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第 7 卷 第 6 期2021 年 12 月生物化工Biological Chemical EngineeringVol.7 No.6Dec. 2021
文章编号：2096-0387（2021）06-0018-04
蔓三七提取物对酵母膏和氧嗪酸钾致小鼠 急性高尿酸血症治疗效果的研究
胡居吾（江西省科学院应用化学研究所，江西南昌 330096）摘 要：目的：考察蔓三七提取物对酵母膏和氧嗪酸钾致小鼠急性高尿酸血症的治疗效果。方法：蔓三七粗提物（MSQ1）经
过乙酸乙酯萃取纯化后得到蔓三七提取物（MSQ2），采用高效液相色谱（HPLC）法检测其中绿原酸和异绿原酸A、B、C的含量。
通过腹腔注射酵母膏和氧嗪酸钾建立高尿酸血症模型，将造模成功的雄性KM小鼠随机分为正常对照组，模型组，蔓三七提取物低剂量组（150 mg/kg）、中剂量组（300 mg/kg）和高剂量组（600 mg/kg），每组7只，给药体积均为0.1 mL/kg。灌胃连续给药7 d， 检测小鼠血清中尿酸含量。结果：与模型组相比，蔓三七提取物低剂量组、中剂量组、高剂量组均显示出不同程度降低小鼠血尿酸水平（P＜0.05）。结论：蔓三七提取物（MSQ2）对酵母膏和氧嗪酸钾诱导联合诱导的高尿酸血症小鼠有一定的降低尿酸作用。
关键词：蔓三七提取物；高尿酸血症；氧嗪酸钾；动物实验中图分类号：R965.1 文献标识码：AStudy of Gynura procumbens Extract on the Treatment of Acute Hyperuricemia Induced by Yeast Extract and Potassium Oxonate in MiceHU Juwu(Instiute of Applied Chemistry, Jiangxi Academy of Sciences, Jiangxi Nanchang 330029)
Abstract: Objective: To investigate the effect of Gynura procumbens extract on the treatment of acute hyperuricemia
茶多酚对高尿酸血症小鼠尿酸水平及肝肾组织的影响作者：任群利廖成成刘建国来源：《现代农业科技》2020年第13期摘要 ; ;本文以雄性昆明小鼠為试验动物，通过比较小鼠血清中尿酸、尿素氮、肌酐的含量，检测肝肾和血清中的黄嘌呤氧化酶，以及观察肝肾组织病理特征，研究茶多酚对氧嗪酸钾诱导的小鼠高尿酸血症的治疗作用。
结果表明，与模型组相比，茶多酚高剂量组（600mg/kg）高尿酸血症小鼠血清中尿酸含量极显著减少约33.7%，茶多酚中剂量（300 mg/kg）和低剂量组（150 mg/kg）均极显著减少约28.5%，别嘌醇组（10 mg/kg）极显著减少99.5%（P关键词 ; ;茶多酚;小鼠;尿酸;高尿酸模型;病理组织中图分类号 ; ;R151 ; ; ; ;文献标识码 ; ;A文章编号 ; 1007-5739（2020）13-0200-03 ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; 开放科学（资源服务）标识码（OSID）Abstract ; ;The male Kunming mice were used as experimental animals in this paper， the therapeutic effect of tea polyphenols on hyperuricemia mice induced by potassium oxyzinate by comparing the serum uric acid， urea nitrogen and creatinine contents of the mice， detecting the xanthine oxidase in liver， kidney and serum， and observing the pathological features of liver and kidney tissue was studied. The results showed that compared with model group， the content ofserum uric acid in tea polyphenols high dose group （600 mg/kg） significantly decreased by about 33.7%， in the tea polyphenols middle dose group （300 mg/kg） and low dose group （150mg/kg） all significantly decreased by about 28.5%， in the allopurinol group （10 mg/kg）significantly decreased by 99.5% （PKey words ; ;tea polyphenols; mice; uric acid; hyperuricemia model; pathological tissue高尿酸是痛风的生化基础，还与高血压、冠心病、代谢综合征、糖尿病等疾病密切相关[1-2]。
山东大学博士学位论文高尿酸血症动物模型的建立及抗痛风中药的筛选姓名：刘文波申请学位级别：博士专业：内科学（风湿病学）指导教师：李兴福20080420山东大学博士学位论文符号说明英文缩写ＸＯＤＣＯＸ英文全称ｘａｎｔｈｉｎｅｏｘｉｄａｓｅｃｙｃｌｏｘｙｇｅｎａｓｅｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ．１中文全称黄嘌岭氧化酶环氧化酶白细胞介素１Ｂ肿瘤坏死因子Ｑ微晶型尿酸钠ＩＬ—ｌｐＴＮＦ．ａＢｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ．ｎＭＳＵＵＡＯＡＮＳＡＩＤｓｍｏｎｏｓｏｄｉｕｍｕｒａｔｅｃｒｙｓｔａｌｕｒｉｃａｃｉｄｏｘｏｎｉｃａｃｉｄＮｏｎ．ｓｔｅｒｏｉｄａｌａｎｔｉ．．尿酸氧嗪酸非甾体抗炎药ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｄｒｕｇＬＴＰＧＩｇＩｐｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａＩｉｎｏｓｉｎｅ白细胞三烯前列腺素灌胃给药腹腔注射次黄嘌呤核苷酸５一磷酸核糖一１一焦磷酸花生四烯酸质量／电荷，质荷比表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术ｉｎｊｅｃｔｉｏｎＩＭＰＰＲＰＰｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ５一Ｐｈｏｓｐｈｏｒｂｏｓｙｌ—ｌ－ｐｙｒｏｐｈｏｓ—ｐｈａｔｅＡＡａａｃｈｉｄｏｎｉｃａｃｉｄＭ／ＺＳＥＬＤＩ．ＴＯＦＭＳＭａｓｓ／ＣｈａｒｇｅＳｕｒｆａｃｅｅｎｈａｎｃｅｄｌａｓｅｒｄｅｓｏｒｐｔｉｏｎ／ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎｔｉｍｅ－ｏｆ－ｆｌｉｇｈｔｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｌｌ原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。
除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。
对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。
本声明的法律责任由本人承担。
论文作者签名：翻童遗Ｅｌ期：矽扎５．矽关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。
大鼠高尿酸血症肾损害模型的建立目的：建立高尿酸血症肾损害的动物模型，为进一步研究高尿酸血症肾损害的发病机制创造条件。
方法：分别腺嘌呤、氧嗪酸钾两种药物灌胃，观察大鼠血清尿酸、血肌酐，行肾组织病理检查。
结果：1.腺嘌呤法：模型组血尿酸未显著升高已出现明显肾损害表现，2.氧嗪酸钾法：模型组血尿酸较对照组显著升高，血肌酐无统计学差异。
模型组肾脏组织切片HE染色光镜下见肾小管上皮细胞颗粒变性。
结论：1. 腺嘌呤所致高尿酸血症不排除腺嘌呤代谢产物2，8-二羟基腺嘌呤导致肾损害继发高尿酸可能，腺嘌呤造模方法不适合用于研究高尿酸血症肾损害。
2.氧嗪酸钾法造模所致肾损害符合高尿酸血症肾损害。
标签：高尿酸血症；动物模型；腺嘌呤；氧嗪酸钾前言尿酸是人体内嘌呤核苷酸的分解代谢产物，嘌呤核苷酸80%由人体细胞代谢产生，20%从食物中获得[1]。
由于合成增多和（或）排泄减少，血尿酸浓度超出正常范围，称为高尿酸血症（hyperuricemia HU）。
血中尿酸过高就会形成结晶沉积于关节、泌尿系，形成痛风、肾结石、尿酸性肾病，且越来越多的证据表明高HU是肾脏、心血管疾病的独立危险因素[2-3]。
为方便研究HUA对肾脏、心血管等的损害机制，建立动物模型是很有必要的。
1材料與方法1.1实验材料1.1.1.实验动物：雄性Wistar大鼠40只，初始体重200g±30g，6-7周龄，由山东中医药大学实验动物中心提供。
1.1.2.主要设备：罗氏MODULAR生化自动分析仪，由山东省千佛山医院检验科提供，病理检查由山东千佛山医院病理科提供。
1.1.3.药物：腺嘌呤：购自Amresco公司，批号0683。
氧嗪酸钾：购自济南德信佳生物科技有限公司，批号10080201。
1.1.4.药物配制方法：腺嘌呤：用灭菌蒸馏水配成25mg/ml悬浊液，按100mg/kg体重灌胃，一天一次。
氧嗪酸钾：用灭菌蒸馏水配成100mg/ml的悬浊液，按400mg/kg体重灌胃，一天两次。
第41卷第6期2022年11月大连工业大学学报J o u r n a l o fD a l i a nP o l y t e c h n i cU n i v e r s i t yV o l .41N o .6N o v .2022收稿日期:2021-06-20.基金项目:国家重点研发计划项目(2017Y F D 0400504).作者简介:苑丽艳(1995-),女,硕士研究生;通信作者:姜鹏飞(1986-),男,高级工程师.D O I :10.19670/j .c n k i .d l g yd x x b .2022.0602基于氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠模型评价玉米花丝中性多糖的降尿酸作用苑丽艳1, 姜鹏飞1,2, 祁立波1,2, 傅宝尚1,2, 林松毅1,2(1.大连工业大学食品学院,辽宁大连 116034;2.大连工业大学国家海洋食品工程技术研究中心,辽宁大连 116034)摘要:为研究玉米花丝中性多糖在体内的降尿酸作用,利用水提醇沉法提取玉米花丝中的粗多糖,在D E A E -52纤维素层析柱上分离纯化得到中性多糖㊂结果表明,玉米花丝中性多糖能够降低氧嗪酸钾所致高尿酸血症模型小鼠的血尿酸浓度,且其活性随给药浓度的增大而提高㊂在低剂量(10m g /k g)㊁中剂量(20m g /k g )㊁高剂量(40m g /k g )3个给药浓度下,小鼠血清U A 水平分别降低了45.68%(P <0.001)㊁50.51%(P <0.001)㊁57.56%(P <0.001)㊂中剂量组的血清和肝脏黄嘌呤氧化酶活性分别下降了14.47%(P <0.05)和6.90%(P <0.05),高剂量组的血清和肝脏黄嘌呤氧化酶活性19.89%(P <0.01)和7.24%(P <0.05)㊂玉米花丝中性多糖可改善肾组织的病理变化,且对小鼠健康无显著影响㊂关键词:玉米花丝;多糖;尿酸;黄嘌呤氧化酶;高尿酸血症中图分类号:T S 201文献标志码:A文章编号:1674-1404(2022)06-0396-06E v a l u a t i o no f h y p o u r i c e m i a e f f e c t s o f n e u t r a l p o l ys a c c h a r i d e f r o mc o r n s i l k b a s e do n p o t a s s i u mo x o n a t e d -i n d u c e dh y pe r u r i c e m i am o u s em o d e l Y U A N L i y a n 1, J I A N G P e n gf e i 1,2, Q I L i b o 1,2, F U B a o s h a n g 1,2, L I N S o n g yi 1,2(1.S c h o o l o f F o o dS c i e n c ea n dT e c h n o l o g y ,D a l i a nP o l y t e c h n i cU n i v e r s i t y,D a l i a n 116034,C h i n a ;2.N a t i o n a l E n g i n e e r i n g R e s e a r c hC e n t e r o f S e a f o o d ,D a l i a nP o l y t e c h n i cU n i v e r s i t y,D a l i a n 116034,C h i n a )A b s t r a c t :T o s t u d y t h e e f f e c t o f n e u t r a l p o l y s a c c h a r i d e f r o mc o r n s i l k o n r e d u c i n g ur i c a c i d i n v i v o ,t h e c r u d e p o l y s a c c h a r i d e s f r o mc o r n s i l kw e r e e x t r a c t e d b y w a t e r e x t r a c t i o n a n d a l c o h o l p r e c i p i t a t i o n ,t h e n s e p a r a t e da n d p u r i f i e do nD E A E -52c e l l u l o s e c h r o m a t o g r a p h y c o l u m n .T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t c o r n s i l kn e u t r a l p o l y s a c c h a r i d e sc o u l dr e d u c et h es e r u m u r i ca c i dc o n c e n t r a t i o no fh y pe r u r i c e m i a m o d e l m i c ei n d u c e d b y p o t a s s i u m o x a z i n a t e ,a n d i t s a c t i v i t i e si n c r e a s e d w i t h t h ei n c r e a s i n g of d r ug c o n c e n t r a t i o n .U n d e r th e t h r e e a d mi n i s t r a t i o nc o n c e n t r a t i o n so f l o wd o s e (10m g /k g),m e d i u md o s e (20m g /k g )a n dh i g hd o s e (40m g /k g ),t h eU Al e v e l i ns e r u mo fm o d e lm i c ed e c r e a s e db y 45.68%(P <0.001),50.51%(P <0.001)a n d57.56%(P <0.001),r e s p e c t i v e l y.T h ex a n t h i n eo x i d a s e a c t i v i t y i ns e r u m a n dl i v e ro f t h e m i d d l ed o s e g r o u p d e c r e a s e db y 14.47%(P <0.05)a n d6.90%(P <0.05),r e s p e c t i v e l y ,w h i l e t h a t o f t h eh i g hd o s e g r o u p d e c r e a s e db y 19.89%(P <0.01)a n d 7.24%(P <0.05).T h e c o r n f i l a m e n tn e u t r a l p o l y s a c c h a r i d e s c a n i m p r o v e t h e p a t h o l o g i c a l c h a n ge s of k i d n e y t i s s u e ,a n dh a s n o s ig n i f i c a n t i m pa c t o n t h eh e a l t ho fm i c e .Copyright ©博看网. All Rights Reserved.K e y w o r d s:c o r n s i l k;p o l y s a c c h a r i d e;u r i c a c i d;x a n t h i n e o x i d a s e;h y p e r u r i c e m i a0引言高尿酸血症(HU A)的发生受血尿酸(U A)水平的调控,当机体内嘌呤代谢紊乱,肾脏U A排泄不足引起体内U A浓度异常增加,高于416μm o l/L时,即为高尿酸血症[1],会导致痛风㊁炎症反应及其他代谢性疾病,心血管疾病㊁急慢性肾病等的患病概率增加[2-3]㊂由于生活水平的提高以及人们饮食习惯的变化等,全球越来越多的人患上HU A,且患者呈现明显的低龄化趋势[4]㊂目前诊治HU A和痛风的有效药物如别嘌呤醇(A P)等均可能导致患者出现严重的恶性反应,甚至死亡[5]㊂因此寻找具有抗HU A作用且更加安全的活性物质意义重大㊂玉米花丝资源丰富㊁来源广阔,含有多种有益的生物活性成分,在民间常被煮水后饮用治疗肾炎㊁高血压㊁糖尿病等疾病,或与其他药物配伍使用治疗痛风[6]㊂多糖是其最主要的活性成分[7]㊂研究表明,玉米花丝多糖在利尿㊁抗糖尿病㊁降血脂等方面均表现出良好的药理作用,是一种潜在的功能制剂[8-9]㊂然而,关于玉米花丝多糖对HU A的作用尚未有明确的报道㊂本实验以玉米花丝为原料,从中分离纯化得到一种中性多糖,利用氧嗪酸钾(P O)构建HU A 小鼠模型,以A P为阳性药物,依据血尿酸(U A)浓度㊁血清和肝脏黄嘌呤氧化酶(X O)活性㊁血肌酐(C r)浓度以及肝脏㊁肾脏病理学变化考察其体内降尿酸活性,初步分析作用机制,以期丰富降尿酸活性成分组成,为玉米花丝资源的充分利用提供依据㊂1材料与方法1.1原料与仪器干玉米花丝,品种为辽育606,秋季收集自大连仟和市场㊂清洁级雄性昆明种小鼠(I D S C X K2020-0001),体重(20ʃ2)g,8周龄,辽宁长生生物科技有限公司;氧嗪酸钾,麦克林有限责任公司;别嘌呤醇,阿拉丁试剂(上海)有限公司;血尿酸㊁黄嘌呤氧化酶㊁血肌酐试剂盒,南京建成生物工程研究所;B C A试剂盒,北京索莱科技有限宝公司;D E A E-52纤维素,B X D公司㊂C X G-1F层析柜,上海青浦沪西仪器厂;S Y-5000旋转蒸发器,上海亚荣生化仪器厂;C R22N 高速冷冻离心机,日立工机株式会社;10N D冷冻真空干燥机,宁波新芝生物科技有限公司;I n f i-n i t eM200多功能酶标仪,瑞士T E C A N公司㊂1.2方法1.2.1玉米花丝中性多糖的制备1.2.1.1粗多糖的提取按照C h e n等[10]的方法提取粗多糖㊂精确称取1g干玉米花丝,利用热水浸提法在料液比1ʒ100㊁80ħ提取90m i n㊂8000r/m i n离心水提液20m i n,保留上层溶液,蒸发浓缩,添加乙醇溶液,终体积分数为70%,4ħ下静止24h㊂加入蒸馏水以重新溶解沉淀,冻干后获得水提玉米花丝粗多糖(C C S P)㊂1.2.1.2脱色脱蛋白及透析处理C C S P经过氧化氢脱色,以体积比1ʒ0.2添加S e v a g溶液(氯仿与正丁醇体积比5ʒ1),以去除其中的蛋白质类物质,重复6次,合并所得液体,浓缩去除有机试剂[11]㊂经流动水和蒸馏水分别透析处理2d,冻干样品㊂1.2.1.3 D E A E-52柱层析将预先吸水充分溶胀㊁N a O H/H C l/N a O H 溶液分别浸润30m i n,用蒸馏水不断冲洗直至中性的D E A E-52纤维素填入规格为Φ3.0c mˑ60c m的纯化柱中㊂将脱色脱蛋白并透析处理的C C S P样品重新溶解后装入该纯化柱中,以1m L/m i n的体积流量连续通入蒸馏水,直至无多糖组分被洗脱㊂该中性多糖组分命名为N C S P,苯酚-浓硫酸法测定其中的多糖类物质[12]㊂1.2.2动物饲养雄性昆明种小鼠在温度(22ʃ2)ħ㊁相对湿度(50ʃ15)%㊁正常暗/光循环(12h/12h)条件下适应至少一周,其间自由进食及饮水㊂1.2.3高尿酸血症模型小鼠的构建根据Z h a n g等[13]的方法并稍做修改后建立HU A小鼠模型,造模药为P O,阳性药为A P㊂将小鼠随机分为6组:空白对照组,模型对照组,阳性对照组,N C S P低㊁中㊁高剂量组(10㊁20㊁40m g/k g)㊂正常对照组在7d内均接受生理盐水处理,其余各组用250m g/k g的P O处理以诱导HU A㊂1h 后,正常和模型对照组用生理盐水处理,阳性对照793第6期苑丽艳等:基于氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠模型评价玉米花丝中性多糖的降尿酸作用Copyright©博看网. All Rights Reserved.组㊁N C S P3个给药组各自给予5m g /k g 的A P 和相应浓度的N C S P ㊂处理6d 后,在最终给药处理前12h 将食物撤出㊂灌胃1h 后,于眼球处采血,检测血液相关指标㊂颈椎脱臼法处死实验动物,当即分离肝㊁肾㊁脾㊁心并称重㊂其中一部分肾㊁肝脏样本处理后进行病理学研究㊂另取部分肝脏组织用以评价肝脏X O 活性㊂1.2.4 高尿酸血症小鼠生化指标的测定依照相应试剂盒的指示说明,评价血U A ㊁C r 水平及血清和肝脏X O 活性㊂1.2.4.1 血清U A 的测定将5μL 蒸馏水或U A 标准溶液(400μm o l /L )或小鼠血清样品与250μL 试剂1混合均匀,37ħ下保持静止10m i n 而后检测各样品在510n m 的吸光度㊂血清尿酸浓度按式(1)计算㊂c (U A )=A c -A 0A s -A 0c s(1)式中:A c 为小鼠血清样品的吸光度;A s 为U A 标准溶液的吸光度;A 0为空白对照(蒸馏水)的吸光度;c s 为U A 标准溶液浓度,μm o l /L ㊂1.2.4.2 血清和肝脏X O 活性的测定向100μL 匀浆样品中依次加入1.0m L 试剂1㊁0.05m L 试剂2㊁0.2m L 试剂3和0.02m L试剂4,37ħ水浴20m i n ㊂加入1m L 试剂5摇匀后检测各反应液在530n m 的吸光度㊂血清X O 酶活单位的定义:每毫升血清(浆)每分钟催化产生1n m o l 尿酸为一个酶活力单位(U /L )㊂肝脏X O 酶活单位的定义:每毫克组织蛋白每分钟催化产生1n m o l 尿酸为一个酶活力单位(U /g )㊂血清X O 酶活力=A 'c -A '012.6ˑ10-3ˑV V c ˑ1t (2)式中:A 'c 为小鼠血清样品的吸光度;A '0为空白对照(蒸馏水)的吸光度;V 为反应溶液总体积,L ;V c 为样品体积,L ;t 为反应时间,20m i n ;12.6ˑ10-3为尿酸摩尔吸光系数与孔板光径的乘积,m L /n m o l㊂肝脏X O 酶活力=(A ᵡc -A ᵡ0)12.6ˑ10-3ˑV ᵡV ᵡcˑ1t ːc c (3)式中:A ᵡc 为小鼠肝匀浆上清样品的吸光度;A 0为空白对照(蒸馏水)的吸光度;V ᵡ为反应溶液总体积,L ;V ᵡc 为样品体积,L ;t 为反应时间,20m i n ;12.6ˑ10-3为尿酸摩尔吸光系数与孔板光径的乘积,m L /n m o l ;c c 为肝匀浆上清的蛋白浓度,由B C A 试剂盒测定㊂1.2.4.3 血清C r 的测定将6μL 蒸馏水㊁C r 标准溶液(442μm o l /L )㊁小鼠血清样品分别与180μL 试剂1混合均匀,37ħ下温育5m i n ,在546n m 处测定吸光度(A 1)㊂继续添加180μL 试剂2,测定吸光度(A 2)㊂血清C r 浓度按公式(4)计算㊂c =(A c 2-k A c 1)-(A 02-k A 01)(A s 2-k A s 1)-(A 02-k A 01)ˑc s(4)式中:A c 1㊁A c 2为小鼠血清样品的吸光度,A s 1㊁A s 2为C r 标准溶液的吸光度,k 为稀释因子,A 01㊁A 02为空白对照(蒸馏水)的吸光度㊂1.2.5 数据统计分析实验结果表示为(均值ʃS D )㊂利用单因素方差分析进行数据处理与结果分析,确定统计学差异㊂利用G r a p h P a dP r i s m8.3.0软件进行统计图绘制㊂2 结果与讨论2.1 玉米花丝中性多糖对高尿酸血症模型小鼠生化指标的影响2.1.1 对高尿酸血症小鼠血尿酸浓度的影响如图1(a )所示,P O 诱导的HU A 模型小鼠血清U A 浓度与未经药物处理的正常小鼠相比显著增加,二者间存在明显差异(P <0.001),表明HU A 小鼠模型成功建立㊂与模型对照组相比,阳性药物A P 和N C S P 低㊁中㊁高剂量组血清U A 水平均显著下降,分别下降66.67%㊁45.68%㊁50.51%和57.56%(P <0.001),表明N C S P 拥有抗HU A 的能力,且活性呈剂量依赖㊂尿酸盐是血浆中主要的抗氧化剂之一,其极低水平长期存在极有可能引发其他疾病,且其与死亡率之间存在U 型曲线关系[14-15]㊂本实验中各剂量的N C S P 均未将血清U A 降至极低水平,其值与正常对照组接近,提示N C S P 具有作为功能食品成分降低血清U A 水平㊁治疗HU A 的应用潜力㊂2.1.2 对高尿酸血症小鼠血清和肝脏黄嘌呤氧化酶活性的影响X O 是产生U A 的关键酶,其活性升高会引起U A 水平的升高,抑制该酶活性是阻断体内U A 过量合成,并在临床上治疗痛风的有效途径[16]㊂为了探究N C S P 降尿酸作用机制,对X O 活性进行测定㊂如图2(b )和图2(c )所示,模型对照组小鼠血清和肝脏中的X O 活性均明显提高(P <0.01),分别达到9.40U /L 和2.90U /g ,说明经氧嗪酸钾诱导后,在嘌呤分解代谢的最后步893大 连 工 业 大 学 学 报第41卷Copyright ©博看网. All Rights Reserved.(a)血清尿酸 (b)血清黄嘌呤氧化酶 (c)肝脏黄嘌呤氧化酶 (d)血肌酐与空白对照组相比,*P <0.05,**P <0.01,***P <0.001;与模型对照组相比,#P <0.05,##P <0.01,###P <0.001图1 N C S P 对高尿酸血症模型小鼠生化指标的影响F i g.1 E f f e c t o fN C S Po nb i o c h e m i c a l i n d e x e s o f h y pe r u r i c e m i am o d e lm i c e 骤中负责将次黄嘌呤分解成黄嘌呤㊁最终产生U A 的X O 活性被激活并提高㊂与图1(a)所示P O 导致HU A 小鼠血清U A 浓度明显增加的结果一致㊂N C S P 组血清和肝脏X O 活性均随剂量增大而表现出更大程度的减弱,说明N C S P 对X O 活性具有抑制作用㊂其中血清X O 活性在中㊁高剂量时分别降低了14.47%(P <0.05)和19.89%(P <0.01);肝脏X O 活性在中㊁高剂量时分别降低了6.90%和7.24%㊂提示N C S P 能够以降低X O 活性阻碍U A 产生的方式表现出抗H U A 的能力㊂2.1.3 对高尿酸血症小鼠血肌酐浓度的影响U A 被认为是慢性肾脏疾病发展的潜在危险因素,因此本研究探讨N C S P 对小鼠肾脏功能的影响㊂在实际应用中,血清C r 浓度常用来体现肾功能状况[17]㊂如图1(d )所示,相较于空白对照组,模型对照组小鼠血清C r 水平显著升高㊂中剂量和高剂量组能够更好地降低HU A 小鼠的血清C r 水平,分别降低了20.07%(P <0.05)和30.02%(P <0.01),作用效果比阳性药物更好㊂提示N C S P 具有改善肾损害的能力,可能与肾U A 清除率增加有关[5]㊂2.2 玉米花丝中性多糖对高尿酸血症模型小鼠病理组织学的影响2.2.1 对高尿酸血症小鼠肾脏组织的影响肾脏在HU A 发生中的作用巨大,70%的U A 由肾脏排出,其发生病变会造成U A 直接排泄不足,增加血液U A 水平,引起HU A [18-19]㊂如图2所示,空白对照组小鼠肾组织清晰完整,未见病理损伤㊂模型对照组小鼠肾脏组织形态被破坏,肾小球严重萎缩,肾小管扩张,管腔不规则,说明P O 引起了严重的肾损伤㊂N C S P 治疗后,小鼠肾脏结构均有不同程度的恢复,其中高剂量组小鼠的肾脏组织恢复效果更好,该结果与其对U A 和C r 浓度的影响一致㊂说明N C S P 通过保护HU A 小鼠的肾脏功能,增加肾U A 排泄量,减少了模型小鼠血清U A 含量㊂2.2.2 对高尿酸血症小鼠肝脏组织的影响如图3所示,与空白对照组相比,各剂量组小鼠肝组织均不存在变性㊁肿胀等其他病理学变化,说明N C S P 对小鼠无毒性作用㊂2.3 玉米花丝中性多糖对高尿酸血症模型小鼠生理指标的影响2.3.1 对高尿酸血症小鼠脏器系数的影响不同剂量多糖对高尿酸血症模型小鼠脏器系数的影响如表1所示㊂结果表明,多糖对小鼠的993第6期苑丽艳等:基于氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠模型评价玉米花丝中性多糖的降尿酸作用Copyright ©博看网. All Rights Reserved.(a )空白对照组(b )模型对照组(c )阳性对照组(d )N C S P低剂量组(e )N C S P中剂量组(f )N C S P 高剂量组图2 N C S P 对高尿酸血症模型小鼠肾脏组织的影响F i g .2 E f f e c t o fN C S Po nk i d n e y t i s s u e o f h y pe r u r i c e m i a m o d e lm i ce(a )空白对照组(b)模型对照组(c )阳性对照组(d )N C S P低剂量组(e )N C S P中剂量组(f )N C S P 高剂量组图3 N C S P 对高尿酸血症模型小鼠肝脏组织的影响F i g .3 E f f e c t o fN C S Po n l i v e r t i s s u e o f h y pe r u r i c e m i a m o d e lm i c e肝㊁肾㊁心和脾脏系数的影响不存在统计学差异(P >0.05)㊂说明玉米花丝多糖并未引起小鼠脏器质量明显变化,安全可靠㊂2.3.2 对高尿酸血症小鼠体重的影响不同剂量多糖对高尿酸血症模型小鼠体重的影响如表2所示㊂结果表明,小鼠体重与对照组表1 不同剂量N C S P 对高尿酸血症模型小鼠脏器系数的影响T a b .1 E f f e c t s o fN C S Po no r g a n i n d e x e s i nh y pe r u r i c e m i am o d e lm i c e %组别肝脏系数肾脏系数心脏系数脾脏系数空白对照(3.85ʃ0.45)a (1.28ʃ0.11)a (0.73ʃ0.14)a (0.27ʃ0.06)a 模型对照(4.06ʃ0.52)a (1.28ʃ0.13)a (0.63ʃ0.14)a (0.24ʃ0.02)a 阳性对照(3.88ʃ0.27)a (1.19ʃ0.12)a (0.63ʃ0.13)a (0.25ʃ0.11)a 低剂量(4.13ʃ0.47)a (1.29ʃ0.13)a (0.68ʃ0.16)a (0.24ʃ0.07)a 中剂量(3.92ʃ0.43)a (1.20ʃ0.19)a (0.69ʃ0.17)a (0.22ʃ0.10)a 高剂量(4.01ʃ0.41)a (1.20ʃ0.08)a (0.65ʃ0.20)a (0.22ʃ0.03)a 注:同一列相同字母代表数据无显著差异(P >0.05)㊂表2 不同剂量N C S P 对高尿酸血症模型小鼠体重的影响注:同一列相同字母代表数据无显著差异(>0.0504大 连 工 业 大 学 学 报第41卷Copyright ©博看网. All Rights Reserved.相比差别不大(P>0.05)㊂实验期间小鼠无死亡现象,证明3种剂量的玉米花丝多糖对小鼠健康没有显著影响㊂3结论通过D E A E-52纤维素柱层析法实现了玉米花丝多糖类化合物的分离纯化,研究了其对P O 所致HU A模型小鼠的影响㊂结果表明,纯化的N C S P显著降低HU A模型小鼠体内U A浓度㊂同时,血清C r水平显著降低㊂肾脏组织病理学分析证明N C S P具有较好的减轻肾脏损害的能力㊂对血清和肝脏中X O活性进行测定,得到N C S P 降尿酸作用机制之一是通过抑制该酶活性减少U A产生,从而表现出抗HU A的作用㊂玉米花丝中性多糖的抗高尿酸血症作用与其抑制黄嘌呤氧化酶活性㊁减少血尿酸生成㊁保护肾功能损害促进血尿酸排泄有关㊂参考文献:[1]王龙源.牛蒡根化学成分研究及其水取物对小鼠高尿酸血症的影响[D].青岛:青岛大学,2012.[2]Z HA N GZ C,Z H O U Q,Y A N G Y,e ta l.H i g h l ya c y l a t e d a n t h o c y a n i n s f r o m p u r p l e s w e e t p o t a t o(I p o-m o e ab a t a t a s L.)a l l e v i a t eh y p e r u r ic e m i aa n dk id ne y i nf l a m m a t i o n i n h y p e r u r i c e m i cm i c e:p o s s i b l e a t t e n u a-t i o ne f f e c t s o na l l o p u r i n o l[J].J o u r n a l o fAg r i c u l t u r a la n dF o o dC h e m i s t r y,2019,67(22):6202-6211.[3]Q I A N X Y,WA N GX,L U OJ,e t a l.H y p o u r i c e m i ca n dn e p h r o p r o t e c t i v e r o l e s o f a n t h o c y a n i n s i nh y p e r u-r i c e m i cm i c e[J].F o o d&F u n c t i o n,2019,10(2): 867-878.[4]L IQ Y,K A N GXY,S H I CC,e t a l.M o d e r a t i o n o fh y p e r u r i c e m i a i nr a t sv i ac o n s u m i n g w a l n u t p r o t e i n h y d r o l y s a t e d i e t a n d i d e n t i f i c a t i o no f n e wa n t i h y p e r u-r i c e m i c p e p t i d e s[J].F o o d&F u n c t i o n,2018,9(1): 107-116.[5]D U B C HA K N,F A L A S C A G F.N e wa n d i m p r o v e d s t r a t e g i e s f o r t h e t r e a t m e n t o f g o u t[J].I n t e r n a t i o n a l J o u r n a l o f N e p h r o l o g y a n d R e n o v a s c u l a r D i s e a s e, 2010,3:145-166.[6]赵文竹.玉米须功能因子活性评价及其降血糖机理研究[D].长春:吉林大学,2014.[7]黄俊文,倪贺,阳成伟.玉米须活性成分提取及其保健机理研究进展[J].食品工业科技,2021,42(8):388-395.[8]石海春,李东波,余学杰,等.正红505玉米花丝多糖结构及其降血糖活性分析[J].玉米科学,2018,26(4):109-117.[9]杨夏,孙从永,余江南,等.玉米须酸性多糖的结构表征及降血脂活性[J].江苏大学学报(医学版),2018, 28(4):333-338.[10]C H E NSH,C H E N H X,T I A NJG,e t a l.C h e m i-c a lm od i f i c a t i o n,a n t i o x i d a n t a n dα-a m y l a se i n h i b i t o-r y a c t i v i t i e s of c o r ns i l k p o l y s a c c h a r i d e s[J].C a r b o-h y d r a t eP o l y m e r s,2013,98(1):428-437.[11]Y A N G W W,WA N G L M,G O N G L L,e ta l. 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藤茶二氢杨梅素对小鼠高尿酸血症模型的降尿酸作用李广枝;卢忠英;徐敬友;郁建平【摘要】为了解藤茶中二氢杨梅素对动物高尿酸血症模型的降尿酸作用，采用腺嘌呤联合乙胺丁醇建立小鼠高尿酸血症模型，给予小鼠二氢杨梅素灌胃给药，剂量分别为0.752 g/kg、0.376 g/kg、0.187 g/kg。
检测小鼠血清尿酸( UA)，尿素氮( BUN)，肌酐( Cr)的含量为检测指标。
结果表明别嘌呤醇组、二氢杨梅素高、中剂量具有显著的降低血清尿酸作用。
藤茶中二氢杨梅素具有降低血清尿酸的作用。
%To study the effect of dihydromyricetin from Ampelopsis grossedentata on reducing uric acid in hype-ruricemia animal model, hyperuricemia mice model was established by given adenine joint with ethambutol. Mice were randomly divided into high dosage group, middle dosage group and low dosage group. Dihydromyr-icetin from Ampelopsis grossedentata was given by gavage administration with the dosage of 0. 752 g/kg, 0. 376 g/kg and 0. 187 g/kg, respectively. Serum uric acid ( UA ) , blood urea nitrogen ( BUN ) and creatinine ( Cr) were selected as detection indicators. The results showed that the allopurinol group, the high-dose and the medium -dose group of dihydromyricetin significantly reduced serum uric acid. It suggested that dihydromyricetin from Ampelopsis grossedentatamay reduce serum uric acid.【期刊名称】《山地农业生物学报》【年(卷),期】2014(000)004【总页数】3页(P40-42)【关键词】二氢杨梅素;藤茶;高尿酸血症模型;降尿酸【作者】李广枝;卢忠英;徐敬友;郁建平【作者单位】贵州大学生命科学学院，贵州贵阳 550025;贵州大学生命科学学院，贵州贵阳 550025;贵州大学生命科学学院，贵州贵阳 550025;贵州大学生命科学学院，贵州贵阳 550025【正文语种】中文【中图分类】R961.1藤茶是一种代茶饮品，在我国民间饮用历史悠久，藤茶系葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata(Hand.Mazz)W.T.Wang.茎叶的加工物，有效成分为黄酮类物质，包括二氢杨梅素、杨梅素、藤茶苷、槲皮素等，二氢杨梅素约占黄酮的80%［1］。
芹菜素对氧嗪酸钾盐致高尿酸血症小鼠的降尿酸及肾保护作用机制研究缪明星;王星;陆琰;王欣【期刊名称】《中国药房》【年(卷),期】2016(027)034【摘要】目的：研究芹菜素对氧嗪酸钾盐致高尿酸血症小鼠的降尿酸及肾保护作用机制。
方法：将50只小鼠按体质量随机分为正常组、模型组、别嘌呤醇组（5 mg/kg）与芹菜素低、高剂量组（40、80 mg/kg），每组10只。
除正常组外，其余各组小鼠ig氧嗪酸钾250 mg/kg复制高尿酸血症模型，造模后1 h，各给药组小鼠ig相应药物，正常组和模型组小鼠ig等体积生理盐水，每天1次，连续7 d。
测定各组小鼠血尿酸、尿尿酸、24 h尿肌酐水平和肾脏转运体相关蛋白（mURAT1、mOCT1、mOCT2、mOCTN1、mOCTN2）表达水平。
结果：与正常组比较，模型组小鼠血尿酸、尿尿酸、mURAT1水平显著升高，mOCT1、mOCT2、mOCTN1、mOCTN2水平和24 h尿肌酐水平显著降低（P＜0.01或P ＜0.001）；与模型组比较，芹菜素低、高剂量组及别嘌呤醇组小鼠血尿酸、尿尿酸、mURAT1水平显著降低，24 h尿肌酐水平、mOCT1、mOCT2、mOCTN1和mOCTN2水平显著升高（P＜0.05或P＜0.01或P＜0.001）。
结论：芹菜素能降低氧嗪酸钾盐致高尿酸血症小鼠的尿酸水平，保护肾脏；其作用机制可能与下调小鼠肾脏中mURAT1水平，上调mOCTN1、mOCTN2、mOCT1及mOCT2水平相关。
%OBJECTIVE:To investigate the mechanism of the effects of apigenin on reducing uric acid and renal protection in oteracil potassium-induced hyperuricemia mice. METHODS:50 mice were randomly dividedinto normal group,model group,allo-purinol group(5 mg/kg),apigenin low-dose and high-dose groups(40,80 mg/kg),with 10 mice in each group. Except for nor-mal group,other groups were given oteracil potassium 250 mg/kg intragastrically to induce hyperuricemia model;1 h after model-ing,treatment groups were given relevant medicine intragastrically,and normal group and model group were given constant vol-ume of normal saline intragastrically,once a day,for consecutive 7 d. Blood uric acid,urine uric acid and 24 h creatinine levels, the expression of kidney transporter associated protein (mURAT1,mOCT1,mOCT2,mOCTN1 and mOCTN2) were all deter-mined in each group. RESULTS:Compared with normalgroup,blood uric acid,urine uric acid and mURAT1 levels of model group were significantly increased,while the expressions ofmOCT1,mOCT2,mOCTN1 and mOCTN2,24 h creatinine were sig-nificantly decreased(P<0.01 or P<0.001). Compared with model group,blood uric acid,urine uric acid and mURAT1 levels of apigenin low-dose and high-dose groups,allopurinol group were significantly decreased,while 24 h creatinine,the expressions of mOCT1,mOCT2,mOCTN1 and mOCTN2 were increased significantly (P<0.05 or P<0.01 or P<0.001). CONCLUSIONS:Apigenin can reduce uric acid level of oteracil potassium-induced hyperuricemia mice and propect kidney,the mechanism of which may be associated with down-regulating the expression of mURAT1 and up-regulating the expressions of mOCTN1,mOCTN2, mOCT1 and mOCT2.【总页数】4页(P4794-4796,4797)【作者】缪明星;王星;陆琰;王欣【作者单位】中国药科大学药学院，南京 210009;中国药科大学药学院，南京210009;中国药科大学药学院，南京210009;南京大学医学院附属鼓楼医院药剂科，南京 210008【正文语种】中文【中图分类】R966【相关文献】1.泽泻乙醇提取物对氧嗪酸钾盐致大鼠高尿酸血症模型的影响 [J], 汪锦飘;刘永茂;何志超;严惠明;陈彩云;王冬梅;邱凯锋2.青梅提取物防治氧嗪酸钾致小鼠高尿酸血症的研究 [J], 夏道宗;潘东曼;龚金炎;邵奇佳3.蔓三七提取物对氧嗪酸钾致小鼠急性高尿酸血症治疗效果的影响 [J], 胡居吾4.蔓三七提取物对氧嗪酸钾致小鼠急性高尿酸血症治疗效果的影响 [J], 胡居吾5.蔓三七提取物对酵母膏和氧嗪酸钾致小鼠急性高尿酸血症治疗效果的研究 [J],胡居吾因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高尿酸血症对慢性肾脏病影响的研究进展发布时间：2023-02-22T02:13:12.430Z 来源：《中国医学人文》2022年31期作者：黄洋[导读] 随着国家的发展越来越好，人们的生活水平也不断的提高，慢性肾脏病（chronickidneydisease）和高尿酸血症（hyper－uricemia）的患病率呈逐年上升趋势，均已成为我国重要的公共卫生问题。
高尿酸血症在慢性肾脏病中高度流行，这可能是肾功能下降导致尿酸排泄减少的原因。
黄洋(湖北省荆州市荆州市中心医院肾病内科湖北?荆州?434000)摘要：随着国家的发展越来越好，人们的生活水平也不断的提高，慢性肾脏病（chronickidneydisease）和高尿酸血症（hyper－uricemia）的患病率呈逐年上升趋势，均已成为我国重要的公共卫生问题。
高尿酸血症在慢性肾脏病中高度流行，这可能是肾功能下降导致尿酸排泄减少的原因。
近年来研究表明，高尿酸血症本身可能参与慢性肾脏病的进展，且慢性肾脏病与高尿酸血症共同加速了慢性肾脏病合并症的发生发展和死亡风险。
关键词：高尿酸血症；慢性肾脏病影响；进展引言慢性肾脏病（Chronickidneydisease，CKD）是一种恶性进展性疾病，最终需依靠肾透析来维持生命，成为全球性重要公共卫生问题。
尿酸（Uricacid，UA）是嘌呤代谢的终产物，主要经肾脏的肾小管转运蛋白排泄。
随着CKD的进展，UA排泄受阻，高尿酸血症（Hyperuricemia，HUA）的发病率同样呈逐渐上升趋势。
高尿酸究竟是肾功能下降的原因还是结果，目前仍存在争议。
有研究表明高尿酸不仅是CKD进展的产物，同时也是促进CKD进展的独立危险因素之一。
高尿酸可通过炎症、损伤内皮功能、氧化应激、激活肾素血管紧张素系统（RAS）、促纤维化等几种潜在机制损伤肾脏。
1激活RAS系统、炎症途径HUA可能通过损伤内皮功能引起肾血管病变，从而促进CKD的发生及发展。
高尿酸血症动物模型的实验研究孟笑玮;樊克涛;代向东;王怡【期刊名称】《天津中医药》【年(卷),期】2015(32)10【摘要】[目的]制备稳定持续、简便易行的高尿酸血症动物模型。
[方法]采用单纯氧嗪酸钾、氧嗪酸钾+次黄嘌呤、腺嘌呤+乙胺丁醇、单纯酵母膏、酵母膏+腺嘌呤、酵母膏+腺嘌呤+氧嗪酸钾不同药物与不同浓度进行实验,检测模型动物血清尿酸值。
[结果]单纯氧嗪酸钾、氧嗪酸钾+次黄嘌呤模型组尿酸值升高,与空白组比较有差异,但模型不稳定,重复性差,个体差异较大。
腺嘌呤+乙胺丁醇、单纯酵母膏、酵母膏+腺嘌呤模型组尿酸值与空白组比较无差异。
酵母膏+腺嘌呤+氧嗪酸钾模型组尿酸值升高,与空白组比较有显著性差异(P<0.01),且模型稳定,个体差异小。
[结论]采用酵母膏+腺嘌呤+氧嗪酸钾复制高尿酸血症动物模型最佳。
【总页数】4页(P614-617)【关键词】高尿酸血症;动物模型;酵母膏【作者】孟笑玮;樊克涛;代向东;王怡【作者单位】天津中医药大学【正文语种】中文【中图分类】R589.7【相关文献】1.氧嗪酸钾致小鼠急性高尿酸血症动物模型的研究及评价 [J], 王陈芸;李哲丽;叶尤松;易红昆;蔡发晶;肖涵;唐东红2.高尿酸血症动物模型的研究进展 [J], 张楠; 胡欣瑜; 董鲜祥; 段为钢; 云宇3.高尿酸血症动物模型研究进展 [J], 周子正; 徐琳; 高建东4.高尿酸血症合并2型糖尿病动物模型建立的实验研究 [J], 史浩楠;王婷婷;张蕾;董惠娟;张羽珊;姚健;张鹏程5.高尿酸血症肾病的实验动物模型研究 [J], 奚九一;赵兆琳;鲁培基;屈立志;王义成因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
)实验方法学)酵母致小鼠高尿酸血症模型%陈光亮!张清林"!马晓芹"!徐叔云!安徽医科大学临床药理研究所"合肥!’$%%$’#’%%’"%$"收稿%安徽省教育厅自然科学基金资助课题!B 5’%%"C k ">#"安徽中医学院药学系’%%’届实习生作者简介"陈光亮!男!$,岁!在职博士生!副教授!硕士生导师#82I 30;I *!/01*=2\=02=8;$徐叔云!男!教授!博士生导师中国图书分类号!<!$$’$<$&$!$$’$<##&="’’$<>,-=+%’$<&-’$<&-’=%’文献标识码!?!文章编号!"%%"!"-+,%’%%$&%#!%#&+!%$摘要!目的!建立小鼠高尿酸血症模型#方法!采用酵母膏灌胃给药!磷钨酸法测定不同时间小鼠血清尿酸水平#结果!$%’">I (C I O "(P O "连续灌胃"’’’$’#:C !小鼠血清尿酸水平分别为"%’+"=,c>$=’&’%’">=#c$"=>&’%"->=-c >&=%&’%"#’="c$%=+&%/5*(^O "!%’’&=,c#%=+&’%"+&=-c ’+=%&’%"#,=&+c $%=#&’%""-=$c ’+=#&%/5*(^O "#+=>I (C I O "(P O "连续灌胃":C !小鼠血清尿酸水平为%""+=%c ’-=%&%/5*(^O "!对照组小鼠血清尿酸为%"%,="c "$=-&%/5*(^O "#结论!酵母膏灌胃可以复制出小鼠高尿酸血症模型!以">&$%I (C I O "(P O "连续灌胃"&’:C 较好#关键词!动物模型$高尿酸血症$痛风$酵母$小鼠!!高尿酸血症是指细胞外液的尿酸盐呈超饱和状!一般认为血尿酸盐*#"+%/5*(^O "时应考虑高尿酸血症#痛风是长期嘌呤代谢障碍!血尿酸增高引起组织损伤的一组临床综合征#临床上以高尿酸血症’特征性关节炎反复发作’痛风石形成!严重者可致关节活动障碍’畸形!肾尿酸结石及痛风性肾实质病变为特征#对上海黄埔区社区’"%$人的调查结果显示"高尿酸血症患病率男性为"#=’a !女性为+="a !痛风患病率男性为%=++a !与该区"-,%年调查结果相比!血尿酸平均值男性增高--=$%/5*(^O "!女性增高+%=,%/5*(^O ")"*#近年痛风发病呈明显上升趋势)’*#本课题组曾报道)$*尿酸腹腔注射可引起小鼠高尿酸血症模型!该方法简便可靠易行!但尚不能形成稳定持久的高尿酸血症!与临床上人的高尿酸血症在病因上有很大的差别!也不能进一步探讨高尿酸血症的发病机制#本文采用酵母灌胃给药!可使小鼠血尿酸持续升高!现报道如下#!!材料与方法!"!!动物!昆明种小鼠!’"兼用!由安徽医科大学实验动物中心提供!合格证号"皖医实动物第%"号#!"#!主要药品与试剂!酵母膏为北京奥博星生物技术责任有限公司产品!批号--"""%$尿酸测定试剂盒%磷钨酸法&购自上海荣盛生物技术有限公司!批号%%""’%"$别嘌呤醇片为上海延安制药厂产品!批号’%%%’%"$苯溴马龙胶囊购自成都中医药大学华神制药厂#别嘌呤醇片’苯溴马龙临用前用%=>a 羧甲基纤维素钠%H Y H !B 0&配成所需浓度#!"$!血清尿酸的测定方法!小鼠摘眼球取血!分离血清!用磷钨酸法测定血清尿酸水平%按试剂盒说明书操作&#!"%!统计学处理!所测数据用$2c (表示!组间比较用1检验##!结果#"!!不同剂量酵母膏对小鼠血清尿酸的影响!>%只"小鼠!随机均分为>组!以酵母膏%’+=>’">’$%’&%I (C I O "(P O "灌胃给药!容量为#%/*(C I O "!每天’次!连续":C !对照组给等容量的蒸馏水#结果显示&%I (C I O "(P O "组给药P$小鼠出现死亡!P#死亡率达>%a !故停止继续给药#+=>’">’$%I (C I O "(P O "组小鼠血尿酸水平分别为%""+=%c ’-=%&’%’’"=$c #’=&&’%’&-=-c >#=’&%/5*(^O "!对照组为%"%,="c "$=-&%/5*(^O "%见b 1I "&#说明酵母膏灌胃给药!小鼠血尿酸明显升高!且存在明显的量效关系#A B /!!K .6;@7.87:6>B 667=7.9>:<7E 74<97C 9=489?4<97/B T 7.5E!’:.<7=@)@=B 848B >;7T 7;B .)B 87%$2c (!&d "%&(+&#(中国药理学通报!#$%&’(’!$)*+),-.-"%,)./0..’1%&!’%%$?6J 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J536$!讨论超高蛋白膳食是引起嘌呤代谢紊乱的重要原因’痛风是长期嘌呤代谢障碍!血尿酸增高引起组织损伤的一组临床综合征’原发性痛风与肥胖症&高血脂症&高血压病&糖尿病&动脉粥样硬化等疾病呈显著正相关(#!>)’痛风和糖尿病一样是危害人类健康的一种严重的代谢性疾病’原发性高尿酸血症主要是由于肾脏尿酸排泄减少及尿酸生成过多所致’继发性高尿酸血症除与相关疾病有关外!还与长期使用利尿剂等有关(&)’高尿酸血症发生的机制为尿酸生成增多或肾脏尿酸排泄减少’由于人类缺乏尿酸酶#3J0K)5e1P0L)$!而大多数动物包括哺乳类动物!体内存在尿酸酶!可以将体内尿酸进一步分解为尿囊素’尿囊素为无毒物质!水溶性良好!极易随尿排出体外!很少在体内蓄积!也不会在组织内形成痛风结石造成损害’由此可见!要在哺乳动物小鼠&大鼠上建立高尿酸血症模型是相当困难的’查阅国内外相关资料!"--#年美国D3等(+)通过胚胎干细胞同源性重组!破坏小鼠尿酸酶基因!建立高尿酸血症及尿酸性肾病动物模型!研究结果表明!半数以上变异的小鼠存活期不到#:C!因此不是理想的动物模型’曹克光等(,)采用给鸡饲喂腺嘌呤!$:C后成功建立鸡高尿酸血症模型’但鸡不是哺乳动物!在种属上与人类差距较远!且普通实验室饲养困难’唐灿等(-)给小鼠腹腔注射次黄嘌呤&陈光亮等($)给小鼠腹腔注射尿酸均成功复制高尿酸血症动物模型’这两种模型简便可靠易行!但尚不能形成稳定持久的高尿酸血症!不利于观察药物对高尿酸血症的治疗作用!并且与临床高尿酸血症在病因上有很大差别!也不能进一步探讨高尿酸血症的发病机制’在体内!腺嘌呤核苷+次黄嘌呤核苷+次黄嘌呤+黄嘌呤+尿酸+尿囊素!尿酸经肾小管分泌排出体外’故增加体内尿酸&尿酸前体#次黄嘌呤&黄嘌呤$的量或抑制肾小管尿酸的分泌均可导致体内血尿酸含量的增高导致高尿酸血症’",&#"中国药理学通报!#$%&’(’!$)*+),-.-"%,)./0..’1%&!’%%$?6J!!+"##分水解能产生含氮的有机碱!包括嘌呤碱类"嘧啶碱类#和磷酸$当大剂量的酵母进入体内后$能干扰机体正常的嘌呤代谢$致嘌呤代谢紊乱$其主要表现为黄嘌呤氧化酶活性增加$加速了尿酸的生成$从而产生大量尿酸%酵母膏&%I &C I O "&P O "灌胃$小鼠出现死亡$P#死亡率为>%a $故没有实际意义$+=>&$%I &C I O "&P O "灌胃$连续":C $小鼠血尿酸明显升高$且存在明显的量效关系%进一步研究’停药$P $小鼠血尿酸仍明显升高$表明小鼠体内已形成稳定的高尿酸血症%继续给药$小鼠血尿酸值反而降低$但仍然高于对照组%其可能的原因一是小鼠肾脏有强大的排泄尿酸的能力$多生成的尿酸通过肾脏排出体外(其次是小鼠尿酸酶活性随着尿酸生成增多而增高$使多生成的尿酸分解为尿囊素及尿囊酸等代谢产物$故继续给药$小鼠的血尿酸值反而降低%酵母膏">&$%I &C I O "&P O "灌胃$连续"&’:C $小鼠血清尿酸显著升高$可以作为高尿酸血症模型%虽然人类男女性血尿酸水平差异较大$高尿酸血症和痛风的发病率差异也较大$但本研究表明酵母膏致小鼠高尿酸血症模型无明显性别差异%老年小鼠与青年小鼠血尿酸水平也未见明显差异%苯溴马龙能抑制肾小管对尿酸得重吸收$促进尿酸的排泄(别嘌呤醇与次黄嘌呤竞争黄嘌呤氧化酶$从而抑制尿酸的生成$而对尿酸的排泄无明显的影响$两药可验证此模型建立成功%高尿酸血症动物模型的建立$为进行药物研究与开发提供了一个思路和方法$具有一定的参考价值和依据%本方法简便可靠易行$可形成稳定的高尿酸血症$与临床高尿酸血症在病因上有一定的相似性%但人类缺乏尿酸酶$小鼠体内存在尿酸酶$能促进尿酸分解为尿囊素$使高尿酸水平逐渐降低$这是本法的不足之处%如果再加用尿酸酶抑制剂有可能维持更稳定的高尿酸血症$有待进一步探讨%在应用本模型时需要同时设立模型组平行对照%参考文献"!杜!蕙$陈顺乐$王!元’1).5上海市黄浦区社区高尿酸血症与痛风流行病学调查9中华风湿病学杂志!"--,(#!’#’+>&,’!杨岫岩$唐福林$尹培达9’"家医院痛风住院构成比">年变化趋势分析9中华流行病学杂志!"--&(!0!"#’"%&’$!陈光亮$孙秀霞$王钦茂’1).5小鼠高尿酸血症模型的研究9中国药理学通报!’%%"(!0!$#’$>"&’#!E 52DA $@)02?$H 201G =H *1;180*6J )L );K 0K 15;0;PP 1L )0L )0L L 5!810K 15;L 5\I 53K ’?25L 61K 0*70L )P L K 3P M 5\"%%60K 1);K L 1;@1;I 0!65J )=6&&6,)9<’98%&");-*’$"--,(#0!"#’+&"%>!(0*020L 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