细菌鉴定 实验方法

  • 格式:docx
  • 大小:923.66 KB
  • 文档页数:5

下载文档原格式

  / 7
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

芽孢菌菌种鉴定部分实验

1、好氧性-半固体琼脂穿刺

半固体琼脂0.5-0.6%,

一般培养用培养基

伯杰氏手册

2、V-P实验(测定培养物终pH)

(科大微生物)按培养液一半的量加入6%萘酚酒精液,摇匀,再按培养液1/3量加入40%氢氧化钾溶液,充分摇匀。呈现红色者为V-P阳性,不呈现红色为阴性,后者放培养条件下继续培养4h再观察判定。

3、柠檬酸盐

4、D-木糖、D-甘露醇

5、葡萄糖产酸产气

糖发酵培养基(科大微生物实验):

牛肉膏0.5%

蛋白胨1%

氯化钠0.3%

Na2HPO4.12H2O 0.2%

0.2%溴麝香草酚蓝溶液1.2%(体积分数)

蒸馏水配制,pH7.4

方法:葡萄糖发酵管按上述成分配好后,加入0.5%葡萄糖,分装于有一个倒置杜氏管的试管内,121℃灭菌15min。其他糖分别配成10%溶液,无菌吸管吸取0,5mL加入10mL培养基内。蔗糖不纯,加热时会自行分解,采用过滤除菌法。乳糖发酵无牛肉膏。

紫色培养基变黄者,利用葡萄糖产酸;培养基变黄,杜氏管中又有气泡,产酸产气,气泡似小米粒,产酸微量产气

6、酪素水解及酪氨酸水解

酪素水解试验(酪蛋白水解)牛奶平板的制备:取5g脱脂奶粉加入50mL蒸馏水中(或用50mL脱脂牛奶),另称1.5g琼脂溶于50mL蒸馏水中,将两液分开灭菌。待冷至45

-50℃时,将两液混匀倒平板,即成牛奶平板。将平板倒置过夜,使表面水分干燥,然后将菌种点接在平板上,每皿可点接3-5株菌。适温培养1、3、5天,记录菌落周围和下面酪素是否已被分解而呈透明。

配制该培养基时,切勿将牛奶和琼脂混合灭菌,以防牛奶凝固。

酪氨酸水解将酪氨酸0.5g悬浮于10mL蒸馏水中,115℃,20分钟灭菌,然后于100mL 无菌的营养肉汤琼脂混合,倾倒平板,待凝固后,将测试菌接种于平皿上,培养7到14d,记录酪氨酸结晶是否被水解而变透明。

7、苯丙氨酸脱氨酶

8、卵黄卵磷脂酶

9、硝酸盐还原到亚硝酸盐实验

10、0.001%溶菌酶抗性实验

滤纸片抑菌圈实验

11、吲哚反应

蛋白胨水培养基:蛋白胨(或胰蛋白胨)20g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL;121,15min。

欧波试剂:将1g对甲氨基苯甲醛溶于95mL乙醇(95%)中,然后缓慢加入浓盐酸20mL。

取培养好的试管,加入约0.5mL乙醚,振摇均匀后静置分层,再沿管壁加入约 1.5mL 的吲哚试剂。阳性者在上层的乙醚层呈玫瑰红色,否则为阴性。

12、淀粉水解

13、接触酶反应