化机制：镇痛药冲动中枢阿片受体,启动抗痛体系.2．解热镇痛药的镇痛感化机制：解热镇痛药克制外周前列腺素合成酶,削减前列腺素合成,缓解痛苦悲伤症状.【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材:1ml打针器.钟罩.镊子2．药品：0.2%哌替啶溶液(A).1%安乃近溶液(B).心理盐水(B)（并将(A)(B)(C)随机装入1.2.3号小药瓶中）0.6%醋酸溶液【实验步调】1．取小白鼠3只,称重量.记号（1.2.3号）不雅察它们的痛觉反射.2．给1号小鼠腹腔打针1号药瓶药液0.1ml/10g.给3号小鼠腹腔打针3号药瓶药液0.1ml/10g.3．10分钟后给3只小白鼠均正中腹腔打针0.6%醋酸0.2ml/只,随即不雅察5分钟内三只小白鼠消失扭体反响的次数,并作记载. 4．依据记载成果揣摸出1.2.3号小药瓶中药液的名称.[建议] 全实验室实验成果可进行统计学处理.【留意事项】1．扭体反响表示：腹部内凹,撤退退却蔓延.躯体扭曲.臀部举高2．醋酸请求新颖配制【思虑题】比较镇痛与解热镇痛药在镇痛方面的不合.实验八苯巴比妥钠的抗惊厥感化【实验目标】不雅察苯巴比妥钠的抗惊厥感化【实验道理】1．尼可刹米致惊厥：大剂量尼可刹米不单高兴呼吸中枢,还高兴血汗管中枢,高兴全部大脑皮层,高兴活动中枢,导致全身骨骼肌不自立强烈压缩引起惊厥.2．苯巴比妥钠抗惊厥机制：克制中枢【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材：1ml打针器.钟罩.大烧杯.镊子2．药品：0.5%苯巴比钠溶液.5%尼可刹米溶液.心理盐水.【实验步调】1．取体重邻近的小白鼠2只,分别称重.记号（1.2号）不雅察一般活动情形.2．给1号鼠腹腔打针0.5%苯巴比钠溶液0.1ml/10g.给2号鼠腹腔打针心理盐水0.1ml/10g.3．10分钟后给 1.2号小白鼠均皮下打针5%尼可刹米溶液0.1ml/10g,不雅察1.2号小白鼠的有无惊厥表示（竖尾乱窜后肢强直肌肉痉挛易吃惊吓口吐鲜血等）.4．成果记载小白鼠号先用药物后用药物动物表示1号2号【留意事项】请求惊厥的小鼠必定要用钟罩罩住【思虑题】苯巴比妥钠的抗机制和尼可刹米的致惊厥机制？实验九氯丙嗪的药理感化一.氯丙嗪的沉着安定感化【实验目标】不雅察.懂得氯丙嗪的沉着安定感化【实验道理】氯丙嗪沉着安定机制：克制中枢神经体系【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材:心理药理实验多用仪.激愤盒.镊子.1ml打针器2．0.08%盐酸氯丙嗪溶液.心理盐水【实验步调】1．选异笼豢养,体重邻近小鼠4只,分别称重后分为甲组和乙组,每组2只,分别按组放入激愤盒内,调节刺激电压由低到高,直至消失激愤反响（前肢抬起.对立.互相厮咬）为止.以此电压为激愤反响的阈电压,记下每组小鼠消失激愤反响的参数.2．然后腹腔打针给药,甲组小鼠给0.08%盐酸氯丙嗪溶液0.1ml/10g;乙组给等容量的心理盐水.3．20分钟后,分别以给药前同样的刺激参数赐与刺激.不雅察两组小鼠给药前后的反响有何不合.4．成果记载------------------------------------------------------------------------------------------------------激怒反应小白鼠组别用药---------------------------------------------用药前用药后-------------------------------------------------------------------------------------------------------甲组氯丙嗪乙组心理盐水-------------------------------------------------------------------------------------------------------【留意事项】1．刺激电压用药前后应一致.刺激方法置“持续B”,时光置“1秒”,频率置“4HZ”2．实验前应卖力筛选小鼠,不轻易引起激愤反响者改换.【思虑题】简述氯丙嗪沉着的感化机制.二.氯丙嗪的降温感化【实验目标】懂得氯丙嗪的降温,沉着感化及特色.【实验道理】氯丙嗪降温机制：氯丙嗪克制体温调节中枢,使体温调节中枢掉灵,体温随外界情形温度的变更而变更.在外界情形温度低于机体正常温度时,可使体温降到正常程度以下.【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材：电子体温计.1ml打针器.大烧杯.镊子.冰箱2．药品：液体白腊.0.08%氯丙嗪溶液.心理盐水【实验步调】1．取体重邻近小白鼠4只,分别称重.记号（1.2.3.4号）测量出它们的肛温并记载,不雅察一般活动情形.2．给1.2号鼠均腹腔打针0.08%氯丙嗪溶液0.1ml/10g.给3.4号鼠均腹腔打针心理盐水0.1ml/10g（对比）.3．把1.3号小白鼠放于室温下,用钟罩罩住;把2.4号小白鼠放于冰箱中（10℃阁下).4．30分钟后,再次测出4只小白鼠放于肛温,并记载.5．成果记载-------------------------------------------------------------------------------------------------------小白鼠号用药前药物情形用药30分钟后活动情形体温活动情形体温-------------------------------------------------------------------------------------------------------1号-------------------------------------------------------------------------------------------------------2号-------------------------------------------------------------------------------------------------------3号4号------------------------------------------------------------------------------------------------【留意事项】1．测肛温办法：应先把体温计金属探头涂上液体白腊起润滑感化,把金属探头全体拔出小白鼠直肠内直到温度显示数值稳固为准. 2．不要激惹小白鼠. 【思虑题】1．剖析1.2.3.4号小白鼠两次测体温不合的原因？2．简述氯丙嗪降温感化的特色.三.氯丙嗪的镇吐感化【实验目标】不雅察氯丙嗪的镇吐感化【实验道理】氯丙嗪镇吐机制：小剂量克制催吐化学感触感染区,大剂量直接克制吐逆中枢.【实验对象】狗(体重10kg阁下)【实验材料】1．器材：5ml打针器.2ml打针器.磅秤2．2.5%氯丙嗪注溶液.0.3%盐酸去水吗啡溶液.【实验步调】1．选健康狗两只,称重,不雅察正常的活动情形,有无流涎.恶心和吐逆.2．给甲狗肌肉打针2.5%盐酸氯丙嗪溶液2ml/kg,乙狗打针等容量的心理盐水2ml/kg.3．10分钟后不雅察两狗的活动情形有何不合,然后分别给两狗皮下打针0.3%盐酸去水吗啡溶液0.1mg/kg,不雅察两狗有无吐逆. 4．实验成果------------------------------------------------------------------------------------------------------- 动物第一次给药活动情形第二次给药吐逆情形-------------------------------------------------------------------------------------------------------甲乙-------------------------------------------------------------------------------------------------------【留意事项】1．氯丙嗪打针液变黄后感化下降,勿用.2．实验完毕后给乙狗打针氯丙嗪,以免过度吐逆.【思虑题】依据实验成果评论辩论氯丙嗪的镇吐感化机理和临床运用.实验十普奈洛尔的抗缺氧感化【实验目标】不雅察普奈洛尔的抗缺氧感化【实验道理】普萘洛尔抗缺氧机制：普萘洛尔可以阻断β1受体,使心率减慢,心肌压缩力削弱,从而下降心肌耗氧量.【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材：广口瓶（125ml）.胶塞(7号).打针器（1ml）.大烧杯2．药品：钠石灰.凡士林.0.1%盐酸普奈洛尔溶液.心理盐水【实验步调】1．取小白鼠3只,称重.记号（1.2.3号）.2．给1号鼠腹腔打针0.1%普奈洛尔溶液0.2ml/10g,给2号鼠腹腔打针心理盐水0.2ml/10g.3．给药15分钟后,将1号.2号.小鼠分别放在2个广口瓶中,每瓶底部放入钠石灰20克,瓶口涂适量凡士林后用胶塞密闭,并记载封口时光.随后不雅察并记载小鼠活动变更及呼吸停滞时光.盘算各小鼠存活时光.4．把实验成果填入下表,并剖析与所用药物的关系.------------------------------------------------------------------------------------------------------小鼠预处理药物存活时光（分钟）------------------------------------------------------------------------------------------------------- 1号2号-------------------------------------------------------------------------------------------------------5．统计全室成果按下列公式盘算存活时光延伸百分率,断定普奈洛尔有无抗缺氧感化.给药组平均存活时光（分钟）--对比组平均存活时光（分钟）存活时光延伸百分率=------------------------------------------------------------- ×100%对比组平均存活时光（分钟）【留意事项】1．广口瓶容量应当一致,瓶口确切达到密封.实验前后应检讨钠石灰的质量,变色则标明已接收了二氧化碳和水,应立刻改换.2．呼吸停滞为逝世亡指标,是以实验中应亲密不雅察呼吸变更.【思虑题】简述普奈洛尔的抗缺氧感化机制.实验十一肝素和鱼精蛋白的拮抗感化【实验目标】不雅察肝素和鱼精蛋白的拮抗感化【实验道理】肝素可以克制凝血进程多个环节而克制凝血,鱼精蛋白可以中和肝素起到凝血感化.【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材：内径1毫米的毛玻璃管数根.小白鼠固定装配.1毫升打针器.天平.烧杯.棉球2．药品：70%乙醇溶液.0.0025%肝素钠溶液.0.0125%鱼精蛋白溶液.心理盐水【实验步调】1．取体重20克阁下的小白鼠3只,分别称重记号（1.2.3号）.分别固定于小白鼠固定器内.2．3．给药后15分钟,分别用毛玻璃管自小白鼠球后静脉取血,今后每隔半分钟折段毛细血管一段,不雅察3支毛细血管中的血液凝固的时光有何不合.4．成果记载-------------------------------------------------------------------------------------------------------小白鼠号药物及用量给药门路血凝时光-------------------------------------------------------------------------------------------------------1号心理盐水0.4 ml 静脉2号 0.0025%肝素0.01 ml 静脉3号 0.0125%鱼精蛋白0.05 ml 静脉-------------------------------------------------------------------------------------------------------【留意事项】1．用乙醇涂擦白鼠尾部时,待乙醇干后,再打针药物.2．打针药物的速度要严加控制,力图一致.特殊留意打针鱼精蛋白的速度宜慢.3．打针鱼精蛋白的打针器,必须冲洗清洁才干用于汲取其他药物.【思虑题】肝素的抗凝血感化机制及临床用处？实验十二咳必清的镇咳感化【实验目标】不雅察咳必清的镇咳感化【实验道理】咳必清的镇咳机制：咳必清不单经由过程中枢镇咳,并且经由过程外周反射性镇咳.【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材:1ml打针器.500ml烧杯.干棉球.镊子2．0.5%咳必清溶液.浓氨水（27%-29%）.心理盐水【实验步调】1．取体重邻近的小白鼠,分别称重.记号（1.2号）不雅察一般活动情形.2．给1号小白鼠腹腔打针打针0.5%咳必清溶液0.1ml/10g. 给2 号小白鼠腹腔打针打针心理盐水0.1ml/10g. 3．20分钟后,用浸有浓氨水的棉球放入罩小鼠的1000ml烧杯中刺激引咳,记载咳嗽埋伏期,并不雅察在3分钟内两鼠的咳嗽次数.4．成果记载小白鼠号开端用药放置浓氨水棉球后咳嗽埋伏期 3分钟内咳嗽次数1号2号【留意事项】1．放置浓氨水棉球时光不宜太长,有咳嗽动作即可掏出.2．咳嗽表示为缩胸张口.有时有咳声.【思虑题】评论辩论咳必清的镇咳机制及临床用处.实验十三硫酸镁的导泻感化【实验目标】不雅察懂得硫酸镁的导泻感化【实验道理】硫酸镁的导泻机制：硫酸镁口服难以接收,在肠内形成高渗入渗出压阻拦水分接收,使肠内容物水分增多,容积增大,刺激肠壁,加强肠蠕动,产生快而激烈的导泻感化.【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材：1ml打针器.尺子.手术剪.小镊子2．药品：卡红硫酸镁溶液（1g卡红+10g硫酸镁溶于水至100ml）.卡红盐水溶液（1g卡红氯化钠溶于水100g）【实验步调】1．取饥饿6-8小时的小白鼠（25g阁下）2只,记号（1.2号）并不雅察一般活动情形.2．给1号鼠用卡红硫酸镁溶液灌胃1ml/只.给2号鼠用卡红盐水溶液灌胃1ml/只.3．30分钟后将1.2号小白鼠都拉断颈椎处逝世,立刻剖开腹腔比较两鼠肠蠕动及肠膨胀情形有何不合？然后将幽门至肠的肠系膜分别,将肠拉直,测量自幽门至卡红远端处的距离(cm),比较两鼠有何不合？最后将肠腔剪开比较两鼠的粪便性状有何不合？4．成果记载小白鼠号用药肠蠕动肠膨胀自幽门到卡红远端的距离（cm）粪便性状1号2号【留意事项】1．小白鼠处逝世后立刻剖解.2．取肠管时不要用力拉肠管.【思虑题】简述硫酸镁的导泻机制及临床用处？实验十四胰岛素引起低血糖反响及解救【实验目标】本实验经由过程打针过量的胰岛素,不雅察动物的低血糖反响及其静注葡萄糖的治疗后果.【实验道理】胰岛素降血糖机制：胰岛素可以增长糖原合成和储存,克制糖的分化和异生.【实验对象】家兔(体重2.5kg阁下)【实验材料】1．器材：打针器(1ml.10ml).针头（5号）2．药品:胰岛素打针液(40U/ml).25%葡萄糖打针液【实验步调】1．禁食（不由水）24h家兔1只,称重后不雅察正常活动情形,然后由耳静脉打针胰岛素40U/kg,放置室温下持续不雅察家兔行动活动有何变更.2．当家兔消失战立不稳.倒下或惊厥时（在打针胰岛素后约1h）,敏捷由耳静脉打针25%葡萄糖打针液4ml/kg,持续不雅察动物的行动活动变更.3．成果记载给药前静注胰岛素后静注高渗葡萄糖后-------------------------------------------------------------------------------------------------------家兔行动变更-------------------------------------------------------------------------------------------------------【留意事项】实验室应保持在20℃阁下,家兔必须禁食24h以上,不然将使低血糖反响消失时光延迟..【思虑题】胰岛素过量的临床表示及防治.实验十五硫酸链霉素的毒性反响及氯化钙的反抗感化一.家兔实验法【实验目标】不雅察硫酸链霉素对兔的毒性反响及氯化钙对其毒性反响的反抗感化【实验道理】链霉素引起肌无力的机制：大剂量链霉素可以阻断神经肌肉接头,阻拦钙离子内流,阻拦乙酰胆碱释放,从而消失四肢无力呼吸艰苦甚至呼吸停滞.【实验对象】家兔(体重2.5kg阁下)【实验材料】1．器材：1ml打针器.10ml打针器.镊子2．药品：24%硫酸链霉素溶液.5%氯化钙溶液【实验步调】1．取兔一只,称重后,腹腔打针24%链霉素溶液 2.5mL/Kg,于给药后20分钟,不雅察兔有何反应？2．待链霉素中毒症状显著后,即从耳缘静脉打针5%氯化钙2ml/kg,打针完毕后,不雅察动物因打针硫酸链霉素消失的中毒症状有何转变？3．成果记载-------------------------------------------------------------------------------------------------------不雅察时光呼吸情形翻正反射四肢肌张力-------------------------------------------------------------------------------------------------------用药前用链霉素后用氯化钙后-------------------------------------------------------------------------------------------------------【留意事项】氯化钙溶液以静脉打针反抗后果最好,打针时推注勿过快,如所用剂量不克不及完整反抗链霉素中毒症状,可酌情再多打针一点氯化钙溶液,但勿过量及打针速度勿过快以免中毒.【思虑题】简述链霉素引起肌无力的机制及挽救措施.二.小白鼠实验法【实验对象】小白鼠(体重20g阁下)【实验材料】1．器材：1ml打针器2个.镊子2．药品：4%硫酸链霉素溶液.3%氯化钙溶液【实验步调】1．取小白鼠2只,分别称重记号（1.2号）,不雅察小鼠正常状况的呼吸.体位.步态.四肢肌张力等.2．给 1.2号小白鼠分别肌肉打针4%链霉素0.1ml/10g,不雅察1.2号小白鼠有何反响消失.3．待症状显著时,立刻从尾静脉给1号小白鼠打针3%氯化钙0.02ml/10g,不雅察其毒性症状有何转变.2号小白鼠不打针氯化钙,症状若何？【留意事项】1．氯化钙静脉推注时勿过快过量.2．打针硫酸链霉素溶液需新颖配制.【思虑题】1．链霉素的重要不良反响及产活力制？2．临床上运用氨基苷类药物时需留意哪些？。

第一部分1、实验与常用动物的选择，错误的是肿瘤实验研究———家兔(应该用小鼠大鼠)心脏生理实验———蟾蜍. 半数致死量测定——小白鼠抗炎药物实验——大白鼠D 抗过敏药实验———豚鼠肿瘤实验研究———家兔2、常用动物的给药方式中，操作简便而起效迅速的是静脉注射灌胃皮下肌肉腹腔3、在应用小白鼠的医学实验中，操作简便又快速起效的给药方法是腹腔注射4、小鼠的给药途径多为腹腔注射5、常用器械的用法正确的是止血钳———分离神经周围结缔组织眼科剪--剪血管进行插管）6、“传出神经系统药物对动物血压的影响”的实验结果，正确的是乙酰胆碱——导致动物血压降低7、实验设计分组时，阳性对照组是指典型同类药的组8、下列哪种统计分析结果可认为差异有显著性意义？P≤0.0 59、在医学实验中用途广泛、经济的常用动物是小鼠10、关于计算机实时记录分析系统（ＢＬ410）的描述，正确的是可进行记录信号的正确处理11、一个可行的探索性实验选题不必强求的是有独立见解和创新性假说12、压力换能器的使用，正确的是务必排尽压力腔内空气13、在实验设计中处理因素是指未知作用药物在探索性实验中，最应该注意的事项是各种操作正确无误14、关于坐骨神经-腓肠肌的实验，正确的是刺激频率逐步加快15.实验项目与处理因素的描述，正确的是半数有效量ED50测定--实验药物16.关于计算机实时记录分析系统（BL410）的描述正确的是可直接记录电（心电图）信号（P21）17.在传出神经系统药物对血压的影响的实验中有协同作用毒扁豆碱与乙酰胆碱18.从220页的LD50计算报告中可得到LD50 101.219.在本阶段的学习中实验实施中最应该注意的事熟练掌握实验操作20.相对来说，难以说明问题的实验对照形式是自身对照气胸引起呼吸功能不全的原因是限制性通气不足21.动物实验中可使用的止血方法不包括：降温止血法。

22.破坏蛙脑时，探针的进针位置是：枕骨大孔。

23.做兔颈部手术时，打开颈总动脉鞘，可见哪条神经最细：减压神经。

药理学实验指导邵阳医专药理学教研室前言药理学既是理论科学，又是实践科学。

药理学实验课是药理学教学的一个重要组成部分。

它的目的一方面是验证理论，巩固并加强对理论知识的理解；另一方面是学习和掌握药效学与药代动力学实验的基本操作方法和技能，培养学生对科学工作严肃的态度，严密的方法、严格的要求及科学的思维方式，学习实验设计及实验数据统计处理的有关知识，初步具备客观地对药理学实验现象进行观察、比较分析、综合和解决实际问题的能力。

从而更深入、准确地理解和掌握药理学基本知识，指导临床合理用药；并为研究开发新药、发现药物新用途，为其他生命科学的研究探索奠定初步基础。

一、药理实验注意事项实验前①仔细阅读实验指导，了解实验的目的、要求、方法和操作步骤，领会其设计原理；②结合实验内容，复习有关药理学和生理学、生化学等方面的理论知识，达到充分理解；③估计实验中可能出现的情况和发生的问题。

实验时①严格按照实验指导上的步骤进行操作，准确计算给药量，防止出现差错造成实验失败；②认真、细致地观察实验过程中出现的现象，随时记录药物反应的出现时间、表现以及最后结果，联系理论内容进行思考；③实验过程中要注意节约药品及实验材料，避免造成浪费。

实验后①认真整理实验结果，经过分析思考，写出报告，按时交给指导教师；②整理实验器材，洗净擦干，妥为安放。

将实验后的动物按要求放到指定地点，课后认真做好实验室的清洁卫生工作。

二、实验报告的书写：每次实验后应写好实验报告，交给实验教师批阅。

实验报告要求结构完整、条理分明、文字简练、书写工整，措辞应注意科学性和逻辑性。

实验报告一搬包括下列几项内容：①实验题目与日期②实验目的实验的意义所在，要做什么，用什么方法，达到什么目的③实验材料包括动物、实验药品、主要使用仪器、也包括手术器材、玻璃器材等的数量，及实验条件。

④实验方法步骤要清晰、使别人能看懂、能重复。

如果实验方法临时有变更，或者由于操作技术方面的原因影响观察结果时，应做简要说明。

关于长时程增强形成机理的研究进展.缉,嘲’葳,,生理科学进展1994年第25卷第1期关于长时程增强形成机理的研究进展糯蜘7[?;岁摘要长盱程增强(L TP)现象是信息贮存的客观指标.其形成主要与突触詹机制有关.本文就近生来关于L TP形成过程中膜受体特征及受体技激活后细胞内的级联反应研究进行了综运,主要包括钙离子通道,蛋白激酶C以及早期诱导基医与L TP的关系.长时程增强(L TP)现象作为信息贮存的客观指标,已在中枢神经系统(CNS)的多个区域内进行了广泛研究,对L TP形成机理的探讨获得了大量的实验资料,一般认为,L TP的形成和维持是突触前和突触后机制的联合作用.而以突触后机制为主.关于L TP形成的突触后机制的研究,主要集中于N一甲基一D门冬氨酸(NMDA)受体的特征及该受体被激活后的细胞内级联反应答氨酸及其它NMDA受体激动剂作用于该受体后,可引起以G蛋白为中介的一系列反应,包括:(1)钙离子通过受体偶联的阳离子通道经突触后膜进入细胞(EcelesTC.1983)}(2)以G蛋白为中介,激活磷脂酶C,并催化磷酯酰肌醇水解为三磷酸肌醇(IP)和二乙酰甘油(DAG);(3)以I和DAG作为细胞内第二信使,引起细胞内继发效应,IP.刺激内质网释放出游离钙.从而使细胞内游离钙水平进一步升高;DAG则在游离钙存在的条件下,激活蛋白激酶C(PKC),被激活的PKC不仅可加强钙依赖性谷氨酸的释放,提高突触后膜对递质的敏感性,而且能增强钙离子通过电压依赖性通道进一步内流入细胞;(4)PKc在细胞内可使底物蛋白磷酸化,其中包括对核转录因子的修饰作用.转录因子的修饰促使早期诱导基因的表达,进而影响到核内相关靶基因的启动和转录.,导致突触后神经元产生长时程生理效应.一,钙离子通道与L TP大量实验资料证明,ca内流入突触后膜是L TP产生的触发困素,突触后膜内游离ca浓度升高是I,TP形成的必要条件之一.突触后膜内Ca～浓度升高的机制至少有以下三方面:(1)Ca通过受体门控性阳离子通道进入nB)Ca~通过电压门控性钙通道进入;(3)细胞内贮存钙的释放.实验表明,在海马CAl区,与NMDA受体偶联的ca通道的开放是L TP 产生的触发因素,而L TP的维持则与细胞内钙敏感性信使的产生有关].使用钙敏感性荧光染料可以测出细胞内钙的动力学变化.当海马细胞受到各氨酸及NMDA刺激时,细胞内游离钙的浓度可由静.时的70nmol/L升高到300nmol/L;不同传入所引起突触联合兴奋时,可以产生L TP,同时可引起与NMDA受体偶联的ca通道开放,致使细胞内钙浓度升高4倍左右(HolmesWR.1990).使用电压钳制技术在海马CA3区所做的研究表明,电压门控性钙通道的开放是L TP产生的重要条件.将去极化电流通人锥体细胞内,当膜的去极化一旦达到足以激活钙通道时,就可以产生L TP(Je{{eD.1990),此外,使用显徽荧光计对单个锥体细胞测量时发现,当高频刺激引起海马锥体细胞产生L TP时,伴随出现突触后膜内ca.的堆积].迄今为止,在不同神经元上所发现的钙离子通道至少有L,N,T,P四型.其分型主要依据生理科学进展1994年第25卷弟1期离子通道的电压敏感性,药理学特征以及单通道的动力学参数等对海马细胞做全细胞钳制时发现,最大钙离子流出现于膜去极化至一10mY时(KayAR.1987).应用单克隆抗体标记通道蛋白发现,L型钙通道存在于海马锥体细胞的胞体及近端树突,且在主树突的基部呈高密度的丛状分布.电压依赖性钙通道的通导状况还受细胞内某些活性物质的调节,这些物质统称为电压依赖性钙通道的内源性调制剂,其中包括ca一本身以及G蛋白作用系统.这些调制剂不仅调制着突触后膜上的L型,T型通道的开放状态,影响着突触后ca”浓度,而且还通过改变突触前膜上的N型通道的开放状态.控制着ca流入突触前膜,进而对神经递质的释放量起调节作用.二,蛋白激酶C与L TP如前所述,L TP的突触后机制包括膜受体被激活后的一系列生化反应,其中包括蛋白激酶C的被激活近年来的研究进一步证明了PKC被激活是产生L TP 的重要条件.如将PKC注入海马脑片的CAI区,锥体细胞就可出现L TP样反应;实验还显示,PKC可明显加强由强直刺激所引起的L TP,使用PKC的激动剂可产生相同的生物学效应,而PKC抑制剂则可使海马锥体细胞不产生L TP.此外,研究还证明了PKC的激活至少参与了早期L TP的形成.动物行为实验的研究显示,PKC与学习和记h乙有密切关系].如用鼠条件反射实验检测动物的空间学习能力,海马PKC活性低的鼠空间学习操作也差. PKC实际上是一个复杂的,与Ca一/磷脂相关的酶系家族在脑内,已被分离出并加以确定的同功酶有PKC,I,Ⅱ,Ⅱ三种使用PKC特异抗体可以标记出同功酶在大鼠脑内的分布.最高密度区为新皮层,海马结构及杏仁核;其次为丘脑,下丘脑和尾状核;最低密度区为内囊,胼胝体等纤维丰富部位..海马是PKCI含量最丰富的区域之一,经亚细胞分析发现,包括突起在内的整个神经元都有PKC1分布.在额叶皮质,PKC主要分布在I～Ⅳ层的锥体细胞.并且主要分布在锥体细胞的胞体及顶树突内在猴脑内,PKC的高密度区包括枕叶,额叶等处理视觉信息的新皮层.研究结果表明,在动物脑发育的不同阶段,PKC的活性不同胚胎期大鼠的脑内PKC活性非常低,出生后逐渐增高.其中,PKCⅡ,Ⅱ自胚胎后期开始,至生后第6周逐渐升高,PKCI的活性则是在生后第2~-’3周内迅速升高.在猫视皮层发育的关键期,出现PKC活性的增强及底物蛋白磷酸化水平明显提高.PKC在脑发育过程中的这种变化,也进一步提示PKC与神经元可塑性密切相关.三,即早基因与IJTP在L TP产生过程中.有新蛋白质的合成.这也许是L TP能够维持数周乃至数月的物质基础.近年的研究资料显示.CNS内的即早基因可能参与了这种神经元的可塑性变化早期基因的表达产物作为第三信使.把神经细胞膜上受体感受的信息与核内的靶基因联系起来.即早基因主要包括—fos及f一两个家族.这两组原癌基因所编码的活性蛋白(如AP_1,Fos蛋白等)被认为参与了CNS,内调节基因转录与表达.当用兴奋性氨基酸类物质刺激分离培养的神经元时,可在30min内出现cfosmRNA的明显增多,其中用海人藻酸(kainicacid,KA)刺激所引起的cfosmRNA的增多可持续4～6h.在此过程中,PKC的被激活是基因表达的始动因素PKC使细胞内的转录活性蛋白磷酸化,导致了即早基因的表达.使用谷氨酸处理的神经元出现了AP1与DNA结合活性的升高.其升高水平可达正常的4～5倍.在大鼠海马齿状回部位,当使用50Hz的刺激脉冲引起稳定的L TP时,用免疫组化方法可测出生理科学进展1994年第25卷第1期rfos表达蛋白(Fos)免疫活性的大大增强.当使用苯巴比妥钠阻滞了L TP产生时.Fos的免疫活性即不再出现(JefferyKJ.1990).另外一些受体,如7一氨基丁酸受体A型,B型(GABAA,GABA),乙酰胆碱M型受体等被激活时,虽然也能通过不同的胞内途径引起一定的生理效应,但是并不引起类似谷氨酸等刺激神经元所引起的那种基因表达例如,当乙酰胆碱M型受体被激活后,同样引起了以G蛋白为中介的磷脂酰肌醇水解过程,也是以IP.和DAG做为细胞内第二信使,引起细胞内效应但是,当使用M.受体激动剂碳酰胆碱(carbocho1)后,却并不出现c.如mRNA的增加(szeke.1yAM.1989).根据上述实验结果推测,NMDA受体被激活所引起L TP这样的长时程生理效应.其关键环节可能在于即早基因的表达.四,甘氨酸与NMDA受体传统的神经生理学知识告诉我们,甘氨酸是存在于哺乳动物CNS内的抑制性神经递质.甘氨酸受体主要分布于脑干和脊髓,其受体分布范围远远小于GABA受体的分布.其受体功能可被士的宁所拮抗.这种甘氨酸受体被称为士的宁敏感性的甘氨酸受体.80年代以来,随着研究的逐步深入,又发现了另一类对士的宁不敏感的甘氨酸受体,它与NMDA受体复台物偶联存在.使用分离培养的胎鼠新皮层神经元做outside—Out斑片钳记录发现,当浴液中仅有NMDA而不含甘氨酸时,能记出单通道的开放,开放时程小于10ms;当浴液中再加入甘氨酸后,可以记录出两个通道同时开放,且开放持续时间超过30ms...甘氨酸对NMDA的这种加附图NMDA受体复台体模式图强作用在10nmol/L浓度时即可显示出来.而且,也不被士的宁所阻断.由于存在于脑脊液内的甘氨酸浓度足以使其发挥对NMDA受体的调制作用,所以甘氨酸的这种生理功能可在脑的正常活动中显现出来.甘氨酸对NMDA受体的调制作用,还表现在它能明显地加强L TP.而且这种作用也不被士的宁所阻断(TauckDI.1990)实验还表明,环自氨基酸,犬尿氨基酸这些能阻断士的宁不敏感性甘氢酸受体的物质,可以阻滞高频刺激在海马CA1区产生的L TP,而不影响正常的突触传递.由此看来,在CNS内与甘氨酸有高度亲和力的结合部位有两类:一类与抑制性的甘氨酸受体相联系t其功能可被士的宁特异性拮抗,这类受体结合部位在脊髓有较高的密度,称为甘氨酸受体A型;另一类对士的宁不敏感,这类受体的分布与NMDA受体的分布区高度一致,称为甘氢酸受体B型(WoodruffGN.1990).关于NMDA受体特征的研究资料表明,NMDA受体是包括了多个不同结合点的大分子生理科学进展1994年第25卷第舅复合体(附图).它至少包括以下几部分:(1)神经递质(谷氨酸)结台部位?与其偶联的阳离子通道,在正常膜电位时受到Mg的阻滞;竞争性拮抗剂(如D—APV等J 通过与激动剂竞争此功能部位而阻止生理效应的产生;(2)非竞争性拮抗剂作用部位一二价阳离子如Mg.?对通道有物理性阻滞作用;phencyclidine(PCP)等拮抗剂通过与通道蛋白内部位点的结合而调制通导状况;(3)偶联的甘氨酸结台部位.此外.谷氨酸的菲NMDA受体(AMPA)往往与NMDA受体并存于同一突触后膜上,分别调制着正常的突触传递及突桂的可塑性变化.近年来有资料显示.这种非NMDA受体可能在L TP的形成中也发挥着作用,其机理还有待进一步探讨.此外,NO作为一种新的神经元信使,已开始I起神经科学界的重视.初步研究发现.NO通过作用于大鼠突触后膜的各氨酸受体.调节着CNS内的兴奋性突触传递过程?并与成年动物的突触可塑性及L TP的形成有关其作用机制以及与NMDA受体的关系等一系列问题,尚待进一步研究参考文献lZaLutskyRA,NieollRAComparisonoftwoiormzoflongtet-mpotentiationinsinglehippocampa[ne~ronsScience.1990,248f】81g～16242LynchMA.V ossKL.PresynaptiechangesinlongrterIT】potentiation-elevatedsynaptosomalcalciumc.l1cenrra—tionandbasalphosphoinositide~Hrfloverindentategyrus-JNeuroehemtl891,58:ll3～1l83GraysonnR,SzekelyAM,CostaEGlutamateinduced geneexpressioninprimarycerebeilarneuFo~sIn:GuidottA.ed.Neurotoxiehyoiexcitatoryaminoacids Fidiaresearchfoundationsymposiumseries.vol4.NewY ork:RaveNPress,1990.185～2O2.4ArlJsteJeL,BenA y.Novelformoflong—termpotentia? tionproducedbyaKchannelblockerinthehippocam pusNature,199l,349j67～69jRegehrWC-一TankDWPostsynapticNbIDAreceptor mediatedcalciumaccumulationinhippocampalCAl pyramidalce1ldendrites.Nature,1990,845z807～8lO6WestenbroekRE.AhlijanianMK,Cattera1]WA.Clus teringofL?typeCachanne1…thebaseoimajorden—drkesinhippocam曲】pyramida1]~eLIrODsNature?l990? 347l281～884.7HanhauerI,GrilliMG.WrightAG,eta1.Studieson anendogenousregulatorofV oltage?dependemCa channelsin…orandcardiacmyoeytes-In=G’uidottA.ed-NeurotoxiekyofexcitatoryaminoacidsFidlare searchialmdationsymposiumseriesvol4.NewY ork:Ra~,enPress.1990.53～88.8HuGyHvallbyO,WalaasSI-eta1.ProteinkmaseC Inlecu.n1111ohippocampa]pyrarr.idalcellselicltsfent~resoflong—t…potentiation.Nature,l987-3284￡6～9.9WehnerJM,SleightS,UpchurehMHippoeampa]pro—teinkinaseCactivityisreducedinpoorspatiallearners BrainRes,1§90,523:l8～l87.10HuangFL,Y oshidaY.N~tkabayasbJH-eta1.Immuno cytochemicallocalizationofproteinkinaseCisozymesin ratbrain.JNeurosci,1988,唱4734～4744.1lSheuFS,KasamatsuT.RouttenbergA.Proteinkinase Cactivityandsubsrra~e(F1/GAP43)phospboryladon indevelopingcatv isualcortex.BrainRes?l99,2,524’l44～14812MorganJI,(2ohenDR.HempsteadJL.etalMapping patternsofclosexpressioninthecentralNervol1%sys1ef『IalterseizureScience,l987,∞7;l92～1918JohnsonJW,AscherPGlycinepote. ntiatestheNMDArespo~e】nculturedmousebrainreur0ns.Naturc, 1987.325:529～53l14LynchG,MullerDStepsbetweentheinductionand expression.longtempotentiationInGuidottA. edNeHrotoxicityofexdtaloryaminoacids.FidiaT.searchfoundationsymposiumseries..】4-NeY ork RavenPress.1990.185～148.15GallyJA,MonbaguePR.Reeke(iN,㈨alTheNO hypo~hesls:possibleeffectsoiashortLived?rapidly diffuAblesignalinthedevelopmentandiut,ctionofthe nervoussystemProeNatlAeadSciUSA.199C.87l 547～885l。