常见病原菌的病原学检查

基因芯片技术（gene chip）
3、致病菌的检验程序
标本
直接涂片染色镜检 分离培养与鉴定
形态、结构、 染色性
涂片 菌落 生化 血清学 药敏 镜检 特征 反应 反应 试验
病原菌抗原检测
沉淀反应
动物 试验
协同凝集 免疫荧光 对流免疫电泳
酶免疫测定
免疫印迹
其它检测
细菌代谢产物
（ 分子生物学技术
标本采集时应注意无菌操作，尽量避免杂菌污染。 根据致病菌在不同病期的体内分布和排出部位，采取不同标本。 应在使用抗菌药物前采集标本，否则在培养时应加入拮抗剂。 尽可能采集病变明显部位的材料。 标本必须新鲜，采集后尽快送检。 送检过程中要采取适当的保存方式。 标本做好标记，详细填写化验单，保证各环节的准确无误。
检测病毒蛋白抗原
用已知特异性抗体直接检测病毒蛋白抗原（简便、敏感、特异） 常用方法：免疫荧光技术（IF）
固相放射免疫测定（SPRIT） 酶免疫技术（EIA）
检测病毒特异性IgM抗体 检测病毒特异性IgM抗体可诊断急性感染或证明病毒复制
7、检测病毒核酸
核酸杂交
• 斑点杂交（dot hybridization）
病毒的鉴定
核酸类型、理化性状、形态、血清学鉴定、基因测序和生物对比
病毒的数量与感染性测定 病毒感染的血清学诊断
用已知病毒抗原检测病人血清中相应抗体以诊断病毒性疾病（中和实验、补体结合实验、 血凝抑制实验、凝胶免疫扩散等） 。
6、病毒感染的快速诊断
形态学
电镜和免疫电镜——直接观察病毒 光镜—— 大病毒 和包涵体
4、血清学诊断
人体受致病菌感染后，其免疫系统被刺激后发生免疫应答而产生特异性抗体。抗体 的量常随感染过程而增多，表现为效价（滴度）的升高。用已知的细菌或其特异性 抗原检测患者体液中有无相应特异抗体和其效价的动态变化，可辅助诊断。一般采 取患者血清进行试验，故称为血清学诊断。

质粒tetM基因(四环素耐药) 23S rRNA基因(大环内酯类药物) 核糖体蛋白基因L4 gyrA基因（氟喹诺酮耐药）
分子生物学检验的临床意义：
方法简便、快速、敏感、特异 适用于：无症状携带者检测、早期诊断、流行病学调查、
基因分析、耐药检测
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2、肺炎衣原体
chlamydia pneumoniae (CP) 1989年确定，重要的人兽共患病原体 人类感染很普遍，血清学证实50~90%的成年人
IgG抗体可用于回顾性诊断，对于肺炎支原体肺炎的早期 诊断价值不大
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肺炎支原体
分子生物学检测方法
PCR, qPCR：
几乎能检测所有已知的人类致病支原体，靶序列： 16S rRNA基因可变区、保守区，P1蛋白基因区
具有很高的敏感性和特异性，且检测方法快速、便捷 但感染后肺炎支原体的持续存在、无症状的支原体携
作复杂、敏感性低、特异性不高 抗原检测： UU抗原是解脲支原体感染时被识别的主要外
膜抗原，具有种特异性。报道方法有：用酶联免疫吸附试 验、荧光标记抗体、肺炎支原体膜蛋白单克隆抗体、反向 间接血凝法，直接检测分泌物和体液中支原体抗原，具有 很高的特异度和灵敏度 血清学方法：有支原体特异性血清学检测、支原体的非特 异血清学方法，对支原体肺炎能起辅助诊断的作用，但检 测特异性抗体的方法尚不能达到早期快速诊断的目的
特异性检测出新型隐球菌 区别变种，不受治疗影响 敏感性更高，可用于痰液、支气管和肺泡灌洗液的
检测
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二、衣原体的分子生物学检验
沙眼衣原体的分子生物学检验 肺炎衣原体的分子生物学检验
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衣原体
chlamydia，原核细胞型微生物， 自然界广泛分布，专性活细胞内寄生，广泛寄

肺部感染诊断标准肺部感染是指由细菌、病毒、真菌或寄生虫引起的肺部疾病。

肺部感染包括肺炎、支气管炎、支气管炎和肺气肿等疾病。

肺部感染的诊断对于及时治疗和预防并发症至关重要。

下面将介绍肺部感染的诊断标准。

一、临床表现。

1. 发热，急性发热多见于细菌感染，慢性发热多见于结核感染。

2. 咳嗽，常见症状，痰多为黏稠、脓性或带血。

3. 呼吸困难，严重感染时可出现呼吸急促、胸痛等症状。

4. 胸部体征，肺部感染可出现肺部啰音、叩诊浊音等体征。

二、影像学检查。

1. X线胸片，肺部感染可表现为肺实质浸润、斑片状阴影等。

2. CT检查，对于复杂的肺部感染，CT检查可以更清晰地显示病变部位。

三、实验室检查。

1. 血常规，白细胞计数增高，中性粒细胞增多。

2. 痰培养，可明确病原菌类型，指导抗感染治疗。

3. C反应蛋白、降钙素原等炎症指标，有助于判断感染程度。

四、病原学检查。

1. 病原菌培养，通过痰液、血液等标本培养明确病原菌类型。

2. PCR检测，对于病毒感染的诊断有重要意义。

五、其他辅助检查。

1. 支气管镜检查，对于疑难病例或需要明确病变部位时可进行支气管镜检查。

2. 肺功能检查，有助于评估肺部感染对肺功能的影响。

六、诊断标准。

根据患者的临床表现、影像学检查、实验室检查、病原学检查和其他辅助检查综合分析，结合病史和流行病学史，可做出肺部感染的诊断。

七、注意事项。

1. 肺部感染的诊断需要全面综合分析，不能仅凭单一检查结果作出诊断。

2. 对于特殊人群（儿童、老年人、免疫功能低下者）的肺部感染，诊断标准和处理方法需特别注意。

总结，肺部感染的诊断需要全面综合分析患者的临床表现、影像学检查、实验室检查、病原学检查和其他辅助检查，结合病史和流行病学史，以便及时准确地做出诊断并制定合理的治疗方案。

希望本文对肺部感染的诊断有所帮助。

第一节 标本采集、运送和检查方法
一.标本采集和运送
• 采集标本注意点： 1.标本容器必须无菌或清洁容器 2.选择最佳时间采集标本，在抗菌药物使 用前 3.获取标本时，须严格无菌操作 4.标本采集后，应尽快送实验室
㈠血 液
• • • • • 发热初期和高峰期采集 抗菌药物治疗前 成人每次10-20ml，婴幼儿1-2ml 标本不用抗凝剂 24小时内，可在不同部位采血3次
2.病原体诊断的基本方法
examination） 直接显微镜检测（microscopic examination） 染色标本检查法： ⑴染色标本检查法：革兰染色和抗酸染色 不染色标本检查法： ⑵不染色标本检查法：悬滴法和压滴法
2.病原体诊断的基本方法
病原体分离培养(isolation and culture)和鉴定(identification) • 培养基选择 • 生长条件：一般大气条件 生长条件： 厌氧条件 微需氧条件
医院感染检查
7.医院感染常见病原菌监测 血培养： 病原菌：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄 球菌等 单次血培养不易区分污染菌或感染菌。 两次培养均为同种皮肤正常菌群可认 为感染菌。
医院感染检查
8.医院环境监测和消毒灭菌监测 空气培养：沉降法采样 物体表面监测：压印法 医务人员手部细菌监测 消毒灭菌效果监测
二.耐药机制及耐药性监测试验
⑵超广谱β-内酰胺酶检测（ESBL） 超广谱β 内酰胺酶检测（ESBL） 方法： 方法：纸片扩散法和稀释法 意义： 阳性预示对头孢泊肟、 意义：ESBL阳性预示对头孢泊肟、头孢他 阳性预示对头孢泊肟 头孢噻肟、 啶、头孢噻肟、头孢曲松和氨曲南等抗 菌药物无效。 菌药物无效。
耐药性统计和分析
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