有机实验-菠菜中色素的提取和分析
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菠菜中色素的提取和分析(15)
一、实验目的:
(1)熟悉天然产物的分离和提纯方法;
(2)掌握有机化合物的色谱鉴定、分离的操作方法。
二、实验原理
绿色植物中含有叶绿素a(绿色)、叶绿素b(绿色)、胡萝卜素(橙色)和叶黄素(黄色)等多种天然色素;叶绿素颜色深,而胡萝卜素和叶黄素颜色很浅。它们的分子结构不同,因此极性大小也有差别。但色素易溶于有机溶剂,在水中溶解度很小。
因此,可以用有机溶剂如石油醚提取植物中的色素,然后用色谱法对提取液进行鉴定、分离。
三、实验仪器和试剂
研钵、分液漏斗、广口瓶、玻璃板、量筒、点样毛细管、抽滤瓶、载玻片、旋转蒸发仪、圆底烧瓶、丙酮、石油醚、95%乙醇、乙酸乙酯、饱和氯化钠、无水硫酸钠、硅胶GF254,CMC水溶液
四、实验步骤
10g菠菜(无水),剪碎→加入30ml石油醚:乙醇(2:1)混合液→研磨碎→抽滤→滤液转移到分液漏斗→ 20ml饱和盐水,振摇、分层,除去水
层→有机相用20ml水洗涤两次→无水Na
2SO
4
干燥10分钟,过滤,浓缩(旋转蒸
发仪)约2ml。
五、思考题(略)
菠菜中色素的提取和分析(16)
一、实验目的:
(1)熟悉天然产物的分离和提纯方法;
(2)掌握有机化合物的色谱鉴定、分离的操作方法。
二、实验原理
绿色植物中含有叶绿素a(绿色)、叶绿素b(绿色)、胡萝卜素(橙色)和叶
黄素(黄色)等多种天然色素;叶绿素颜色深,而胡萝卜素和叶黄素颜色很浅。它们的分子结构不同,因此极性大小也有差别。但色素易溶于有机溶剂,在水中溶解度很小。
因此,可以用有机溶剂如石油醚提取植物中的色素,然后用色谱法对提取液进行鉴定、分离。
三、实验仪器和试剂
研钵、分液漏斗、广口瓶、玻璃板、量筒、点样毛细管、抽滤瓶、载玻片、旋转蒸发仪、圆底烧瓶、丙酮、石油醚、95%乙醇、乙酸乙酯、饱和氯化钠、无水硫酸钠、硅胶GF254,CMC水溶液
四、实验步骤
(1)薄层层析对提取液进行分析鉴定
点样→配展开剂(展开剂A:石油醚-丙酮(4:1);展开剂B:石油醚-乙酸乙酯(3:2))→展开→计算Rf值。对两种展开剂的展开效果进行比较,确定分离用的展开剂。
(2)制备性薄层层析进行分离
用制备性薄层对浓缩液进行分离,需要展开液约150 ml,将色带刮下,用丙酮洗脱下来,浓缩后用薄层层析检测纯度
以上实验,预实验重复三次。
五、思考题
1、如果样品斑点点得过大或者靠边,对分离效果会产生什么样的影
响?
2、如何判断叶黄素、β-胡萝卜素、叶绿素的极性大小?
3、如果点样点得过浓,会对分离产生什么样的影响?