白僵菌高孢粉生产技术及在农林业生物防治上的应用
1 白僵菌高孢粉生产流程和技术要点
土洋结合法生产工艺流程，主要包括以下技术环节。即原种筛选及固定、初级原种培养、中期菌液扩大、固体料扩大、高孢粉干燥、原粉提取、成品检验和包装。
1.1 原种筛选及固定人工选育或在林区选定被菌粉感染的僵虫或僵蛹，通过培养、分离和转种，即可得到高品质菌原种。
1.2 原种培养
1.2.1 营养料的配制取米粉35份、糖4份、琼脂4份、水适量（pH值自然），将米粉放入清水中煮沸，继之选用干净纱布过滤去剩余物残渣，然后加入琼脂、糖，经过充分搅拌，等待琼脂溶化后再装入试管内，盖好试管塞；营养料灌入量以试管容积的1/5为宜，5～10支一捆放人高压灭菌锅中进行高温灭菌30min，并将其趁热摆成斜面，以便于后面的接种。
1.2.2 转种和培养严格要求在无菌条件下操作，于配制好的试管培养基中接入高品质菌原种，将其置于25℃温度下培养。经过1～2d后，菌丝即可基本布满料面；3～5d后开始形成孢子，此时可适当调高培养室温度，以加速其高品质菌原种孢子的形成，大约有6～8d 的时间即可完成孢子发育。
1.2.3 质量检查高品质菌原种，其菌丝呈白色茸毛状，生长丰满，菌苔光滑平坦，孢子形成快且孢子层厚实，轻轻碰敲试管壁可发现有很多孢子粉掉落或飞扬。
1.3 初级菌种培养营养料的配制与前期相同，将培养好的菌原种接入三角烧瓶中，放在摇床上震动，温度控制在25～28℃，培养48h。
1.4 中期菌液扩大
1.4.1 营养液的配制按照玉米面∶麦麸∶水=2∶3∶10的比例，放入铁制培养罐中搅拌均匀后煮熟、过滤，再将其装入60只铝制罐中（每只铝制罐10～12kg），采用高压灭菌30min 后备用。
1.4.2 转种培养在确保无杂菌污染的条件下，将优质菌种接入已经准备好的营养液中，完成接种后将瓶子放置于25～28℃条件下进行培养，环境温度不得超过32℃，否则易造成所接种的菌种死亡；培养48h待菌丝长满瓶壁，良好的菌液呈显酱红色、粘稠状，此时结束培养，将其移放到比较安全的地方待用。
1.5 固体转种生产
1.5.1 固体基料的配制按麸皮∶谷壳∶大米=4∶4∶2比例，拌匀后装入线制麻袋（每袋15～25kg为宜）扎紧袋口，加温加压灭菌（100℃、2～3h）。
1.5.2 转种生产将灭菌后的固体基料，放入已经过充分消毒的培养生产室内，待料温下降至到25～28℃之间，可在一般的自然环境中进行接种。接种量：菌种和固体基料的比例通常控制在15∶100。接种时需要多人配合，1人操作倒出菌种，多人辅助进行手工拌料，菌种和固体基料经过充分手工拌匀后倒入木质或塑料盘中拌好、铺平，厚度要求控制在3～4cm之间。
1.5.3 白僵菌生长期间管理白僵菌生长期间，根据其不同的生长阶段，要合理控制好温度，这是大床发酵成败与否的关键，适时进行上下调盘，保证菌丝生长均衡匀称。
1.5.3.1 孢子产生期间其孢子产生前期最合适的温度是在24～26℃，在生长的第1阶段（即孢子萌芽前期），必须将环境温度控制在21～23℃范围内，因为此阶段不产生热量，所以室温约高于料温2～3℃，从而满足了此期间对温度的要求。到了孢子萌芽阶段，特别是在转种24h之内，一定要严格控制料温，维持在25℃以下就能有效地阻止杂菌污染。
1.5.3.2 菌丝生长中期当孢子萌芽后，其芽管迅速增长而转入菌丝生长中期，若条件适宜接种48h菌丝快速生长，可以布满整个料盘，此时固体料开始凝结成块；由于菌丝生长产生较多热量，会导致料温快速上升，48h达30～35℃，达到最高峰值；以后稳定至72h左右，菌丝生长基本结束。料盘内外都呈现出一片白色菌丝层。此阶段应严格控制温度在33℃以下，一旦超过33℃虽然菌丝生长旺盛，但会导致菌丝死亡或固化，不产生孢子或孢子量少。
1.5.3.3 孢子生长阶段菌丝生长发育结束（即接种72h）后，很快转入孢子生长阶段。孢子产生的最适温度为26℃左右，此阶段培养室温度应控制在26～28℃；因为此时料温已经恒定，约高于室温2～3℃，固体菌料会逐渐变干，通常在第7d即可出料。将固体菌料倒扣在铺有报纸的竹席上，放置于室温30～35℃的干燥通风房间内，至第10d孢子达到充分发育，固料呈现白色松散状态，即可进行下一步的干燥处理。
1.6 高孢粉干燥通常放在室内或大棚通风处阴干，或在室内低温干燥，时间约为7～10d。
1.7 原粉提取利用负压原理，将干燥好的混合菌料进行一、二、三级提取，一级分离稻壳、麦麸，二级分离破碎稻壳、麦麸及其它细料，三级收集高孢粉（孢子含量1 000亿个/g）
1.8 产品质量检查
1.8.1 直观检查用手指接触到高孢粉产品时有光滑感，白色略黄粉雾飞扬，粉雾越浓，说明孢子含量越高、质量越好。
1.8.2 镜检在显微镜下检查高孢粉产品的孢子含量，成品含活孢子数1 000亿/g以上为好。
1.9 产品包装高孢粉产品干燥后，要求用双层塑料袋密封包装，以防其回潮；要将其放在低温干燥处或冷藏，不能多层叠放，以免因孢子的吸呼作用增温而引起孢子死亡。
2 白僵菌高孢粉在生物防治中的应用
利用白僵菌高孢粉防治或预防农林业害虫，已有较长的历史。白僵菌的孢子能够在任何条件通过感染达到杀灭害虫的目的。据调查，白僵菌在我国可寄生15个目、159个科的800余种昆虫，对自然环境比较安全，长期使用害虫也产生不了抗药性，并可与许多化学农药（杀虫剂、杀螨剂、杀菌剂等）同时或混合使用。目前白僵菌已广泛用于松毛虫、玉米螟、蛴螬、蝗虫、马铃薯甲虫、松褐天牛、茶蝉、桃小食心虫等农林害虫防治。
2.1 白僵菌对森林害虫的感染机理白僵菌感染害虫的方式主要通过皮肤而进入体内，但个别也通过消化道或气孔感染虫体。白僵菌孢子附着于寄主表皮，当满足条件时就开始感染，生出芽管，同时分泌胞外蛋白酶等多种酶溶解昆虫表皮，以利于芽管的侵入。渐渐生长为菌丝，直接吸取昆虫体内养分而生长，菌丝又生长出新的孢子。如此反复感染、循环，使昆虫血淋巴中到处游离着这种菌丝和孢子，从而中断昆虫体内的血液循环。菌丝代谢产物草酸盐类在血液中渐渐积累，造成血液的酸碱度下降，引起理化性质的改变，最终导致昆虫的死亡和干枯。
2.2 白僵菌高孢粉在林业害虫防治中应用（以皖东马尾松毛虫防治为例）
2.2.1 施菌季节和天气白僵菌在22～28℃、相对湿度80%的条件下生长、发育良好，为此皖东地区主要选择在4月份至越冬代幼虫期使用，以及第一代幼虫（6月上旬）、第二代幼虫（9月下旬）发生时使用。施菌时间一般在阴雨天后或早晨露水未干时或傍晚时分，微风有利于菌粉扩散、释放。
2.2.2 施菌方式和用量白僵菌可重复扩散、感染、蔓延，施菌时，首先要摸清虫情，找准虫源地，根据虫口密度和虫株率大小，分别采取机械或人工全面喷洒、带状喷洒、点状喷洒，原粉用量10～15g/667m2，可稀释后使用。
2.2.3 防治效果根据滁州市采用我厂生产的白僵菌高孢粉防治马尾松毛虫试验，松毛虫能持续、重复感染，造成不同虫龄的活体松毛虫大量死亡，并且安全、无污染，对人蓄无害，防治效果一般可达85%以上，局部可达100%，连续使用效果更佳。可用于长期防治大面积、低虫口密度马尾松林松毛虫危害，做到有虫不成灾。
2.3 白僵菌高孢粉在农业害虫防治中的应用（以吉林玉米螟防治为例）
2.3.1 菌种剂型筛选根据不同地区玉米螟田间发生、危害规律及各种因素的影响，可选择不同的剂型。目前有4种粉、液剂剂型可用于大田玉米种植区选择；有2种粉、液剂剂型可供玉米（甜、粘玉米）分期播种田防治玉米螟选择。
2.3.2 防治方法防治方法有2种，分别是喷粉和喷雾。一是封垛（秸秆垛）防治法，主要是针对玉米秸秆垛内的越冬代老熟幼虫，杀死越冬玉米螟老熟幼虫，降低化蛹率。在冬末春初越冬幼虫刚刚复苏化蛹前（有越冬幼虫爬出洞口活动中），对残存的秸秆，逐垛喷撒高孢原粉封垛进行防治。用量是每m2垛面用含1 000亿/g孢子的菌粉10～15g喷一个点，方法是将喷粉管插入垛内，摇动，当垛面冒出菌粉即可。也可用含1 000亿/g孢子的白僵菌粉加滑石粉或草木灰按1∶100充分混匀，每667m22～3kg，用机动或手摇喷粉器喷粉。二是在玉米生长心叶末期，应用高孢粉粉剂或液剂向植株喷粉或喷雾，防治玉米螟第一代幼虫。三是
