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实验 菠菜叶中叶绿素的提取和分离一 实验目的1．掌握从菠菜叶中提取叶绿素的方法；2．了解薄层层析的原理，掌握薄层层析的一般操作和定性鉴定方法二 实验原理1．叶绿素提取高等植物体的叶绿体色素有叶绿素和类胡萝卜素两类，主要包括叶绿素a (C 55H 72O 5N 4Mg)、叶绿素b(C 55H 70O 6N 4Mg)、β—胡萝卜素(C 40H 56)和叶黄素(C 40H 56O 2)等4种。
叶绿素a 和叶绿素b 为吡咯衍生物与金属镁的配合物，胡萝卜素是一种橙色天然色素，属于四萜类，为一长链共轭多烯，有α、β、γ三种异构体，其中，β异构体含量最多。
叶黄素为一种黄色色素，与叶绿素同存在于植物体中，是胡萝卜素的羟基衍生物，较易溶于乙醇，在乙醚中溶解度较小。
根据它们的化学特性，可将它们从植物叶片中提取出来，并通过萃取、沉淀和色谱方法将它们分离开来。
RR=H ； 叶黄素 R= OH2．薄层色谱 薄层层析是快速分离和定性分析微量物质的一种极为重要的实验技术，具有设备简单、操作方便而快速的特点。
它是将固定相支持物均匀地铺在玻片上制成薄层板，将样品溶液点加在起点处，置于层析容器中用合适的溶剂展开而达到分离的目的。
用此法分离时几乎不受温度的影响，可采用腐蚀性显色剂，而且可在高温下显色，特别适用于挥发性小或在较高温度下易发生反应的物质，同时也常用来跟踪有机反应或监测有机反应完成的程度。
薄层层析按分离机制不同可分为吸附层析、分配层析、离子交换层析等，最常用的为吸附薄层层析，在此主要讨论。
吸附层析中样品在薄层板上经过连续、反复的被吸附刑吸附及展开剂解吸附过程，由于不同的物质被吸附剂吸附的能力及被展开剂解吸附的能力不同，放在薄层上以不同速度移动而得以分离。
通常用比移值(Rf)表示物质移动的相对距离：的距离展开剂前沿至原点中心点中心的距离色斑最高浓度中心至原 f RRf值计算示意图1．起点线； 2. 展开剂前沿a.色斑最高浓度中心至原点中心的距离b. 展开剂前沿至原点中心的距离MgNCH2CH3NCH3HHNRCH3NCH3OCOOCH3OOCH3CH3CH3CH3R=CH3; 叶绿素a；R=CHO；叶绿素b;叶绿素：吡咯衍生物和镁的配合物，是植物进行光合作用必需的催化剂，易溶于石油醚等非极性溶剂中。
菠菜色素的提取与分离
实验材料：
1.菠菜叶：新鲜的菠菜叶作为原料。
2.无水乙醇：用于菠菜色素的提取。
3.正己烷：用于菠菜色素的分离。
实验步骤：
1.准备新鲜的菠菜叶，将其洗净并切碎成小段。
2.将切碎的菠菜叶放入一个绞肉机或搅拌机中，加入适量的无水乙醇。
搅拌均匀，使菠菜叶完全浸泡在乙醇中。
3.将浸泡好的菠菜浆放入玻璃烧杯中，放置在室温下浸泡一段时间
（通常为2-3小时），以充分提取菠菜色素。
4.将浸泡好的菠菜浆过滤，将提取得到的菠菜色素溶液收集起来，并
将其保存在一个干净的容器中。
5.取一定量的菠菜色素溶液，并用正己烷进行萃取。
将菠菜色素溶液
与正己烷按照1:1的比例混合，充分摇匀。
6.静置一段时间后，菠菜色素会分为两层，上层是正己烷层，下层是
菠菜色素层。
分离这两层，可以使用分液漏斗或者一些特殊的仪器设备来
完成。
7.分离得到的菠菜色素层即为所需的产品。
可以将其保存在一个干净
的容器中，或者对菠菜色素进行进一步的实验研究。
实验注意事项：
1.在实验过程中，应注意安全操作，避免乙醇和正己烷的接触和吸入。
2.密闭容器中的溶剂切勿满溢，以免发生外溢和溅出。
3.实验前应检查实验器材的完整性和密封性，确保实验过程的准确性
和安全性。
4.菠菜叶应该选择新鲜、无病虫害的叶片，并保持充分的洗净。
5.实验操作时要注意从装置的出口处向连接装置的玻璃瓶中逸出瓶道
的紫外光辐射。
6.实验后要及时清洗实验仪器和容器，避免菠菜色素的残留和污染。
