罗氏电化学发光
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罗氏电化学发光免疫分析仪测试项目定标物保存方法无信息定标物和质控物是测试包装内的一部分定标必须被进行:每盒新试剂;每天 (当仪器上使用同一盒试剂);需要时,如质控不在范围内心肌标志物性激素项目肿瘤标志物贫血诊断指标、骨标志物传染病项目其它唐氏筛查先兆子痫罗氏电化学发光免疫分析仪定标物保存方法(简版)定标物不需要分装冰冻保存的项目:使用时从2-8︒C取出,摇均后吸200μl(此数据为国内实验室试验所得,不代表罗氏官方)到日立杯,马上将剩余定标品放回2-8︒CFT3、FT4、T3、T4、TSH、T-uptake、Anti-TG、HCG+β、HCG STAT、ProgesteroneCEA、CA 125、CA 153、CA 724、Cyfra21-1、NSE、Free PSA、HE4Myoglobin、Myoglobin - STAT 、Digoxin、Digitoxin、Ferritin、IgE、β-CrossLapsAnti-HAV、Anti-HAV IgM、HBsAg、HBsAg II quant、 Anti-HBs、HBeAg、Anti-HBe、Anti-HBc、 Anti-HBc IgM、 HIV combi、HIV Ag 、HIV combi PTToxo IgG、 Toxo IgM、Rubella IgG、Rubella IgM、CMV IgG、CMV IgM定标物需要分装冰冻保存的项目:定标物加水复溶,用子弹头进行分装(分装量为200μl(此数据为国内实验室试验所得,不代表罗氏官方)),然后放在-20︒C保存,使用时取出并平衡到室温TG、Anti-TPO、 Anti-TSHR、CK-MB、CK-MB STAT、ProBNP、Troponin T HS、Troponin T HS STAT free βHCG、PAPP-A、 Insulin、C-peptide、IL-6 、PCT、Anti-CCP.Cortisol、ACTH、Estradiol II、FSH、LH、Prolactin、Testosterone、DHEA-S、SHBG、PIGF、 sFlt-1、hGHAFP、CA 199、TPSA、S100Vitamin B12、Folate III 、N-MID、Total P1NP、PTH、PTH STAT、PTH(1-84)Vitamin D3、Vitamin D totalHSV-1 IgG、 HSV-2 IgG11 / 11'.。
罗氏电化学发光检测法与化学发光法检测泌乳素的比较李红【摘要】目的比较罗氏电化学发光检测法与化学发光法在泌乳素临床检测过程中的实际价值。
方法将2014年6月-2015年6月来我院体检的68名健康女性作为研究对象,对其分别利用罗氏电化学发光法与化学发光法进行检测,分析两种方法检测泌乳素的异常率,并利用卡方检验进行统计分析。
结果罗氏电化学发光检测法检测泌乳素异常率为17.65%,而化学发光法的异常检测率为20.59%,且两者差异有统计学意义(P<0.05)。
结论在泌乳素检测过程中,罗氏电化学发光检测法与化学发光法差异并不明显,实际临床检测中应根据患者情况进行合理选择。
【期刊名称】《临床检验杂志(电子版)》【年(卷),期】2018(007)001【总页数】2页(P122-123)【关键词】罗氏电化学发光检测法;化学发光法;泌乳素【作者】李红【作者单位】[1]贵州省人民医院检验科,贵州贵阳550002;【正文语种】中文【中图分类】R446.8泌乳素属于一种肽类激素,主要由垂体前叶泌乳素细胞所分泌,其可以有效调节人体的卵巢功能,促进胎儿正常生长发育。
泌乳素存在多种检测方法,其中最为常用的包括罗氏电化学发光检测法、化学发光酶联免疫法以及放射免疫分析法等,且医学研究人员最为关心的则是这些检测方法之间的差异性,但此方面研究结论却很少,对此,本研究以2014年6月-2015年6月来我院体检的68名健康女性作为研究对象,分析了罗氏电化学发光法与化学发光法在检测泌乳素异常率方面存在的差异,现报道分析如下。
1 资料与方法1.1 一般资料将2014年6月-2015年6月来我院体检的68名健康女性作为研究对象,其年龄在19岁-61岁之间。
所有受检人员的肝肾功能均正常,乙型肝炎标志物正常且癌胚抗原正常,已经排除了患有心肝肾肺等部位疾病的患者,所有患者内分泌正常,不患有乳腺以及肿瘤等疾病。
1.2 方法罗氏电化学发光检测中采用罗氏E601型全自动电化学发光分析仪,使用配套试剂盒;化学发光法检测中采用贝克曼Dxl800化学发光仪,并使用配套试剂盒。
本文部分内容来自网络整理,本司不为其真实性负责,如有异议或侵权请及时联系,本司将立即删除!== 本文为word格式,下载后可方便编辑和修改! ==罗氏电化学发光免疫分析总结技术是罗氏公司开发的,但全自动机械制造却由日本的日立公司承担,所以仪器上还有Hitachi的标志。
这个仪器让大家吃惊的一大原因就在于一直在实验室研究的电致化学发光居然已经真正地产业化了,其中我们一直无法解决的诸多问题(尤其是重现性)均已得到解答,看来罗氏的确花了不少心血开发这款仪器。
罗氏电化学发光免疫分析技术的性能特点——创新的技术,与众不同一、最先进的检测原理电化学发光免疫测定,是目前最先进的标记免疫测定技术,是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术,具有敏感、快速和稳定的特点,在固相标记免疫测定中技术上居领先地位。
电化学发光(ECL)是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,实际上是电化学和化学发光两个过程的完美结合。
电化学发光与普通化学发光的主要差异在于前者是电启动发光反应,循环及多次发光,后者是通过化合物混合启动发光反应,是单次瞬间发光。
因此ECL反应易精确控制,重复性极好。
电化学发光免疫测定是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物,直接以[Ru(bpy)3]2+标记抗体,反应时标记物直接发光。
且[Ru(bpy)3]2+在电极表面的反应过程可以周而复始进行,产生许多光子,使光信号得以增强。
二、专利的包被技术链霉亲和素(streptoavidin,SA)和生物素(biotin,B)是具有很强的非共价相互作用的一对化合物,特异性强且结合紧密。
一分子SA可与四分子B相结合,增大了抗体结合量,达到放大效果。
在ECL的试剂中,SA通过特殊的蛋白结合物均匀牢固地包被在磁性微粒上,形成通用的能与B结合的固相载体,另一试剂为活化的B衍生物化合的抗原或抗体。
两种试剂混合时,抗原或抗体即包被在磁性微粒上。
电化学发光免疫测定(Electrochemiluminescence immunoassay,ECLI)是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术,是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物。
它的标记物的发光原理与一般的化学发光(CL)不同,是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,实际上包括了电化学和化学发光二个过程。
ECL与CL的差异在于ECL是电启动发光反应,而CL是通过化合物混合启动发光反应。
ECL 不仅可以应用于所有的免疫测定,而且还可用于DNA/RNA探针检测。
其检测原理(以TSH检测为例):第一步:结合了活化的三联吡啶钌衍生物即[Ru(bpy)3]2++ N 羟基琥珀酰胺酯(NHS)的TSH抗体和结合了生物素的TSH抗体与待测血清同时加入一个反应杯中孵育9分钟。
第二步:将被链霉亲和素包被的磁珠加入反应杯中,再次孵育9分钟,使生物素通过与亲和素的结合将磁珠、TSH抗体连接为一体,形成双抗体夹心法。
下一步,蠕动泵将形成的 [Ru(bpy)3]2+-抗体-抗原-抗体-磁珠复合体吸入流动测量室,此时,磁珠被工作电极下面的磁铁吸附于电极表面。
同时,游离的TSH抗体(与生物素结合的和与[Ru(bpy)3]2+结合的抗体)也被吸出测量室。
紧接着,蠕动泵加入含三丙胺(TPA)的缓冲液,同时电极加电压,启动ECL反应过程。
发光剂 [Ru(bpy)3]2+和电子供体TPA在阳极表面可同时各失去一个电子而发生氧化反应,使二价的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三价,后者是一种强氧化剂;另一方面,TPA 被氧化成阳离子自由基TPA+●,后者很不稳定,可自发失去一个质子(H+),形成自由基TPA●,这是一种很强的还原剂,可将一个电子给三价的[Ru(bpy)3]3+,使其形成激发态的[Ru(bpy)3]2+,而TPA自身被氧化成二丙胺和丙醛。
激发态的[Ru(bpy)3]2+通过荧光机制衰减,发射出一个波长620nm的光子,重新生成基态的[Ru(bpy)3]2+。
设备维修DEVICE MAINTENANCE引言Cobas-E411型电化学发光免疫分析仪由分析仪和控制装置组成。
该仪器采用最先进的电化学发光技术,对体外多种物质进行定量测定,具有全自动、随机存取、条形码识别、软件智能控制系统,有较高的灵敏度和较宽的检测范围,应用专利的包被技术、独特的载体、稳定的发光配套试剂[1]。
检测速度为86个测试/h,可同时检测18个项目。
仪器在运行过程中,若出现报警信息,屏幕上方状态栏的颜色会发生改变并有报警声音提示。
因采用原装进口配套试剂,测定成本较高,而当仪器出现机械故障时所有检测操作会立刻被停止,还未测试出结果的项目因此被废止。
为充分有效利用资源,避免仪器故障发生,减少损失,保证仪器正常运行,工作人员需要认真总结仪器维修和保养经验,及时排除故障[2]。
1 罗氏Cobas-E411型电化学发光免疫分析仪基本工作原理电化学发光免疫分析是基于对抗原和抗体的特异性反应进行的检测[3],通过抗原、抗体反应和磁珠分离技术的特点,增强放大效应显示物质的性质与含量。
其原理是:仪器通过机械抓手把分析吸头、反应杯抓取至检测池孵育孔内;分析吸头通过S/R针,吸取样品和试剂并加入反应杯中进行孵育,孵育在37℃±0.3℃下进行,在底物三联吡啶钌[Ru(bpy)2+3]N羟基琥珀酰胺酯和三丙胺(Tripropyl Amine,TPA)作用下,电极阳极表面发生电化学发光反应,两种电化学活性物质同时失去电子发生氧化反应,2价的[Ru(bpy)2+3]标记物被氧化成3价的[Ru(bpy)3+3]的标记物,TPA被氧化成阳离子自由基TPA+*,TPA+*不稳定,自发地失去一个质子而形成自由基TPA*,其为强还原剂,将一个电子给3价的[Ru(bpy)3+3],使其成为激发态的Ru(bpy)2+3,而TPA自身被氧化成氧化产物。
激发态罗氏Cobas-E411型全自动电化学发光免疫分析仪常见故障维修分析三例李迎军,李滢超,马各富昆明医科大学第二附属医院石林天奇医院检验科,云南石林 652200[摘 要] 罗氏Cobas-E411型电化学发光免疫分析仪由于高频率的使用,导致了较高的故障发生率。
罗氏cobase 411电化学发光仪使用体会及常见报警故障处理汪兴周;袁招红;刘士文【摘要】电化学发光是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫之后的新一代免疫标记测定技术,其原理是采用双抗夹心原理,将形成的抗原抗体复合物通过生物素与链霉素亲和素间的反应结合到微粒上,在测量池中,微粒通过磁铁吸附到电极上经清洗电极加电压产生化学发光,光电倍增管将其测定到的发光强度自动对应标准曲线,查出结果,整个检测结果仅18分钟.罗氏Cobase 411全自动电化学发光免疫分析仪罗氏公司开发制造的产品,我院于2010年5月引进该仪器,经过近一年的使用,我们认为该仪器具有线性范围宽、准确性灵敏度高、检测速度快等特点.笔者将在使用过程中的体会及常见报警故障分析处理介绍如下.【期刊名称】《赣南医学院学报》【年(卷),期】2012(032)001【总页数】1页(P117)【作者】汪兴周;袁招红;刘士文【作者单位】江西省赣州市第三人民医院检验科,江西赣州341000;江西省赣州市第三人民医院检验科,江西赣州341000;江西省赣州市第三人民医院检验科,江西赣州341000【正文语种】中文【中图分类】R446.6电化学发光是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫之后的新一代免疫标记测定技术,其原理是采用双抗夹心原理,将形成的抗原抗体复合物通过生物素与链霉素亲和素间的反应结合到微粒上,在测量池中,微粒通过磁铁吸附到电极上经清洗电极加电压产生化学发光,光电倍增管将其测定到的发光强度自动对应标准曲线,查出结果,整个检测结果仅18分钟。
罗氏Cobase 411全自动电化学发光免疫分析仪罗氏公司开发制造的产品,我院于2010年5月引进该仪器,经过近一年的使用,我们认为该仪器具有线性范围宽、准确性灵敏度高、检测速度快等特点。
笔者将在使用过程中的体会及常见报警故障分析处理介绍如下。
1.1 罗氏发光仪试剂昂贵,每盒试剂达到厂家设定的测定数后,试剂盒还能够剩下一些试剂,此时把白色条码撕去,将试剂盒黑色条码手工注册后,该试剂盒还能检测一定数量的样本,可以节约成本。