培养基配方及配置
根据其作用不同，培养基分为：
诱导培养基
增殖培养基
生根培养基
根据其营养水平不同，培养基可分为基本培养基和完全培养基。
基本培养基（就是通常称呼的培养基）主要有MS、White、N6、B5 、改良MS、Heller、Nitsh、SH、Miller等。
完全培养基就是基本培养基的基础上，根据试验的不同需要，附加一些物质，如生长调节物质和其他复杂有机物质等。
N6培养基特点：
•1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计
•成分简单
•KNO3 和(NH4)2SO4含量高
•广泛应用于小麦、水稻及其它植物的花药培养等
White培养基特点：
•1943年由Ｗhite为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良，称作Ｗhite改良培养基。
•特点：无机盐含量较低
•适用：生根培养。
B5培养基特点：
•含较低的铵
•双子叶植物尤其木本植物组培可选择
MS培养基特点：
无机盐、离子浓度高，硝酸盐含量较高。
MS培养基是目前应用最多最普遍的培养基。无机盐的浓度较高，能保证组织培生长所需的矿物质营养。并且因为离子浓度高，在配制、贮存、消毒过程中，即使有些成分略有出入，也不致影响培养基中的离子平衡
培养基配方明细表：
培养基成分：
一、无机盐：
氮枝叶生长需要氮素，缺氮老叶先发黄；氮过量，枝叶过度茂盛。
磷缺磷，植株生长缓慢，老叶暗紫色。
钾促进花卉生长健壮，增强抗性，茎秆挺拔。缺钾，叶尖、叶缘枯焦，叶片呈皱曲状，老叶发黄或火烧状。
钴缺钴，叶片失绿而卷曲，整个叶片向上弯曲凋枯。
二、有机物
碳水化合物：选用种类：蔗糖（或葡萄糖、果糖）等
•蔗糖浓度：2%～3%，胚培养为4%～15%
•大生产时可用白糖
糖在培养基的作用：
1）为细胞提供合成新物质的碳骨架
2）为细胞的呼吸代谢提供底物和能量
3）维持渗透压
维生素
种类：VB1（盐酸硫胺素）、VB6（盐酸吡哆醇）、VB3（烟酸）、Vc（抗坏血酸
浓度：0.1－1.0mg/L
作用：VB1 促愈伤组织产生，提高活力
VB6 促根生长
Vc 防组织褐变
VB3 与植物代谢和胚的发育有关系
氨基酸：甘氨酸、精氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等等。因培养基的种类不同，其种类和浓度不同。
肌醇：又称环己六醇，在糖类的转化中起作用
椰乳：促愈伤组织和细胞培养，用量10－20%，使用注意茎尖大小
香蕉泥：用量150－200ml/L ，应用在兰花组培
马铃薯汁液：用量150－200g/L，使苗壮
水解酪蛋白：浓度100－200mg/L，应用在微茎尖培养
三、激素
自然界中，植物激素是植物新陈代谢中产生的天然化合物，它能以极微小的量影响到植物的细胞分化、生长、发育，影响到植物的形态建成、开花、结实、成熟、脱落、衰老和休眠、萌发等许多生理生化活动。
在培养基中，其各种成分对培养物影响最大的最显著的就是激素。激素的种类、浓度、以及配比都会显著的影响愈伤组织的形成、不定根、不定芽的分化，胚状体的形成等。
通常，不同植物，或不同品种，甚至同一植物的不同位置对激素的要求有很大的变化，这主要取决于植物的内源激素水平。
组织培养中使用的激素有的是天然的，如脱落酸（ABA）等，有的是合成的，如二氯苯氧乙酸（2，4－D）
（一）、激素的种类：
1、生长素类：
在自然界中，生长素影响茎和节间的伸长、向性、顶端优势、叶片脱落和生根等现象
在组织培养中的主要作用是：诱导细胞的分裂和根的分化，诱导愈伤组织）组织培养中常用的生长素：
1 二氯苯氧乙酸（2，4－D）
2 萘乙酸（NAA）
3 吲哚乙酸（IAA）
4 吲哚－－3－丁酸（IBA）
NAA、IAA、IBA被广泛用于生根，2，4－D有利于愈伤组织的诱导和
生长。
IAA容易光解，注意用棕色试剂瓶保存，保存时间不要太久。
溶解方法：1M NaOH或95％酒精，以前者为好保存：配成一定浓度后，
冰箱冷藏保存
2、细胞分裂素
自然界中，细胞分裂素影响细胞分裂，顶端优势的变化和茎的分化等
组织培养中，细胞分类素主要促进细胞分裂和由愈伤组织上或器官上分化不定芽。细胞分裂素常常与生长素相互配合，用以调节细胞分裂，细胞伸长，细胞分化和器官形成。
常用的细胞分裂素有：
6－苄氨基嘌呤（6－BA）
激动素（6-糠氨基嘌呤、KT）
玉米素（ZT）
噻二唑苯基脲（thidiazuron、TDZ ）
溶解方法：1MHCL
保存：配成一定浓度后，冰箱冷藏保存
3、赤霉素
由日本人黑泽1926年发现。自然界中，赤霉素能够打破休眠、促进果实成长等效果。虽然已经用于顶端分生组织的培养和维管分化的研究，但在培养基中很少添加，因为它的作用往往是负面的。虽然也有赤霉素能刺激不定胚发育成正常小植株的报道，但在使用中仍需慎重，不可轻易添加。赤霉素有20多种，其中在组织培养中最常用的是GA3。在组织培养中与生长素和细胞分裂素相比，赤霉素不太常用，据报道赤霉素能刺激不定胚正常发育成小植株溶解方法：95％酒精
保存：配成一定浓度后，冰箱冷藏保存
赤霉素易溶于水，但溶于水后不稳定，容易分解
灭菌：高温易分解，要过滤灭菌
4、脱落酸
在自然界中，脱落酸能阻碍发育、促进老化、形成休眠芽等作用。
经试验表明，脱落酸有利于胚性愈伤组织形成正常不定芽。
材料的试管保存，加上脱落酸能抑制生长，使继代培养时间延长。
溶解：易溶于NaHCO3溶液、氯仿或丙酮。
保存：具有热稳定性，但容易发生光解。
配成一定浓度后，冰箱冷藏保存
