乳制品中L-羟脯氨酸的测定
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HPLC法测定复方阿胶膏中4种氨基酸的含量目的建立复方阿胶膏中4种的含量测定方法。
方法采用HPLC法,Shimpack ODS C18柱(4.6mm×250mm,5um),以乙腈-0.1mol/L乙酸钠溶液(用冰乙酸调节pH值至6.5,7:93)为流动相A,以乙腈-水(4:1)为流动相B,进行梯度洗脱。
结果L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸分别在12.46~124.6ug/mL、23.62~236.2ug/mL、8.47~84.7ug/mL、19.14~191.4ug/mL范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999,n=6),平均加样回收率分别为97.91%、97.77%、97.67%、97.65%,RSD分别为1.70%、1.18%、1.31%、1.29%(n=9)。
结论本法准确可靠,可用于复方阿胶膏的质量控制。
标签:高效液相色谱;复方阿胶膏;-羟脯氨酸;甘氨酸;丙氨酸;L-脯氨酸复方阿胶膏为安徽中医药大学第二附属医院院内制剂,由阿胶、黄芪、枸杞子、核桃仁等八味中药组成,以养血益气为主,滋补肝肾、健胃消食、温肺润肠为辅。
主用于气血两虚证所致的诸多疾病。
其中阿胶为君药,阿胶中的主要有效成分为蛋白质、多肽和氨基酸。
该方原采用凯氏定氮法测总氮含量为质量标准,但由于该制剂为复方制剂,干扰较大,该方法测得的结果误差较大,不够准确。
因此在参考文献的基础上,于2015年10月~2016年1月期间,采用HPLC法以甘氨酸、丙氨酸、L-羟脯氨酸和L-脯氨酸四种阿胶中含量较高的氨基酸为定量指标,对复方阿胶膏进行质量标准研究。
1.仪器与试药LC-20ATvp岛津液相色谱仪(日本岛津公司);SPD-20Avp检测器(日本岛津公司);梅特勒AG285电子分析天平(瑞士);梅特勒xp56型百万分之一电子天平(瑞士);JK-300型超声波清洗器(合肥金尼克机械制造有限公司)。
复方阿胶膏(安徽中医药大学第二附属医院,批号:20150306、20150313、20150320),缺阿胶阴性制剂为自制。
离子色谱法检测化妆品中L—羟脯氨酸方法研究先进的仪器设备和一流的分析方法是离子色谱法的两个重要组成部分。
离子色谱法有许多不同类型的分析方法,不同的方法适用于不同类型的样品和化合物。
对于L-羟脯氨酸的分析,离子色谱法有以下几个关键步骤:1. 样品制备样品制备是离子色谱分析中的第一步,是确保结果准确可靠的重要步骤。
制备的方法根据样品的类型和要求的结果不同而不同。
渗透吸附树脂是常用的样品制备方法,树脂具有良好的选择性和吸附性能,可以“捕获”待分析的化合物。
2. 色谱柱离子色谱法使用特定类型的柱来进行分析。
选择合适的柱是确保分析精度和可靠性的关键之一,不同类型的柱适用于不同类型的分析。
对于L-羟脯氨酸的分析,通常选择弱离子型离子交换柱,它可以通过离子交换来分离待分析的离子化合物。
3. 分析条件离子色谱法中,分析条件指的是离子交换柱、流速、洗脱剂和检测条件等参数。
分析条件的优化对于提高分析精度和稳定性至关重要。
对于L-羟脯氨酸的分析,一般采用无机离子作为洗脱剂,比如硫酸盐、氢氧化钠等,同时选择合适的检测波长进行检测。
4. 数据处理离子色谱法的数据处理通常是通过计算机程序完成的,可以自动化处理数据、记录结果等。
数据处理的准确性对于结果的可信度也有很大的影响。
除了以上关键步骤,离子色谱法检测L-羟脯氨酸的方法还需要进行一系列的前期处理工作,比如样品取样、提取和洗脱等步骤。
同时,对于不同场合的分析要求,离子色谱法还需要根据实际需要,作出相应的参数调整和优化工作,如进样量、检测波长和流速等方面的调整。
总之,离子色谱法检测化妆品中L-羟脯氨酸是一种有效的分析方法,可以快速、准确的检测到待分析化合物,为化妆品质量监测提供可靠的手段。
在实际应用中,需要根据不同类型的样品和要求的结果,选择合适的分析条件和方法,确保分析结果的准确性和可靠性。
乳及乳制品中有毒有害物质的检测方法作者:任春晓吴丹杨丽霞来源:《食品安全导刊》2014年第05期摘要:本文介绍了乳及乳制品中常见的几种有毒有害物质及其检验方法。
主要包括:L-羟脯氨酸、四环素族药物残留、β-受体激动剂、硝酸盐、苯甲酸、山梨酸、安赛蜜、糖精钠,并汇总归纳了比色法、高效液相色谱法、紫外分光光度法等快速检测方法。
经济、快速、简便,可用于大批量的实际检验工作中。
关键词:乳及乳制品有毒有害物质检测方法随着人们生活水平的提高,乳及乳制品需求不断加大,其安全问题备受关注,而对其中有毒有害物质的检测管理直接关系到乳制品的质量安全。
近年来,研究者主要从非法添加物质、抗生素及农药残留、防腐剂及添加剂超标等方面研究其质量问题。
基于此,本文汇总归纳了乳及乳制品中常见有毒有害物质的检测方法,为选择较优检测提供依据,提高了检验效率。
1 皮革水解蛋白皮革水解蛋白粉就是利用皮革下脚料甚至动物毛发等物质,经水解而生成的一种粉状物,因其氨基酸或者说蛋白含量较高,故人们称之为“皮革水解蛋白粉”。
该物质中混进了重铬酸钾和重铬酸钠等有毒物质,如果长期食用便会被人体吸收、积累、造成铬中毒,引起人体关节疏松肿大,甚至造成儿童死亡[1]。
目前常用的检测皮革水解蛋白的方法有超声乳成分分析法,比色法测定L-羟脯氨酸,氨基酸自动分析法等[2]。
王衍彬[3]等人运用国际法、超声乳成分分析仪和Foss红外分析仪对掺加了水解动物蛋白的乳制品进行了测定,发现随蛋白粉含量的增加,3种方法检测的蛋白含量数均呈上升趋势,上升幅度超声分析仪最小,最能反映真实的乳蛋白含量。
L-羟脯氨酸是皮革水解蛋白所特有的氨基酸,含量约13.4%,而在其它蛋白中几乎不存在,可以作为判定是否含有皮革水解蛋白的依据[4]。
羟脯氨酸难挥发,在紫外区有微弱吸收,没有荧光基团,运用比色法来测定,选择廉价、易除的过氧化氢作为氧化剂,脱羧生成含吡咯环的物质,选用乙酸锌和亚铁氰化钾为沉淀剂效果最佳[2]。
生鲜乳中皮革水解蛋白的检测及应用陈磊【摘要】为测定生鲜乳中皮革水解蛋白,采用UV法检测农业部生鲜乳比对盲样和2011-2015年兵团9个师的生鲜乳收购站及生鲜乳运输车的生鲜乳,按3:1比例进行抽检样品的L-羟脯氨酸.结果显示:L-羟脯氨酸的浓度在0~1.5 mg/L范围呈良好的线性关系,线性相关系数为0.9993,L-羟脯氨酸的回收率为96.16%~104.84%,相对标准偏差为3.32%,农业部生鲜乳盲样比对结果全部通过,检测634批次生鲜乳均未检出皮革水解蛋白.此检测方法对兵团生鲜乳中皮革水解蛋白的测定提供重要的科学依据.【期刊名称】《草食家畜》【年(卷),期】2016(000)006【总页数】4页(P34-37)【关键词】生鲜乳;L-羟脯氨酸;皮革水解蛋白【作者】陈磊【作者单位】新疆兵团畜牧兽医工作总站,新疆乌鲁木齐 830063【正文语种】中文【中图分类】S879.110.16863 /ki.1003-6377.2016.06.008皮革水解蛋白是利用已经废弃的皮革制品和动物毛发,水解后将其制成粉末状,再掺入到牛奶或着奶粉中去,用以提高奶制品中蛋白质的浓度,这种掺杂有皮革水解蛋白的奶制品食用后,会致使身体消化不良,吸收及利用率降低,长时间饮用会导致人体中毒,影响了人体健康[1]。
2009年2月6日,中国卫生部公布了《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单(第二批)》,其中共4个指标,就包含有“皮革水解蛋白”。
检测鲜奶中的皮革水解蛋白,实际就是检测鲜奶中的L-羟脯氨酸[2]。
1.1 主要的试剂和材料L-羟脯氨酸标准品(中国食品药品检定研究院提供,批号111578-200201);氯胺T、对二氨基苯甲醛、HCl、苯酚、柠檬酸、NaOH、结晶乙酸钠、正丙醇均为分析纯;去离子水。
生鲜乳样品:来自兵团九个师生鲜乳奶站和运输车。
1.2 主要仪器设备TU-1901紫外分光光度仪、水浴锅、电热恒温干燥箱、移液器。
离子色谱法检测化妆品中L—羟脯氨酸方法研究
L-羟脯氨酸是一种重要的天然氨基酸,它在化妆品中具有一定的保湿和抗氧化功能。
为了确定化妆品中L-羟脯氨酸的含量,离子色谱法被广泛应用。
离子色谱法是一种分析方法,通过分离和测定溶液中的离子物质。
它是一种高效快速的方法,适用于分析水溶液中的离子物质。
我们需要准备样品溶液。
将待测化妆品样品溶解在适量的溶剂中,使其达到适合离子色谱分析的浓度。
然后,用0.45μm滤膜过滤样品溶液以去除悬浮物和杂质。
接下来,调节离子色谱仪的工作条件。
选择适当的色谱柱和移动相,并调整流速和温度,以保证分离的效果和分析的准确性。
然后,根据需要的灵敏度和检测范围选择合适的检测器。
常用的检测器包括电导度检测器和紫外检测器。
在进行实际分析之前,需要进行方法的验证和优化。
可以通过构建标准曲线和添加不同浓度的标准品来验证方法的准确性和灵敏度。
为了优化方法,可以利用不同的柱和移动相组合来提高分离效果。
在进行实际分析时,将样品溶液注入离子色谱仪进行分析。
离子色谱仪将会分离样品中的L-羟脯氨酸,并通过检测器进行检测和定量。
根据预先建立的标准曲线,可以计算出样品中L-羟脯氨酸的含量。
通过这种方法,可以确定化妆品中L-羟脯氨酸的浓度,并确保产品质量和安全性。
离子色谱法是一种有效的分析方法,适用于化妆品中L-羟脯氨酸的检测。
通过优化分析条件和进行方法的验证,可以得到准确和可靠的分析结果。
这对于保证化妆品质量和安全性具有重要意义。
原料中羟脯氨酸含量的测定1.材料和试剂1.1材料秦宝雪花牛牛蹄筋:陕西秦宝牧业有限责任公司。
秦宝普通育肥牛、雪花牛肺:陕西秦宝牧业有限责任公司。
秦宝雪花牛棒骨:陕西秦宝牧业有限责任公司。
1.2试剂所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水或去离子水,或相同浓度的水。
1.2.1硫酸溶液[c(H2SO4)≈3mol/L]量取750mL水于2L的容量瓶中,在搅拌下缓慢加入320mL浓硫酸(ρ20=1.84g/mL)。
冷却至室温后用水定容。
1.2.3缓冲溶液(PH=6.8)包括下列组分:a)26.0g一水柠檬酸(C6H8O7·H2O);b)14.0g氢氧化钠;c)78.0g无水乙酸钠[Na(CH3CO2)]。
用500mL水溶解上述试剂并转入1L的容量瓶中,加入250mL 正丙醇,用水定容。
该溶液于4℃暗处可稳定保存几周。
1.2.4氯胺T溶液称取1.41g三水·N-氯-对甲苯磺酰胺钠盐(氯胺T),用100mL 缓冲溶液溶解。
临用前配制。
1.2.5显色剂称取10.0g对甲氨基苯甲醛,用30mL高氯酸溶液[70%(质量分数)]溶解,缓慢加入65mL异丙醇。
临用前配制。
1.3羟脯氨酸标准溶液1.3.1标准储备液称取50mg4-羟基-α-吡咯甲酸(羟脯氨酸)于100mL容量瓶中,用水溶解,加一滴硫酸溶液(1.2.1),用水定容。
该溶液于4℃下可稳定存放1个月。
1.3.2标准工作液移取5.00mL上述标准储备液至500mL容量瓶中,用水定容。
分别吸取该溶液10.00mL、20.00mL、30.00mL、40.00mL于100mL容量瓶中,用水定容,所得标准工作液浓度一次为0.5µg/mL、1.0µg/mL、1.5µg/mL、2.0µg/mL。
临用前配制。
2.仪器和设备3.试样制备用刀将原料在冷冻时(0℃以下)切成小块(约0.5cm3,边长约为8mm)。
将切好的试样装入密封样品盒中,或用耐热塑料袋真空包装,70℃以上保温30min后,冷却。
1羟脯氨酸含量测定2羟脯氨酸标准曲线绘制3试剂的配制【6-7】[6] 李秋营,姚汝琳.细胞中羟脯氨酸的测定.山西医科大学学报.2001,32(6):558-559[7] David J Etherington, Trevor J Sims. Detection and Estimation of Collagen[J]. J Sci Food Agric, 1981,32:539-546柠檬酸缓冲液:柠檬酸钠120g、冰醋酸12mL、柠檬酸46g、氢氧化钠34g 溶解于蒸馏水中,调整pH 值至6.0,然后定容至1000mL。
0.05mol/L 氯胺T 溶液:称取氯胺T 7.05g,溶解于100mL 蒸馏水中,然后加入乙二醇独甲醚150mL,再加入250mL 柠檬酸缓冲液混合均匀。
对二甲基氨基苯甲醛: 试剂 A:取无水乙醇20mL,慢慢加入浓硫酸2.74mL;试剂B:取对二甲基氨基苯甲醛12.0g,慢慢加入无水乙醇40mL,水浴加热使其完全溶解并冷却至室温,然后将A 液慢慢加入B,混合均匀。
3.5mol/L 高氯酸溶液:取27mL 高氯酸,以蒸馏水定容到100mL。
羟脯氨酸标准曲线的绘制羟脯氨酸标准储存液:准确称取L-羟基脯氨酸标准品50mg,加入0.01mol/L 盐酸中溶解,稀释并定容到100mL,在冰箱中保存。
羟脯氨酸标准工作液:吸取羟脯氨酸标准储存液10mL到50mL 容量瓶中,用蒸馏水定容到50mL(临用前配),浓度为100μg/mL。
4标准曲线绘制分别吸取羟脯氨酸标准工作液1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5mL,用蒸馏水定容到50mL容量瓶中。
以蒸馏水为空白,分别吸取上述标准液1mL,加入1mL 柠檬酸缓冲液和1mL 0.05mol/L 氯胺T 溶液,室温(25 ℃) 氧化10min 后,加入高氯酸1mL(3.5mol/L),放置10min,加入对二甲基氨基苯甲醛试剂1mL,在65℃水浴显色10min,冷却后在560nm处测吸光度。
高效液相色谱法测定奶粉中羟脯氨酸含量于淑新;赵连海;王丰琳;孙元社;唐涛;李彤【摘要】In this paper, a method for measurement of hydroxyproline in milk powder by high perform ance liquid chromatography(HPLC)with pre-column derivation was established. 2, 4-dinitrofluorobenzene (DNFB) was used as derivative reagent, and the separation was performed on Elite AAK C18 column (250 mm×4. 6 mm I. D. , 5 μm) with gradient elution of 0.05mol/L sodium acetate and acetonitrile/water (50: 50, V:V) at 27 ℃. The flow rate was 1. 2 mL/min and the detection wavelength was 360 nm. Method val idation was performed. The results showed that the linear range was from 0. 04 to 10 mg/L with a linear correlation coefficient of 0. 9999. The limit of quantification was 30 mg/kg in milk powder sample (S/N = 10). The relative standard deviations of parallel determination (n=5) were 9. 64% and 0. 36% with spiked of 0. 05 mg/L and 8. 0 mg/L respectively. The recoveries were from 95. 94% to 114. 87% in the spiked range of 0. 05~8. 0 mg/L in milk powder. It was indicated that the method was accurate and repeatable for the determination of hydroxyproline in milk powder.%建立了柱前衍生化高效液相色谱法(HPLC)测定奶粉中羟脯氨酸含量的方法.以2,4-二硝基氟苯为衍生试剂,采用Elite AAK C18色谱柱(250 mm×4.6 mm i.d.,5μm);0.05 mol/L乙酸钠,乙腈/水(50∶50,V∶V)为流动相梯度洗脱;流速1.2 mL/min;检测波长360 nm;柱温27℃.结果表明:羟脯氨酸标准品在0.04~10.00mg/L范围内线性相关系数为0.9999;方法检出限为30 mg/kg(S/N=10);加标浓度为0.05,8.0 mg/L的平行5次测试结果相对标准偏差分别为9.64%和0.36%;0.05,0.1,0.25,0.5,1.0,2.0,8.0 mg/L7个加标水平测试,加标回收率在95.94%~114.87%之间,加标线性曲线的线性相关系数为0.9998.该方法定量结果准确,满足奶粉中羟脯氨酸含量测定的要求,可以作为判断奶粉中是否违禁添加皮革水解蛋白的依据.【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2012(000)002【总页数】4页(P26-29)【关键词】羟脯氨酸;皮革水解蛋白;柱前衍生;高效液相色谱【作者】于淑新;赵连海;王丰琳;孙元社;唐涛;李彤【作者单位】大连依利特分析仪器有限公司,大连116023;大连依利特分析仪器有限公司,大连116023;大连依利特分析仪器有限公司,大连116023;大连依利特分析仪器有限公司,大连116023;大连依利特分析仪器有限公司,大连116023;辽宁大连依利特分析仪器工程技术研究中心,大连116023;大连依利特分析仪器有限公司,大连116023;辽宁大连依利特分析仪器工程技术研究中心,大连116023【正文语种】中文近几年,国内有些乳制品生产企业违禁向乳及乳制品中添加皮革水解蛋白,以提高蛋白质含量,引起社会的广泛关注。
脯氨酸含量的测定方法
脯氨酸是一种氨基酸,在生物体中具有重要的功能和作用。
以下是常见的脯氨酸含量测定方法之一:
1. 高效液相色谱法(HPLC):HPLC 是目前最常用的脯氨酸测定方法之一。
该方法是利用色谱柱将样品中的脯氨酸与其他化合物分离,并通过比较峰面积或峰高来定量分析脯氨酸。
2. 气相色谱法(GC):GC 方法需要将样品中脯氨酸进行衍生化反应,将其转化为易于气相色谱分析的化合物,如三氯化乙酰的脯氨酸酯。
通过测定峰面积或峰高来定量分析脯氨酸。
3. 毛细管电泳法(CE):毛细管电泳是基于溶液中离子迁移速率的差异进行分离和测定的方法。
该方法可以通过测定脯氨酸的迁移时间或峰面积来定量分析脯氨酸。
4. 免疫测定法:免疫测定法是利用特异性抗体与脯氨酸结合,通过测定免疫复合物的形成量来定量分析脯氨酸。
常见的方法包括酶联免疫吸附测定法(ELISA)和放射免疫测定法等。
需要注意的是,不同的测定方法具有不同的特点和适用范围,在选择方法时需要根据具体情况进行选择。
同时,还需要注意测定方法的准确性、灵敏度和重复性
等指标。
羟脯氨酸测定原理羟脯氨酸(Hydroxyproline)是一种非常重要的氨基酸,在胶原蛋白中占有重要地位。
羟脯氨酸的含量可以作为评估胶原蛋白合成和降解的指标,因此,羟脯氨酸的测定具有重要的临床意义。
本文将介绍羟脯氨酸测定的原理及其应用。
羟脯氨酸的测定原理主要基于其与酚类物质反应生成紫色化合物的特性。
一般情况下,羟脯氨酸的测定方法主要有两种:色素法和高效液相色谱法。
色素法是羟脯氨酸测定的常用方法之一。
其原理是在碱性条件下,羟脯氨酸与酚类试剂发生缩合反应,生成有色产物。
这种反应是一种氧化还原反应,需要存在氧化剂的存在,常用的氧化剂有次氯酸钠和过氧化氢。
在碱性条件下,羟脯氨酸与酚类试剂发生缩合反应,生成的产物可以通过分光光度计测定其吸光度,从而计算出羟脯氨酸的含量。
高效液相色谱法是羟脯氨酸测定的另一种常用方法。
该方法利用高效液相色谱仪对样品进行分析。
在该方法中,首先将样品中的羟脯氨酸与特定的试剂进行反应,生成具有荧光的产物。
然后,将反应产物注入高效液相色谱仪中进行分离和检测。
通过测定峰面积或峰高的方式,可以计算出羟脯氨酸的含量。
羟脯氨酸的测定方法在临床和科研领域有着广泛的应用。
在临床上,羟脯氨酸的测定可以用于评估胶原蛋白合成的情况,对于一些与胶原蛋白代谢相关的疾病的诊断和治疗具有重要意义。
此外,羟脯氨酸的测定方法还可以用于评估食物中胶原蛋白的含量,对于食品安全和质量控制也有一定的应用价值。
在科研领域,羟脯氨酸的测定方法可以用于胶原蛋白的合成和降解研究。
通过测定羟脯氨酸的含量,可以评估胶原蛋白的合成速率和降解速率,进而研究胶原蛋白的代谢机制。
此外,羟脯氨酸的测定方法还可以用于评估某些药物对胶原蛋白合成和降解的影响,为新药的研发提供参考依据。
总结起来,羟脯氨酸是一种重要的氨基酸,在胶原蛋白代谢中起着关键作用。
羟脯氨酸的测定可以通过色素法和高效液相色谱法等方法进行。
这些方法不仅在临床上有着重要的应用价值,还在科研领域中发挥着关键作用。
微波水解-HPAEC-PAD法快速测定乳粉中的皮革水解蛋白钟莺莺;奚中威;葛一超【摘要】L-羟脯胺酸是皮革水解蛋白的特征氨基酸.样品经微波酸水解使氨基酸游离,水解液过C18柱和0.22μm水系膜净化过滤,以AminoPacTM PA10阴离子交换柱为分离柱,采用NaOH/NaOAc/HOAc梯度洗脱,脉冲安培检测,建立了脉冲安培检测-离子色谱法(HPAEC-PAD)测定乳粉中的皮革水解蛋白.结果表明,L-羟脯氨酸在0.05~0.20 m g/L内线性良好,线性相关系数r2为0.999,阴性样品加标回收率为92.8%~101.7%,检出限(LOD)为0.015 mg/L,定量限(LOQ)为0.050 mg/L.相较国家标准方法准确、快速、简便,可以大致反映乳粉中皮革水解蛋白的添加量.【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2019(000)001【总页数】4页(P157-160)【关键词】微波酸水解;HPAEC-PAD;乳粉;L-羟脯氨酸【作者】钟莺莺;奚中威;葛一超【作者单位】宁波海关技术中心,宁波 315012;宁波海关技术中心,宁波 315012;浙江工商大学,杭州 310018【正文语种】中文动物皮革水解蛋白是将皮革边角、甚至动物毛发等下脚料,经加工后制成的水解蛋白质。
某些非法厂家为降低生产成本,在乳粉中掺入廉价的水解动物蛋白来冒充或替代乳蛋白质[1]。
但皮革下脚料中含有金属铬,长期食用含有“动物皮革水解蛋白”的食物,易引起重金属中毒。
为此,国家卫生部于2009年2月公布的《食品中可能违法添加的非食用物质名单(第二批)》的通知中明确规定乳及乳制品、含乳饮料中禁止添加皮革水解蛋白。
而羟脯氨酸则是皮革的主体蛋白-胶原蛋白中特有的氨基酸 [2]。
而乳蛋白质则不含羟脯氨酸,因此常将羟脯氨酸含量作为奶粉及乳饮料产品掺假与否的证据。
样品的前处理方法对后期的检测尤为重要[3],水解蛋白质常见的方法有酶水解、酸水解和碱水解。
离子色谱法检测化妆品中L—羟脯氨酸方法研究随着化妆品行业的不断发展,对化妆品中成分的检测也变得越来越重要。
其中,L-羟脯氨酸是一种广泛存在于化妆品中的氨基酸,其在抗氧化、抗皱等方面具有重要作用。
为了保证化妆品质量和安全,需要对其中的L-羟脯氨酸进行检测。
本文采用离子色谱法对化妆品中的L-羟脯氨酸进行检测,并对该方法进行了研究。
一、实验原理离子色谱法是一种分离和定量离子的方法。
该方法基于离子与离子交换树脂之间的相互作用,利用不同离子的化学性质差异,通过离子交换树脂将待测溶液中的离子分离。
在离子交换树脂中,离子与树脂中固有离子发生化学反应,从而将离子分离出来。
离子色谱法广泛应用于水质、食品、生物样品、环境样品等领域的离子分析。
二、实验步骤1、样品准备取化妆品样品0.5 g,加入10 mL甲醇,并振荡混合10分钟,过滤得到样品溶液。
2、色谱柱准备取离子交换柱(4.6 mm × 150 mm),用纯水淋洗15分钟,然后用0.1 mol/L NaOH 洗涤15分钟,最后用纯水淋洗至稳定。
3、标准溶液准备取L-羟脯氨酸标准品0.2 g,在10 mL甲醇中溶解得到标准溶液。
4、样品检测取一定量的样品溶液,注入离子色谱仪,流量为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测器温度为35℃,检测波长为220 nm。
将标准溶液注入仪器,绘制出标准曲线,并采用曲线外推法计算样品中L-羟脯氨酸的浓度。
三、结果分析经过离子色谱法检测,化妆品中L-羟脯氨酸的浓度为0.015 g/L。
四、结论采用离子色谱法可以对化妆品中的L-羟脯氨酸进行准确、快速的检测,并获得了可靠的检测结果,该方法为化妆品的质量安全控制提供了重要的技术支持。
竭诚为您提供优质文档/双击可除可行性研究报告财务报表篇一:项目可行性研究报告-财务分析预测表填表说明1、项目财务分析预测总表之一、之二、之五、之六、之八、之九、之十中关于建设期和经营期的说明:建设期请依据项目实际需要据实填写,不必都按两年来建设,经营期的年度则应相应地变动。
如:若建设期为1年,则经营期为第2年至第11年;若建设期为3年,则经营期为第4年至第13年。
2、项目财务分析预测总表之八“产品销售收入和销售税金及附加估算表”应计算至生产负荷达到100%的年度,其后年度的则不用再列出。
如:若生产负荷达到100%的年度为第4年,则仅计算第3年、第4年的产品销售收入和销售税金及附加;若生产负荷达到100%的年度为第5年,则仅计算第3年、第4年、第5年的产品销售收入和销售税金及附加。
项目财务分析预测总表之一投资计划与资金筹措表单位:万元项目财务分析预测总表之二流动资金估算表单位:万元项目财务分析预测总表之三固定资产投资估算表项目财务分析预测总表之四土建工程投资明细表单位:万元篇二:供参考财务可行性分析报告黑龙江省农科院五常水稻所“松粳号”优质水稻原原种扩繁基地项目可行性研究报告建设单位:黑龙江省农业科学院五常水稻研究所编制单位:黑龙江省农业科学院编制时间:二〇一〇年七月目录第一章总论 (1)1.1项目概况 (1)1.2建设规模 (1)1.3建设内容 (1)1.4项目总投资 (2)1.5资金筹措 (2)1.6建设期限 (3)1.7项目效益 (3)1.8可行性研究的依据 (4)1.9主要技术经济指标 (4)第二章项目背景及建设的必要性 (6)2.1项目背景 (6)2.2项目建设的必要性 (6)2.3项目建设目标和任务 (10)第三章建设单位概况 (12)3.1建设单位科技优势 (12)3.2建设单位人才优势 (13)3.3建设单位管理和设备使用情况 (13)第四章市场预测与产品方案 (15)4.1市场预测 (15)4.2产品及营销方案 (16)第五章项目选址及建设条件 (17)5.1项目选址 (17)5.2项目建设条第六章项目建设方案 (21)6.1建设内容与规模 (21)6.2技术措施和路线 (22)第七章投资估算和资金等筹措方案 (24)7.1投资估算的依据 (24)7.2投资构成 (24)7.3资金来源 (24)7.4资金运用 (24)第八章环境保护与综合利用 (25)第九章项目建设期限和实施进度安排 (26)9.1项目建设期9.2项目建设进度安排 (26)第十章项目组织管理与运行 (27)10.1项目组织管理 (27)10.2项目建成后生产管理和形式 (27)10.3生产岗位人员设臵 (28)10.4人员技术培训 (28)10.5劳动安全保护与工业卫生........................28第十二章财务评价及效益分析. (30)12.1财务评价 (30)12.2效益分析......................................32第十三章结论. (35)附表:附表1:项目建设投资估算表附表2:流动资金估算表附表3:营业收入和营业税金及附加费估算表附表4:总成本费用估算表附表5:固定资产折旧及无形资产摊销费估算表附表6:利润及利润分配表附表7:项目财务现金流量表附表8:农业综合开发效益估算表(二0一一年度)附表9:农业综合开发任务和投资计划表(二0一一年度)附件:附件1:事业单位法人证书、组织机构代码证附件2:土地使用证明复印件附件3:松粳9号、松粳12号品种权证书附件4:松粳9、10、11、12、13、松粳香1号品种说明书附件5:拟扩繁品种的省级以上审定证书彩色复印件及品质分析化验单附件6:国家水稻产业技术体系五常综合实验站任务书附件7:单位基本帐户开户行出具的资信等级证明附件8:单位基本帐户开户行出具的存款证明附件9:事业单位20XX年度财务报表附件10:现有固定资产明细附图:附图1:黑龙江省农科院五常水稻研究所内建设地点规划设计平面位臵图附图2:“松粳号”原原种基地现状图附图3:“松粳号”原原种基地规划图附图4:“松粳号”原原种基地生产布局图附图5:拟建工程平面图、剖面图篇三:如何编制可行性研究报告中财务评价部分如何编制可行性研究报告中财务评价部分摘要:从经济方面进行详尽的调查研究、分析、计算和方案比较,并对xx大学新校区建设项目建成后可能取得的经济效果进行预测,为投资决策者值得投资建设提供了可靠的依据。
L-羟基脯氨酸标准
L-羟基脯氨酸是一种非蛋白质氨基酸,其化学名为(S)-2-氨基-3-羟基-4-氧代戊酸。
L-羟基脯氨酸在生物化学和药物研究领域中有广泛应用,因此需要制定相应的标准来确保其纯度和质量。
L-羟基脯氨酸的标准通常包括以下内容:
1. 纯度标准:规定L-羟基脯氨酸的纯度要求,通常要求其纯度达到98%以上。
2. 外观和晶型标准:规定L-羟基脯氨酸的外观和晶体形态,包括颜色、光泽、溶解度等。
3. 化学成分标准:规定L-羟基脯氨酸的化学成分,包括分子量、分子式、结构式等。
4. 物理性质标准:规定L-羟基脯氨酸的物理性质,如熔点、沸点、比重、折射率等。
5. 检测方法标准:规定L-羟基脯氨酸的检测方法,包括色谱法、质谱法、红外光谱法等。
6. 包装和贮存标准:规定L-羟基脯氨酸的包装和贮存要求,以确保其质量不受外界因素的影响。
L-羟基脯氨酸标准的制定和实施对于保证其质量和安全性具有重要意义。
用液相色谱-PITC柱前衍生法对老酸奶中掺水解动物蛋白检测方法的研究摘要】本文采用PITC柱前衍生法,利用液相色谱和氨基酸分析柱,对老酸奶中L-羟脯氨酸进行分析检测。
该方法的回收率在89.95%-92.16%之间,变异系数在4.33%-5.96%之间。
本法具有检测结果准确,方法稳定性好,回收率高等优点,可用于老酸奶及乳制品中是否含有皮革成分的鉴别。
【关键词】柱前衍生;老酸奶;L-羟脯氨酸;液相色谱0.引言最近一则关于“果冻,老酸奶是由破皮鞋做成的”消息在网上流传,因破皮鞋可以提炼出明胶。
明胶是一种极为常见的食品添加剂,是从牛、猪等动物骨和皮中的胶原通过变性而制得的变性蛋白质,其化学组成与胶原基本相同,主要成分是胶原蛋白。
老酸奶等乳制品为了保持其口感和外观,会适当添加明胶等食品添加剂,这是国家允许使用的。
而皮革制成的明胶透明,无味,消费者根本无法区分。
本文通过检测皮革水解蛋白来区分食用明胶和皮革制成的明胶。
皮革水解蛋白多用皮革厂制作服装、皮鞋后的下脚料来生产,自然这种蛋白中混进了大量皮革糅制、染色过程中添加进去的重铬酸钾和重铬酸钠等有毒物质,如果长期食用含有皮革水解蛋白的食物,金属铬离子便会被人体吸收、积累、中毒,使人体关节疏松肿大,严重的会患上癌症。
对于乳与乳制品中皮革水解蛋白的鉴定,主要是通过对L-羟脯氨酸含量的测定。
L-羟脯氨酸是胶原蛋白(皮革水解蛋白)特有的氨基酸,在乳酪蛋白中则没有,所以一旦检出,则可认为含有皮革水解蛋白,即可判断该乳制品中含有由废弃皮革而来的成分。
本文提供了乳制品中L-羟脯氨酸的检测方法,采用异硫氰酸苯酯PITC柱前衍生法,利用液相色谱和氨基酸分析柱,对L-羟脯氨酸进行分析检测。
该方法检测结果准确,方法稳定性好,可用于老酸奶等乳制品中是否含有皮革成分的鉴别。
1.材料与方法1.1原理样品经蛋白水解试剂水解,释放出L-羟脯氨酸,然后用异硫氰酸苯酯(PITC)衍生,采用液相色谱仪测定,外标法定量。
羟脯氨酸(HYP)检测
羟脯氨酸(Hydroxyproline,HYP)是亚氨基酸之一,是一种非必需氨基酸,是胶原组织的主要成分之一,且为胶原中特有的氨基酸。
利用羟脯氨酸在胶原蛋
白中含量最高这一特点,通过血液和尿液对羟脯氨酸的测定,可了解体内胶原
蛋白分解代谢情况,即可作为结缔组织分解情况指标。
此外,测定羟脯氨酸也
是了解骨吸收、骨代谢情况的指标。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液质联用(LC-MS)法,可高效、精准的检测羟脯氨酸的含量变化。
此外,我们还提供其他氨基酸及其代谢物检测服务,以满足您的不同需求。
HPLC和LC-MS测定羟脯氨酸样本要求:
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期:2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告,报
告包括:
1. 实验步骤(中英文)
2. 相关质谱参数(中英文)
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 羟脯氨酸含量信息
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案,具体可免费咨询技术支持。
LC-MS氨基酸测定项目样本报告,点击查看>。
离子色谱法检测化妆品中L—羟脯氨酸方法研究随着现代化妆品市场的日益扩大,关注化妆品成分安全的需求也越来越高。
L-羟脯氨酸是一种常用的美白剂,在很多化妆品中都被广泛使用。
因此,对L-羟脯氨酸的检测变得至关重要。
本文将介绍一种基于离子色谱法的L-羟脯氨酸检测方法。
一. 实验原理离子色谱法是一种基于溶液化学分析原理的分析方法。
其原理是基于带电离子在场中移动速度的差异性,通过对离子在国际标准水中的干扰抑制和检测水平分析实现离子分析。
该方法具有选择性强、检测灵敏度高和分离度佳等优点。
二. 实验材料1. 高效液相色谱仪,电化学检测器。
2. Reagent A、Reagent B、Reagent C、Reagent D。
3. 标准L-羟脯氨酸。
4. 待测样品。
三. 实验步骤1. 标准溶液配置取L-羟脯氨酸标准品(约1.0mg)放置于10ml的容量瓶中,再以0.1mol/L KCl溶液将其稀释至临床化学检测标准范围内。
2. 样品的制备取被检测样品1g,放入50 ml锥形瓶中,加入Reagent A溶液2 ml,Reagent B溶液2 ml,Reagent C溶液2 ml,摇匀,再加入酚酞溶液2滴,分钟即可进行下一步操作。
使用高效液相色谱检测仪进行样品的检测。
将上一步制备好的待测样品排出一定体积采样,注射到CE22-H列上,固定泵流速为0.6mL/min,检测波长为270nm,流动相中水、乙腈、甲酸的比例为93.5:5:1.5。
四. 实验结果分析通过以上实验步骤,我们可以通过离子色谱法检测化妆品中L-羟脯氨酸。
在实验过程中,通过制备好的样品,使用高效液相色谱检测仪进行检测,最终得到了化妆品中L-羟脯氨酸的检测结果。
这种方法操作简单、准确性高、检测速度较快,可以有效地检测出化妆品中L-羟脯氨酸的含量,保障人们的健康。
五. 实验注意事项1. 实验过程中,必须严格按照实验操作步骤进行,注意测量时间和工具的清洁卫生。
2. 注意样品的制备过程,保证样品的精确性。
乳制品中L-羟脯氨酸的测定
1 引言
皮革水解蛋白是由皮革废料或动物皮毛、脏器等水解生成的一种蛋白粉,将其掺入牛奶或奶粉中可提高蛋白质的含量。
对于乳与乳制品中皮革水解蛋白的鉴定,主要是通过对L-羟脯氨酸含量的测定。
L-羟脯氨酸是胶原蛋白(皮革水解蛋白)特有的氨基酸,在乳酷蛋白中则没有,所以一旦检出,则可认为含有皮革水解蛋白,即为“皮革奶”。
本实验提供两种L-羟脯氨酸衍生方法,利用氨基酸分析柱,对L-羟脯氨酸进行分析检测,可根据实际情况进行选择。
2 仪器与试剂
2.1 仪器、器皿
2.1.1 HPLC+紫外检测器
2.1.2 Diamonsil AAA氨基酸分析柱(CAT#: 99751)。
2.1.3 11 mL水解瓶(CAT#: 55354)
2.1.4 1.5 mL塑料离心管。
2.1.5 20 mL玻璃具塞刻度试管。
2.1.6 5 mL玻璃具塞刻度试管。
2.1.7 0.22 μm针式过滤器(CAT#:37177)。
2.1.8 2 mL样品瓶(瓶:CAT#:5323,盖CAT#:5325)
2.2 试剂
2.2.1 甲醇(CAT#:50102)。
2.2.2 乙腈(CAT#:50101)
2.2.3 正己烷(CAT#:50115)
2.2.3 三乙胺(CAT#:50131)
2.2.4 冰醋酸(CAT#:50132)
2.2.5 三乙胺(CAT#:50131)
2.2.6 磷酸氢二钠(CAT#:50158)
2.2.7 磷酸二氢钠(CAT#:50157)
2.2.8 L-羟脯氨酸(CAT#:46587)
2.2.9 蛋白水解试剂:称取0.1 g苯酚置于100 mL容量瓶,加入50 mL浓盐酸(36%-38%,摩尔浓度约为12 mol/L),然后加水定容至100 mL。
2.2.10 0.1 mol/L HCl水溶液:量取8.3 mL浓盐酸,然后用纯水定容至1000 mL。
2.2.11 衍生剂PITC溶液:将250 μL异硫氰酸苯酯(PITC)用乙腈定容至10 mL。
2.2.12 三乙胺溶液:将1.4 mL三乙胺用乙腈定容至10 mL。
2.2.13 衍生剂DNFB溶液:0.5 mL 2,4-二硝基氟苯(DNFB)溶于50 mL乙腈。
2.2.14 Na2B4O7缓冲溶液:称取1.91 g Na2B4O7·10 H2O,用50 mL纯水溶解。
2.2.15 氨基酸储备液:称取一定量L-羟脯氨酸,用0.1 mol/L HCl水溶液溶解,得到浓度为0.05 mol/L的储备溶液。
2.2.16 氨基酸使用液:将储备液用0.1 mol/L HCl水溶液稀释,得到浓度为0.0003 mol/L的L-羟脯氨酸溶液。
2.2.17 磷酸盐缓冲溶液:0.02 mol/L Na2HPO4 和NaH2PO4水溶液。
3 实验方法
3.1 样品水解
(1) 称取奶粉0.1 g或牛奶0.68 g置于蛋白水解瓶中(2.1.3),加入蛋白水解试剂(2.2.9),
旋紧盖子,振荡混匀,110 °C下反应24 h。
(2) 反应完毕,将反应液全部转移至100 mL蒸馏瓶中,75℃下减压蒸馏至近干。
(3) 用12 mL0.1 mol/L HCl水溶液(2.2.10)分三次溶解残渣,并转移到20 mL玻璃具塞
刻度试管(2.1.5),再用纯水定容至20 mL,待衍生。
3.2 样品衍生
3.2.1 异硫氰酸苯酯(PITC)衍生方法
(1)样品水解溶液衍生
量取200 μL样品水解溶液,置于1.5 mL塑料离心管中,加入100 μL三乙胺溶液(2.2.12)和100 μL衍生剂PITC溶液(2.2.11),混匀,室温反应1h,加入400μL正己烷(2.2.3),旋紧盖子后剧烈振荡5~10 s,静置分层,取200 μL下层溶液与800 μL水混合,经0.22 μm 针式过滤器(2.1.7)过滤,待分析。
(2)标准溶液衍生化
量取200 μL L-羟脯氨酸使用液*(2.2.16),置于1.5 mL塑料离心管中,加入100 μL三乙胺溶液(2.2.12)和100 μL衍生剂PITC溶液(2.2.11),混匀,室温反应1h,加入正己烷400 μL(2.2.3),旋紧盖子后剧烈振荡5~10 s,静置分层,取200 μL下层溶液与800 μL 水混合,经0.22 μm针式过滤器(2.1.7)过滤,待分析。
*根据实际情况,氨基酸使用液浓度可进行调整,本方法中氨基酸使用液浓度仅供参考。
3.2.2 2,4-二硝基氟苯(DNFB)衍生方法
(1)样品溶液衍生
取0.5 mL样品水解溶液置于5 mL玻璃具塞刻度试管(2.1.6)中,加入0.5 mL Na2B4O7
缓冲溶液(2.2.14)和0.5 mL衍生剂DNFB溶液(2.2.13),具塞摇匀,于60 °C下避光反应1 h。
反应完毕将试管置于冷水中冷却,用磷酸盐缓冲溶液(2.2.17)定容至5 mL,混匀后经0.22 μm针式过滤器(2.1.7)过滤,待分析。
(2)标准溶液衍生
取0.5 mL L-羟脯氨酸使用液(2.2.16)置于5 mL玻璃具塞刻度试管(2.1.6)中,加入0.5 mL Na2B4O7缓冲溶液(2.2.14)和0.5 mL衍生剂DNFB溶液(2.2.13),具塞摇匀,于60 °C下避光反应1 h。
反应完毕将试管置于冷水中冷却,用磷酸盐缓冲溶液(2.2.17)定容至5 mL,混匀后经0.22 μm针式过滤器(2.1.7)过滤,待分析。
3.3 色谱条件
3.3.1 异硫氰酸苯酯(PITC)衍生色谱条件
色谱柱: Diamonsil AAA 250×4.6 mm,5 μm(Cat.#:99751)
mol/L乙酸钠水溶液(冰乙酸调节pH值为6.50 ± 0.05)
流动相A: 0.05
流动相B: 甲醇 : 乙腈 : 水=20 : 60 : 20(V : V : V)
流速: 1.0 mL/min
检测波长: UV 254 nm
℃
柱温: 45
进样体积: 10 μL
梯度程序
时间/min 0 39 40 45 46 60
流动相A/% 95 52 0 0 95 95
流动相B/% 5 48 100 100 5 5
3.3.2 2,4-二硝基氟苯(DNFB)衍生色谱条件
色谱柱: Diamonsil AAA 250×4.6 mm,5 μm(Cat.#:99751)
流动相A: 0.02 mol/L Na2HPO4 + 0.02 mol/L NaH2PO4水溶液
流动相B: 甲醇 : 乙腈=10 : 90 (V : V)
流速: 1.0 mL/min
检测波长: UV 360 nm
℃
柱温: 35
进样体积: 10 μL
梯度程序
时间/min 0 39 44 44.0165
流动相A/% 86 60 30 86 86
流动相B/% 14 40 70 14 14
4 色谱图
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Time (min)
L-羟脯氨酸-PITC标准色谱图
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Time (min)
奶粉中添加L-羟脯氨酸-PITC色谱图
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Time (min)
牛奶中添加L-羟脯氨酸-PITC色谱图
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Time (min)
L-羟脯氨酸-DNFB标准色谱图
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Time (min)
奶粉中添加L-羟脯氨酸-DNFB色谱图
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Time (min)
牛奶中添加L-羟脯氨酸-DNFB色谱图。