当前位置：文档之家 › 不同缓冲体系的牛血清白蛋白插层蒙脱石效果

不同缓冲体系的牛血清白蛋白插层蒙脱石效果

  • 格式：pdf
  • 大小：359.79 KB
  • 文档页数：6

第３０卷第６期２００９年１１月华侨大学学报（自然科学版）ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｕａｑｉａｏＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ）Ｖ０１．３０Ｎｏ．６Ｎｏｖ．２００９

文章编号：１０００－５０１３（２００９）０６－０６６１—０４

不同缓冲体系的牛血清白蛋白插层蒙脱石效果

吕英海，周仕学，李桂江，王斌，吕东琴

（山东科技大学化学与环境工程学院，山东青岛２６６５１０）

摘要：利用离子交换的原理，研究等电点两侧的不同ｐＨ值、不同缓冲体系对牛血清白蛋白插层蒙脱石效果的影响．结果发现，ｐＨ值对蒙脱石插层影响显著．在采用低于蛋白质等电点的ｐＨ值且利用乙酸一乙酸钠作为缓冲体系时，蛋白质的插层容易造成蒙脱石层问的剥离．等电点两侧的ｐＨ值不同，会造成蛋白质插入量的显著差异．热重分析表明，蛋白质／蒙脱石复合物的热稳定性有一定程度的提高．关键词：蒙脱石；牛血清白蛋白；插层；ｐＨ值；缓冲液中图分类号：ＴＢ３８３．０２１文献标识码：Ａ

纳米复合材料中一相为有机聚合物，另一相为无机相时，称为有机一无机纳米复合材料．这种复合材

料不是有机相与无机相的简单混合，而是两相在纳米尺寸范围内复合而成的，从而产生许多特异的性能，在生物学等领域展现出广阔的应用前景［１。３］．蒙脱石（ＭＭＴ）具有耐化学溶剂、粒径小、晶层可被嵌

入、比表面积大和易于吸附分子等特点［４］．通过离子交换反应，可改变ＭＭＴ晶体表面的化学性质，这为制备蛋白质／蒙脱石混杂复合材料奠定了基础．牛血清白蛋白（ＢＳＡ）晶体呈等边三角形（宽为１４ｎｍ，高

为４ｎｍ），在溶液中的等电点为４．８［５］．ＢＳＡ可与多种阳离子、阴离子及其他小分子物质结合，常用作研究蛋白质复合材料的模式蛋白；ＢＳＡ可以逐步插层［５］进入蒙脱石．研究ＢＳＡ与蒙脱石的相互作用，有

助于了解酶与粘土矿物的作用机制［６］，对药物负载、可降解材料等方面的研究也具有重要意义．本文主要研究不同ｐＨ值下，不同缓冲体系对牛血清白蛋白插层蒙脱石效果的影响．

１实验部分

１．１材料

钠基蒙脱石（吉林省长春市），利用静沉降法提纯蒙脱石原土，提纯后加人体积分数为１０％的

Ｈｚ０２，煮２ｈ以去除有机物，过２００目筛备用；牛血清白蛋白（分析纯，美国Ｓｉｇｍａ有限公司），在分析天平上准确称量少量牛血清白蛋白，溶解到１００ｍＬ蒸馏水中，按照Ｆｏｌｉｎ酚方法测定蛋白质标准曲线［７３；

其他药品均为分析纯．

１．２蒙脱石对牛血清白蛋白的吸附分别配制浓度为０．０５ｍｏｌ·Ｌ一，ｐＨ值为４．６的乙酸一乙酸钠、磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液；ｐＨ值

为６．２的磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液、磷酸氢二钠一磷酸二氢钠缓冲液体系．量取４０ｍＬ缓冲液，加入一

定量去有机物蒙脱石，然后加入３倍质量的ＢＳＡ，超声振荡１５ｍｉｎ，混匀，静置１２ｈ，离心分离沉淀，取

出上清液；然后，用去离子水对沉淀物洗涤一次，合并上清液；最后，利用Ｆｏｌｉｎ法测定上清液中蛋白质含量［８］，沉淀于５０℃烘４８ｈ，研磨至粒径小于０．０７４ＩＴｌｒｌｌ备用．１．３复合材料的表征

晶体结构表征：采用ＴＤ－３０００型Ｘ射线衍射仪（中国辽宁）扫描，钴靶，管电压为３０ｋＶ，管电流为

２０ｍＡ，扫描范围为２＂一３０（。），扫描速度为２（。）·ｍｉｎ～．官能团分析：采用５１０Ｐ型傅里叶变换红外光

收稿日期：２００９－０２—２３通信作者：周仕学（１９６６一），男，教授，博士生导师，主要从事矿物材料的研究．Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈｏｕｓｈｉｘｕｅ６６＠１６３．ｃｏｍ．

基金项目：国家自然科学基金资助项目（５０５７４０５４）；山东科技大学春蕾计划（２００８ＡＺｚ０７５）

　万方数据６６２华侨大学学报（自然科学版）２００９年

谱仪（美国Ｎｉｃｏｌｅｔ公司）扫描，ＫＢｒ压片．热失重分析（ＴＧＡ）：采用ＴＧＡ／ＳＤＴＡ／８５１Ｅ型热分析仪（瑞

士梅特勒一托利多公司），升温速率为１０℃·ｍｉｎ～，氮气氛围，扫描范围为３０－－－９００℃．

２结果与讨论

２．１Ｘ射线衍射分析

不同ｐＨ值的缓冲液体系，ＢＳＡ插层蒙脱石而得到的复合材料的ｘ射线衍射（ＸＲＤ）谱图，如图１所示．在无水状态下，测得的钠基蒙脱石（００１）面衍射峰位于８．２（。），由Ｂｒａｇｇ方程ｎ２＝２ｄｓｉｎ０，可推导

出ｄ（。。１）约为１２．５×１０－１０札在ｐＨ值为４．６时，使用磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液，层间距为４２．７×１０＿１０ｍ；而使用乙酸一乙酸钠缓冲液体系，则蒙脱石剥离完全．在ｐＨ值为６．２时，使用磷酸氢二钠一柠檬酸缓

冲液，层间距为２７．２×１０—１０ｍ；而使用磷酸氢二钠一磷酸二氢钠缓冲液体系层间距为３２．３×１０＿１０１１１．

。八ｈ．．Ｍ。Ｕ。～＾．州．２的磷酸缓冲液／１＼—～一一一一一＿，ｈ一一一一ｐＨ＝６．２的柠檬酸缓冲液７＼～．＾～一．。ｐＨ＝４．６的柠檬酸缓冲液

图１ＢＳＡ插层蒙脱石的ＸＲＤ谱图

Ｆｉｇ．１ＸＲＤｐａｔｔｅｒｎｓｏｆＢＳＡ－ｉｎｔｅｒｃａｌａｔｅｄｍｏｎｔｍｏｒｉｌｌｏｎｉｔｅ通过上面数据可以看出，不同缓冲体系对牛血清白蛋白插层蒙脱石有较大影响．乙酸一乙酸钠缓冲

液体系作用明显强于磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液，磷酸氢二钠一磷酸二氢钠缓冲液与磷酸氢二钠一柠檬酸

缓冲液插层效果差距不大，但磷酸氢二钠一磷酸二氢钠缓冲液的效果更明显．乙酸缓冲液作用明显的原

因，可能是因为乙酸含的氢原子比例高于柠檬酸，增加了氢原子与蒙脱石内部的氧原子形成氢键数目，而且乙酸与柠檬酸相比分子体积小，易进入蒙脱石层间．这些可能都是有助于ＢＳＡ／ＭＭＴ剥离的一个

重要因素．由此可见，不同基团间的化学键合、分子间的作用力（包括氢键等）、极性等性质［９］，对ＢＳＡ／

ＭＭＴ间的相互作用影响显著．

不同ｐＨ值的ＢＳＡ插层蒙脱石，如图２所示．蒙脱石对带电荷的蛋白质或氨基酸的吸附，是通过粘土表面上的负电荷与蛋白质上的正电荷的静电吸引完成的．蛋白质的两性离子所带电荷，因溶液的

ｐＨ值不同而改变．等电点是指两性离子净电荷为零时溶液的ｐＨ值，牛血清白蛋白的等电点为４．８．

当ｐＨ值为４．６时，牛血清白蛋白带正电荷，而蒙脱石带负电荷，蒙脱石与ＢＳＡ静电作用强烈，大量

ＢＳＡ嵌入蒙脱石，导致蒙脱石层间结合力降低．蒙脱石片层由于ＢＳＡ嵌入，容易导致层间的剥离．当ｐＨ值为６．２时，此时的ＢＳＡ带负电荷多于正电荷，仅依靠少量正电荷基团作用而插入蒙脱石层间，蒙

图２ＢＳＡ插层蒙脱石的图解

Ｆｉｇ．２ＣｏｎｃｅｐｔｕａｌｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＢＳＡ－ｉｎｔｅｒｃａｌａｔｅｄ

ｍｏｎｔｍｏｒｉｌｌｏｎｉｔｅ

　万方数据第６期吕英海，等：不同缓冲体系的牛血清白蛋白插层蒙脱石效果６６３

脱石层间距稳定在３２．Ｏ×１０＿１０ＩＴＩ左右．２．２傅里叶变换红外光谱分析

牛血清白蛋白、蒙脱石，以及经过不同方式处理的ＢＳＡ／ＭＭＴ复合材料，其傅里叶变换红外光谱（兀－ＩＲ）如图３所示．图３中，蒙脱石的３６００～３６５０ｃｍ－１为自由羟基Ｏ—Ｈ的伸缩振动，是一个尖锐

吸收峰，在蒙脱石中表现非常突出．在ｐＨ值为

６．２的复合材料中表现非常明显，但在ｐＨ值为４．６的复合物中则表现不够明显．３２００～３５００ｃｒｉｂ－１为分子问氢键Ｏ—Ｈ伸缩振动，复合物中

由于有机物的存在而使峰型漫散．在ｐＨ值为６。２的磷酸缓冲液和ｐＨ值为

４．６的乙酸缓冲液条件下得到的复合物，以及牛

血清白蛋白都具有明显的蛋白质的特征峰．即

１６９０ａｍ叫为酰胺Ｉ带，由于氢键缔合而偏移至１蚴～１６５０锄＿。，１５３０～１５５０ａｍ－１为仲酰胺Ⅱ带特征峰，１２６０＂－－１３００ｃｍ－１为酰胺Ⅲ带图３ＢｓＡ插层蒙脱石的红外光谱图

Ｆｉｇ．３ＩＲｓｐｅｃｔｒａｏｆＢＳＡ－ｉｎｔｅｒｃａｌａｔｅｄｍｏｎｔｍｏｒｉｌｌｏｎｉｔｅ

特征伸缩振动峰，２９５９ａｍ．１为烷基的不对称伸缩振动［１０］．１０３７ｃｍ－１处的峰为ｓｉ—ＯＨ伸缩振动峰，

是蒙脱石的特征峰，在复合材料中表现很突出．

综上所述，复合物具备蒙脱石和蛋白质的特征峰，而且ｐＨ值的不同复合物，其羟基伸缩振动峰差异明显，但分子间氢键Ｏ—Ｈ伸缩振动都得到加强．

２．３热重分析

ＢＳＡ和ＢＳＡ／ＭＭＴ纳米复合材料的热重分析（ＴＧＡ）谱图，如图４所示．复合物与蒙脱石相比都有较大程度的失重，其中ｐＨ值为４．６的乙酸缓冲液复合材料的失重比例更大一些．

复合物的导数热重（ＤＴＧ）曲线，如图５所示．从图５可看出，出现了两个明显的峰，第１个为水的蒸

发吸热，第２个为蛋白质的分解峰．由第２个峰的极值点来确定蛋白质的最大分解速率（ｄｗ／ｄｔ）。．。时的温度‰，ＢＳＡ的‰为３２６℃，而蛋白质／蒙脱石复合物的‰为３５６℃（ｐＨ＝６．２）．‰有了一定程度

的提高，可以认为在一定程度上，蒙脱石提高了蛋白质的热稳定性．

图４ＢＳＡ插层蒙脱石的ＴＧＡ分析图Ｆｉｇ．４劂ｏｆＢＳＡ－ｉｎｔｅｒｃａｌａｔｅｄｍｏｎｔｍｏｒｉｌｌｏｎｉｔｅ

２。４吸附量分析÷暑’暑岛量Ｔ专毒

图５ＢＳＡ插层蒙脱石的ＤＴＧ分析图

Ｆｉｇ．５ＤＴＧｏｆＢＳＡ－ｉｎｔｅｒｃａｌａｔｅｄｍｏｎｔｍｏｒｉｌｌｏｎｉｔｅ

通过Ｆｏｌｉｎ酚法测定ＢＳＡ的吸附量，利用差减法可以得出，ｐＨ值为４．６时，蒙脱石吸附量为１．４２３

ｇ·ｇ＿１；ｐＨ值为６．２时，蒙脱石吸附量为１．０５９ｇ·ｇ～．由此可见，ｐＨ值对ＢＳＡ插层蒙脱石影响显

著，低于蛋白质等电点时，蛋白质的附着量远高于等电点的ｐＨ值的吸附量．

３结论

复合材料的表征充分证明，虽然ＢＳＡ分子相对分子质量很大，但仍可以插层进入蒙脱石中形成了

　万方数据６６４华侨大学学报（自然科学版）２００９年

ＢＳＡ／ＭＭＴ纳米复合物．蒙脱石的剥离与ｐＨ值关系密切，低于蛋白质等电点的ｐＨ值有利于蒙脱石

的剥离，高于等电点的ｐＨ值不利于蒙脱石的剥离．在不同ｐＨ值下，蛋白质插层量差异显著．不同的缓冲体系对ＢＳＡ插入蒙脱石影响显著，乙酸一乙酸钠缓冲液体系有利于剥离的实现，而磷酸

氢二钠一柠檬酸缓冲液则不利于剥离的进行．由ＤＴＧ分析可知，蛋白质插层蒙脱石后，复合物热稳定性

有了一定程度的提高．

参考文献：

ＥｌｌＪＵＤＥＩＮＳＴＥＩＮＰ，ＳＡＮＣＨＥＺＣＨｙｂｒｉｄｏｒｇａｎｉｃ—ｉｎｏｒｇａｎｉｃｍａｔｅｒｉａｌｓ：Ａｌａｎｄｏｆｍｕｌｔｉ—ｄｉｓｃｉｐｌｉｎａｒｉｔｙ［Ｊ］．ＪＭａｔｅｒＣｈｅｍ，１９９６，６（４）：５１１－５２５．Ｅ２３［３］［４３Ｅ５３

［６］

［７３［８］

［９］

［１０］ＣＨＡＮＤＲＯＳＳＥＡ，ＭＩＬＬＥＲＲＤ．Ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ：ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＩＪ１．ＣｈｅｍＲｅｖ，１９９９，９９（７）：１６４１—１６４２．洪伟良，刘剑洪，田德余，等．有机一无机纳米复合材料的制备方法［Ｊ］．化学研究与应用，２０００，１２（２）；１３２—１３６．王一中．聚合物／蒙脱土混杂材料的制备及其表征［Ｄ］．北京：北京化工大学，１９９９．ＬＩＮＪＪ，ＷＥＩＪＣ，ＪＵＡＮＧＴＹ，ｅｔａＬＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎ－ｓｉｌｉｃａｔｅｈｙｂｒｉｄｓｆｒｏｍｐｏｌｙａｍｉｎｅｉｎｔｅｒｃａｌａｔｉｏｎｏｆｌａｙｅｒｅｄｍｏｎｔｍｏｒｉｌｌｏｎｉｔｅＦＪ］．Ｌａｎｇｒｎｕｉｒ，２００７，２３（４）：１９９５—１９９９．ＣＨＥＮＧｕｏ－ｊｉｎｇ，ＹＥＮＭｉｎｇ－ｃｈｅｎｇ，ＷＡＮＧＪｅｎ—１１１ｉ１１９，ｅｔａ１．Ｌａｙｅｒｅｄｉｎｏｒｇａｎｉｃ／ｅｎｚｙｍｅｎａｎｏｈｙｂｒｉｄｓｗｉｔｈｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｓｔａｂｉｌｉｔｙｕｐｏｎｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ谢ｔｈｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ［Ｊ］。ＢｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅＣｈｅｍ，２００８，１９（１）：１３８－１４４．郭蔼光，郭泽坤．生物化学实验技术ＥＭ］．北京：高等教育出版社，２００７：６０—６２．Ｌ（）ＺＺＩＩ，ＰＵＣＣＩＡ，ＰＡＮＴＡＮＩｏＬ，ｅｔａＬＩｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆｓｕｓｐｅｎｄｅｄｃｌａｙｆｒａｃｔｉｏｎｉｎｐｒｏｔｅｉｎｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎｂｙｓｅｖｅｒａｌｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓ［Ｊ］．ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００８，３７６（１）：１０８—１１４．ＺＨＡＯＦａｎｇ—ｍｉＩｌｇ，ＸＩ（）ＮＧＣｈｕａｎ—ｘｉ。ＷＥＮＤｉ－ｊｉａｎｇ．Ｒｏｌｅｏｆｔｏｕｇｈｉｎｔｅｒｆａｃｉａｌｌａｙｅｒｓｉｎｆｉｂｒｅｒｅｉｎｆｏｒｃｅｄｃｏｍｐｏｓｉｔｅｓ［Ｊ］．ＪＷｕｈａｎＵｎｉｖｏｆＴｅｃｈ，１９９６，１１（２）：３８—４３．李纯毅，李赞忠，付渊．红外光谱在二茂铁类化合物中的应用［Ｊ］．内蒙古石油化工，２００８（１）：２７－２９．

合集下载

蒙脱石在养猪业中的应用

蒙脱石在养猪业中的应用

2011养猪SWINEPRODUCTION(4)

（2）根据表1中单项得分的结果，在表3中查

出B、C、D、E值，对建议添加量进行校正。

（3）取A、B、C、D和E值中的最高参考添加量，确定为最终的建议添加量。

3应用举例

按表1给表4饲料一打分，黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、T-2毒素和烟曲霉毒素B1单项得分分别为1、2、2、2、1，总分为8，检测项目数

为5项，所以A值为1.6。查表2，推算出霉菌毒素吸

附剂添加量为1kg/t。由于各项得分均没有达到3分，所以该添加量不需要校正，为最终建议添加量。

按表1给表4饲料二打分，黄曲霉毒素B1、玉

米赤霉烯酮、呕吐毒素、T-2毒素和烟曲霉毒素B1单项得分分别为1、4、3、2、1，总分为11，检测项目数为5，所以A值为2.2。查表2，推算霉菌毒素吸附剂

添加量为1kg/t。但由于玉米赤霉烯酮这一项打分

为4分，按表3校正结果，霉菌毒素吸附剂添加量应

修正为2.5kg/t，此为最终建议添加量。4小结

该方法是在实验室检测饲料中霉菌毒素的基础

上，根据检测结果、各种霉菌毒素的危害以及国家对这些霉菌毒素的限量标准，推算出霉菌毒素吸附剂

的建议添加量，从而使饲料厂或养殖场在确定霉菌

毒素吸附剂的添加量时有了科学的依据。几年来的应用情况表明，按照此方法确定霉菌毒

素吸附剂的添加量，在有效地解决了霉菌毒素污染

问题的同时，避免了添加霉菌毒素吸附剂的盲目性，

节约了添加成本，并充分发挥霉菌毒素吸附剂功效。

参考文献：

[1]杨丽梅，申光荣.饲料中霉菌毒素的危害及其预防[J].饲料工业,2003,12:38-40.[2]HuwigA,FreimundS,KappeliO,etal.Mycotoxindetoxicationofanimalfeedbydifferentadsorbents[J].ToxicolLett,2001,122:179-188.[3]JiC.Mycotoxin-relatedfeedandfoodsafety[M].ChemicalIn－dustryPress,2007：87-92.[4]GB13078-2001，饲料卫生标准[S].[5]GB13078.2-2006，饲料卫生标准饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的允许量[S].[6]GB13078.3-2007，配合饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的允许量[S].[7]GB21693-2008，配合饲料中T-2霉毒的允许量[S].（编辑：富春妮）蒙脱石（montmorillonite）又名微晶高岭石，是一

PBS缓冲液的配方

PBS缓冲液的配方

PBS缓冲液的配方

发布日期:2008-11-11 热门指数:865

PBS是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是我的总结：

母液的配制：

0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水

0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水

各种浓度PB(pH=7.4)的配制：

先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml

0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。

然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可，如：

0.1M PB（PH=7.4） ：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。

0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。

0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。

若需要 NaCL 的话，加入 NaCL 至0.9%（g/100ml）即可。

另：其它各种另 PH值的 0.2M PB（100ml)配方 ：

pH 0.2M NaH2PO4（ml） 0.2M Na2HPO4（ml）

5.7 93.5 6.5

5.8 92 8

5.9 90 10

6.0 87.7 12.3

6.1 85 15

6.2 81.5 18.5

6.3 77.5 22.5

6.4 73.5 26.5

6.5 68.5 31.5

6.6 62.5 37.5

6.7 56.5 43.5

6.8 51 49

6.9 45 55

7.0 38 62

7.1 33 67

7.2 28 72

7.3 23 77

7.4 19ml 81ml

7.5 16 84

7.6 13 877.7 10.5 0.5

7.8 8.5 91.5

7.9 7 93

8.0 5.3 94.7

分子生物学常用溶液配制

210995665_蒙脱石的药理作用与医学应用

210995665_蒙脱石的药理作用与医学应用

14 2009年第3期 中国非金属矿工业导刊 总第75期

【开发利用】

蒙脱石的药理作用与医学应用

王桂芳1,2，吕宪俊1，马少健2，邱 俊1，张 帅3

(1.山东科技大学化学与环境工程学院，山东 青岛 266510；2.广西大学资源与环境学院，广西 南宁 530004；

3.中钢矿业开发有限公司，北京 100080)

摘要：本文从蒙脱石结构出发分析了蒙脱石原料药在治疗腹泻、胃炎等疾病中所起到的药理作用，介绍了蒙脱石散剂、

颗粒剂、凝胶剂、混悬剂等制剂研究现状，并提出了蒙脱石原料药在临床实践中应注意的问题。

关键词：蒙脱石；原料药；药理作用

中图分类号：P619.255;R961 文献标识码：A 文章编号：1007-9386(2009)03-0014-03

Pharmacological Action of Montmorillonite

and Its Application in Medicine

Wang Guifang1,2, Lu Xianjun1, Ma Shaojian2, Qiu Jun1, Zhang Shuai3

(1.College of Chemical and Environmental Engineering, SUST, Qingdao 266510, China; 2.College of Resources and Environment,

GXU, Nanning 530004, China; 3.Sinosteel Mining Co.,LTD, Beijing 100080, China)

Abstract: In the paper, from the viewpoint of the structure of montmorillonite, the pharmacological action of montmorillonite

drugs used in treating diseases such as diarrhea, gastritis, is mainly introduced. The research state of the powder, granule, gel and

常见缓冲液的配方

常见缓冲液的配方

一.常用贮液与溶液

1mol/L 亚精胺( Spermidine ): 溶解 2.55g 亚精胺于足量的水中，使终体 积为10ml。分装成小份贮存于-20 Co

1mol/L精胺(Spermine ):溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20 Co

10mol/L 乙酸胺( ammonium acetate ):将 77.1g 乙酸胺溶解于水中，加 水定容至 1L 后，用 0.22um 孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物

学试剂级，无 DNA 酶)于 9.5ml 水中(为减少变性，

小份贮存于 -20Co

分成小份贮存于-20 Co或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加

0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L 乙酸钾( potassium acetate )：溶解 78.5g 乙酸钾于足量的水中，

加水定容到 100ml o

1mol/L氯化钾(KCI):溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml o

3mol/L 乙酸钠( sodium acetate )：溶解 40.8g 的三水乙酸钠于约 90ml 水

中，用冰乙酸调溶液的 pH 至 5.2，再加水定容到 100ml o

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的 Na2EDTA 和 NaOH 溶液(0.5mol/L ),混合 后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA?2H2O和20g的NaOH ,须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白) ，盖好盖后，轻轻摇动，直至

牛血清蛋白完全溶解为止。 不要涡旋混合。 加水定容到 10ml ，然后分装成

1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇 5g 的原装瓶中加 32.4ml 水， 烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至 1Lo 并溶于水中，定容至 1L。