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液相色谱_串联质谱法测定人工模拟猪消化液中3种霉菌毒素

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藡藡研究报告DOI:10.11895/j.issn.0253_3820.140672

液相色谱_串联质谱法测定人工模拟猪消化液中3种霉菌毒素

王瑞国 苏晓鸥* 樊霞 王培龙 高忠武 张瑜

(中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所,农业部农产品质量安全研究重点实验室,北京 100081)

摘 要 建立了液相色谱_串联质谱法(LC_MS/MS)同时测定人工模拟猪胃和小肠消化液中黄曲霉毒素B1(AFB1)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEA)的快速、灵敏方法,并将此方法应用于霉菌毒素

吸附剂吸附率体外法评价。通过模拟猪的消化道对饲料基质进行体外消化获得猪胃和小肠消化液,分别向其中按一定比例添加霉菌毒素吸附剂和3种霉菌毒素,孵育、离心后,经进样液10倍稀释后测定。采用反相C18色谱柱分离,以0.2mmol/L乙酸铵溶液和0.1%甲酸_甲醇溶液作为流动相,梯度洗脱,多反应监测离子模式(MRM)检测,同位素内标法定量。在优化条件下,对AFB1,DON和ZEA在人工猪胃和小肠消化液中的定

量限分别是1,50,40μg/L和0.3,50,20μg/L,相对偏差(RSD)<5.0%。并且,在39℃±0.5℃,10h内测定结果稳定,能够满足霉菌毒素吸附剂吸附率的测定。采用本方法对市售8种蒙脱石类吸附剂和5种酵母细胞壁类吸附剂进行吸附率评价。

关键词 液相色谱_串联质谱;模拟猪消化液;霉菌毒素;霉菌毒素吸附剂

2014_08_07收稿;2014_10_04接本文系“十二五”农村领域国家科技计划(No.2011BAD26B0405)资助*E_mail:suxiaoou@caas.cn1 引 言

霉菌毒素(Mycotoxins)是由霉菌产生的次级代谢产物,一旦被动物采食会产生一系列毒性效应[1]。

饲料特别易于被各种霉菌毒素污染[2,3],而霉菌毒素吸附剂是消除饲料中、低剂量霉菌毒素对动物影响

的有效手段[4]。对特定毒素的吸附率是霉菌毒素吸附剂评价的最重要指标,但是吸附率的评价尚没有

一致的方法。目前,霉菌毒素吸附剂吸附率的评价存在以下问题:(1)评价方法 吸附率的测定通常分

为体外和体内两种。体外方法一般以缓冲液为介质,测定吸附剂对某种霉菌毒素的吸附能力,这种方法

在吸附剂初步评价和吸附潜力筛选方面得到广泛应用。但是,由于经常与体内方法的评价结果不一致,

从而降低了可信度[5]。体内法采用动物生产性能或生物标记物等间接指标来评价吸附剂效果,因为很

多因素和实验条件都可影响最终结果,导致了评价结果不稳定[6]。(2)毒素检测方法 绝大部分霉菌

毒素吸附剂吸附率评价采用的是高效液相色谱(HPLC)法[7,8],灵敏度相对液质联用而言较低,测定步

骤多,过程繁琐,同步测定多种毒素的能力较差。也有采用酶联免疫试剂盒(ELISA)法进行评价[9~11],

结果可靠性差。(3)吸附对象 大部分霉菌毒素吸附剂吸附率测定对象采用AFB1[12],其原因主要是

AFB1较其他毒素更易于被吸附[13]。事实上,75%的饲料同时被多种毒素污染,且以DON、ZEA等为

主[14,15]。但是,多数种类的霉菌毒素吸附剂对DON和ZEA等吸附效果一般,甚至无效[16]。体内实验

也表明,对AFB1吸附效果良好的一种吸附剂在同时受到多种霉菌毒素污染的饲料中使用效果不佳[17]。

而且,吸附剂对霉菌毒素是非特异性吸附,饲料中的其他成分很可能会干扰吸附效果[18]。

霉菌毒素吸附剂吸附率评价的关键在于评价体系和霉菌毒素检测。目前,液相色谱串联质谱法(LC_MS/MS)在食品和饲料中多种霉菌毒素同步检测上得到了广泛应用[19],但尚未见LC_MS/MS法用于

霉菌毒素吸附剂体外吸附率测定的文献报道。本研究针对上述3个问题,通过模拟猪消化道环境和饲料

基质特点制备了人工猪胃和小肠消化液,将饲料中霉菌毒素以外的其它成分引入吸附率评价体系中,并应

用LC_MS/MS同时对3种主要毒素进行测定,能够更加全面、准确地测定霉菌毒素吸附剂的吸附率。第43卷

2015年1月 分析化学(FENXIHUAXUE) 研究报告

ChineseJournalofAnalyticalChemistry 第1期

1~62 实验部分

2.1 仪器与试剂TQD超高效液相色谱_串联质谱仪(美国Waters公司);RVC2_18台式离心浓缩仪(德国Christ公

司);3K15高速冷冻离心机(美国Sigma公司);ZWY_200D恒温培养振荡器(上海智诚分析仪器制造有

限公司);D37520高速离心机(美国Kendro公司)。AFB1,DON和ZEA标准品(纯度≥99%,以色列Fermentek公司);同位素内标13C17_AFB1、13C15_

DON、13C18_ZEA(ROMER公司);MilliQ超纯水;乙腈、甲醇、乙酸铵和甲酸(色谱纯,美国Fisher公司);

胃蛋白酶、胰蛋白酶、猪胆盐、氯化钠等常规试剂(分析纯,国药集团化学试剂有限公司)。霉菌毒素吸

附剂从市场购买,其中主成分为蒙脱石类的8种产品,分别标识为浙江三鼎科技有限公司、攀枝花兴加环保技术有限公司、赤峰和正美化工有限公司、赤峰市物华天宝矿物材料有限公司、浙江丰虹新材料股

份有限公司、寿光中联精细蒙脱石有限公司、内蒙古天源蒙脱石开发有限公司和内蒙古润隆化工有限责任公司;主成分为酵母细胞壁类的5种产品,分别标识为广东江门生物技术开发中心有限公司、北京优

利保生物科技与技术有限责任公司、巴西ICC公司、上海沪鼎生物科技有限公司、安琪酵母股份有限公

司。生长猪配合饲料样品由国家饲料质量监督检验中心(北京)惠赠。2.2 溶液配制

2.2.1 霉菌毒素混合标准溶液的配制 分别准确移取浓度为1000mg/L的AFB1,DON,ZEA50,500

和200μL,用乙腈定容至10mL,配制成为浓度分别为5,50和20mg/L的霉菌毒素混合标准储备液,

-20℃保存。2.2.2 混合同位素内标进样液的配制 分别准确移取400,400和200μL的13C17_AFB1(500μg/L)、

13C15_DON(25mg/L)、13C18_ZEA(25mg/L)置于2mL离心管中,40℃条件下用离心浓缩仪1500r/min

旋干,进样液(0.2mmol/L乙酸铵溶液_乙腈_甲酸,95∶4.9∶0.1,V/V)复溶,超声溶解2min,移取并用进样液定容至100mL,4℃保存。2.2.3 人工猪胃消化液的制备 称取NaCl2g,胃蛋白酶3.2g,量取36.5%浓HCl7mL,加水至1000mL,混匀,制得人工胃液。称取适量生长猪配合饲料于三角瓶中,按照质量体积比1∶3向其中加

入人工胃液,用HCl调至pH=2.0±0.5,置于39℃±0.5℃恒温振荡器中220r/min孵育1h,静置1min,转移上清液,并10000r/min离心10min,收集上清液于1000mL试剂瓶,4℃保存待用。

2.2.4 人工猪小肠消化液的制备 称取KH2PO46.8g,加水500mL使溶解,用0.1mol/LNaOH溶液

调至pH6.8,称取胰酶10g,加水使溶解,将两溶液混合后,另加3g猪胆盐,加水稀释至1000mL,制得人工小肠液。将3倍体积的人工小肠液加入到人工胃液消化液制备时剩余的饲料沉淀中,置于39℃±0.5℃恒温振荡器中220r/min孵育1h,静置1min,转移上清液,并10000r/min离心10min,收集上

清液于1000mL试剂瓶,4℃保存待用。2.3 样品处理

移取霉菌毒素混合标准储备液40μL于50mL旋盖塑料离心管中,40℃氮气吹干,加入5mL人工猪

胃消化液复溶,再向其中准确加入霉菌毒素吸附剂4mg±0.1mg,涡旋混匀1min,迅速水浴加热至39℃±0.5℃,然后置于恒温振荡器中39℃±0.5℃,220r/min振荡孵育1h,立即取出冷却静置。取1mL

上清液,13000r/min离心5min,取50μL上清液与450μL混合同位素内标进样液涡旋混匀,上机测定平

衡后体系中游离毒素的浓度。每种吸附剂吸附率的测定设3个平行,并设不添加霉菌毒素吸附剂的基质校正组,人工小肠液消化液中游离毒素浓度测定步骤同上。吸附率(%)的计算公式为Y=(1-Ceq/C0)×100%,式中Y为吸附率,C0为毒素初始(即基质校正组)浓度,Ceq为平衡后体系中游离毒素的浓度。2.4 色谱和质谱条件AcquityUPLCBEHC18色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm,美国Waters公司);柱温40℃,流速0.40mL/min,进样量5μL。流动相A为0.2mmol/L乙酸铵溶液,流动相B为0.1%甲酸_甲醇。梯度

洗脱:0~0.5min,90%A;0.5~1.5min,70%A;1.5~2.5min,40%A;2.5~3.5min,30%A;3.5~2 分析化学第43卷4.0min,20%A;4.0~4.2min,90%A;4.2~5.0min,90%A。

电喷雾离子源(ESI),离子源温度为150℃,脱溶剂温度为450℃,脱溶剂气和锥孔气均为N2,脱溶

剂气流速为900L/h,锥孔气流速为20L/h。AFB1和DON采用正离子监测,ZEA采用负离子监测方式,毛

细管电压为0.75kV。采用多反应监测方式(MRM)检测,监测离子、碰撞能量、锥孔电压等参数见表1。

3 结果与讨论

3.1 质谱条件的优化

以甲醇_水(50∶50,V/V)为流动相,采用结合进样方式,对3种霉菌毒素及其同位素内标的质谱条

件进行优化,在正负离子模式下进行全扫描,选择合适的准分子离子峰和电离方式。其中,AFB1和DON的准分子离子为正电离模式下获得的[M+H]+,ZEA因含有酚羟基结构,其准分子离子为负电离模

式下获得的[M-H]-。有文献报道,DON采用加乙酸根离子[20]或减氢[21]的电离模式,但研究显示DON加氢模式同样能获得很好的响应。结合基质空白和基质标准液的离子扫描图,进一步优化确定了

各种毒素的特征离子对等参数(表1)。

表1 MRM监测模式下3种霉菌毒素及其同位素内标的质谱优化条件Table1 OptimizedMS/MSparametersof3mycotoxinsandisotopeinternalstandards

扫描模式Scanmode分析物Analyte保留时间Retentiontime(min)母离子Parention(m/z)子离子Daughterion(m/z)锥孔电压Conevoltage(V)碰撞能量Collisionenergy(eV)驻留时间Dwelltime

(s)

正离子Positiveion

负离子NegaiveionAtlatoxinB1,AFB12.67313.10

13C17_AFB12.67330.09Deoxynivaleneol,DON2.02297.22

13C15_DON2.02312.43

Zearalenone,ZEA3.28317.22

13C18_ZEA3.28335.07241.04*46360.106284.8646220.106255.1046360.106249.06*20120.106231.0720100.106262.8025120.106175.06*38260.106187.1238220.

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QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法测定乳粉中黄曲霉毒素B_(1)和M_(1)

QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法测定乳粉中黄曲霉毒素B_(1)和M_(1)

QuEChERS-高效液相色谱-串联质谱法测定乳粉中黄曲霉毒素B_(1)和M_(1)

刘瑞;陈冬东;贾景建;王一名;霍思宇;董静;彭涛;呼秀智

【期刊名称】《中国兽药杂志》

【年(卷),期】2022(56)11

【摘 要】建立了QuEChERS结合高效液相色谱-串联质谱测定乳粉中黄曲霉毒素B 1(aflatoxin B_(1),AFB_(1))和黄曲霉毒素M 1(aflatoxin M_(1),AFM_(1))的检测方法。乳粉用水复溶,乙腈提取,十八烷基键合硅胶和无水硫酸镁净化,在InertSustain-C_(18)柱(2.1 mm×150 mm,3μm)上分离,乙酸铵溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,电喷雾正离子模式扫描,多反应监测,基质添加外标曲线定量。乳粉中AFB_(1)和AFM_(1)在0.08~20μg/kg范围内线性关系良好,r>0.999。检出限为AFM 10.02μg/kg,AFB 10.03μg/kg,定量限均为0.05μg/kg。在定量限的1、5和10倍添加浓度下,平均回收率为91.5%~100.7%。本方法便捷高效、重现性好、结果准确,可以为日常检测乳粉中黄曲霉毒素提供技术参考。

【总页数】9页(P39-47)

【作 者】刘瑞;陈冬东;贾景建;王一名;霍思宇;董静;彭涛;呼秀智

【作者单位】河北工程大学;中国检验检疫科学研究院

【正文语种】中 文

【中图分类】S859.84

【相关文献】 1.QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定畜禽组织中6种黄曲霉毒素和杂色曲霉素2.分散液液微萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定茶饮料中黄曲霉毒素B1和B23.超高效液相色谱-串联质谱法快速测定小麦中黄曲霉毒素B_(1)4.同位素稀释液相色谱-串联质谱法和量子点荧光免疫层析法快速测定花生油中黄曲霉毒素B_(1)的比较5.同位素内标稀释-超高效液相色谱串联质谱法测定花生及其制品中黄曲霉毒素B_(1)的含量

液相质谱法同时检测猪肉中氯霉素和地塞米松

液相质谱法同时检测猪肉中氯霉素和地塞米松

液相质谱法同时检测猪肉中氯霉素和地塞米松

舒顺顺;米倩;杨彩霞;刘芹;牛军

【摘 要】建立一种利用高效液相色谱-串联质谱法同时检测猪肉中氯霉素和地塞米松药物残留的方法.猪肉样品中的药物残留经乙酸乙酯提取后,经氮气吹干,残渣溶解后过Silica柱,洗脱液经氮气吹干,用初始流动相溶解定容.用Shim-pack GIST C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,5μm)分离,以纯水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,质谱采用多反应监测模式,氯霉素以内标法定量,地塞米松以外标法定量.在5 min内完成了两种目标化合物的分离分析.氯霉素和地塞米松在0.2μg/kg～40μg/kg范围内线性关系良好,相关系数r2分别为0.9999和0.9997.氯霉素添加水平在1、2.5、5μg/kg时,回收率在90.54％～101.73％之间;地塞米松添加量在0.5、2.5、5μg/kg时,回收率在83.82％～87.5％之间;批内标准偏差和批间标准偏差均小于10％(n=5),方法定量限均小于0.15μg/kg.

【期刊名称】《食品研究与开发》

【年(卷),期】2019(040)005

【总页数】5页(P186-190)

【关键词】液相色谱-串联质谱法;猪肉组织;氯霉素;地塞米松;乙酸乙酯提取

【作 者】舒顺顺;米倩;杨彩霞;刘芹;牛军

【作者单位】正大食品(襄阳)有限公司,湖北襄阳441000;正大食品(襄阳)有限公司,湖北襄阳441000;正大食品(襄阳)有限公司,湖北襄阳441000;正大食品(襄阳)有限公司,湖北襄阳441000;正大食品(襄阳)有限公司,湖北襄阳441000 【正文语种】中 文

在我国，养殖业抗生素滥用问题一直比较严重。在养猪业不仅用抗生素治疗疾病，还用来防治疾病[1]。滥用抗生素，将导致猪体内抗生素残留，不仅会给猪肉食品安全带来潜在隐患，更会对人类的健康及生存环境造成危害[2]。氯霉素和地塞米松是抗生素残留中的重要成员。

QuEChERS-液相色谱-串联质谱法测定安徽省小麦中4种主要真菌毒素

QuEChERS-液相色谱-串联质谱法测定安徽省小麦中4种主要真菌毒素

98 食品安全导刊 2023年5月（中）分析检测

QuEChERS-液相色谱-串联质谱法测定安徽省

小麦中4种主要真菌毒素

宋旭凤，童　心

（安徽中青检验检测有限公司，安徽合肥 230088）

摘　要：目的：通过优化的QuEChERS方法对安徽省小麦样品进行前处理后利用液相色谱串联质谱测

定4种主要真菌毒素。方法：样品经过1%乙酸乙腈溶液提取，盐包加净化填料萃取净化，选用Shim-pack GISS-HP C18色谱柱，乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，采用电喷雾正离子多反应监测模式，

混合标准溶液外标法定量。结果：4种真菌毒素化合物在相应浓度范围内线性良好（R≥0.998 8）。该方法的检

出限在0.03～10.00 μg·kg-1，定量限在0.1～20.0 μg·kg-1，回收率为81.0%～106.7%，RSD为2.17%～9.20%。

结论：该方法灵敏度高，定性、定量准确，能够节约时间和人力成本，提高实验效率，可用于实验室测定粮

谷中主要真菌毒素的含量。

关键词：真菌毒素；小麦；液相色谱-串联质谱法

Determination of Four Main Mycotoxins in Wheats Produced

in Anhui Province by QuEChERS-Liquid Chromatography-

Tandem Mass Spectrometry

SONG Xufeng, TONG Xin

(Anhui Zhongqing Inspection and Testing Co., Ltd., Hefei 230088, China)

Abstract: Objective: To determine four mycotoxins by liquid chromatography-tandem mass spectrometry after

pretreatment of wheat samples from Anhui province by the optimized QuEChERS method. Method: The samples

猪尿中6种β-受体激动剂残留的超高效液相色谱-串联质谱法同时测定

猪尿中6种β-受体激动剂残留的超高效液相色谱-串联质谱法同时测定

中国动物检疫２０１２年第２９卷第７期　

猪尿中６种１３一受体激动剂残留的　

超高效液相色谱一串联质谱法同ｐ，－ＩＮ定　

徐丽君，卢艳芬，杨辉，冯亚玫　（长沙市畜禽水产品质量检测中心，湖南长沙４１００１３）　

摘要：建立了猪尿中苯乙醇胺Ａ、莱克多巴胺、克仑特罗、西马特罗、特布他林、沙丁胺醇等６种Ｄ－受体激动剂在多　

反应监测模式下超高效液相色谱．串联质谱同时检测的方法。尿样经酶解，调至酸性，经固相萃取技术（ＳＰＥ）净化富集。６种　受体激动剂在０．２～５　ｎｇ／ｍＬ的浓度范围内线性关系良好。方法的检出限和定量限分别为０．２　ｎｇ／ｍＬ和０．５　ｎｇ／ｍＬ。考察了０．５　ｎｇ／　ｍＬ、１　ｎｇ／ｍＬ和２　ｎｇ／ｍＬ三个添加浓度的回收率。６种化合物的加标回收率为８７．２％－１０６．６％；ＲＳＤ为１．２％－１３．８％。该方法精　密度好，灵敏度高，重现性好，能简便、快速、准确地测定猪尿中六种Ｂ一受体激动剂。　关键词：超高效液相色谱．串联质谱；Ｂ－受体激动剂；猪尿；残留测定　中图分类号：￥８５２．６５９．５文献标识码：Ａ文章编号：１００５－９４４Ｘ（２０１２）０７－００３８—０４　

Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｈｅｎｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ　Ａ，Ｒａｃｔｏｐａｍｉｎｅ，Ｃｌｅｎｂｕｔｅｒｏｌ，　Ｃｉｍａｔｅｒｏｌ，Ｔｅｒｂｕｔａｌｉｎｅ，Ｓａｌｂｕｔａｍｏｌ　ｉｎ　Ｐｉｇ　Ｕｒｉｎｅ　ｂｙ　ＵＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ　

Ｘｕ　Ｌｉｊｕｎ，ＬｕＹａｎｆｅｎ，Ｙａｎｇ　Ｈｕｉ，ＦｅｎｇＹａｍｅｉ　（Ｃｈａｎｇｓｈａ　Ｑｕａｌｉｔｙ　Ｔｅｓｔｉｎｇ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｏｆ　Ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ　Ｐｏｕｌｔｒｙ　ａｎｄ　Ａｑｕａｔｉｃ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔ０　ｄｅｖｅｌｏｐ　ａ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｉｘ　１３一ａｇｏｎｉｓｔｓ（Ｐｈｅｎｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ　Ａ，Ｒａｃｔｏｐａｍｉｎｅ，Ｃｌｅｎｂｕｔｅｒｏｌ，　Ｃｉｍａｔｅｒｏｌ，Ｔｅｒｂｕｔａｌｉｎｅ，Ｓａｌｂｕｔａｍｏ１）ｉｎ　ｐｉｇ　ｕｒｉｎｅ　ｕｓｉｎｇ　ＵＰＬＣ—ＭＳ／ＭＳ　ｕｎｄｅｒ　ＭＲＭ　ｍｏｄｅ．Ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ　ｗａｓ　ｈｙｄｒｏｌｙｚｅｄ　ｂｙ　ｅｎｚｙｍｅ，ａｄｊｕｓｔｅｄ　ｔｏ　ｂｅ　ａｃｉｄｉｃ，ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ａｎｄ　ｅｎｒｉｃｈｅｄ　ｂｙ　ＳＰＥ．Ｔｈｅ　ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ　ｃｕｒｖｅｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．２～５　ｎｇ／ｍＬ　ｗｉｔｈ　ａ　ｇｏｏｄ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ．Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｈａｓ　ａ　ｌｏｗｅｒ　ｌｉｍｉｔ　ｏｆ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　０．２　ｎｇ／ｍＬ　ａｎｄ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　０．５　ｎｇ／ｍＬ．Ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｆｏｒ　ｓｉｘ　Ｂ－ａｇｏｎｉｓｔｓ　ａｔ　ｔｈｅ　ｓｐｉｋｉｎｇ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ０．５ｎｇ／ｍＬ，１　ｎｇ／ｍＬ，２　ｎｇ／ｍＬ　ｒａｎｇｅｄ　８７．２％－１０６．６％ｗｉｔｈ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｄｅｖｉａｔｉｏｎｓ　１．２％～１３．８％．　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｈａｄ　ｇｏｏｄ　ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ，ｈｉｇｈ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ，ａｎｄ　ｇｏｏｄ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ，ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆａｓｔ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，ａｎｄ　ａｃｃｕｒａｔｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｉｘ　ａｇｏｎｉｓｔｓ　ｉｎ　ｐｉｇ　ｕｒｉｎｅ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ＵＰＬＣ—ＭＳ／ＭＳ，Ｄ—ａｇｏｎｉｓｔ，Ｐｉｇ　ｕｒｉｎｅ，Ｒｅｓｉｄｕｒａ１　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ