基因重组与基因工程综述(ppt 15页)
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高二生物选修3 基因工程 ppt
解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具, 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具, 剪刀——限制性内切酶 关键步骤一的工具:基因的剪刀——限制性内切酶
关键步骤一的工具:基因的剪刀 针线——DNA连接酶 关键步骤二的工具:基因的针线——DNA连接酶 关键步骤二的工具:基因的针线 运载工具——运载体 关键步骤三的工具:基因的运载工具——运载体 关键步骤三的工具:基因的运载工具
一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切 分子手术刀” ——限制性核酸内切 酶 主要是从原核生物中分离纯化出来 原核生物中分离纯化出来的一 主要是从原核生物中分离纯化出来的一 1、来源: 来源: 种酶。能将外来的DNA切断 切断, 种酶。能将外来的DNA切断,由于这种 切割作用是在DNA分子内部进行的
分子内部进行的, 切割作用是在DNA分子内部进行的,故 名限制性内切酶。 名限制性内切酶。 2、种类:4000种。 种类:4000种 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸 3、作用: 作用: 序列,并且使每一条链中特定部位 序列,并且使每一条链中特定部位的两 特定部位的两 磷酸二酯键断开 个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
粘性末端 平末端 4、结果: 结果: 形成两种末端
分子缝合针” DNA连接酶 二、 “分子缝合针” —— DNA连接酶 1、种类:两类 、种类: Ecoli DNA连接酶 连接酶 T4 DNA连接酶 连接酶 2、作用部位: 、作用部位: 磷酸二酯键 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙 连接酶可把黏性末端 “缝合”起来,即把梯子两边扶手的断口连
缝合”起来, 接起来,这样一个重组的DNA分子就形成了 分子就形成了。 接起来,这样一个重组的DNA分子就形成了。 “分子缝合针”——DNA连接酶 分子缝合针” 分子缝合针 连接酶 1、作用:恢复被限制性内切酶切开了的两个 、作用: 的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 2、分类:从大肠杆菌中分离得到 、分类: 从T4噬菌体分离得到 3、区别:E.coli连接黏性末端 、区别: 连接黏性末端 T4既能连接黏性末端,又可以连接 既能连接黏性末端, 平末端(效率低) 平末端(效率低)
第19讲 基因突变和基因重组
一、 基因突变
概念:碱基对的增添、缺失(移码突变)
碱基对的改变(碱基对替换突变)
适用范围:所有生物
原因:物理、化学、生物因素(外);异常代谢产物(内)
发生时期:细胞分裂间期
特点:普遍性、随机性、低频性、有害性、不定向性
结果:产生新基因
意义:生物变异的根本来源,生物进化的原始材料
育种应用:诱变育种
实例:镰刀形细胞贫血症
基因突变不一定引起性状改变
① 突变发生在基因的非编码区
② 突变发生在基因编码区的内含子
③ 原密码子与变后密码子决定一种氨基酸
④ 隐性突变
二、 基因重组
概念:基因重新组合
类型:减Ⅰ前期,非姐妹染色单体的交叉互换
减Ⅰ后前,同源染色体分开,非同源染色体自由组合
细菌的转化
基因工程
结果:产生新基因型
意义:生物多样性的重要原因,生物变异的丰富来源,生物进化的重要材料 育种应用:杂交育种
三、 育种方法(P132)
第20讲 基因工程
生物A 提取某基因 修饰和改造 生物B
一、 基因工程的基本工具
限制性核酸内切酶(“剪刀”)
来源:原核生物
作用特点:①切割外源DNA②识别双链DNA特定核苷酸序列(专一性)③识别序列两条链为回文序列
作用过程:切割双链DNA每条链特定部位的磷酸二酯键
作用结果:形成黏性末端或平末端
识别序列越短,在DNA中出现几率就越大
DNA连接酶
DNA连接酶 DNA聚合酶
作用 合成磷酸二酯键
作用过程 连接DNA片段的末端 连接单个脱氧核苷酸成DNA长链
作用结果 形成重组DNA 形成新DNA分子
是否需要模板 否 是
运载体
常用运载体:质粒(主要取自大肠杆菌,真核生物如酵母菌体内也有) 噬菌体、动植物病毒
特点:
①能在宿主细胞内稳定保存、大量复制,且对宿主生存无影响,便于目的基因的表达
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源-于-网-络-收-集 第十四章 基因重组和基因工程
一、自然界的基因转移和重组:
基因重组(gene recombination)是指DNA片段在细胞内、细胞间,甚至在不同物种之间进行交换,交换后的片段仍然具有复制和表达的功能。
1.接合作用:当细胞与细胞相互接触时,DNA分子即从一个细胞向另一个细胞转移,这种遗传物质的转移方式称为接合作用(conjugation)。
2.转化和转染:由外来DNA引起生物体遗传性状改变的过程称为转化(transformation)。噬菌体常常可感染细菌并将其DNA注入细菌体内,也可引起细菌遗传性状的改变。通过感染方式将外来DNA引入宿主细胞,并导致宿主细胞遗传性状改变的过程称为转染(transfection)。转染是转化的一种特殊形式。
3.整合和转导:外来DNA侵入宿主细胞,并与宿主细胞DNA进行重组,成为宿主细胞DNA的一部分,这一过程称为整合。整合在宿主细胞染色体DNA中的外来DNA,可以被切离出来,同时也可带走一部分的宿主DNA,这一过程称为转导(transduction)。来源于宿主DNA的基因称为转导基因。
4.转座:转座又称为转位(transposition),是指DNA的片段或基因从基因组的一个位置转移到另一个位
置的现象。这些能够在基因组中自由游动的DNA片段包括插入序列和转座子两种类型。
⑴插入序列:典型的插入序列(insertion sequence,IS)是长750-1500bp的DNA片段,由两个分离的反向重复序列和一个转座酶基因。当转座酶基因表达时,即可引起该序列的转座。其转座方式主要有保守性转座和复制性转座。
⑵转座子:转座子(transposons)是可从一个染色体位点转移到另一个位点的分散的重复序列,含两个反向重复序列、一个转座酶基因和其他基因(如抗生素抗性基因)。
一、教学目的与要求:
1. 掌握DNA重组的类型;接合作用、转化作用、转导作用的概念、转座重组的形式;DNA克隆、基因工程、限制性内切核酸酶、回文结构、目的基因、基因载体、质粒的概念;重组DNA技术的基本原理;获取目的基因的途径。
2.熟悉限制性内切核酸酶切割DNA产生的末端类型;目的基因的类型;基因载体的类型;外源基因与载体的连接方式重组体的筛选方法。
3.了解不同类型DNA重组的机理;其它重组DNA技术中常用的工具酶、重组DNA技术与医学的关系。
二、教学重点、难点:
教学重点:要求掌握的内容。
教学难点:不同类型DNA重组的机理及重组DNA技术的基本原理。
三、教学方法设计:
1.从当前迅速发展的分子生物学技术及“人类基因组计划”等研究进展引入本章的内容,同时说明重组DNA技术是在自然界DNA重组的基础上得到启示而发展起来的一门新兴的科学技术。
2.突出重点,分散难点,深入浅出,抓住关键;
3.语言表达、图文并茂的多媒体课件相结合,适当介绍相关的研究进展;
4.
在一些重点或关键处可适当板书,起到突出重点、引导学生思路从而更易掌握的作用;
5. 课堂上多提问,与学生交流,调动他们的积极性,也可先设疑,在后续教学中引导学生寻找答案,做到深入浅出,逐层剥离。 课程名称 生物化学