糖原磷酸化酶 b(Glycogen phosphorylase b,GPb)试剂盒说明书

第1篇一、产品概述本试剂盒是针对多糖含量测定而设计的高效、便捷的检测工具。

适用于各类生物样本中多糖含量的定量分析，包括但不限于植物提取物、动物组织、微生物发酵液等。

本试剂盒采用酶联免疫吸附法（ELISA）原理，通过特异性抗体与多糖的结合，实现对多糖含量的精确测定。

二、产品组成1. 试剂盒- 多糖抗体- 标准品- 酶标抗体- 底物溶液- 洗涤缓冲液- 封闭液- 终止液2. 仪器- 酶标仪- 微量移液器- 恒温水浴箱- 试管3. 试剂- 酶标仪专用缓冲液- 酶标仪专用洗涤液三、使用方法1. 样本准备- 将待测样本按照说明书要求进行稀释。

- 确保样本无污染，避免酶标仪读取误差。

2. 加样- 在酶标板孔中加入50μl的标准品或样本稀释液。

- 在所有孔中加入50μl的多糖抗体。

3. 孵育- 将酶标板放入恒温水浴箱，37℃孵育1小时。

4. 洗涤- 使用酶标仪专用洗涤液，将酶标板充分洗涤3次。

5. 加酶标抗体- 在所有孔中加入50μl的酶标抗体。

- 37℃孵育1小时。

6. 洗涤- 使用酶标仪专用洗涤液，将酶标板充分洗涤3次。

7. 加底物溶液- 在所有孔中加入50μl的底物溶液。

- 避光孵育15分钟。

8. 终止- 在所有孔中加入50μl的终止液。

9. 检测- 使用酶标仪在450nm波长下检测各孔的吸光度（OD值）。

10. 数据分析- 将测得的OD值与标准曲线进行比较，计算多糖含量。

四、注意事项1. 试剂和仪器- 使用前请仔细阅读说明书，确保试剂和仪器符合使用要求。

- 使用酶标仪时，请按照仪器说明书进行操作。

2. 样本处理- 样本处理过程中，请确保无污染，避免影响检测结果。

- 样本稀释时，请使用适宜的稀释液，确保稀释倍数合理。

3. 操作步骤- 操作过程中，请严格按照说明书进行，避免人为误差。

- 注意操作环境，避免交叉污染。

4. 标准曲线- 标准曲线的绘制应使用新鲜标准品，并确保标准曲线线性良好。

5. 质量控制- 定期进行质量控制，确保试剂盒的准确性和可靠性。

β-葡萄糖苷酶（β-GC）活性检测试剂盒说明书微量法UPLC-MS-4219100T/48S试剂名称规格保存条件提取液液体100mL×1瓶2-8℃保存试剂一粉剂×2瓶-20℃保存试剂二液体15mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体15mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：临用前取1瓶加入6mL蒸馏水，充分溶解；用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；2、标准品：5μmol/mL的对硝基苯酚溶液。

β-GC（EC3.2.1.21）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化β-糖苷键水解，具有多方面生理作用：在纤维素的糖化作用中，β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖；β-GC水解萜烯类香气前驱体，使糖苷键合态变成游离态。

从而产生香味；β-GC能够水解植物体内野黑樱苷，释放HCN，从而防止昆虫取食。

β-GC分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算β-GC活性。

p-Nitrophenylβ-D-glucopyranosideβ-GC p-Nitrophenol(400nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、超声破碎仪、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌或培养细胞的处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议1000万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率200W，超声3s，间隔10s，重复30次），15000g，4℃条件下离心20min，取上清，置冰上待测。

人钙调磷酸酶(CaN)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T1U/L–32U/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中钙调磷酸酶(CaN)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人钙调磷酸酶(CaN)水平。

用纯化的人钙调磷酸酶(CaN)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入钙调磷酸酶(CaN)，再与HRP标记的钙调磷酸酶(CaN)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的钙调磷酸酶(CaN)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人钙调磷酸酶(CaN)浓度。

试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（64U/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液 1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

32U/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液16U/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液8U/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液4U/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液2U/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

货号：MS2205 规格：100管/96样3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH)试剂盒说明书微量法正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。

测定原理3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3 二磷酸甘油酸。

GAPDH逆向催化 1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD，340nm处测定NADH的减少量可反映GADPH 活性的高低。

需自备的仪器和用品分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制提取液：100mL×1 瓶，4℃保存；试剂一：粉剂×1 瓶，-20℃保存；试剂二：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；试剂三：液体×1 支，4℃保存；样本的前处理1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。

8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

测定步骤1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。

2、样本测定（1）工作液的配制：将试剂二全部倒入试剂一瓶中，充分溶解，37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热10分钟；现配现用。

3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）活性检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4201规格:100T/96S微量法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体100mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶-20℃保存试剂二液体20mL×1瓶4℃保存试剂三液体12µL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂三：液体置于试剂瓶内EP管中。

根据用量按照试剂三:蒸馏水为3:100的体积比例充分混匀，现用现配；2、工作液的配制：将试剂二全部倒入试剂一瓶中，充分溶解，根据需要取一定的量37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）预热10min；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。

产品说明：GAPDH（EC1.2.1.12）催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。

3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3-二磷酸甘油酸。

GAPDH逆向催化1,3-二磷酸甘油酸和NADH生成3-磷酸甘油醛、无机磷和NAD+，340nm处测定NADH的减少量可反映GAPDH活性的高低。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，8000g，4℃，离心20min，取上清，置冰上待测。

细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（AGP ）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC0430规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体50 mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体20 mL×1瓶2-8℃保存试剂二A 粉剂×2瓶-20℃保存试剂二B 液体12mL×1瓶2-8℃保存试剂三粉剂×2瓶2-8℃保存试剂四粉剂×2支-20℃保存试剂五粉剂×2支-20℃保存溶液的配制：1.试剂二：临用前将试剂二A 加入试剂二B 充分溶解，用不完的试剂建议-20℃分装保存4周，避免反复冻融.2.试剂三：临用前取1瓶加3 mL 蒸馏水充分溶解，用不完的试剂建议-20℃分装保存4周，避免反复冻融；3.试剂四：临用前取1支加入500 μL 蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融。

4.试剂五：临用前取1支加入500μL 蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融。

产品说明：AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中，催化葡萄糖-1-磷酸（G-1-P ）与ATP 反应生成淀粉合成的直接前体ADPG ，是植物淀粉生物合成的主要限速步骤。

AGP 催化的逆向反应生成G-1-P ，在反应体系中添加的磷酸己糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH ，340nm 下测定NADPH 增加速率，即可计算AGP 活性。

Glucose 6-PhosphateGlucose 6-Phosphate+NADP +6-Phosphogluconolactone+H ++NADPH注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

UDPG焦磷酸化酶（UGP）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC3360规格:50T/48S产品简介：尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（UDP-glucose pyrophosphosphprylase，UGP，EC 2.7.7.9）在自然界广泛分布。

在葡萄糖合成糖原前催化葡萄糖活化，将1-磷酸葡萄糖与UTP分子合成为UDP-葡萄糖（UDPG），UDPG是高等植物和动物中主要活化酶的形式，作为葡萄糖基供体参与糖原、蔗糖、纤维素等的合成代谢。

UGP可逆的催化生成1-磷酸葡萄糖，其在磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下将NADP转化为NADPH，UGP活性可以用340nm的吸光值的变化来反应。

试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

产品内容：提取液：液体55mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×2瓶，-20℃避光保存。

临用前加15mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融，-20℃保存2周。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。

临用前加5mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后4℃保存，禁止反复冻融，4℃保存1周。

试剂三：粉剂×1支，-20℃避光保存。

临用前加1.4mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融，-20℃保存2周。

试剂四：粉剂×2支，-20℃避光保存。

临用前每支加1mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融，-20℃保存2周。

试剂五：液体5mL×1瓶，4℃保存。

试剂六：液体15mL×1瓶，4℃保存。

操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，10000g，4℃，离心10min。