哺乳动物核移植研究进展
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通 讯作者 ： 白秀娟 ， ， 女 教授 。
停滞于 ＭⅡ 期的卵母细胞继续发育 ，这一过程称为 卵母细胞的激活。以成熟卵母细胞 为受体的核移植
一
９ 一
的 卵裂 球 ， １ ９ 在 ９ ７年 Ｗｉ ｔ 报 道 “ ｌ 等 ｍｕ 多莉 ” 之 前 羊
激活 、 去核 、 细胞 核移 植 、 融合 一激 活 、 重构 胚 的体外 内进 行 重编 程 ， 以恢 复其 全 能性 ， 卵母 细 胞 的成 熟 而 程度 则会 直 接影 响体 细 胞 的重 编程 过程 。所 以卵母 细胞 的 体外 成熟 ，作 为 体细 胞核 移 植 过程 中的一 个 目前 关 于哺 乳动 物 卵母 细胞 的体 外 成熟 还 存 在
从 目前 的研 究 来看 ，似乎 应用 处 于各 个 细胞 时
个体Ⅲ 。新个体具有与供体完全相 同的基因型 ， 即新 相的细胞都能得到克隆动物 ，但还没有一种伴随核
个 体具 有 与供体 完全 相 同的遗 传物 质 。因此 ， 移植 移植动物出生的细胞周期专一性标记物来证 明核移 核 技 术在 动 物育 种 、 备 转基 因动 物 、 因治 疗 和器 官 植所 得 后代来 源 于某 一个 特定 细胞 时相［ 因此深 人 制 基 ８ １ 。 细 同步化 处理 方 式 以及 移 植等 方面 具有重 大作 用ｆ 哺乳动 物核 移植 技术 可 研究 供 体 细胞类 型 、 胞周 期 、 ２ １ 。 以根据 供核 细 胞 的不 同分 为胚 细胞 核移 植 和体 细 胞 细胞 的倍增 时 间等 在 核移植 胚 胎发 育 过程 中所起 的
究认为供体细胞处于 Ｇ Ｏ期［ ５ １ 是体细胞 核移植 成功 １ ． 卵母 细胞 的激 活 ．２ ２
收 稿 日期 ：０ ９ ０ — １ ２０ — ９ ２
自然状 况 下或 体 外受 精 时 ，精子 的进入 会 启 动
作者简 介 ： 宁方勇（９ ７ ）男 ， １７ 一 ， 讲师 ， 士。 硕
学意义 和应 用价值 重 大。本 文根 据近 年 来 国 内外 的研 究进展 ， 对核 移植 技 术 步骤 、 移 植研 究概 况 核
及目 前核移植研 究中存在 的问题作一综述 ， 希望能够对从事核移植研究的 同行有所帮助。
关键 词 ： 哺乳 动物 ； 核移植 ； 究进 展 研 中图分 类号 ：８ ４８ ￥ １． 文献标 识码 ： Ｂ 文章 编 号 ：０ ５ ２ ３ （ ０ ０ Ｏ — ０ ９ ０ １０ — ７ ９ ２ １ ）１ ０ ０ — ３
哺 乳 动 物 核 移 植 研 究 进 展
宁方勇 ， 王
（ ． 北农 业 大 学 动 物科 技 学 院 ， 龙 江 １ 东 黑
星 ：杜智 恒 杨春 山 ， ， ， 白秀娟
哈尔滨 １０ ３ ； ． 东 学 院农 学 院 ， 宁 ５０ ０ ２辽 辽 丹东 １ ８０ ） １０ ３
摘
要 ： 乳动 物核 移植 （ ｕ ｌａ ｒｎｐａ ｔ ｉｎ Ｎ ） 目前 生物技 术领 域 研 究 的 热点 之 一 ， 哺 Ｎ ｃｅｒ ａ ｓｌｎａ ｏ ， Ｔ 是 Ｔ ｔ 其科
组建 一个新 的胚 胎 。 这个 胚 胎称 为重 组胚 或克 隆胚 。 移 植 中供 体 细胞 的类 型 和基 因 型对移 植 效率 也 有较
克隆 胚被 激 活后 ， 供体 细胞 Ｄ Ａ可 以像正 常 受 精卵 大影 响［ Ｎ ７ ］ 。
一
样 ， 细胞 分裂 ， 化并 在母 体 内发 育成 一 个新 的 经 分
哺 乳 动 物 核 移 植 就 是 人 们 通 常所 说 的动 物 克 所必 需 的 ，并指 出 可通 过选 择 细胞类 型 或 人工 诱 导 隆， 是指 通过 显 微操 作 的方法 ， 早 期胚 胎分 离 一个 两种 方法 来 获得 Ｇ 从 Ｏ期 细胞 。然 而近来 发 现 ， 经 休 未 或 ２甚 至 Ｍ期 供 体 细 胞 的核 移植 也 卵裂 球或 分 离一个 培 养 的体 细胞 ，通 过显 微 操作 仪 眠诱 导 的 Ｇ１ Ｇ ６ １ 此 同时 ， 。与 研究 还 发现 在小 鼠的 核 将其 注入 到去 核 卵母 细胞 的胞 质 或透 明带 下 ，重新 均获得 了 成 功［
用 于 核移 植 的细胞 有 多种 ，最 早 采用 早 期胚 胎 关 键环 节 而为人 们所 关 注 。 主要 是 以此 类 细胞 作 为供 核 。这 些细 胞具 有 全 能性 很 多 的 问题 ，有 人提 出将 卵母 细胞 的成 熟 分为 ３个 核 胞质 的成 熟 、 分子 的成熟 。目前 对 卵 或 多能 性 ， 相对 来说 核 移植 的成 功 率高 １ 目前用 于 方 面 ： 的成 熟 、 ３ １ 。 核 供体 的 主要有 卵 丘 细胞 、睾 丸支 持 细胞 、精 子 细 母 细 胞 的 成熟 的判 断 只是 通 过形 态 学上 的观 察 ， 或
胞 、脑 细胞 、胎 儿 或成 体成 纤 维细 胞 、胚 胎 干细 胞 者 通过 对 囊胚 率 、受 孕率 及 产仔 率来 进 行验 证 性地
（Ｓ Ｅ 细胞 ） 。供体与受体细胞 的细胞周期发育 同 判断 ， 等 而要从根本上解决卵母细胞的体外成熟 问题 ，
９ １ 。 步化是影响核移植成败的一个重要因素 ，早期 的研 还移植 两类 。 １ 哺乳动 物核 移植 的主 要步骤
作用 显得 异 常重要 。
１ 卵母 细胞 的体外 成熟 及激 活 ． ２ 体 细胞 核移 植 中体 细胞 必须 在 去 核 的卵母 细 胞
哺乳 动 物 核 移植 技 术 包 括 一 系 列 复 杂程 序 ： 供 １ ． 卵母 细胞 的体 外成 熟 ．１ ２ 体 细胞 的选 择 与体外 培养 、卵母 细胞 的体外 成 熟及 培养 和胚胎 移植 。 １ 供 体细胞 的选择 与体 外培养 ． １
停滞于 ＭⅡ 期的卵母细胞继续发育 ，这一过程称为 卵母细胞的激活。以成熟卵母细胞 为受体的核移植
一
９ 一
的 卵裂 球 ， １ ９ 在 ９ ７年 Ｗｉ ｔ 报 道 “ ｌ 等 ｍｕ 多莉 ” 之 前 羊
激活 、 去核 、 细胞 核移 植 、 融合 一激 活 、 重构 胚 的体外 内进 行 重编 程 ， 以恢 复其 全 能性 ， 卵母 细 胞 的成 熟 而 程度 则会 直 接影 响体 细 胞 的重 编程 过程 。所 以卵母 细胞 的 体外 成熟 ，作 为 体细 胞核 移 植 过程 中的一 个 目前 关 于哺 乳动 物 卵母 细胞 的体 外 成熟 还 存 在
从 目前 的研 究 来看 ，似乎 应用 处 于各 个 细胞 时
个体Ⅲ 。新个体具有与供体完全相 同的基因型 ， 即新 相的细胞都能得到克隆动物 ，但还没有一种伴随核
个 体具 有 与供体 完全 相 同的遗 传物 质 。因此 ， 移植 移植动物出生的细胞周期专一性标记物来证 明核移 核 技 术在 动 物育 种 、 备 转基 因动 物 、 因治 疗 和器 官 植所 得 后代来 源 于某 一个 特定 细胞 时相［ 因此深 人 制 基 ８ １ 。 细 同步化 处理 方 式 以及 移 植等 方面 具有重 大作 用ｆ 哺乳动 物核 移植 技术 可 研究 供 体 细胞类 型 、 胞周 期 、 ２ １ 。 以根据 供核 细 胞 的不 同分 为胚 细胞 核移 植 和体 细 胞 细胞 的倍增 时 间等 在 核移植 胚 胎发 育 过程 中所起 的
究认为供体细胞处于 Ｇ Ｏ期［ ５ １ 是体细胞 核移植 成功 １ ． 卵母 细胞 的激 活 ．２ ２
收 稿 日期 ：０ ９ ０ — １ ２０ — ９ ２
自然状 况 下或 体 外受 精 时 ，精子 的进入 会 启 动
作者简 介 ： 宁方勇（９ ７ ）男 ， １７ 一 ， 讲师 ， 士。 硕
学意义 和应 用价值 重 大。本 文根 据近 年 来 国 内外 的研 究进展 ， 对核 移植 技 术 步骤 、 移 植研 究概 况 核
及目 前核移植研 究中存在 的问题作一综述 ， 希望能够对从事核移植研究的 同行有所帮助。
关键 词 ： 哺乳 动物 ； 核移植 ； 究进 展 研 中图分 类号 ：８ ４８ ￥ １． 文献标 识码 ： Ｂ 文章 编 号 ：０ ５ ２ ３ （ ０ ０ Ｏ — ０ ９ ０ １０ — ７ ９ ２ １ ）１ ０ ０ — ３
哺 乳 动 物 核 移 植 研 究 进 展
宁方勇 ， 王
（ ． 北农 业 大 学 动 物科 技 学 院 ， 龙 江 １ 东 黑
星 ：杜智 恒 杨春 山 ， ， ， 白秀娟
哈尔滨 １０ ３ ； ． 东 学 院农 学 院 ， 宁 ５０ ０ ２辽 辽 丹东 １ ８０ ） １０ ３
摘
要 ： 乳动 物核 移植 （ ｕ ｌａ ｒｎｐａ ｔ ｉｎ Ｎ ） 目前 生物技 术领 域 研 究 的 热点 之 一 ， 哺 Ｎ ｃｅｒ ａ ｓｌｎａ ｏ ， Ｔ 是 Ｔ ｔ 其科
组建 一个新 的胚 胎 。 这个 胚 胎称 为重 组胚 或克 隆胚 。 移 植 中供 体 细胞 的类 型 和基 因 型对移 植 效率 也 有较
克隆 胚被 激 活后 ， 供体 细胞 Ｄ Ａ可 以像正 常 受 精卵 大影 响［ Ｎ ７ ］ 。
一
样 ， 细胞 分裂 ， 化并 在母 体 内发 育成 一 个新 的 经 分
哺 乳 动 物 核 移 植 就 是 人 们 通 常所 说 的动 物 克 所必 需 的 ，并指 出 可通 过选 择 细胞类 型 或 人工 诱 导 隆， 是指 通过 显 微操 作 的方法 ， 早 期胚 胎分 离 一个 两种 方法 来 获得 Ｇ 从 Ｏ期 细胞 。然 而近来 发 现 ， 经 休 未 或 ２甚 至 Ｍ期 供 体 细 胞 的核 移植 也 卵裂 球或 分 离一个 培 养 的体 细胞 ，通 过显 微 操作 仪 眠诱 导 的 Ｇ１ Ｇ ６ １ 此 同时 ， 。与 研究 还 发现 在小 鼠的 核 将其 注入 到去 核 卵母 细胞 的胞 质 或透 明带 下 ，重新 均获得 了 成 功［
用 于 核移 植 的细胞 有 多种 ，最 早 采用 早 期胚 胎 关 键环 节 而为人 们所 关 注 。 主要 是 以此 类 细胞 作 为供 核 。这 些细 胞具 有 全 能性 很 多 的 问题 ，有 人提 出将 卵母 细胞 的成 熟 分为 ３个 核 胞质 的成 熟 、 分子 的成熟 。目前 对 卵 或 多能 性 ， 相对 来说 核 移植 的成 功 率高 １ 目前用 于 方 面 ： 的成 熟 、 ３ １ 。 核 供体 的 主要有 卵 丘 细胞 、睾 丸支 持 细胞 、精 子 细 母 细 胞 的 成熟 的判 断 只是 通 过形 态 学上 的观 察 ， 或
胞 、脑 细胞 、胎 儿 或成 体成 纤 维细 胞 、胚 胎 干细 胞 者 通过 对 囊胚 率 、受 孕率 及 产仔 率来 进 行验 证 性地
（Ｓ Ｅ 细胞 ） 。供体与受体细胞 的细胞周期发育 同 判断 ， 等 而要从根本上解决卵母细胞的体外成熟 问题 ，
９ １ 。 步化是影响核移植成败的一个重要因素 ，早期 的研 还移植 两类 。 １ 哺乳动 物核 移植 的主 要步骤
作用 显得 异 常重要 。
１ 卵母 细胞 的体外 成熟 及激 活 ． ２ 体 细胞 核移 植 中体 细胞 必须 在 去 核 的卵母 细 胞
哺乳 动 物 核 移植 技 术 包 括 一 系 列 复 杂程 序 ： 供 １ ． 卵母 细胞 的体 外成 熟 ．１ ２ 体 细胞 的选 择 与体外 培养 、卵母 细胞 的体外 成 熟及 培养 和胚胎 移植 。 １ 供 体细胞 的选择 与体 外培养 ． １
