三氧化二砷对人卵巢癌耐药细胞株细胞增殖和转移能力的影响

三氧化二砷与隐丹参酮不同配比对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤的抑制作用

倪珊珊;廖广辉;张广顺;申力;钱旭武;李范珠;张光霁

【摘 要】[目的]探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)与隐丹参酮对人肝癌HepG2裸鼠的最佳配伍剂量,以期提高As2O3治疗肝癌的临床疗效,并减轻其毒副作用.[方法]建立人肝癌细胞系HepG2裸鼠肝癌模型,将As2O3(1.25mg·kg-1、2.5mg·kg-1、5.0mg·kg-1)与隐丹参酮(50mg·kg-1,100mg· kg-1,200mg· kg-1)低、中、高三个剂量分为9组联合治疗,计算各组瘤体体积、瘤重及计算肿瘤抑制率;进行血常规及血生化检测.[结果]与模型组比较,除L-L剂量组的平均瘤重外,As2O3与隐丹参酮联合用药组平均瘤重及瘤体积均显著小于模型组(P＜0.05).H-M剂量组瘤体积抑制率和瘤重抑制率分别为(56.38％,54.36％),抑瘤作用大于M-M剂量组(52.25％,45.43％)、L-M剂量组(48.90％,42.13％)、H-L剂量组(50.34％,40.82％)、H-H剂量组(46.10％,35.72％)、M-H剂量组(47.13％,33.68％)、L-H剂量组(32.08％,33.25％)、M-L剂量组(36.38％,31.94％)、L-L剂量组(33.39％,20.71％).对血常规的影响:与模型组比较,M-H剂量组的白细胞数量显著升高(P＜0.05); L-M剂量组、L-H剂量组、M-L剂量组、H-L剂量组、H-M剂量组、H-H剂量组的红细胞数量比模型组有显著下降(P＜0.01),M-M剂量组(P＜0.05); L-H剂量组、H-M剂量组、H-H剂量组血红蛋白数量有明显下降(P＜0.05),M-L剂量组、H-L剂量组的血小板数量下降(P＜0.05).对血生化的影响:除L-L剂量组ALT升高外(P＜0.05),As2O3联合隐丹参酮各剂量组ALT含量无统计学意义(P＞0.05);L-L剂量组、L-M剂量组的AST含量有显著升高(P＜0.05);L-L剂量组、L-H剂量组CREA含量升高(P＜0.05);BUN与模型组比较无统计学意义(P＞0.05).[结论]As2O3与隐丹参酮配伍用药可显著的抑制肝癌裸鼠移植瘤的生长,高剂量的As2O3组对血液系统的影响较大,隐丹参酮的联合运用可以起到协同的作用,这为临床上As2O3治疗肝癌疗效的提高提供了一定的参考价值.

《ATG7沉默影响卵巢癌SKOV3细胞顺铂化疗敏感性的研究》

一、引言

卵巢癌是一种常见的女性生殖系统恶性肿瘤，其发病率和死亡率均较高。目前，顺铂是卵巢癌治疗中常用的化疗药物之一。然而，化疗抵抗性的出现往往导致治疗效果不佳，严重威胁着患者的生命安全。因此，研究卵巢癌细胞对顺铂化疗敏感性的影响因素及其机制，对于提高卵巢癌的治疗效果具有重要意义。近年来，自噬在肿瘤发生、发展和化疗抵抗中的作用逐渐受到关注。其中，ATG7作为自噬过程中的关键基因，在卵巢癌中的表达及其与顺铂化疗敏感性的关系尚不清楚。本研究旨在探讨ATG7沉默对卵巢癌SKOV3细胞顺铂化疗敏感性的影响及其机制，为卵巢癌的治疗提供新的思路。

二、材料与方法

1. 实验材料

（1）细胞株：人卵巢癌SKOV3细胞。

（2）试剂与仪器：顺铂、ATG7 siRNA、相关抗体、细胞培养基、PCR仪、电泳仪等。

2. 方法

（1）细胞培养与处理：培养SKOV3细胞，并分别进行ATG7 siRNA转染和顺铂处理。 （2）检测指标：通过MTT法检测细胞增殖情况；通过流式细胞术检测细胞凋亡情况；通过Western blot检测相关蛋白表达情况。

（3）数据分析：采用SPSS软件进行数据分析，计量资料以均值±标准差表示，组间比较采用t检验或单因素方差分析。

三、实验结果

1. ATG7沉默对SKOV3细胞增殖的影响

结果显示，ATG7沉默后，SKOV3细胞的增殖能力明显降低，说明ATG7在SKOV3细胞的增殖过程中发挥重要作用。

2. ATG7沉默对SKOV3细胞顺铂化疗敏感性的影响

与未转染ATG7 siRNA的SKOV3细胞相比，转染ATG7

siRNA的SKOV3细胞在顺铂处理后的细胞凋亡率明显增加，同时，细胞的IC50值（半数抑制浓度）降低，表明ATG7沉默能够提高SKOV3细胞对顺铂的化疗敏感性。

3. ATG7沉默对自噬相关蛋白表达的影响

Western blot结果显示，ATG7沉默后，自噬相关蛋白的表达降低，表明ATG7沉默可能通过抑制自噬过程来影响细胞的化疗敏感性。

山东医药２０ｌ０年第５Ｏ卷第１Ｏ期　

三氧化二砷对人胆管癌细胞侵袭力的影响　

及机制探讨　

李光明　。雷康　，刘国文　，黄长文ｈ　

（１南昌大学第二附属医院，南昌３３０００６；２江西省横峰县阳光医院）　

摘要：目的观察三氧化二砷（Ａｓ　Ｏ，）对人胆管癌细胞ＱＢＣ－９３９黏附、侵袭力的影响，并探讨其机制。方法　常规培养ＱＢＣ一９３９，之后加入Ａｓ２Ｏ３培养。１垤，ＩＴＩ’法检测细胞黏附力，Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ趋化小室检测细胞侵袭力，ＲＴ—ＰＣＲ　检测细胞的尿激酶型纤溶酶原激活因子（ｕ－ＰＡ）ｍＲＮＡ、基质金属蛋白酶　（ＭＭＰ－９）ｍＲＮＡ。结果加入Ａｓ　Ｏ，培　养后，ＱＢＣ－９３９细胞黏附力、穿膜细胞数较对照组明显下降（Ｐ均＜０．０５），其ｕ—ＰＡ、ＭＭＰ一９　ｍＲＮＡ表达减少（Ｐ均　＜０．０５），并呈时问、剂量依赖性。结论Ａｓ２０，可抑制ＱＢＣ一９３９的黏附和侵袭力，其机制与降低该细胞ｕ－ＰＡ、　ＭＭＰ－９　ｍＲＮＡ表达有关。　关键词：三氧化二砷；胆管癌；细胞黏附力；细胞侵袭力；尿激酶型纤溶酶原激活因子；基质金属蛋白酶－９　中图分类号：１１７３５．８　文献标志码：Ａ　文章编号：１００２－２６６Ｘ（２０１０）１０－０００３－０３　

Ｅｆｆｅｃｔ　ａｎｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ａｒｓｅｎｉｃ　ｔｒｉｏｘｉｄｅ　ｏｎ　ｉｎｖａｓｉｖｅｎｅｓｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌｓ　

Ｇｕａｎｇ—ｍｉｎｇ　，ＬＥＩ　ｇａｎｇ，ＬＩＵ　Ｇｕｏ—ｗｅｎ，ＨＵＡＮＧ　Ｃｈａｎｇ－ｗｅｎ　

（１　Ｓｅｃｏｎｄ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｚ，Ｎａｎｃｈａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ　３３０００６，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ａｒｓｅｎｉｃ　ｔｒｉｏｘｉｄｅ（Ａｓ２　Ｏ３）ｏｎ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｖａｓｉｖｅｎｅｓｓ　ｏｆ　ｈｕｍａａｌ　ｅｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌｓ　ｌｉｎｅ　ＱＢＣＯ３９　ａｎｄ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｉｔｓ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｃｈｏｌａｎｇｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌｓ（ＱＢＣ－９３９）　

内斟　２００８年８月　第３卷第４期　

异有统计学意义。　

２结果　

２．１临床疗效比较本组存活１５例，死亡１９例。Ａ组部分　

缓解１９．２％；Ｂ组部分缓解２２．４％；Ｃ组部分缓解３６．３％。Ｃ　

组优于Ａ组及Ｂ组（ｘ　＝２．４１０，Ｐ＜０．０５）。生存时间：Ｃ组为　

（２１．６±３．４）个月、明显长于Ｂ组的（１２．１±４．４１）个月和Ａ组　

（１３．２±３．６）个月，（Ｆ＝４．７１，Ｐ＜０．０１），而Ａ、Ｂ两组比较无　

统计学意义。　

２．２毒副反应Ｃ组有２例患者出现头晕、纳差、腹张、恶心，　

２例患者白细胞下降，３例患者有一过性肝功能异常，３例出现　

水肿。经应用造血刺激因子、护肝、利尿等对症治疗均有效控　

制。其他２组出现副作用的症状基本相似，均对症治疗有效控　

制。　

３讨论　

至今为止，ＭＭ仍是一个难以治愈的疾病。在治疗过程中　

瘤细胞很容易产生耐药现象，复发或难治性ＭＭ治疗手段有　

限，有必要探讨新的治疗措施。干细胞移植虽然为部分患者带　

来了一定的治愈希望，但因年龄、供体及费用等诸多因素的限　

制，仍难以普遍开展。对大多数患者来说，治疗的主要目的仍　

是减轻症状、延长生存期及改善生存质量。基础研究　已证　

实Ａｓ：Ｏ，具有调节机体免疫功能、抗血管生成，促进骨髓瘤细　

胞凋亡。不依赖维甲酸调节途径而发挥作用，诱导ＮＢ　细胞凋　

亡，不能与二巯基功能基团的蛋白结合诱导细胞凋亡。有可能　

成为新的ＭＭ有效治疗手段。最早应用于临床的治疗方法为　

联合化疗，标准方案为ＭＰ和Ｍ２方案。十余年前０ｌ干扰素开　

［文章编号］１６７３－７７６８（２００８）０４－０５６３－０４　５６３　

始应用于ＭＭ的治疗，研究表明　干扰素联合化疗较单纯化疗　

有效率明显提高。近期有较多报道应用Ａｓ２　０，治疗ＭＭ取锝　

了很好的疗效但Ａｓ：０，用量较大（８～１２　ｍｇ／ｄ）　。目前未见　

有小剂量Ａｓ：Ｏ　联合化疗治疗复发或难治性ＭＭ方面的报道。　

我们在化疗的基础上加用小剂量Ａｓ：Ｏ，（４～６　ｍｇ／ｄ）治疗