第03章 酶
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3 核酸1.①电泳分离四种核苷酸时,通常将缓冲液调到什么pH?此时它们是向哪极移动?移动的快慢顺序如何? ②将四种核苷酸吸附于阴离子交换柱上时,应将溶液调到什么pH?③如果用逐渐降低pH的洗脱液对阴离子交换树脂上的四种核苷酸进行洗脱分离,其洗脱顺序如何?为什么?解答:①电泳分离4种核苷酸时应取pH3.5 的缓冲液,在该pH时,这4种单核苷酸之间所带负电荷差异较大,它们都向正极移动,但移动的速度不同,依次为:UMP>GMP>AMP>CMP;②应取pH8.0,这样可使核苷酸带较多负电荷,利于吸附于阴离子交换树脂柱。
虽然pH 11.4时核苷酸带有更多的负电荷,但pH过高对分离不利。
③当不考虑树脂的非极性吸附时,根据核苷酸负电荷的多少来决定洗脱速度,则洗脱顺序为CMP>AMP> GMP > UMP,但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在着非极性吸附,嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。
静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱顺序为:CMP> AMP > UMP >GMP。
2.为什么DNA不易被碱水解,而RNA容易被碱水解?解答:因为RNA的核糖上有2'-OH基,在碱作用下形成2',3'-环磷酸酯,继续水解产生2'-核苷酸和3'-核苷酸。
DNA的脱氧核糖上无2'-OH基,不能形成碱水解的中间产物,故对碱有一定抗性。
3.一个双螺旋DNA分子中有一条链的成分[A] = 0.30,[G] = 0.24,①请推测这一条链上的[T]和[C]的情况。
②互补链的[A],[G],[T]和[C]的情况。
解答:①[T] + [C] = 1–0.30–0.24 = 0.46;②[T] = 0.30,[C] = 0.24,[A] + [G] = 0.46。
4.对双链DNA而言,①若一条链中(A + G)/(T + C)= 0.7,则互补链中和整个DNA分子中(A+G)/(T+C)分别等于多少?②若一条链中(A + T)/(G + C)= 0.7,则互补链中和整个DNA分子中(A + T)/(G + C)分别等于多少?解答:①设DNA的两条链分别为α和β则:Aα= Tβ,Tα= Aβ,Gα= Cβ,Cα= Gβ,因为:(Aα+ Gα)/(Tα+ Cα)= (Tβ+ Cβ)/(Aβ+ Gβ)= 0.7,所以互补链中(Aβ+ Gβ)/(Tβ+ Cβ)= 1/0.7 =1.43;在整个DNA分子中,因为A = T,G = C,所以,A + G = T + C,(A + G)/(T + C)= 1;②假设同(1),则Aα+ Tα= Tβ+ Aβ,Gα+ Cα= Cβ+ Gβ,所以,(Aα+ Tα)/(Gα+ Cα)=(Aβ+ Tβ)/(Gβ+ Cβ)= 0.7 ;在整个DNA分子中,(Aα+ Tα+ Aβ+ Tβ)/(Gα+Cα+ Gβ+Cβ)= 2(Aα+ Tα)/2(Gα+Cα)= 0.75.T7噬菌体DNA(双链B-DNA)的相对分子质量为2.5×107,计算DNA链的长度(设核苷酸对的平均相对分子质量为640)。
第三章常见疾病的病因、发病机制、病理、药理呼吸系统疾病考纲要求慢性阻塞性肺疾病病因病机、病理和病理生理哮喘概念、病因病机肺炎病因分类、发病机制和病理呼吸衰竭病因和病理生理知识点一、慢性阻塞性肺疾病慢性阻塞性肺疾病(COPD)简称慢阻肺,是以持续气流受限为特征的可以预防和治疗的疾病,其气流受限多呈进行性发展。
考点:病因和发病机制(一)病因目前尚不完全清楚,可能是吸烟、职业粉尘和化学物质、空气污染、感染因素等多种环境因素与机体自身因素长期相互作用的结果。
(二)发病机制1.气道炎症:多种细胞参与COPD的气道炎症,包括中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸粒细胞等。
其中中性粒细胞是主要的效应细胞。
中性粒细胞释放弹性蛋白酶等多种生物活性物质引起慢性黏液高分泌状态,蛋白酶引起弹性蛋白破坏。
2.蛋白酶/抗蛋白酶失衡:蛋白酶引起弹性蛋白破坏,是导致肺气肿的重要原因,并且为不可逆损害。
肺气肿肺过度充气、膨胀,肺组织弹性降低,常有肺大泡形成。
2.氧化应激机制香烟烟雾和其它吸入颗粒可产生氧自由基。
氧化应激对肺组织不利影响有:激活炎症基因、使抗蛋白酶失活、刺激黏液高分泌、使糖皮质激素抗炎活性下降。
4.其他机制如自主神经功能失调、营养不良。
两种病变考点:病理和病理生理(一)病理主要表现为慢性支气管炎及肺气肿的病理变化;慢性炎症以及反复损伤修复引起的支气管结构改变。
小叶中央型肺气肿全小叶型肺气肿(二)病理生理:持续气流受限→肺通气功能障碍知识点二、支气管哮喘考点:概念支气管哮喘简称哮喘,是由多种细胞(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、平滑肌细胞、气道上皮细胞等)和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病。
考点:病因及发病机制病因不清,遗传和环境因素有关。
环境因素室内变应原:尘螨、家养宠物室外变应原:花粉等职业变应原:油漆等食物:鱼、虾、蟹、牛奶等药物:阿司匹林、抗生素知识点三、肺炎肺炎是指终末气道、肺泡和肺间质的炎症,可由病原微生物、理化因素、免疫损伤、过敏及药物所致。
一、名词解释[第02章生物化学检验技术基础知识]1、RCF:2、生物源性危害:[第03章光谱光度分析技术]1、摩尔吸光系数:2、百分吸光系数:3、紫外分光光度法:4、火焰分光光度法:5、可见分光光度法:6、最大吸收波长:[第04章电泳技术]1、电泳:2、电泳迁移率:3、高压电泳:4、电渗:5、离子强度:6、等电聚集电泳:7、转移电泳:8*、等渗性脱水:9*、高渗性脱水:[第05章自动生化分析技术]1、自动生化分析技术:2*、顺序分析法:3*、同步分析:4*、干化学法:[第06章糖类测定]1、血糖:2、葡萄糖耐量试验:3、Trinder反应:4*、IDDM:[第07章酶类测定]1、定时法:2、速率法:3、酶的国际单位:4、同工酶:[第08章血脂测定]1、血脂:2、载脂蛋白:3、高脂血症:4*、脂蛋白(a):[第09章蛋白质测定] 1、β-γ桥:[第10章肝功能试验]1、改良J-G法:[第11章肾功能试验]1、肾糖阈:2、假肌酐:3、内肌酐生清除率:[第12章电解质类测定]1、总铁结合力:2、离子钙:3、结合钙:[第13章血气酸碱分析]1、血液PH:2、二氧化碳分压:3、氧分压:4、AB:5、SB:6、BB:7、BE:8、AG:[第14章临床生化检验的质量控制]1、准确度:2、精密度:3、医学决定水平:4、系统误差:5、随机误差:二、填空题、[第02章生物化学检验技术基础知识]1~5(5)、常用玻璃仪器的洗涤剂有合成洗涤剂、重铬酸钾洗液、45%尿素溶液、30%硝酸溶液%、乙胺四乙酸二钠。
2~5(4)、国产化学试剂一般分为四级名称分别为:优级纯、分析纯、化学纯、实验试剂。
3~5(3)、离心机按转速分为普通离心机《6000rpm ,高速离心机6000rpm~25000rpm 和超速离心机》30000rpm 。
[第03章光谱光度分析技术]1~2(2)、比色分析常用的定量方法主要有对比法和标准曲线法。
2~6(4)、钠原子的火焰激发光谱波长为589nm,火焰呈黄色;钾子的火焰激发光谱波长为767nm,火焰呈紫红色。