浅谈黄芪中主要成分的含量测定方法中国健康月刊2011年第3O卷第9期JChinaHealthMonthly2011,V ol30.No.9月期间收治的ll2例心血管病高危患者,其中男性有62例,女性有5O 例,年龄在40～81岁之间,平均年龄为53.2岁.本组人选的都是高危患者并且都是拟行冠状动脉造影者.高危定义是既往发生过心脑血管疾病如缺血性脑卒中,短暂性脑缺血,冠心病等疾病或者是具有两个以上心血管危险因素.心血管危险因素主要包括吸烟,酗酒,肥胖,糖尿病,高血压,高血脂及年龄在5O以上等因素.人选患者中排除严重心功能不全及其他原因不愿接受检查者.1.2检查方法1.2.1仪器:本组研究中使用的颈动脉检查仪器是由飞利浦公司生产的IE33型超声显像仪.探头频率为7～10MHz.颈动脉检测的指标主要包括几项:搏动指数(PI),收缩期峰值流速(SPV),舒张末期流速(EDV),阻力指数(RI),其中几项指标的关系为Rj:(SPV—EDV)/SPV.1.2.2临床血液生化指标:调查所收治患者的既往心血管发病史,统计发生的次数和数目.检查患者的身体指标包括身高,体重,并测量患者的动脉血压和心率.另外在清晨空腹检查患者的血常规.1.23颈动脉超声检查:颈动脉检查时先纵向检查颈总动脉近心端沿血管的部位,之后在检查颈内动脉和颈外动脉.检查时患者应处于平卧位,而且在颈后垫上一个低枕,头部向后方仰.之后将头部转9O度,进行横向检查.在血管收缩期检查得到的IMT值是最厚的部位,了解内中膜情况,如此评价测量3次,之后取其平均值.对于有斑块的患者要观察其斑块的性状和大小,并准确的测最最大的斑块长度.依照IMT,颈总动脉,颈动脉分叉部和颈内动脉粥样化等情况将所有的患者分为4组,A组是IMT 小于1.0mm者,B组中IMT为1.1～1.5ram之间的患者;C组中长度为小于2cm且颈动脉斑块不大于2个的患者;D组斑块长度大于2cm或者是颈动脉斑块多于2个的患者.1.2.4冠状动脉造影:给患者做常规的股动脉和桡动脉穿刺进行造影检查,分析左右冠状动脉的造影结果.观察患者的造影情况,正常或者狭窄小于5O%者为造影阴性;狭窄大于5O%为造影异常.1.3统计学处理:本组研究中的数据通过SPSS13.0的统计学的软件包进行统计学处理,计量资料用料采用均数±标准差表示,组伺差异进行t检验,计数资料用卡方检验,有显着的统计学差异表示为P<O.05. 2结果4组患者的超声检查中显示c组和D组患者的危险因素和心血管发生数目明显的高于A组患者,D组患者的收缩压高于其他的三组,四组患者的心率,舒张压和BMI情况也存在有统计学差异(P<0.05).四组患者的血液生化指标比较也有显着的统计学差异(P<O.05).表1四组患者的情况比较3讨论心血管患者发生动脉粥样硬化是长期发展而形成的.近年来随着社会压力和生活节奏的加快,心脑血管的发病率也在逐年的升高,成为危害人们健康的重要因素之～,因此临床中对于心脑血管疾病的检查和治疗有重要的意义.有研究表明,经总动脉的IMT与年龄有线性正相关,其随着年龄的增加而增厚,尤其是对于六旬以上的老年人增厚差异较为明显.本组研究中心血管危险因素的判定标准:吸烟指患者在现在或者是以往有过吸烟;肥胖是按照中华医学会在2004年糖尿病分会的代谢综合征的诊断标准;高血压是根据美国JNC7和2003年ESH/ESC欧洲高血压指南标准;糖尿病主要是根据1999年WHO的糖尿病诊断标准.高血脂症的标准是要符合下列条件之一:(1)总胆固醇C)高于5.20mmol/L;(2)低密度脂蛋白胆固醇(LDL—c)高于3.12mmol/L;(3)高密度脂蛋白胆固醇(HDL---e)低于1.04mmol/L;(4)三酰甘油G)高于1.7mmol/L.总之,通过本组对我院心血管患者的分析表明,超声技术可以为临床中诊治提供一定的依据.参考文献【1】富华颖,周长钰,李广平,刘彤,郑成环,尹力.心血管病高危人群颈动脉超声的临床应用fJ1.天津医药,2010,38(8):663—667.【2]陈虞,胡大一,杨进刚.心血管病高危人群臂踝脉搏波速床应用Ⅲ.中国康复理论与实践,2007,13(3):275—278[3】王吉耀,廖二元,胡品津.内科学【M】北京:人民卫生出版社,2005:247.~]NewmanAB,NaydeckBL,NesDG,eta1.Coronaryarterycalcium,carotid arterywallthickness,andcardiovasculardiseaseoutcomesinaduhs70to99yearsol dfJ].AmJCardiol,2008,101(2):186—192.浅谈黄芪中主要成分的含量测定方法崔桂英(安徽淮南卫校附属医院,安徽淮南232007)【摘要】目的本文的研究主要为了对中药黄芪质量评价提~,-q-靠的方法和指导临床合理用药提供依据.方法线性关系考察,精密度试验,供试品溶液稳定性试验和重现性试验.结果蒙古黄芪与膜荚黄芪中含有化合物3,1,13,12,5和6的比值为O.50,o.70…111.89,o.59和1.13,化合物13和6的d/X<15%.没有显着性差异;化合物,3,12和5的d/X>15%~有显着性差异.结论膜荚黄芪中的化合物5,3,1均高于蒙古黄芪,蒙古黄芪的化合物12高于膜荚黄芪.【关键词】黄芪主要成分含量测定一中图分类号:R282.5文献标识码:B文章编号:1005—0515(2011)9-333-02中国传统医院强调中药的整体效果,多环节,多靶点,多成分的协同但是结果无法得到纯品.黄芪甲苷粗品进一步用反相硅胶C-18常压色作用才能够使中药机理发生作用.因此,我们从多个黄芪中主要化合物人谱柱分离,60%甲醇洗脱,得到黄芪甲苷纯品13.4mg,HPLC-ELS检测纯手,多方面的对黄芪的质量做出评价.度符合药典标准.运用硅胶柱色谱和活性炭色谱分离手段,从黄芪粉末醇1实验药材,对照品,试剂和仪器提物的正丁醇萃取部分分离出黄芪甲苷的纯品,纯度符合药典标准.分析1.1实验药材及试剂纯甲醇:HCRC国药集团试剂有限公司;分析乙腈:Sigma.蒙古黄芪与膜荚黄芪(购自淮南市药材批发市场),对照品本均来自本1.2仪器实验组从黄芪中分离得到的化合物(1,3,5,6,12和13);从黄芪中分离得HPLC:Waters2695;检测器:uVwaters2996,ELSDwaters2420到的化合物,主要有皂苷类,黄酮类,黄烷类,联苯衍生物,多糖,另外还有2实验条件的选择氨基酸,谷甾醇,胡萝苷等,其中以皂苷类,黄酮类最为重要.影响甲苷色谱柱:SUNFIREC18(5urn4.8*150mm);流动相:甲醇.水一乙腈;流提取率的因素有很多,根据文献用正交试验法对各因素试验结果的影响速:hnl/min.进行分析,顺序为乙醇的体积分数)PH值)乙醇用量,其中乙醇的体积分2.1黄酮(苷)数对黄芪甲苷的提取率有显着性的影响(p<O.05),PH值对黄芪甲苷的提表1梯度洗脱条件取率也有显着性影响(P<O.05),而乙醇用量的影响甚小(P>O.1).另外,与水提法相比,用醇回流提取法的提取率更高,且液体用量更少,便于以后进一步的分离.因此确定最佳提取条件为:乙醇体积分数为60%,乙醇用量6倍于黄芪质量,温度为60’E时.有文献报导,用正丁醇萃取后用氨试液洗涤提取液,弃去氨试液,正丁醇液蒸干,用0.451xm微孑L滤膜滤过,检测器:HPLC.PDAD;检测波长:250nm.2.2皂苷333?中国健康月刊2011年第3O卷第9期JChinaHealthMonthly2011,V o130.No.9表2梯度洗脱条件检测器:ELSD;氮气压力25.0psi,增益100,喷雾加热器级别60%,漂移管温度50℃.3对照品的制备精密称取黄芪甲苷(5)标准品21mg,黄芪皂苷IIO)26mg,紫檀烷型黄酮.3.葡萄糖苷(1)13rag,3’一羟基一5’一甲氧基异黄酮一7—0一D一毗喃葡萄糖苷(3)14mg,7～羟基一4,～甲氧基异黄酮(12)18mg,7,3’一羟基一5’甲氧基异黄酮(13)12mg,分别精确配成O.42mg/ml,1.3rag/rid,0.13u~ml,4.64ug/ml,0.01medml,0.024mg/ml的溶液.摇匀,分别经O.45urn微L滤膜过滤,备用.4供试品的制备分别取蒙古黄芪,膜荚黄芪各20%,分别用1500nil甲醇浸泡过夜回流提取3次(2h,2h,1.5h),得蒙古黄芪粗提物68.27g,膜荚黄芪粗提物48.55g.分别取蒙古黄芪粗提物68.8mg,膜荚黄芪粗提物55.1mg,均配成10rag/ml溶液作为黄酮(苷元)的供试品;分别取蒙古黄芪粗提物5g,膜荚黄芪粗提物59,甲醇溶解,309硅胶柱色谱纯化,二氯甲烷甲醇10:1f200mE)和4:l(400mL)洗脱,4:1部分蒸干后溶于50ml甲醇,作为皂苷的供试品.分别取蒙古黄芪粗提物1g,膜荚黄芪粗提物1g,溶于1OraL 甲醇中,取lmL稀释至10mL,作为黄酮的供试品.5方法学考察5.1线性关系考察表3线性关系考察表5.2精密度试验取已配好的对照品化合物l,3,5,6,12和13溶液重复进样6次,其中1,3,l2和13每次进10ul,5和6每次进5ul,记录各峰面积,计算RSD 值分别为2.6%,3-8%,O.8%,19%,O.4%和0_3%,表明本实验方法精密度符合要求.5-3供试品溶液稳定性试验取蒙古黄芪和膜荚黄芪的粗提物溶解,分别在O,4,8,12,24,48小时测定,进样40ul,测得蒙古黄芪的RSD值5和6分别为0.263%,O.215%, l,3,12和13分别为0.105%,0.082%,0297%,0.099%;膜英黄芪的RSD 值分别为5和60.395%,1.407%,1,3,12和13分别为O.155%,0.025%, 0.325%,0.101%.结果表明化合物1,3,5,6,12和13在48小时内稳定性良好.5.4重现性试验取蒙古黄芪提取物各6份,按供试品的制备方法平行处理,测定蒙古黄芪中的黄酮化合物1,3,12和l3及皂苷化合物5和6的峰面积,计算RSD为2.2.黄酮的加样回收率:取蒙古黄芪粗提物1.009,分别加30mg,lmg,2.35rag,3mg,甲醇溶解,过滤,蒸干,溶于10Oral色谱甲醇中,微孔过滤,进样lOul.重复6次,取峰面积的平均值,数据如下:表5,化合物3的加样回收率.6样品含量测定蒙古黄芪皂苷的供试品进样40uL测化合物5和6的含量,膜荚黄芪皂苷的供试品进样20uL测化合物5和6的含量.表6黄芪中黄酮的含量表7黄芪中皂苷的含量7讨论论文中分别考察了6种主要成份在蒙古黄芪和膜英黄芪中的含量差异,结果蒙古黄芪与膜荚黄芪中含有化合物3,1,l3,12,5和6的比值为0.50,0.70…111.89,0.59和1.13,化合物l3和6的d/X<I5%,没有显着性差异;化合物,3,12和5的d/X>15%均有显着性差异.由此得出结论,膜荚黄芪中的化合物5,3,l均高于蒙古黄芪,蒙古黄芪的化合物12 高于膜荚黄芪.8结束语黄芪的生物活性的全貌不能够通过单一活性成分的含量所反映出来.本文的研究主要为了对中药黄芪质量评价提供可靠的方法和指导临床合理用药提供依据.我们对黄芪中的主要活性成分进行制备,并以其作为对照品进行多活性组分含量测定.参考文献[1】胡伦香,张建,罗春,傅晓钟9一【2一酰基甲氧基)乙基】腺嘌呤的合成工艺研究,贵阳医学院2008,5,23(5).[2]张云峰,魏东等,大花罗布麻化学成分研究,天然产物研究与开发, 200618.954--957.[3]Agzarn0va,M.A.,Khim.Prir.S0edin.,1986,22,l17:pd. (En91.Trans1.),1986,22,ll5.超声在女性盆腔结核诊断中的应用霍雅清李畅刘晶鑫(吉林省结核病医院,吉林九台130500)【摘要】目的分析超声在女性盆腔结核诊断及鉴别诊断中的应用,为临床提供可靠的依据.方法对40例盆腔结核患者进行跟踪随访,穿刺活检,手术病理对照.研究每个病例声像图特征并进行分类总结.结果超声诊断盆腔结核病理符合率达92.5%左右.结论超声可以判断盆腔结核病变波及的范围,与周围组织及血管的关系,具有G4,I性,无痛性,安全性,可重复性等优点.334?。
