２４ ・论 著・ Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０１１，Ｖｏ１．９，Ｎｏ．６
中药血清药理方法学的研究概况
柯玮 朱建华 （皖南医学院医学三系，安徽芜湖２４１００２）
【摘要】中药血清药理学是指将中药、中药复方以及不明成分的药物给动物灌服一定时间后，采集动物血清，用此含药成分的血清进行体 外实验的一种实验方法学。本文就该方法学在动物选择、给药方案、含药血清的处理等方面的研究进展进行综述，阐明了血清药理学在中 药药效研究的重要性。 【关键词】血清药理学；给药方案；血清处理；采血时间 中图分类号：Ｒ２８５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７１－８１９４（２０１ １）０６－００２４－０２
Ｐｒｏｇｒｅｓｓｅｓ ｏｆ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ Ｓｅｒｕｍ‘‘ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｈｅｒｂｓ
ＫＥ阮ｔＺＨＵＪｉａｎ—ｈｕａ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ１１１，ＷａｎｎａｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ａｎｈｕｉ Ｗｕｈｕ２４１００２） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｉｓ ｕｓｉｎｇ ｓｅｒｕｍ ｔａｋｅｎ ｆｒｏｍ ａｎｉｍａｌｓ ｗｅｒｅ ｇｉｖｅｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂｓ ｏｒ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｈｅｒｂａｌ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｔｈｅ ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｎ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｉｍａｌｓ，ｄｏｓａｇｅ ｒｅｇｉｍｅｎ，ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｗｅｒｅ ｓｕｍｍａｒｉｚｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｗｅｒｅ ｆｏｒｅｃａｓｔｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ．
［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］Ｓｅｒｕｍ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ；Ｄｏｓａｇｅ ｒｅｇｉｍｅｎ；Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｓｅｒｕｍ；Ｂｌｏｏｄ ｓａｍｐｌｉｎｇ ｔｉｍｅ
抗肿瘤中药血清药理学研究现状
南京中医药大学2003级博士 邹玺
摘要：血清药理学近年研究颇多，特别是抗肿瘤中药方面。现将抗肿瘤中药的研究分别从（1）与中药粗制剂的比较，（2）剂量的探索，（3）抗肿瘤作用机制的研究三个方面作一简要的综述。
关键词：抗肿瘤中药 血清药理学 现状
体外实验是中药药理的实验研究中不可或缺的手段。其优点是条件可控性强，可在细胞、亚细胞水平进行超微、生化、受体、基因等方面的研究，揭示药物机理较为深入，重复性好，使用材料少。但随着研究的深入，传统的用中药粗制剂直接加入离体反应体系中进行体外实验研究的方法发现很多问题。由于中药化学成分复杂，口服后体内要进行一系列的生物转化以发挥药效，而且理化性质复杂，经常造成一些假阴性和假阳性的结果，例如：五、六十年代国内外用瘤细胞株在体外过筛数千种植物提取物，报道了上百个阳性结果，但用于体内实验结果大部分为阴性（1）。这促使各国学者不断的努力，寻找更好的方法，1984年，在日本召开的第一届和汉医药学会上，日本学者首次提出给动物灌服中药一定时间后，取其血清进行实验的药理学新方法。1988年田代真一正式提出了“血清药理学”这一新概念。国内直到90年代初才开始探索，1991年国家中医药管理局正式立题，使该研究得以较系统开展。1996年国家自然科学基金将其列为重点项目，着重进行方法学研究（2）。此后，血清药理学广泛应用于肿瘤、心血管、消化、免疫等方面的药理学研究中，并与体外实验所见作比较，取得了很大的进展。随着研究的深入，相信其推广应用将对提高中药复方的药理研究水平产生重大的影响。现将以血清药理学方法研究中药抗肿瘤作用的国内现状综述如下。
1. 中药粗制剂与含药血清比较：
王力倩等（3）首次报道采用中药血清药理学方法观察了苦参、仙鹤草的抗肿瘤作用。结果发现：仙鹤草、苦参煎剂及含苦参的血清在体外均可明显抑制S180细胞的生长，而含仙鹤草血清则无效。说明苦参在体内外确有较强的抗肿瘤活性，而仙鹤草口服吸收进体内则失去其抗肿瘤活性。这可能与仙鹤草煎剂中的干扰因素有关，也可能与动物体内代谢过程及血清等因素的影响有关。他们（4）还报道了复方仙人球直接给药和含复方仙人球的大鼠血清均能抑制S180、EAC肿瘤细胞的体外生长。
中药血清药理学研究方法应用现状及展望
【摘要】 近年来中药血清药理学研究取得了可喜的成绩,随着中药血清药理学所存在的问题的逐步解决、方法更进一步的成熟和完善,它将更广泛地应用于:(1)复方药物的评价,具有直接的、快速的、敏感的、准确的作用等特点;(2)复方药物的机制研究,血清药理学是复方药物的机制研究主要研究方法之一,随着化学分析手段的的完善,复方药物中有效成分的逐步确认,其药理学机制也终将被揭开;(3)老年痴呆等慢性病及微生物学、分子生物学、药理学和生理学、免疫学等学科的研究。
【关键词】 血清药理学;研究方法;综述
中药血清药理学是近年来逐渐发展起来的研究中药药效较为科学的一种方法。它是由日本学者田代真一于1988年首次提出的,该方法就是将动物灌服给予中药或复方制剂后,在一定时间采集血液、分离血清进行体外药效实验。1990年,姜廷良教授将它引入我国,之后国内许多学者和专家进行了大量的研究工作,取得了可喜的成绩,积累了一定的经验,为中药作用机制和物质基础的深入研究奠定了基础。我国已将它列入国家自然科学基金资助范围,现就其研究应用现状作一综述。
1 中药血清药理学方法在我国的应用现状
对中药解热作用的研究 杨奎等研究含黄芩、藿香、羌活胜湿汤和九味羌活汤的血清对单核细胞内DNA合成、Ca2+内流的影响,发现:含黄芩血清能明显抑制单核细胞内DNA合成,抑制Ca2+内流,因而能阻止内生致热原的合成;而含藿香、羌活胜湿汤和九味羌活汤的血清对单核细胞的合成的抑制作用依次增强,含香薷血清呈明显量效递增性抑制作用,含羌活胜湿汤和九味羌活汤的血清两者在大剂量时却呈促进作用;对单核细胞内流的影响,香薷的作用较九味羌活汤弱,但均呈量效递增性抑制作用,而羌活胜湿汤则与此相反,在较大剂量时翻转为促进Ca2+内流作用;时效关系表明,九味羌活丸对内流的抑制作用在给药后90min达高峰,对DNA合成的抑制作用在给药后30min和90min间较明显,对蛋白质合成的影响在给药后120min内呈轻微促进作用。该实验表明采用中药血清药理学方法进行中药时效关系研究,有较大的优势。
表１ Ａ１组与Ａ２组高血压患者临床疗效比较 ［ｎ ）】 ２．２不良反应 两组高血压患者在治疗过程中均未表现出严重不良反应的 情况。在Ａ１组高血压患者中，共３例患者表现出轻微头昏症状，２ 例患者表现出口干症状；在Ａ２组高血压患者中，共４例患者表现 出轻微头昏症状，３例患者表现出口干症状；在临床不良反应表现 方面，Ａｌ组与Ａ２组未表现出显著差异（Ｐ＞０．０５）。 ３讨论 硝苯地平缓释片针对血管表现出较高的选择性作用，其可以 对患者的血管平滑肌直接进行扩张，最终有效降低患者的血管扩 张血压。坎地沙坦能够有效将患者血管紧张素Ⅱ针对血管表现出 的收缩作用降低，将患者的血儿茶酚胺有效升高，表现出显著的 中医药探索２０１４年第１ＩＦ 降压作用，与此同时可以有效对患者的心’肾等器官进行保护，最 终将糖代谢作用有效改善。 在本次研究过程中，Ａ１组高血压治疗总有效率为９８．２１％，Ａ２ 组治疗总有效率为８０．３６％，Ａ１组高于Ａ２组高血压患者极为显著 （Ｐ＜０．０５）。在临床不良反应表现方面，Ａｌ组与Ａ２组未表现出显著 差异（Ｐ＞Ｏ．０５）。有效证明将上述两种药物联用的临床价值。 总而言之，针对高血压病患者，选择硝苯地平缓释片＋坎地沙 坦胶囊给予临床治疗，能够显著将高血压患者生活质量提高，凸 显硝苯地平缓释片与坎地沙坦胶囊两种药物联用治疗高血压疾 病的临床价值。 参考文献： ｆ１１江世亭，汤仁礼，余赛英等．硝苯地平缓释片治疗高血压合并糖 尿病疗效观察卟山东医药，２０１３，５（２１）：６７—６８． 『２］２江世亭，汤仁礼，熊天健等．硝苯地平缓释片治疗慢性肾功能不 全合并高血压疗效评价【丌．山东医药，２０１３，５（９）：５４－５５． 『３］朱海龙，肖静，陈小玲等．硝苯地平缓释片与非洛地平缓释片治 疗不同高血压患者疗效观察Ⅱ］．海南医学，２０１２，２１（４）：２０—２２． 中药血清药理学研究方法的概述 吴晋 （福建省药品检验所，福建福州３５０００３） 【关键词】中药；血清药理学；概述 中药血清药理学起源于日本，由著名日本学者带真一川在 １９８４年在第一届汉医学会上提出并命名的，后来传人我国，并形 成了一种医药学的研究热点。所谓的中药血清药理学是指先将中 药、中药复方以及不明成分的药物给动物灌服，待到设定的时间 后，采取动物的血清并分离，然后利用采集的血清来进行药学实 验的方法。本文通过对搜集近年来的实验成果以及经验，为今后 的发展提供借鉴。 １ 中药血清药理学的起源 传统在做中药药理实验的时候大多都是将利用中药的粗提 物来进行的，这样做的缺点很多，往往造成实验结果的不准确性， 其缺点大致分为三点：第一，中药粗提物中的杂质太多，对实验的 结果会产生干扰；第二，由于一些无法吸收的物质会对鉴定结果 产生误导；第三，粗提物中缺少所需要的有效物质。在１９８４年日本 召开的第一届和汉医药学会上提出中药“血清药理学”这一新概 念。 ２中药血清药理学方法概述 ２．１实验动物的选择和模型的建立 在选取实验体时要尽量选取与人类生理学相近的小鼠、大 鼠、豚鼠和兔，制备含药血清的人或动物尽量与获取离体器官的 组织或细胞的来源相一致，缩小由于种属不同所带来生理方面的 差异，减小人体对药物的免疫反应，这样会让实验的结果更加可 靠，个别的还有健康的志愿者提供血清。在选取合适的血清提供 者的同时还要考虑到血清的有效成分的含量，考虑到幼鼠对血清 提供量无法满足，所以一般都是选取大鼠作为血清提供体，且大 鼠也不能太大，添加多余的动物之外的因素，一般在实验时都选 取体重在２５０～３００ｇ的成年大鼠，与此同时为了减少动物个体的 差异性，需要将数只大鼠的血清混合起来用。中药血清药理学多 用于复方中药制剂的研究，且可以验证制剂的药效学。健康动物 模型的建立可以观察含药血清对机体各系统的药理作用，但由于 健康动物体和病理动物体存在生理机能上的差异及药物吸收的 特异性等不同，因此建立合适的病理动物模型在研究复方制剂的 药效学研究上有更实际的意义。如建立炎症动物模型研究含药血 清的抗炎活性、建立肿瘤动物模型研究含药血清的抗肿瘤作用 等。 ２．２给药剂量与浓度 给药剂量一直是中药药理学方法中的一道难题，在现有的研 究中也不是统一的。在进行体外实验时，所用的含药血清都是要 被稀释的，但是这样有可能造成的结果是结论不准确，呈现假阳 性或隐形，这种的结果还可能是含药血清的浓度过低所造成的。 为了解决这种情况，学者们提出了两种解决方案：第一，增加所用 药物剂量；第二，利用公式，给药剂量＝临床常用量×动物等效剂 量系数Ｘ培养基内的稀释度；这两种方法优势为，能够提高含药 浓度并且能够更好的保存血清。所谓有利有弊，这样做并不能把 含药血清的浓度等倍增加，当遇到比较复杂的复方时就会面临难 灌服的缺点，只能将含药的血清经过处理形成干粉，以便达到所 需要的浓度。利用后者来提高血清中的药物，来满足实验的需要， 并容易保存。在临床进行治疗时，并不是剂量越大效果越好，必须 要考虑到剂量大所带来的后果，因此最好是根据预实验的结果来 确定所用的剂量。一般的含药血清的浓度不超过２０％，而１０％是比 较合理的，稀释浓度比例为１：４时比较合适，如果浓度过高培基 中的物质会产生毒性作用。 ２．３采血时间 采血的时间是根据具体的动物种类来定的，为了能够有效的 避免结果是假阴性的，采药的时段要最好控制在给药浓度的高 峰。但是这个时间很难把握，主要是因为不同的药物特别是中药 复方制剂的达峰时间和半衰期是不同的。一部分学者认为一般的 药物在药后１～２ｈ达到峰值，因此他们认为采血应该在给药后２ｈ时 进行，或者是末次给药时连续给２次，中间间隔ｌｈ，在最后一次给 药后１ｈ收取血。而李仪奎则持不同意见，他认为要连续３天给药， 每天２次，在最后一次给药后１ｈ取血。为了攻克这一难题，部分学 者通过选取５一ＨＴ和阻滞内皮细胞钙通道作用为指标来开展时效 研究，实验结果表明：采取的血中的血清在给药以后０．５ｈ效果是 最好的，几乎达到了近似稳态血药浓度时所制备的血清。但是最 合理的方法还是先对动物进行预实验，根据所得出的结果来制定 合适的采血时间。 ２．４含药血清的处理与保存 处理血清的方法有很多，其中最常用的就是水浴灭活的方 法，其他的方法还有丙酮法和乙醇法。进行灭活的主要目的是为 了减少血清中的其他物质对实验造成的干扰。如果是进行体外抗 病毒实验时则要选取合适的灭活方法，因为适当的灭活方法能够 降低血清及含药血清对病毒细胞病变的抑制作用，最常用的方法 是灭活血清，用含有桂枝兔血清在５６＂１２的条件下灭活０．５ｈ。影响 实验的还有其他因素，比如实验的对象的不同或者检验的目标不 一样就会造成灭活血清对实验的不同影响。 ２．５血清添加量 血清的添加量是进行药理学实验时要注意的问题之一，尤其 是在向体外反应系统时加入血清时要注意到血清的含药浓度会 降低，因此在进行实验时可以适当的添加血清的量，最好是选取 Ｉ
