D4S2364基因座在山西汉族人群中的遗传多态性研究

陈健等：关节腔内注射Ａｎｔｉ．ＶＥＧＦ对家兔ＴＭＪ间接性损伤作用研究２００９年２月　第１９卷第１期　

注射ＶＥＧＦ的拮抗剂（ＶＥＧＦ的多克隆抗体），试图干　

扰血管生成这一病理过程。　目前，对于间接性ＴＭＪ损伤可以导致颞下颌关节　

骨关节病及其他临床病症的机理尚认识不清。一些研　究认为，损伤破坏或抑制了髁突软骨的增殖能力，引起　

软骨基质的进行性丧失。但目前尚未见到有关实验研　究报道。而对于ＴＭＪ严重损伤的治疗也多以手术为　

主。本研究可能为临床治疗ＴＭＪ间接损伤提供思路。　

［参考文献】　［１］Ｈａｕｔ　ＲＣ，Ｉｄｅ　ＴＭ，Ｃａｍｐ　ＣＥ．Ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒａｂｂｉｔ　ｐａｔｅｌ－　Ｉｏ・ｆｅｍｏｒａｌ　ｊｏｉｎｔ　Ｉｎ　ｈｌｕｎｔ　ｉｍｐａｃｔ［Ｊ］．Ｊ　Ｂｉｏｍｅｃｈ，１９９５，１１７：４０２－４０８．　【２］Ｄｖｏｒａｋ　ＨＦ，Ｂｒｏｗｎ　ＬＦ，Ｄｅｔｍａｒ　Ｍ，ｅｌ　ａ１．Ｖａｓｃｕｌａｒ　ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ　ｆａｃｔｏｒ／　ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ，ｍｉｃｒｏｖａｓｃｎｌａｒ　ｈｙｐｅｒｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ　Ｊ］．Ａｍ　Ｊ　Ｐａｔｈｏｌ，１９９５，１４６：１０２９—１０３９．　［３　Ｋｏｃｈ　ＡＥ，Ｂｕｒｒｏｗｓ　Ｊｃ，Ｈａｉｎｅｓ　ＧＫ，ｅｔ　ａ１．１ｍｍｕｌｌｏｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｎ・　ｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ａｎｄ　ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ　ａｎ（１　ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｃ　ｓ）’ｎｏｖｉａｌ　ｔｉｓｓｕｅｓ［Ｊ］．Ｌａｂ　Ｉｎｖｅｓｔ，１９９９，６４：３１３－３２０．　Ｆｏｘ　ＳＢ，Ｔｕｒｎｅｒ　ＧＤ，Ｇａｒｔｅｒ　ＫＣ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｉｎｃｒｅａ．￣ｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　ＩＣＡＭ．３，Ｅ．ａｎｄ　Ｐ　ｓｅｌｅｃｔｉｎｓ　ｏｎ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｅｌｌ・　ｄｏｔｈｅｌｉｕｍ［Ｊ］．Ｊ　Ｐａｔｈｏｌ，１９９５，１７７；３９６－３７６．　Ｊａｃｋｓｏｎ　ＪＲ．Ｓｅｅｄ　ＭＰ．Ｋｉｒｃｈｅｒ　ＣＨ。ｅｌ　ａ１．Ｔｈｅ　ｃｏｄｅｐｅｎｄｅｎｅｅ　ｏｆ　ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｃｈｒｏｎｉｃ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ［Ｊ　．Ｆａｓｅｂ　Ｊ，１９９７，１　１：４５７—　４６５．　Ｗａｌｓｈ　ＤＡ，Ｈｕ　ＤＥ，Ｍａｐｐ　ＰＩ，ｅｔ　ａ１．１ｎｎｅｒｖａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｎｅｕｒｏｋｉｎｉｎ　ｒｅｅｅｐ—　ｔｏｔｓ　ｄｕｒｉｎｇ　ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｔｈｅ　ｒａｔ　ｓｐｏｎｇｅ　ｇｒａｎｕｌｏｍａ［Ｊｊ．Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ　Ｊ，　１９９６，２８：７５９—７６９．　Ｗａｌｓｈ　ＤＡ．Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ　ａｎｄ　Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ［ｊ］．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，１９９９，３８：　１０３．Ｉｌ２　

［作者简介］　陈　健（１９８０一），男，黑龙江人，２００８年毕业于山　西医科大学，硕士　本文编辑：李夏　

ＩＭＳ２３６４基因座在山西汉族人群中的遗传多态性研究　

刘艳琼，张更谦　，郭大玮，车　莎　

（山西医科大学法医学院，山西太原０３０００１）　

［摘要］　目的：通过对Ｄ４Ｓ２３６４基因座在山西汉族人群中的研究，获得此ＳＴＲ基因座的群体遗传数据，对其法　医学意义进行探讨。方法：应用ＰＣＲ扩增技术，非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，对Ｄ４Ｓ２３６４基因座进行分型。结　果：ｌ２０例个体中Ｄ４Ｓ２３６４共检出５个等位基因，ｌ１种基因型，基因型频率分布符合Ｈａｒｄｙ—Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡。此　ＳＴＲ基因座在中国山西汉族人群中的非父排除率为Ｏ．３６２，个人识别率为０．８０４。结论：Ｄ４Ｓ２３６４基因座在法医　学及人类遗传学方面有较高的应用价值。　［关键词］　短串联重复序列；Ｄ４Ｓ２３６４；遗传多态性；山西；汉族人群　【中图分类号］　Ｒ３９４．３　［文献标识码］　Ａ　［文章编号］　ｌ６７ｌ　ｌ２６（２００９）０ｌ－０００９－０３　

Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　Ｇｅｎｅｔｉｃ　Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｏｆ　ＩＭＳ２３６４　Ｌｏｃｕｓ　ｉｎ　Ｓｈａｎｘｉ　Ｈａｎ　Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　

ＬＩＵ　Ｙａｎｑｉｏｎｇ，ＺＨＡＮＧ　Ｇｅｎｇｑｉａｎ，ＧＵＯ　Ｄａｗｅｉ，ＣＨＥ　Ｓｈａ　

（Ｆｏｒｅｎｓｉｃ　Ｍｅｄｉｃａｆ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｓｈａｎｘｉ　Ｍｅｄｉｃａｆ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｙｕａｎ　０３０００　ｌ，Ｓｈａｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ）　［ＡＢＳＴＲＡＣＴ］ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｏｂｔａｉｎ　ｔｈｅ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｄａｔａ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＳＴＲ　ｌｏｃｕｓ　ａｎｄ　ｄｉｓｃｕｓｓ　ｔｈｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ｏｆ　ｆｏｒｅｒｔ．　

ｓｉｃ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ｂｙ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇ　ｔｈｅ　Ｄ４Ｓ２３６４　ｌｏｃｕｓ　ｉｎ　Ｓｈａｎｘｉ　Ｈａｎ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ　Ｄ４Ｓ２３６４　ｌｏｃｕｓ　ｗａｓ　ｃｌａｓｓｉｆｉ．　

ｃａｔｅｄ　ｂｙ　ＰＣＲ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ　ａｎｄ　ｎｏｎ　ｄｅｎａｔｕｒｅｄ　ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅ　ｇｅｌ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｆｉｖｅ　ａｌｌｅｌｅｓ　ａｎｄ　ｅｌｅｖｅｎ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｄ４Ｓ２３６４　ｌｏｃｕｓ　ｏｆ　１　２０　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ　ｃａｓｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｇｅｎｏｔｙｐｉｃ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ　ｄｉｓｔｉｌ．　

ｂｕｔｉｏｎ　ｃｏｉｎｃｉｄｅｄ　ｗｉｔｈ　Ｈａｒｄｙ—Ｗｅｉｎｂｅｒｇ　ｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ．Ｔｈｅ　ｐｏｗｅｒ　ｏｆ　ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ（ＰＥ）ｗａｓ　０．３６２　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｏｗｅｒ　ｏｆ　ｄｉｓｃｒｉｍｉ—　ｎａｔｉｏｎ（ＰＤ）ｗａｓ　０．８０４　ｏｆ　ｔｈｅ　ＳＴＲ　ｌＯＣＨＳ　ｉｎ　Ｓｈａｎｘｉ　Ｈａｎ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ　Ｄ４Ｓ２３６４　ｌＯＣＵＳ　ｈａｓ　ｈｉｇｈ　ｐｒａｃｔｉｃａｌ　

ｖａｌｕｅ　ｉｎ　ｆｏｒｅｎｓｉｃ　ｍｅｄｉｃｉｎｅ　ａｎｄ　ｈｕｍａｎ　ｇｅｎｅｔｉｃｓ　ｒｅｓｅａｒｃｈ．　

［ＫＥＹＷＯＲＤＳ］ｓｈｏｒｔ　ｔａｎｄｅｍ　ｒｅｐｅａｔｓ；ＩＭＳ２３６４；ｇｅｎｅｔｉｃ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ；Ｓｈａｎｘｉ：Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｈａｎ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　

通讯作者：张更谦，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｇｎｇｑｉａｎ＠１６３．￣．＊ＯＩＩＩ　

・９・　１　Ｊ　］、　ｊ　］

　山面职Ｚ压学院季掘　２００９年２月第ｌ９卷第１期　

人类ＤＮＡ短串联重复序列（ｓｈｏｒｔ　ｔａｎｄｅｍ　ｒｅｐｅａｔｓ，　

ＳＴＲ），是３个或４个碱基为重复单位构成的串联重复序　

列，由其核心序列２－６ｂｐ构成，其在个体问重复次数的差　异形成丰富的片段长度多态性…。这种片段长度的大小　

按孟德尔遗传规律遗传。ＳＴＲ基因座的等位基因片段　

小，特异性高，极易通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增，电泳　

分型。ＳＴＲ是新一代ＤＮＡ指纹中最重要的内容　，被　

广泛地应用于法医学中的个人识别、亲子鉴定。而此基　

因座在山西汉族群体中基因频率分布状态尚未见报道。　本文通过对ＩＭＳ２３６４基因座的研究，以获得山西汉族人　

群此基因座的频率分布和遗传多态性特征。　１材料与方法　

１．１　标本　１２０例山西汉族无关男性个体，取外周血１　ｍＬ，　

ＥＤＴＡ抗凝。　

１．２引物序列　引物序列参照基因库（ｗｗｗ．ｇｄｂ．ｏｒｇ），由ＴａＫａＲａ　

公司合成。见表１。　

表１　Ｄ４ｓ２３６４基因座信息特征　Ｔａｂｌｅ　１　Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　０ｆ　ｓ２３６４　Ｉｏｃｕｓ　

１．３　ＤＮＡ的提取　采用酚．氯仿有机溶剂法　』。　

１．４　目标ＤＮＡ片段扩增与电泳　２５　Ｌ的ＰＣＲ反应体系包含：５０　ｎｇ～１００　ｎｇ基因　

组ＤＮＡ，２．５　ＩＬＬ　１０×ＰＣＲ缓冲液（含１．５　ｍｍｏｌ／Ｌ　

Ｍｇ“），２００　ｍｏｌ／，Ｌ　ｄＮＴＰ，１　Ｕ　Ｔａｑ　ＤＮＡ聚合酶　

（ＴＡＫＡＲＡ，大连），引物各０．３　ｉｘｍｏＬ／Ｌ。热循环仪采用　

Ｔ１　Ｔｈｅｒｍｏｃｙｃｌｅｒ（Ｂｉｏｍｅｔｒａ，德国）。ＰＣＲ的反应条件：　

９５℃预变性５　ｒａｉｎ，９５　ｏＣ变性５０　Ｓ，５９℃退火４０　Ｓ，　

７２℃延伸５０　Ｓ，３０个循环；７２　ｏＣ延伸１０　ｍｉｎ。非变性聚　

丙烯酰胺垂直电泳分析ＰＣＲ扩增产物。１×ＴＢＥ缓冲　液，恒压４００　Ｖ，电泳时间２　ｈ。　

１．５等位基因阶梯的制备与命名　

取该基因座的纯合子的ＰＣＲ扩增产物进行测序反　

应（各等位基因委托大连ＴａＫａＲ且公司），ＭｅｇＢａｓｅ一１０００　

自动测序，测序得到的重复序列按照国际法医血液遗传　学会ＤＮＡ委员会（ＩＳＦＧ）推荐的原则命名　］。　

１．６数据分析　

按照文献　对群体数据作Ｈａｒｄｙ—Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡　

吻合度检验，非父排除率和个人识别率按照文献　

计算。　

２结果　

２．１序列结构　

本次实验发生其重复次数分别为８，９，１０，ｌ１，１２；　

按照ＩＳＦＧ推荐的命名标准，将其等位基因命名为８，　

・１Ｏ・　９，１０，１１，１２　，见表２。　

表２　Ｄ４Ｓ２３６４基因座的多态性　Ｔａｂｌｅ　２　Ｇｅｎｅｔｉｃ　ｐｏｌｙｍｏｒｐＭｓｍ　ｏｆ　Ｄ４Ｓ２３６４　ｌｏｃｕｓ　

等位基因　重复顺序　

８　９　１０　ｌ１　１２　（ＧＡＡＴ）（ＧＧＡＴ）（ＧＡＡＴ）８　（ＧＡＡＴ）（ＧＧＡＴ）（ＧＡＡＴ）９　（ＧＡＡＴ）（ＧＧＡＴ）（ＧＡＡＴ）　０　（ＧＡＡＴ）（ＧＧＡＴ）（ＧＡＡＴ）ｌｌ　（ＧＡＡＴ）（ＧＧＡＴ）（ＧＡＡＴ）ｌ２　

２．２　结果　１２０例无关个体中，Ｄ４Ｓ２３６４基因座检出５个等　

位基因，１１种基因型，各等位基因及基因频率见表３。　基因频率分布经ｘ。检验，Ｐ＞０．０５，符合Ｈａｒｄｙ—Ｗｅｉｎ．　

ｂｅｒｇ平衡。个人识别率（ＤＰ）为０．８０４，匹配概率为　

０．１９６，非父排除率（ＰＥ）为０．３６２。　

表３　Ｄ４Ｓ２３６４基因座的等位基因频率　Ｔａｂｌｅ　３　Ａｌｌｅｌｅｓ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓ　ｏｆ　ＩＭＳ２３６４　ｌｏｃｕｓ　

等位基因　基因频率　

８　９　ｌＯ　１ｌ　ｌ２　Ｏ．Ｏ１６　０．Ｏ９３　８　０．４９８　３　０．３Ｏ９　

０．０８２　９