微生物实验报告

测定细菌生长曲线

一、 实验目的

1． 了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时；

2． 学习液体培养基的配制以及接种方法；

3． 反复练习无菌操作技术；

4． 了解不同细菌，不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同；

5． 掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法；

二、 实验原理

将一定量的菌种接种在液体培养基内，在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数做纵坐标，以培养时间做横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线。单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整期（迟滞期）、对数期（生长旺盛期）、平衡期（稳定期）、死亡期（衰亡期）。生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的的全过程动态。不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。

测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法。本实验才用比浊法，由于细胞悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的菌液的浓度。将所测得的光密度值（OD600）与对应的培养时间做图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌和死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。

从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间，即代时，以G表示，其计算公式为：

G＝（t2-t1）/[(lgW1-lgW2)/lg2]

式中t2和t1为所取对数期两点的时间，W1和W2分别为对应时间测得的细胞含量或OD。

三、 实验器材

大肠杆菌，枯草杆菌菌液及平板；

培养基(100mL/250mL三角瓶×10瓶/大组):牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基；

取液器(5000ul, 1000ul 各一支)，无菌1000ul吸头若干，无菌5000ul吸头若干，比色皿10个及共用参比杯一个，培养箱3台，722s分光光度计；

第1篇

一、实验目的

1. 了解空气中微生物的种类和数量。

2. 掌握空气中微生物检测的基本方法。

3. 认识空气中微生物对环境和人体健康的影响。

二、实验原理

空气中微生物的检测主要采用平板培养法，通过培养和观察菌落形态，分析空气中微生物的种类和数量。实验过程中，利用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基作为培养介质，对采集的空气样品进行培养，然后通过革兰氏染色和显微镜观察，对微生物进行分类。

三、实验材料

1. 实验室空气样品

2. 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基

3. 氢氧化钠、牛肉膏、蛋白胨、琼脂粉、NaCl等试剂

4. 无菌水、石棉网、电炉、酒精灯、培养皿、三角瓶、500ml烧杯、玻璃棒、超净工作台、pH试纸

5. 革兰氏染色液、显微镜、接种环、无菌棉拭子等

四、实验步骤

1. 空气样品采集

将无菌培养皿置于实验室内，用无菌棉拭子蘸取空气样品，确保棉拭子充分接触培养皿表面。

2. 培养基制备

按照牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的配方，称取相应试剂，加入适量的无菌水，搅拌均匀，煮沸溶解。待培养基冷却至50-60℃时，加入琼脂粉，继续搅拌均匀。将培养基倒入培养皿中，待凝固后，将培养皿放入超净工作台。

3. 培养与观察 将采集的空气样品与培养基混合，均匀涂布在培养皿表面。将培养皿放入37℃恒温培养箱中培养24-48小时。

4. 革兰氏染色

取培养皿中生长的菌落，用无菌接种环挑取少量菌体，滴加革兰氏染色液，进行染色。

5. 显微镜观察

将染色后的菌体在显微镜下观察，根据菌落形态和革兰氏染色结果，对微生物进行分类。

五、实验结果与分析

1. 微生物种类

通过显微镜观察，本实验共检测到细菌、真菌和放线菌等微生物。

2. 微生物数量

根据培养皿上生长的菌落数量，估算空气中微生物的数量。

3. 结果分析

实验结果表明，实验室空气中存在多种微生物，其中细菌数量最多，其次是真菌和放线菌。这可能与实验室内的通风条件、人员活动等因素有关。

一、实验目的

1. 了解微生物拮抗关系的概念和类型；

2. 掌握微生物拮抗关系实验的方法和原理；

3. 通过实验验证微生物之间的拮抗关系。

二、实验原理

微生物拮抗关系是指微生物之间通过竞争、抑制、杀死等方式相互作用的关系。根据拮抗关系中的专一性，可以分为专一性拮抗关系和非专一性拮抗关系。专一性拮抗关系是指一种微生物的生命活动和代谢产物可以抑制另一种微生物的生命活动，甚至杀死另一种微生物的现象。而非专一性拮抗关系是指微生物之间的拮抗作用没有特异的针对性，凡是不耐酸的微生物都会受到抑制。

三、实验材料与仪器

1. 实验材料：

（1）微生物菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌；

（2）培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、酵母膏培养基；

（3）实验工具：培养皿、移液器、无菌操作台、酒精灯、恒温培养箱等。

2. 实验仪器：

（1）恒温培养箱；

（2）显微镜；

（3）移液器；

（4）酒精灯；

（5）无菌操作台。

四、实验方法

1. 金黄色葡萄球菌与枯草芽孢杆菌的拮抗实验

（1）将金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，37℃恒温培养24小时； （2）将金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的菌液分别涂布于牛肉膏蛋白胨培养基上，37℃恒温培养24小时；

（3）观察并记录金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的生长情况。

2. 大肠杆菌与乳酸菌的拮抗实验

（1）将大肠杆菌和乳酸菌分别接种于酵母膏培养基上，37℃恒温培养24小时；

（2）将大肠杆菌和乳酸菌的菌液分别涂布于酵母膏培养基上，37℃恒温培养24小时；

（3）观察并记录大肠杆菌和乳酸菌的生长情况。

3. 枯草芽孢杆菌与乳酸菌的拮抗实验

（1）将枯草芽孢杆菌和乳酸菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基上，37℃恒温培养24小时；

（2）将枯草芽孢杆菌和乳酸菌的菌液分别涂布于牛肉膏蛋白胨培养基上，37℃恒温培养24小时；

动物微生物及免疫学实验报告

一、实验目的

（一）掌握一般培养基的制备原理及要求，掌握培养基酸碱度的测定，熟悉一般培养基的制备过程和各种器皿灭菌方法。

（二）掌握细菌分离培养的基本要领和方法，掌握细菌抹片的制备方法和革兰氏染色法及油镜的使用方法，并认识革兰氏染色的反应特性。

（三）掌握学习用微生物学原理诊断疾病的一般方法及步骤。

二、实验用品

（一）器材

量筒、烧杯、电子天平、漏斗、三角烧瓶、空试剂瓶、玻璃棒、玻璃平皿、刻度吸管、pH试纸、纱布、脱脂棉、天平、电炉、试剂瓶瓶塞、扎绳、放大镜、包装纸、洗耳球、酒精灯、载玻片、火柴、吸水纸、剪刀、记号笔、接种环、注射器、镊子、钳子、毫米尺、培养箱、水浴培养箱、高压蒸汽灭菌锅、油镜

（二）试剂及材料

肘胨、蛋白胨、猪胆盐、氯化钠、琼脂、乳糖、0.01%结晶紫水溶液、0.5%中性红水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氢氧化钠、盐酸、牛血清、革兰氏染色液、蒸馏水、小白鼠、病猪内脏

三、实验步骤

（一）培养基的制备

（所有用到的器皿都已121℃高压灭菌15~30min，倾注平板在无菌操作台内完成，并放在无菌操作台内）

1、麦康凯培养基 （1） 组成：蛋白胨17g、肘胨3g、猪胆盐5g、氯化钠5g、琼脂17g、乳糖10g、0.01%结晶紫水溶液10ml、0.5%中性红水溶液5ml、蒸馏水1000ml

（2） 方法：将蛋白胨、肘胨、猪胆盐和氯化钠溶解于400ml蒸馏水中，调节pH至7.2。将琼脂加入600ml蒸馏水中，并加入乳糖，加热熔化。将两液混合，分装于烧瓶内，用纱布、扎绳等捆好后，121℃高压灭菌15~30min。待冷却至50 ~ 55℃ 时，加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。

注：结晶紫和中性红水溶液配好后需经高压灭菌。

2、血清平板

（1） 组成：营养琼脂、牛血清

（2） 方法：将灭菌的营养琼脂加热熔化，冷却至45~50℃时，加入牛血清，并混匀，倾注平板。