卵巢肿瘤患者血浆溶血磷脂酸测定及临床意义

第１０卷第２期　２０１２年６月　延安大学学报（医学科学版）　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｙａｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｍｅｄ　Ｓｃｉ）　Ｖｏ１．１０　Ｎｏ．２　Ｊｕｎ．２０１２　卵巢肿瘤患者血浆溶血磷脂酸测定及临床意义　庞秋霞　，张建红　，米志宽　，王爱红　，郭贤利　，魏晓丽　（１．延安大学医学院，陕西延安７１６０００；２．宜川县人民医院，陕西宜川７１６０００）　摘要：目的探讨卵巢肿瘤患者血浆溶血磷脂酸（ＬＰＡ）表达水平及其临床意义。方法观察ＬＰＡ对卵巢癌细胞　增殖力的影响；测定卵巢癌患者４８例、卵巢良性肿瘤患者２０例及ｌ４例健康妇女的血浆ＬＰＡ水平，并作对比分析。　结果ＬＰＡ可增加细胞的增殖能力，且存在剂量依赖性。正常妇女和卵巢良性肿瘤患者血浆ＬＰＡ水平无统计学意　义；卵巢上皮性癌患者血浆ＬＰＡ水平显著高于正常妇女和良性卵巢上皮性肿瘤患者（Ｐ＜０．０１）。结论ＬＰＡ与　卵巢癌的发生发展相关，对卵巢上皮性癌的诊断和病情监测具有潜在的临床应用价值。　关键词：溶血磷脂酸；卵巢肿瘤　中图分类号：Ｒ７３７．３１　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７２—２６３９（２０１２）０２—０００４—０３　Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ｌｙｓ０ｐｈＯｓｐｈａｔｉｄｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｏｖａｒｉａｎ　ｔｕｍｏｒ　ＰＡＮＧ　Ｑｉｕ—ｘｉａ　，ＺＨＡＮＧ　Ｊｉａｎ—ｈｏｎｇ。，ＭＩ　Ｚ　—ｋｕａｎ　。　ⅣＧ　Ａｉ—ｈｏｎｇ　．ＧＵ０　Ｘｉａｎ—ｌｉ　．　Ｅ，Ｘｉａｏ—ｌｉ　（１．Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｙａｎｈｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎ’ａｎ　７１６０００　Ｃｈｉｎａ；２．ＹｉＣｈｕａｎ　ｃｏｕｎｔｙ’Ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，７１６２００　Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ　ａｃｉｄ（ＬＰＡ）ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｏｖａｒｉａｎ　ｔｕｍｏｒ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ｂｙ　ＬＰＡ　ｄｅａｌ　ｗｉｔｈ；４８　ｐａ—　ｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｏｖａｒｉａｎ　ｔｕｍｏｒ，２０　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｂｅｎｉｇｎ　ｏｖａｒｉａｎ　ｔｕｍｏｒｓ　ａｎｄ　１４　ｎｏｒｍａｌ　ｗｏｍｅｎ　ｗｅｒｅ　ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＬＰＡ　ａｎｄ　ｆｏｒ　ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ＬＰＡ　ｐｒｏｍｏｔｅｓ　ｃｅｌｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｓｈｏｗｉｎｇ　ａ　ｄｏｓｅ—ｄｅｐｅｎｄ—　ｅｎｃｙ．Ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ＬＰＡ　ｉｎ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｗｅｒｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｏｆ　ｎｏｒｍａｌ　ｗｏｍｅｎ　ａｎｄ　ｂｅｎｉｇｎ　ｃａｓｅｓ（Ｐ＜０．Ｏ　１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　ＬＰＡ　ｉｓ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ．ＬＰＡ　ｍａｙ　ｈａｖｅ　ａ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｖａｌｕｅ　ｆｏｒ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ｏｆ　ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ　ａｃｉｄ；Ｏｖａｒｉａｎ　ｔｕｍｏｒ　溶血磷脂酸（Ｌｙｓ　０ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃａｃｉｄ，ＬＰＡ）是具　有细胞间信号传递作用的脂类小分子物质，通过Ｇ　蛋白受体介导的多种信号传导通路发挥其多种生物　效应¨Ｊ。２０世纪９０年代末，发现ＬＰＡ可以刺激体　内外卵巢癌细胞的生长及增殖　ｊ，随着研究的不断　深入，人们逐渐发现ＬＰＡ与肿瘤，尤其是与卵巢恶　性肿瘤的发生发展密切相关，特别是近两年来，又发　现卵巢癌患者的腹水、血浆中存在较高浓度ＬＰＡ。　目前溶血磷脂酸在妇科肿瘤特别是卵巢癌方面的研　项目来源：延安市科技计划项目，２０１ｌｋｓ－３３　究受到高度重视。本研究通过观察ＬＰＡ对卵巢癌　细胞增殖力的影响，测定卵巢恶性肿瘤患者血浆　ＬＰＡ水平，探讨ＬＰＡ在卵巢恶性肿瘤诊断及病情监　测中的临床意义。　１材料与方法　１．１研究对象　卵巢癌细胞株ＳＫＯＶ３（由延安大学医学实验中　

心保存）。所有血清均来自延安大学附属医院妇科　卵巢肿瘤患者血浆溶血磷脂酸测定及临床意义　在２００９．９－２０１１．９进行手术治疗的患者，其中卵巢　上皮性癌４８例，年龄平均５１岁。病理类型：浆液性　囊腺癌２８例，黏液性囊腺癌ｌ２例，透明细胞癌３　例，子宫内膜样癌５例；手术病理分期采用国际妇产　科联盟（ＦＩＧＯ）２０００年的分期标准：Ｉ期５例，Ⅱ期　１Ｏ例，Ⅲ期３０例，Ⅳ期３例；病理分级：Ｇ　７例，Ｇ　１５　例，ｃ　２６例；有淋巴结转移者ｌ９例，无淋巴结转移　者２９例；卵巢良性肿瘤２Ｏ例，正常健康献血妇女　１４例为对照组。　１．２　ＬＰＡ对卵巢癌细胞株增殖生长状况的影响　卵巢癌细胞株ＳＫＯＶ３用ＲＰＭＩ１６４０（含１５％小　牛血清）培养基常规培养于３７℃、５％ＣＯ　孵箱，隔　日分瓶，培养３　ｄ后，进行细胞无血清培养，过夜约　１２　ｈ后，分别加入不同浓度（５　Ｍ、２Ｏ　Ｍ、８０　Ｍ）的　ＬＰＡ，空白对照组加ＰＢＳ液代替ＬＰＡ，孵育２４　ｈ，观　察细胞生长状况并进行分析比较。　１．３　ＥＬＩＳＡ方法检测血浆ｕ　水平　采集卵巢上皮性癌、卵巢良性肿瘤患者术前空　腹外周静脉血及正常健康妇女的外周静脉血３　ｍＬ，　离心分离血清置一８０℃保存。严格按照ＬＰＡ试剂盒　（北京泰福仕科技开发有限公司）操作说明检测血　浆ＬＰＡ水平。　１．４统计学处理　采用ＳＰＳＳ１３．０统计软件包对检测数据进行Ｆ　检验、ｘ　检验。　２　结果　２．１　ＬＰＡ对卵巢癌细胞增殖力的影响　ＬＰＡ加入到卵巢癌细胞（ＳＫＯＶ３）后，可增加细　胞的增殖能力，且存在剂量依赖关系，５　Ｍ　ＬＰＡ较　空白对照组能促进细胞增殖，２０　Ｍ　ＬＰＡ较空白对　照组促进细胞生长、增殖明显，８０　Ｍ　ＬＰＡ较２Ｏ　Ｍ　ＬＰＡ促进细胞生长、增殖明显。　２．２　卵巢肿瘤患者与健康妇女血浆ＬＰＡ水平　表１　不同分组血浆ＬＰＡ（　ｍｏＬ／Ｌ）水平比较（互±５）　对三组之间血浆ＬＰＡ水平进行方差分析，结果　有统计学意义（Ｆ＝３．９２，Ｐ＜０．０５），进一步行两　两比较，卵巢上皮性癌组血浆ＬＰＡ水平显著高于卵　巢良性肿瘤组（Ｐ＜０．０５）与正常对照组（Ｐ＜　０．０１），而在卵巢良性肿瘤组与正常对照组之间差　异无统计学意义（Ｐ＞０．０５’ｌ。　２．３血浆ＬＰＡ水平与临床病理因素之间的关系　不同病理类型血浆ＬＰＡ水平无差异，卵巢上皮　癌患者血浆ＬＰＡ水平与肿瘤的进展似乎有相关性，　Ⅲ一Ⅳ期高于Ｉ一Ⅱ期，但是差异无统计学意义（Ｐ＞　０．０５）。有远处转移的卵巢癌患者血浆ＬＰＡ高于无　远处转移的患者（Ｐ＜０．０５），见表２。　表２血浆ｕ　与卵巢癌临床病理因素的关系　按照说明书操作要求及标准计算结果：ＬＰＡ＞　３．２￣ｍｏｌ／Ｌ为阳性，ＬＰＡ≤３．２￣ｍｏｌ／Ｌ为阴性。　３讨论　ＬＰＡ是近年来发现的一种具有生长因子样活性　的脂质分子，它作为细胞间的多功能磷脂信使，通过　Ｇ蛋白受体介导的多种信号途径，发挥多种生物学　效应，ＬＰＡ可诱导多种细胞发生增生性和形态学改　变。正常人血中ＬＰＡ水平很低，卵巢癌患者的腹水　及血浆中ＬＰＡ水平显著升高，而其他肿瘤患者如白　血病、乳癌血浆ＬＰＡ增高不明显，因而认为卵巢癌　细胞可以产生ＬＰＡ＿３　Ｊ。ｍ　能增强卵巢癌细胞的　粘附，迁移，和浸润，是卵巢癌的潜在的标志物和治　疗靶点　］，且有望成为卵巢癌早期诊断指标及卵巢　肿瘤术前良、恶性鉴别指标之一　Ｊ。体外实验证实　ＬＰＡ能通过增强细胞周期蛋白Ｄ１启动子活性而提　高卵巢癌细胞周期蛋白Ｄ１的蛋白水平，从而通过　改变细胞周期进展促进卵：巢癌细胞增殖＿６　Ｊ。国内　学者观察不同浓度ＬＰＡ对ＳＫＯＶ３细胞增殖的影　响，并且合用ＭＡＰＫ信号传导通路的特异性阻断剂　ＰＤ９８０５９，研究发现当阻断ＭＡＰＫ信号传导通路后，　ＬＰＡ促增殖作用被明显抑制，提示ＬＰＡ是通过激活　ＭＡＰＫ信号传导通路促进　ｊ巢癌细胞增殖　Ｊ。Ｓｕｔ－　ｐｈｅｎ等　测定卵巢上皮性癌患者及正常对照组血　浆ＬＰＡ表达水平，结果显示卵巢上皮性癌患者术前　血浆ＬＰＡ水平明显高于正常对照组，且检测卵巢上　

皮性癌的敏感性为９１．１％，特异性为９２．６％。提示　第１０卷　延安大学学报（医学科学版）　第２期　血浆ＬＰＡ对卵巢上皮性癌的诊断具有较好的临床　应用价值。我们的实验结果表明，ＬＰＡ能增加卵巢　癌细胞的增殖能力；在卵巢上皮癌患者中ＬＰＡ高表　达，且明显高于卵巢良性肿瘤组及正常对照组，而卵　巢上皮癌患者血浆ＬＰＡ水平与肿瘤的进展似乎有　相关性，提示ＬＰＡ与卵巢癌的生长、浸润和转移过　程相关。　参考文献：　［１］Ｓａｋａｍｏｔｏ　Ｓ，Ｙｏｋｏｙａｍａ　Ｍ，Ｚｈａｎｇ　Ｘ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｅｘｐｒｅｓ．　ｓｉｏｎ　ｏｆ　ＣＹＲ６１，ａｎ　ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　ｍａｔｒｉｘ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ，ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｂｅｎｉｇｎ　ｐｒｏｓｔａｔｉｃ　ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｌｙ－　ｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ　ａｃｉｄ［Ｊ］．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２００４，１４５（６）：　２９２９－２９４０．　Ｅ２　３　Ｍｉｌｌｓ　ＧＢ，Ｍａｙ　Ｃ，ＭｃＧｉｌｌ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｐｕｔａｔｉｖｅ　ｎｅｗ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｉｎａｓｃｉｔｉｃ　ｆｌｕｉｄ　ｆｒｏｍ　ｏｖａｎｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ：ｉｄｅｎｔｉｆｉ—　ｃａｔｉｏｎ，ｃｈａｒａｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ，ａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃａｎ—　ｃｅｒＲｅｓ，１９８８，４８：１０６６－１０７１．　［３］Ｓｈｅｎ　ｚ，Ｗｕ　Ｍ，Ｅｌｓｏｎ　Ｐ，ｅｔ　ａ１．Ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆｌｙｓｏ．　ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔａｌ　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ　ｆｒｏｍ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ｄｉｓｅａｓｅｓ［Ｊ］．Ｇｙｎｅｃｏｌ，Ｏｎｃｏｌ　２００１，８３（１）：２５．３０．　［４］Ｒｅｎ　Ｊ，Ｘｉａｏ　Ｙ　Ｊ，Ｓｉｎｇｈ　Ｌ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｌｙ８叩ｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｓ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅｌｙ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｈｕｍａｎ　ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ　ｍｅｓｏｔｈｅｌｉａｌ　ｃｅｉｌｓ　ａｎｄ　ｅｎｈａｎｃｅｓ　ａｄｈｅｓｉｏｎ，ｍｉｇｒａｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｉｎｖａｓｉｏｎ　ｏｆ　ｏｖａｒ－　ｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００６，６６（６）：３００６－３０１４．　［５］Ｂａｓｅ　Ｔ，Ｂａｔｂａｒｏｓ　Ｍ，Ｂａｙｋａｒａ　Ｅ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｐｌａｓｍａ　ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｓｅｒｕｍ　ＣＡ－１２５　ａｓ　ａ　ｔｕｍｏｒ　ｍａｒｋｅｒ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ　ａｎｄ　ｆｏｌｌｏｗ　ｕｐ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｅｐｉｔｈｅ—　ｌｉａｌ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｇｙｎｅｃｏｌ　Ｏｎｃｏｌ，２０１０，２１（４）：２４８・　２５４．　［６］Ｈｕ　ＹＬ，Ａｌｂａｎｅｓｅ　Ｃ，ＰｅｓｔｅｌｌＲＧ，ｅｔ　ａ１．Ｄｕａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｆｏｒ　ｌｙｓｏｐｈｏ８ｐｈａｔｉｄｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏ￣ｌｕｍａｎ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｎａｔｌ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｉｎｓｔ，２００３，９５（１０）：７３３－７４０　［７］丁萍萍，李强．溶血磷脂酸促卵巢癌细胞增殖机制的研　究．山东大学学报（医学版），２０１１，４９（７）：３５・３８．　［８］Ｓｕｔｐｈｅｎ　Ｒ，Ｙａｎ　Ｘｕ，Ｗｉｌｂａｎｋｓ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ　ａｒｅ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ　ｏｆ　ｏｖａｒｉａｎ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｅｐｉ—　ｄｅｍｉｏｌｏｇｙ　Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ　Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，２００４，１３（７）：１１８５・Ｉ１９１．　［收稿Ｅｔ期２０１２—０４—１５；责任编辑赵菊梅］　（上接第３页）　［１０］Ａｄｅｒｋａ　Ｄ，Ｌｅ　Ｊ，Ｖｉｌｃｅｋ　ＪＭ．ＩＬ　ｉｎｈｉｂｉｔｅｓ　ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａ—　ｒｉｄｅ・ｉｎｄｕｃｅｄ　ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｈｕｍａｎ　ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ，Ｕ９７３　ｃｅｌｌｓ，ａｎｄ　ｉｎ　ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｊ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，　１９８９，１４３（１１）：３５１７－３５２３．　［１１］张俊华，张国安，金威尔，等．翼状胬肉ＩＬ－６和ＴＮＦ—ｄ　的异常分泌及其意义［Ｊ］．眼科新进展，１９９９，１９（１）：　１５．１７．　［１２］Ｄｕｓｈｋｕ　Ｎ，Ｒｅｉｄ　ＴＷ．Ｐ５３　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ａｌｔｅｒｅｄ　ｌｉｍｂａｌ　ｂａｓ—　ａｌ　ｃｅｌｌｓ　ｏｆ　ｐｉｎｇｕｅｃｕｌａｅ，ｐｔｅｒｙｇｉａ，ａｎｄ　ｌｉｍｂａｌ　ｔｕｍｏｒｓ［Ｊ］　．Ｃｕｒｒ　Ｅｙｅ　Ｒｅｓ，１９９７，１６（１２）：１１７９—１１９２．　［１３］Ｓｐａｎｄｉｄｏｓ　ＤＡ，Ｓｏｕｒｖｉｎｏｓ　Ｇ，Ｋｉａｒｉｓ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ　ｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｌｏｓｓ　ｏｆ　ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｐｔｅｒｙｇｉａ