药理实验

实验一 不同剂量对药物作用的影响

(Influnce of the Does on the Effects of Drug)

[目的和原理]

观察药物不同剂量对药物作用的影响。药物剂量的大小决定血药浓度的高低，血药浓度又决定药理效应，因此药物剂量决定药理用强弱

[实验材料]

1动物：小鼠3只。

2药品：o．5％苯甲酸钠咖啡因溶液(Caffeine and sodium benzoate solution)、4％苯甲酸钠咖啡因溶液(Caffeine and sodium benzoate solution)。

3器材:鼠笼、大烧杯、普通天平、1 m1注射器。

[实验步骤]

取小鼠3只，以苦味酸溶液涂毛作不同记号，称其体重，观察小鼠正常时的活动情况。给各鼠分别腹腔注射不同剂量的苯甲酸钠咖啡因：甲鼠o．5 mg／10 g体重，乙鼠2．o mg／10g体重，丙鼠8．o mg／10 g体重。将小鼠放人3个大烧杯中，密切注意先后出现的反应。咖啡因在小鼠身上可能引起的作用，按照轻重程度不同，大约有活动增加、呼吸急促、反射亢进、震颤、惊厥及死亡等。记录各鼠所出现药物反应的严重程度和发生快慢，并比较各鼠有何不同。

[结果整理及整理]

记录并比较三只小白鼠出现的反应，分析不同给药剂量对药物效应的影响

[注意事项]密切观察三只小白鼠先后出现的反应并记录各鼠出现药物反应的严重程度

[思考题] 药物的剂量和作用的关系对临床用药有何重要意义?

（石乐鸣）

实验二 不同给药途径对硫酸镁作用的影响

(1nfluence Of the Routes Of Administration On the Effects Of Magnesium Sulfate)

[目的和原理]

观察硫酸镁不同给药途径所产生的药理作用及药物间的拮抗作用。

给药途径不同，不仅影响到药物作用的快慢、强弱及维持时间的长短，有时

还可改变药物作用的性质，产生不同的药理作用。硫酸镁即为一典型药物。Mg2＋与Ca2＋

可产生竞争性拮抗作用。

[实验材料]

1.动物：家兔2只。

2.药品：生理盐水(normalsaline)；

250mg／m1硫酸镁溶液(mag~msidmsulfatesolution)；

50mg／m1氯化钙溶液(calciumchloridesolution)。

3.器材：灌胃管(可用导尿管代替),兔开口器，注射器。 [实验步骤]

1.取家兔2只，观察其正常情况(呼吸、肌张力及大小便)。

2.甲兔给硫酸镁250mg／kg灌胃，乙兔按同样剂量深部肌内注射硫酸镁，观察两兔

所出现的症状。 ·

3.若兔出现四肢瘫痪、呼吸困难时立即自耳缘静脉注射氯化钙25—50mg／kg，观察

上述情况是否缓解。

[结果整理及分析]

记录并比较两兔所出现的反应，分析给药途径不同对药物的作用有何影

响。分析Ca2＋与Mg2＋的拮抗作用机理。

[注意事项]

1.葡萄糖酸钙也可用于解救硫酸镁中毒。

2.注射钙剂速度要慢，以免引起心室颤动并防止药物渗出血管外。

[思考题]

同一药物相同剂量以不同给药途径为什么会出现不同的药物反应？

（石乐鸣）

实验三 戊巴比妥钠半数有效量（ED50）的测定

〔Determination Of Median Effective Does（ED50）Of Sodium Pentobarbital〕

[目的和原理] 测定戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠催眠作用的ED50值。戊巴比妥钠为巴比妥类镇静催眠药，用适当剂量给小鼠腹腔注射后产生的催眠效应，常用翻正反射的消失来判断，该指标仅有阳性（睡眠）和阴性（不睡眠）两种现象，属于质反应。

质反应量效曲线的横坐标为对数剂量，而纵坐标采用阳性反应发生的频数时，一般为常态分布曲线。如改用累加阳性频数为纵坐标时，可以得到标准的S型曲线。该曲线的中央部分（50%反应处）接近一条直线，斜度最大，其相应的剂量也就是能使群体中半数个体出现某一效应的剂量，通常称为半数效应量。如效应为疗效，则称半数有效量（ED50）；如效应为死亡，则称半数致死量（LD50）。这些数值是评价药物作用强度和药物安全性的重要参数。

测定ED50和LD50的方法基本一致，只是所观察的指标不同。前者以药效为指标，后者以动物死亡为指标。常用的测定方法有Bliss法（正规机率单位法），Litchfield-Wilcoxon机率单位图解法，Kaerber面积法，孙瑞元改进的Kaerber法（点斜法）及Dixon-Mood法（序贯法）等。其中孙氏改进的Kaerber法因其简捷性和精确性更为常用。

孙氏改进的Kaerber法的设计条件是：各组实验动物数相等，各组剂量呈等比数列，各组动物的反应率大致符合常态分布。若以Xm为最大反应率组剂量的对数，i为组间剂量比的对数，p为各组反应率，Pm为最高反应率，Pn为最低反应率，n为实验组数，则：

ED50＝lg-1[Xm－i（∑P－0.5）＋i/4（1－Pm－Pn）] （4－5） 含0%及100%反应率时，

ED50＝lg-1[Xm－i（∑P－0.5）] （4－6）

ED50的95％可信限＝lg-1（lgED50±1.96·S） （4－7）

其中S＝i 12nPP （4－8）

[实验材料]

小鼠60只，体重18～24g；戊巴比妥钠溶液（sodium pentobarbital solution）2.00mg/ml，2.40mg/ml，2.89mg/ml，3.47mg/ml，4.16mg/ml，5.00mg/ml；小鼠笼，天平，0.5ml或0.25ml注射器。

[实验步骤]

1、确定给药剂量：先以少量动物做预实验，以获得小鼠对戊巴比妥钠催眠反应率为100％的最小剂量（ED100）和反应率为0％的最大剂量（ED0）。然后在此剂量范围内，按等比数列分成几个剂量组（一般4～8组），各组剂量的公比（r）为 r＝n-1√ED100/ED0

求得r后，自第一剂量组（ED0）开始乘以r，可得相邻的下一个组的剂量。若共分为6个组，各组剂量分别为ED0、r·ED0、r2·ED0、r3·ED0、r4·ED0、r5·ED0。

2、给药：取体重18～22g的健康小鼠50只，查随机数字表，随机分为6个组，每组10只。按表4－6所列的各组给药浓度分别腹腔注射10ml/kg。

3、记录结果：以翻正反射消失为入睡指标，观察药物的催眠效应，记录各组腹腔注射后15min内睡眠鼠数，填入表4－6。

[结果整理及分析]

依表4－6所列，分别计算各组P和P2。再按（4－5）或（4－6）式计算ED50，（4－7）及（4－8）式计算ED50的95％可信限。

表4－6 戊巴比妥钠ED50计算用表

组别 小鼠数 药物浓度

（mg/ml） 给药剂量

（mg/kg） 对数剂量 催眠鼠数 P P2

1 10 2.00 20.0 1.3010

2 10 2.40 24.0 1.3806

3 10 2.89 28.9 1.4602

4 10 3.47 34.7 1.5398

5 10 4.16 41.6 1.6194

6 10 5.00 50.0 1.6990

∑

[注意事项]

1、若用50只小鼠，随机分为5个剂量组进行实验，各组动物可参照20mg/kg、25mg/kg、31mg/kg，39 mg/kg，49 mg/kg给药。（药物浓度为2.45 mg/ml、1.96 mg/ml、1.57 mg/ml、1.25 mg/ml、1.00 mg/ml、）以20ml/kg腹腔注射。

2、随机分组时，可先称各小鼠体重，将体重相同小鼠放一笼，分别做好标记。再按确定组数查随机数字表分组，使各组平均体重及体重分布尽可能一致。

3、本实验为定量实验，注射药量必须准确。给药后要仔细观察药物反应，但不可过多地翻动小鼠，以免影响实验结果。

[思考题]ED50的定义，治疗指数的定义、意义。

（张树平）

实验四 戊巴比妥钠半数致死量（LD50）的测定

（Determination of Median Lethal Dose(LD50) of Sodium Pentobarbital）

[目的和原理]

测定戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠的半数致死量（LD50）。LD50测定的方法和原理与ED50测定基本相同，区别在于测定LD50的观察指标是死亡和生存。

[实验材料]

戊巴比妥钠溶液（Sodium Pentobarbital solution）9.38mg/ml、7.50mg/ml、6.00mg/ml、4.80mg/ml、3.80mg/ml。

[实验步骤]

用孙氏改进Kaerber氏法。取小鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别腹腔注射不同浓度的戊巴比妥钠20ml/kg（剂量分别为187.5、150.0、 120.0、96.0及76.0mg/kg），观察记录给药后24h内各组死亡鼠数。

[结果整理及分析]

1. 将实验结果列入表5-1

表5-1 戊巴比妥钠的LD50计算用表

分组 剂量 实验鼠数 死亡鼠数 死亡百分率（%） P P2

1 187.5

2 150.0

3 120.0

4 96.0.

5 76.0

2. 计算：

LD50=log-1[Xm-i(ΣP-0.5)] 式中Xm=log187.5=2.273；i=log 0.1505.187 =0.0969

LD50的95%可信限=log-1（logLD50±1.96·S）

S=i12nPP

[思考题]LD50的定义，化疗指数的定义、意义。

（张树平）

实验六 有机磷酸酯类中毒与解救

(Intoxication and Detoxification Of Organophosphate)

【目的和原理】

了解有机磷酸酯类中毒的症状，观察阿托品和解磷定对中毒的解救效果。敌敌畏是一种有机磷酸酯类的剧毒农药，可抑制胆碱酯酶，使体内积聚大量的乙酰胆碱，导致N样和M样症状。阿托品和解磷定可分别解除M样症状和N样症状，恢复胆碱酯酶活性，达到解救目的。

【实验材料】

1．动物：家免1只(2.5kg左右)。

2．药品：10mg／m1敌敌畏溶液(DDV solution)；lmg／m1硫酸阿托品溶液(atropine sulfate

solution)；25mg／m1碘解磷定溶液(pyraloxime iodide solution)。

3．器材：家兔固定箱，注射器，小鼠灌胃器，婴儿秤。

【实验步骤】

1． 取家免1只，称重，观察并记录下列生理指标(活动情况呼吸、瞳孔大小、唾液分泌、

大小便、肌张力及有无肌震颤等)。