大肠杆菌耐药性研究进展
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大肠杆菌实验报告大肠杆菌实验报告引言:大肠杆菌(Escherichia coli)是一种常见的肠道细菌,广泛存在于人和动物的肠道中。
尽管大肠杆菌在正常情况下对人体没有害处,但某些菌株可能引起食物中毒和其他健康问题。
本实验旨在探究大肠杆菌的特性和其对环境的适应能力。
实验目的:1. 了解大肠杆菌的形态和结构特征;2. 探究大肠杆菌的生长条件和适应能力;3. 研究大肠杆菌在不同环境下的生长情况。
实验材料和方法:1. 实验材料:- 大肠杆菌培养基- 灭菌培养皿- 灭菌试管- 灭菌移液管- 微量移液器- 恒温培养箱- 显微镜2. 实验步骤:1. 准备培养基:将大肠杆菌培养基按照说明书配制好,并灭菌处理。
2. 接种:使用微量移液器,将大肠杆菌接种到灭菌培养皿中。
3. 培养:将接种好的培养皿放入恒温培养箱中,并设置适当的温度和湿度条件。
4. 观察生长情况:每隔一段时间,观察培养皿中大肠杆菌的生长情况,并记录下来。
5. 形态和结构观察:取一部分培养物放在载玻片上,使用显微镜观察大肠杆菌的形态和结构特征。
实验结果:1. 大肠杆菌的形态和结构特征:在显微镜下观察,大肠杆菌呈现为短杆状,长度约为2-4微米,直径约为0.5微米。
细菌的表面有许多纤毛,这些纤毛有助于细菌的运动和附着。
大肠杆菌呈现为革兰阴性菌,其细胞壁主要由脂多糖和蛋白质组成。
2. 大肠杆菌的生长条件和适应能力:大肠杆菌在适宜的环境条件下能够迅速生长和繁殖。
它对温度、pH值和营养物的要求较为宽容。
一般来说,大肠杆菌的最适生长温度为37摄氏度,pH值在6.5-7.5之间。
此外,大肠杆菌对葡萄糖等简单糖类具有较高的利用能力,能够利用这些营养物进行代谢和生长。
3. 大肠杆菌在不同环境下的生长情况:大肠杆菌在不同环境条件下的生长情况可能有所不同。
例如,在高温环境下,大肠杆菌的生长速度会加快,而在低温环境下则会减慢。
此外,在酸性环境中,大肠杆菌的生长可能受到抑制。
然而,尽管大肠杆菌对环境的适应能力较强,但在极端条件下,如高温、高盐度等,它的生长可能会受到抑制或甚至死亡。
氟苯尼考研究进展氟苯尼考,一种兽用抗生素,自其问世以来,就以其强大的抗菌活性在医疗和兽医领域引起了广泛的和研究。
今天,我将概述近年来氟苯尼考的研究进展。
氟苯尼考是一种氯代肽类抗生素,其抗菌谱广,能够抵抗大多数G⁺菌和一些G⁻菌。
氟苯尼考的主要作用机制是通过抑制细菌70S核糖体的解聚和蛋白质的合成,从而发挥抗菌作用。
氟苯尼考在临床上的应用主要包括畜禽和水产养殖领域。
作为一种兽用抗生素,氟苯尼考被广泛应用于预防和治疗畜禽的各类细菌感染,如呼吸道感染、消化道感染等。
氟苯尼考在水产养殖业中也得到了广泛的应用,用于防治鱼类、虾类等水生生物的细菌感染。
近年来,随着科学技术的不断进步,对氟苯尼考的研究也越来越深入。
除了对其抗菌活性、作用机制的研究外,还涉及到了分子生物学、基因组学、蛋白质组学等多个领域。
例如,研究者们通过基因组学的研究,发现了氟苯尼考产生抗药性的基因位点,为预防和治疗抗药性感染提供了理论基础。
氟苯尼考作为一种重要的兽用抗生素,在临床上的应用广泛,且具有显著的治疗效果。
然而,随着抗生素的长期使用,细菌的抗药性问题也日益突出。
因此,我们需要进一步深入研究氟苯尼考的作用机制和抗药性机制,以便开发出更为有效的治疗策略,保护抗生素的有效性。
也需加强抗生素的生产和质量控制,确保抗生素的安全和有效性。
未来,针对氟苯尼考的研究将不仅仅局限于抗菌活性、抗药性等传统领域,还将涉及到更为深入的分子生物学、基因组学、蛋白质组学等领域。
相信随着科技的不断进步,我们对氟苯尼考的认识将越来越深入,为人类健康和动物健康提供更为有效的保障。
氟苯尼考是一种广泛应用于兽医临床的抗生素,主要用于治疗由敏感菌引起的畜禽疾病。
然而,随着抗生素的广泛使用,耐药性问题日益突出。
本文就氟苯尼考耐药性的研究进展进行综述。
氟苯尼考耐药性的产生机制主要包括以下几个方面:细菌细胞膜对药物的通透性降低:细菌通过改变细胞膜的通透性,减少药物进入细胞内的数量,从而降低药物对细菌的作用效果。
抗菌药物耐药性的研究进展标题:抗菌药物耐药性的研究进展及新型抗菌药物研发策略摘要:本研究旨在全面了解抗菌药物耐药性的研究现状,并提出新型抗菌药物研发策略。
通过文献综述、实验设计、数据采集和分析等步骤,收集相关数据,对其进行整理和分析,并在已有研究成果的基础上,提出新观点和方法,为解决实际问题提供有价值的参考。
Abstract:This study aims to comprehensively understand the current research status of antimicrobial resistance and propose new strategies for the development of novel antimicrobial agents. Through literature review, experimental design, data collection and analysis, we collect relevant data, organize and analyze them. Based on existing research results, we propose new perspectives and methods to provide valuable references for solving practical problems.1. 引言1.1 研究背景抗菌药物耐药性是全球范围内的严重问题,对人类健康造成了巨大威胁。
研究抗菌药物耐药性的研究进展以及开发新型抗菌药物具有重要意义。
1.2 研究目的本研究旨在对抗菌药物耐药性的研究进展进行全面分析,并探索新型抗菌药物研发的策略和方法,为解决实际问题提供有价值的参考。
2. 研究方法2.1 文献综述通过收集并综述已有文献,了解抗菌药物耐药性的研究进展,包括其发生机制、分子基础、流行病学特征等方面的内容。
探讨大肠杆菌的培养及药敏试验摘要:随着社会经济带动养殖业的发展,产生的大量的环境及其他问题也亟待解决[1]。
其中,大肠杆菌属于常发性感染细菌病,其传播范围大、病情严重,给养殖经济带来严重损失,有效预防大肠杆菌病是现代养殖业需要研究的重要课题[2]。
本文研究大肠杆菌的分离纯化培养及对各种抗生素的敏感程度。
得到结论:大肠杆菌对抗生素环丙沙星、头孢唑啉敏感,对氯霉素、庆大霉素、复方新诺明、丁胺卡那、诺氟沙星表现为中度敏感,氨苄西林、红霉素、青霉素则表示为不同程度上的耐药性。
关键词:大肠杆菌分离纯化药敏实验抗生素引言21世纪以来,我国养殖业不断扩大,随着养殖市场规范化、集约化养殖程度的增加,随之而来的动物疾病也越发严重[3],尤其是大肠杆菌病日益突出[4]。
大肠杆菌可引起鸡、鸭、猪、兔、羊、水貂、狐狸等多种动物的疾病[7],常见的大肠杆菌病例如:仔猪水肿病、动物肺炎及腹泻等。
为此也给养殖业带来了严重的经济损失。
大肠杆菌是革兰氏阴性兼性厌氧菌,是一种常见的胃肠道细菌和环境污染源。
它是引起人和动物并发症[5]的重要病原体。
目前,抗生素治疗是控制疾病最有效的方法,由于部分药物抗菌活性强、价格低廉、易被口服[6]吸收,但随着抗生素的过度使用,导致耐药严重。
本课题旨在为临床合理用药提供可靠依据[3]。
1材料与方法1.1材料大肠埃希氏菌(ATCC25922标准菌株[8],斜面菌种,上海鲁微科技有限公司)营养琼脂培养基(杭州微生物试剂有限公司)[9],LB肉汤培养基(长沙市雨花区加德实验仪器),10种抗生素药敏纸片(氯霉素、庆大霉素、复方新诺明、丁胺卡那、环丙沙星、头孢唑啉、氨苄西林、诺氟沙星、红霉素[10]、青霉素等购于常德比克曼生物科技有限公司)[11],电热恒温培养箱DNP 型( 上海精宏实验设备有限公司) ; 高压蒸汽灭菌器YX - 280D + ( 合肥市华泰医疗设备有限公司) ; 紫外灯2537A 型( 江苏申星光电医疗器械有限公司)[9]。
大肠杆菌生化实验报告大肠杆菌生化实验报告引言:大肠杆菌(Escherichia coli)是一种常见的肠道细菌,广泛存在于人类和动物的消化系统中。
由于其简单的生长条件和高度适应性,大肠杆菌成为了许多生化实验的理想模型。
本报告旨在介绍大肠杆菌在生化实验中的应用和结果。
实验一:酶活性测定酶活性是衡量细胞代谢活跃程度的重要指标之一。
在本实验中,我们选择了大肠杆菌中的一种酶,β-半乳糖苷酶(LacZ),来进行酶活性测定。
实验步骤:1. 培养大肠杆菌细胞。
2. 采集细胞样品,并进行离心。
3. 悬浮细胞样品,并加入底物。
4. 反应一段时间后,停止反应,并测定底物的降解程度。
结果与讨论:通过测定底物的降解程度,我们可以得到β-半乳糖苷酶的酶活性。
实验结果显示,在不同培养条件下,大肠杆菌中的β-半乳糖苷酶酶活性存在差异。
这表明培养条件对细菌酶活性有一定的影响。
进一步的研究可以探究这些影响因素,并优化培养条件,提高酶活性。
实验二:代谢产物分析大肠杆菌是一种典型的乳酸菌,其代谢途径复杂多样。
在本实验中,我们选择了大肠杆菌中的乳酸代谢途径作为研究对象,通过代谢产物分析来了解细菌的代谢特征。
实验步骤:1. 培养大肠杆菌细胞。
2. 采集细胞样品,并进行离心。
3. 提取细胞内代谢产物。
4. 使用色谱或质谱等技术,对代谢产物进行分析。
结果与讨论:通过代谢产物分析,我们可以了解大肠杆菌在不同培养条件下的代谢特征。
实验结果显示,大肠杆菌在不同培养基中产生的代谢产物有所差异。
这表明培养基成分对细菌代谢途径的选择有一定的影响。
进一步的研究可以探究这些影响因素,并优化培养基配方,调控代谢途径,提高产物产量。
实验三:抗生素敏感性测试抗生素敏感性测试是评估细菌对抗生素的耐药性的重要方法之一。
在本实验中,我们选择了几种常用的抗生素,对大肠杆菌进行敏感性测试。
实验步骤:1. 培养大肠杆菌细胞。
2. 制备不同浓度的抗生素溶液。
3. 在琼脂平板上涂布细菌样品。
中药对大肠埃希菌耐药性消除作用研究进展黄永志;赵旭东;赵战勤;邱妍;王帅帅;董发明;梁立钦【摘要】致病性大肠埃希菌的耐药性给人类健康及畜禽生产带来巨大威胁,这已引起国内外学者的广泛关注.中药可以通过多种途径消除细菌耐药性,研究中药消除致病性大肠埃希菌耐药性的作用效果及机制对保障人类健康和畜禽生产具有重要意义.论文对致病性大肠埃希菌的耐药现状、中药消除效果及作用机制的最新研究进展进行综述,以期为中药消除致病性大肠埃希菌耐药性提供科学依据.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2019(040)003【总页数】4页(P97-100)【关键词】中药;大肠埃希菌;耐药性;消除【作者】黄永志;赵旭东;赵战勤;邱妍;王帅帅;董发明;梁立钦【作者单位】河南科技大学动物科技学院,河南洛阳 471023;河南科技大学动物科技学院,河南洛阳 471023;河南科技大学动物科技学院,河南洛阳 471023;河南科技大学动物科技学院,河南洛阳 471023;河南科技大学动物科技学院,河南洛阳471023;河南科技大学动物科技学院,河南洛阳 471023;洛阳惠德生物工程有限公司,河南洛阳 471112【正文语种】中文【中图分类】S853.75;S852.612近年来,抗菌药物的广泛、持续、不当使用,使得细菌耐药问题越来越严重[1-2]。
细菌对抗菌药物的耐药性已被列为将会对世界经济产生深远影响的五项潜在因素之一[3]。
而致病性大肠埃希菌作为对养殖业危害最大的细菌之一,其耐药性问题一直是研究的热点[4]。
在所有耐药消除剂中,中药因具有天然、环保、毒副作用小的特点而受到研究者的广泛关注。
本文从以下几个方面对近年的研究成果进行综述。
1 致病性大肠埃希菌对抗菌药的耐药现状刘正明等[5]通过对内蒙古地区108株羊源大肠埃希菌耐药性的研究,发现耐7种以上常用抗菌药物的菌株达94.4%,耐13种常用抗菌药物菌株为15.6%,分离菌株对阿莫西林、头孢噻吩、磺胺甲唑、黏菌素的耐药率均达100%。
大肠杆菌耐药性研究进展 刘蔚雯 11动科类丁颖班 【摘要】大肠埃希氏菌(E.coli)俗称大肠杆菌,是一种常见致病菌。由于抗生素的
广泛持续的不当使用,导致大肠杆菌耐药株的大量出现,使人医临床和兽医临床对大肠杆菌病的治疗变得十分困难,有时甚至找不到可治之药。近年来,大肠杆菌的耐药性问题已经引起了国内外医药界的广泛重视。本文对大肠杆菌耐药现状、产生耐药性机制的研究以及减少大肠杆菌耐药性的措施综述如下。
【关键字】大肠杆菌 细菌耐药性 抗生素
大肠杆菌寄生在人和动物的肠道内,大多是肠道的正常菌群。人和动物出生后数小时即可经口进入消化道后段,大量繁殖而定居,终身伴随,并经粪便不断散播于周围环境。但在特定条件下可致病。随着抗菌药物长期的大量的应用,特别是近年来抗菌药物的盲目滥用,大肠杆菌耐药株引起的感染在临床上不但有增多趋势,而且其耐药性还通过质粒在细菌间传递耐药基因而不断蔓延、变迁。大肠杆菌的多重交叉耐药株的出现使大肠杆菌的治疗变得十分困难,而且还造成了动物源性食品的安全问题。因此,大肠杆菌耐药性问题引起了师姐的广泛关注。各国学者对大肠杆菌耐药性的探索也从未停止,并从多方面阐述了细菌产生耐药性的机制以及提出了一些建设性的措施。 1.大肠杆菌耐药性现状 1.1家畜源大肠杆菌耐药性现状 自1929年弗来明发现青霉素以来,伴随着养殖业的发展,抗生素在动物疾病防控过程中发挥着重要的作用。但由于抗生素和抗菌药被广泛、长期使用,细菌的耐药情况也逐渐凸显出来。世界各地均有分离得到耐药家畜源性大肠杆菌的报道。目前病原细菌对青霉素的耐药率达70%以上,对大多数喹诺酮类药的耐药率也达50%以上。瑞普公司研发中心药敏实验发现,近几年在临床上常用抗菌药物有80%大肠杆菌已对其产生严重的耐药性,处于被淘汰的境地。在试验中同时发现,家禽大肠杆菌多重耐药菌株普遍,占所有耐药菌株的50%以上,且仍呈现上升趋势。二重、三重耐药菌株所占比例下降,而五重、六重、七重耐药菌株占主导优势。在实验中发现一株对12种抗菌药都产生耐药性的超级大肠杆菌。由此表明大肠杆菌的耐药性日益严重,其药敏谱越来越窄,可选择药物的余地也越来越小,随着多重耐药增加,联合用药的效果必然也会越来越差。由于养殖规模、养殖历史、饲养水平和用药习惯的不同,不同地区大肠杆菌的耐药性差异也比较大。 1.2野生动物源大肠杆菌耐药性现状 野生动物与抗生素的接触机会较少,但国内外多个报道表明野生动物写到耐药大肠杆菌,说明耐药大肠杆菌已经向环境扩散,因为野生动物流动性较大,尤其是野生鸟类,又易于将耐药大肠杆菌传递给家畜,在一定程度上加速了耐药大肠杆菌和耐药基因的扩散。 2.大肠杆菌的耐药机制 2.1细菌耐药性分类 固有耐药(intrinsic resistance),又称天然耐药,由细菌染色体基因决定,代代相传,如肠道阴性杆菌对青霉素的耐药;绿脓杆菌对氨苄西林的耐药;链球菌对庆大霉素的耐药等。 获得耐药(acquired resistance),是指细菌在接触抗生素后,改变代谢途径,使自身不被抗菌药物杀灭的抵抗力。这种耐药可通过耐药基因的传代、转移、传播、扩散、变异形成高度和多重耐药。 2.2大肠杆菌的耐药机制 2.2.1减少药物的摄入量 细菌可通过各种途径阻止药物进入菌体,提高细菌的耐药程度。生物被膜和细菌外膜构成药物进入菌体的一道屏障,细菌可通过增加生物被膜的生成量、改变细菌外膜的通透性减少药物的摄入量。 2.2.1.1 细菌生成生物被膜 细菌生物被膜是指细菌粘附于固体或有机腔道表面,形成微菌落,并粉笔细胞外多糖蛋白复合物将自身包裹其中而形成的膜状物。细菌间的多糖蛋白复合物形成孔道维持细菌物质代谢。细菌生物被摸生成后,往往对抗菌药物产生耐药性。生物被摸具有以下功能:①减少抗菌药物渗透。②吸附抗菌药物钝化酶,促进抗菌药物水解。③细菌生物被摸下细菌代谢低下,对抗菌药物不敏感。④生物被膜的存在阻止了机体对细菌的免疫力。大肠杆菌可通过提高与生物被膜产生相关的基因的表达量,提高生物被膜的生成量。如acrA、agn43、csgD和pgnA基因的表达量与细菌生物被膜的生成量直接相关,而抗生素的浓度可以影响大肠杆菌相关基因的表达量。一定浓度的抗生素可提高细菌生物被膜的生成量。 2.2.1.2 细菌外膜通透性的改变 药物进入菌体必须通过菌体外膜,因而菌体外膜的通透性直接影响药物通过菌体外膜。LPS(lipopolysaccharide)由脂质A、1分子核心多糖和O抗原构成,是构成大肠杆菌细胞细胞壁的脂多糖,能降低脂质双分子层对疏水分子的通透性。青霉素、氯霉素、氟喹诺类抗生素进入革兰氏阴性菌菌体需通过细菌外膜上的孔蛋白OmpA、OmpF、OmpC,而大肠杆菌通过改变外膜上孔蛋白的数量、大小和选择性减少抗菌药物的摄入,提高菌体耐药性。OmpF在保持细菌外膜正常通透性中起重要作用,OmpF数量减少可以使细胞膜对抗生素的通透性下降,造成细菌对多种抗生素的敏感性下降;OmpC的增多(有时下降)致使某些药物失去抗菌作用。显然这些膜孔蛋白的表达水平的变化可对细菌的耐药性产生影响。 2.2.2增加药物的外排量 外排泵系统是细菌增加药物外排的一种主要途径,有针对一种或几种药物的具有选择性的外排泵,也有没有药物选择性的外排泵系统超家族。目前,将外排泵分为5个家族:SMR(small multidrug resistance protein)家族、MFS(major facilitator superfamily)超家族、ABC(ATP-binding cassette)超家族、RND(resistance-nodulation-cell division)超家族、MATE(multidrug and toxic compound extrusion)家族,其中RND、MFS、SMR为H+/药转运,MATE为Na+/药转运。在大肠杆菌中RND家族的成员起到较为重要的作用。大肠杆菌具有AcrA/AcrB/TolC三重外排泵系统及MexAB-OprM,可以排除多种抗生素,使大肠杆菌可以同时对多种抗生素的抵抗力增强。其中,AcrA、AcrB、MexAB都为RND家族成员。上述5个外排泵家族的底物种类很多,可以排出多种抗生素,与大肠杆菌的多重耐药机制有关。 2.2.3产生灭活酶 大肠杆菌可以产生酶加工修饰进入菌体内的抗生素,使抗生素识货,提高菌体的耐药性。如可以灭活β-内酰胺类药物的β-内酰胺酶、超广谱β内酰胺酶、可以使氨基糖苷类药物失活的氨基糖苷修饰酶等。 3.减少大肠杆菌耐药性的措施 3.1加强环境管理 从饲养管理做起,因为大肠杆菌是条件致病菌,若密度过大、通风不良、转群应激、突然变换饲料等均会引起大肠杆菌的暴发。所以只有良好的环境卫生,才可以减少疾病的产生。因此制定科学的饲料管理制度,加强饲养管理,至关重要。做好消毒工作必然首当其冲。消毒工作应当依据养殖场自身情况进行计划,做到定期消毒。而消毒剂也应科学选择,做到真正有效。研究表明:消除环境诱因,是减少大肠杆菌病发生的有效措施。 3.2新药和疫苗的应用 为了减少药物在预防工作中的大量应用,现在主要采取的办法是应用疫苗。疫苗的使用虽然在大肠杆菌的控制上起较大的作用,且国内外研制了各种类型的基因工程菌苗与多价灭活菌苗,但由于大肠杆菌的血清型复杂,各个地方的流行菌株各不相同,免疫效果并不理想,一般以自制的灭活菌苗效果更好。研制新药是以变质变来对耐药性产生后的一种弥补措施,它能为药物抵抗细菌注入新的血液。 3.3提高药物生产应用的科学化 药物生产的规范化是避免因假冒伪劣药品成分不足所产生耐药性的根本解决办法。而科学的使用抗生素,包括合理的疗程、适宜的剂量、轮换交替用药、针对性用药。这样不但能有效地控制和预防疾病,避免损失,而且也是减少大肠杆菌耐药性产生的有效措施。 3.4耐药性质粒的消除 在防止耐药性产生的同时,人们也在积极寻找耐药性消除剂,希望通过一些方式消除细菌的耐药性,其中针对耐药性质粒的消除和阻止传递方面国内外的一些实验室已经取得了一定进展。目前质粒消除剂分为二类:一类是作用于细菌细胞表面,包括大分霉素、SDS、EDTA等能特异性地杀死带有质粒的菌株,从菌群中除去耐药菌;另一类是吖啶类染料和丝裂霉素C等DNA抑制剂,可一直质粒的复制。 4.小结 大肠杆菌作为环境常在菌,在公共卫生学上具有重大的意义。有助于我们对耐药性传播问题进行更多更深入的探讨。以及提示医用、饲用、农用抗生素对环境微生态所造成的影响。这些抗菌药作为环境外源性化学物对环境生物及生态产生广泛而深远的影响,并与耐药菌株一起对环境中的敏感细菌进行耐药性“改造”。而这些耐药菌株出现后,猪场隔离、消毒是否得力,将会影响耐药菌株的传播与增长速度。大肠杆菌耐药性的产生和发展无疑给畜牧业带来无穷无尽的烦恼,而大肠杆菌耐药性的监测工作给抵制这些烦恼指引了道路。耐药性机制的研究已经审图到生化和分子生物学等科学领域,这就是对我们今后研究工作指引了方向。相信在不远的将来耐药性不再是难题。 参考文献: [1]朱力军.动物大肠杆菌耐药性的变化趋势.中国兽药杂志,2001,35(2):16-18 [2]王波云,李立安,顾亚夫.细菌耐药性研究进展与对策.解放军药学学报出版社,2001 17(5):259-261,287 [3]金升藻,金巍,叶微.大肠杆菌耐药性研究进展.上海畜牧兽医通讯,2008,6:17-18 [4]程龙,程明等.控制细菌耐药性发展与抗生素的合理使用.中国医药导报,2008,5(25):101-102 [5]张凤珍.大肠杆菌耐药机制和消除耐药性方法概述.内蒙古民族大学学报(自然科学版),2009,24(2):84-87 [6]杨微.大肠杆菌耐药性的研究进展.畜牧与饲料科学,2011,6(32):116-118 [7]王瑞庆.禽类大肠杆菌产生耐药性的原因分析及防治对策.中国动物保健,2010,(3):64-65 [8]常维山,王应文,孙金华等.我国部分地区鸡源大肠杆菌耐药性分析.山东畜牧兽医,2009,30(1) [9]夏利宁,赵红琼,苏艳等.新疆某猪场分离和大肠杆菌对抗生素耐药性调查.新疆农业科学,2012,49(12):2299-2303 [10]刘坤友.耐药性大肠杆菌研究进展.中外健康文摘.2011,31