普通生物学实验——血细胞相关

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普通生物学实验

实验十:血细胞计数及大小测量

实验目的:1、用血球计数板、计数器计数,估算兔血中红细胞浓度。

2、用目镜测微尺、物镜测微尺测量人血涂片中白细胞的大小。

红细胞计数表格结果:

计算次数 5个中方格红细胞数

1 2 3 4 5 总数

第一次 68 62 75 64 72 341

第二次 65 68 66 70 74 343

两次平均总数 (341+343)/2=342

红细胞计数(已知稀释倍数为400) 5个中方格总体积为0.02立方毫米

故红细胞浓度为342*400*(1/0.02)=6.84*10^6/mm³=6.84*10^12/L

白细胞大小测量:

测量是在40X物镜下进行:通过校尺使两尺平行,找到两刻度完全重合的两个位臵。

目镜测微尺每个长度=(5/20)X10μm=2.5μm

1 2 3 4 5 平均值

a(格) 4.2 4.1 4.2 4.3 4.3 4.2

b(格) 3.8 3.7 3.9 3.8 3.7 3.8

所以 a=4.2X2.5μm=10.5μm b=3.8X2.5μm=9.5μm

白细胞体积=(4π/3)ab^2=4.0*10^-15m³

思考题1:将原来浓的从活体上直接提取的血细胞溶液稀释,再将稀释液涂在血细胞计数板上,由于计数板每个小格的容积已知,若稀释倍数得当且涂液时血细胞分布均匀,则可以通过镜检的方式对一定体积的稀释液中血细胞计数。然后乘上相应的稀释倍数即可以得血细胞的浓度。

思考题2:影响因素1:稀释倍数不当导致计数板中上血细胞分布过密,无法计数。

解决方案:根据第一次镜检的结果估算一下应稀释多少倍为宜。

影响因素2:涂血细胞溶液时没有涂均匀,导致有些中方格血细胞数差别很大

解决方案:如果两个中方格相差超过20个,则视为没有涂均匀,需重新涂。多次

测量取平均值。

实验十一:血细胞种类的观察及血型鉴定

实验目的:观察人血永久装片,了解血液的基本的有形成分。

学习ABO血型鉴定的方法,初步了解抗原—抗体反应的原理。

思考题1:人体的血细胞大致分为3类:其中血液中大量无核圆形的细胞为红细胞。少量有

核的细胞为白细胞(白细胞又根据其细胞内有无颗粒分为有粒细胞和无粒细胞,有粒细胞又因颗粒着色不同分为嗜中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞。而无粒细胞分为单核细胞和淋巴细胞两类)。以及呈碎片状,体积很小的巨核细胞细胞质碎片——血小板。

思考题2:我的血型为A型血。因为我的血液同标准A血清发生凝集反应,血滴略呈花边状;

与标准B血清不发生凝集反应,血液呈均匀状态,边缘整齐。

实验十二:红细胞膜通透性观察

实验目的:熟悉并理解细胞膜选择透性这一基本生理活动。

了解各类物质进入细胞的速度。

思考题1:

红细胞通透性观察 编号 溶液种类 是否溶血 所需时间

0 蒸馏水 是 24秒

1 0.17M氯化钠 否

2 0.17M氯化铵 是 7分20秒

3 0.17M醋酸铵 是 38秒

4 0.17M硝酸钠 否

5 0.12M草酸铵 是 1分49秒

6 0.12M硫酸钠 否

7 0.32M葡萄糖 否

8 0.32M甘油 是 7分32秒

9 0.32M乙醇 是 22秒

10 0.32M丙酮 是 16秒

结果分析:从上述结果可以看出对于溶质不同的溶液,有的可以使红细胞溶血,有的不能。并且可以使红细胞溶血的溶液即使浓度相同,是红细胞发生溶血所需时间也有差异。如将红细胞臵于低渗溶液中,由于细胞内溶质高于细胞外,所以液体很快进入细胞,使细胞胀破,血红蛋白逸出,即发生溶血现象。如将红细胞臵于各种等渗溶液中,由于红细胞膜对各种溶质分子的通透性不同,有的分子能通过,有的分子不能通过,溶质分子种类不同,渗入速度也有差异。渗入的溶质提高了红细胞的渗透压,降低了水势,促使水分进入细胞,引起溶血。对上述结果进行分析:0号为低渗溶液,故发生溶血。1至10号为等渗溶液,通过各溶质及其所含的阴阳离子的对比,可知铵根可以进入细胞而钠离子不能进入细胞。而甘油丙酮乙醇均为脂溶性小分子,因此可以进入红细胞。所以2,3,5,8,9,10试管中发生溶血。钠离子,氯离子,硝酸根离子,硫酸根离子为非通透性离子。

思考题2:这主要与溶质分子或离子能否进入红细胞有关,铵根离子,甘油乙醇丙酮可以通

过细胞膜进入细胞,因此使细胞内渗透势降低,从而吸水溶血。而钠离子,氯离

子,硝酸根离子,硫酸根离子不能进入细胞内外渗透势相等,从而细胞不会吸水,

因而不会发生溶血。