酵母菌的分离与培养条件的优化

酵母菌实验报告摘要：本实验通过观察酵母菌在不同环境条件下的生长情况，探究酵母菌的生长规律，并验证酵母菌在不同温度下的最适生长范围。

实验结果显示，酵母菌在适宜的温度范围内生长最好，同时不同环境因素对酵母菌的生长也有一定的影响。

引言：酵母菌是一种单细胞真菌，广泛存在于自然界中。

酵母菌的生长和繁殖与发酵有着密切的联系，因此被广泛应用于食品工业和生物制药等领域。

了解酵母菌的生长规律和适宜环境对于优化酿酒和面包等食品工艺以及生物制药的研发具有重要意义。

材料与方法：1. 酵母菌培养液：取适量酵母菌培养基溶解于适量蒸馏水中，调整pH值至6.0±0.2。

2. 多孔瓷片：用105度高温煅烧的多孔瓷片，用于沉淀酵母菌。

3. 酵母菌悬液：取适量酵母菌培养液，通过多孔瓷片的滤过作用制备酵母菌悬液。

4. 不同温度条件下的培养杯：准备4个培养杯，分别标注为10℃、20℃、30℃、40℃。

实验步骤：1. 将酵母菌培养液倒入培养杯中，每个培养杯装满1/3。

2. 使用移液管向四个培养杯中加入相同体积的酵母菌悬液。

3. 将培养杯放入相应温度的恒温箱中培养。

4. 每天观察并记录培养杯中酵母菌的生长情况，包括酵母菌的数量和形态变化。

结果与讨论：在实验中，我们观察到酵母菌在10℃、20℃、30℃和40℃四个温度条件下的生长情况，并记录了每天的观察结果。

在10℃温度下，最初的小菌落在第一天变大，但生长速度较慢。

第二天至第四天，小菌落开始扩张，数量逐渐增多。

然而，在第五天开始，酵母菌的生长停滞，数量没有显著变化。

我们可以得出结论，10℃对于酵母菌的生长不够适宜，可能是因为温度过低导致酵母菌代谢缓慢。

在20℃温度下，酵母菌的生长情况较为良好。

在第一天，小菌落变大并开始扩张。

第二天至第四天，酵母菌数量显著增加并呈现活跃的状态。

第五天以后，酵母菌的数量趋于稳定，但生长速度减慢。

我们可以得出结论，20℃是酵母菌生长的相对适宜温度，在这一温度下酵母菌能够较快地繁殖并维持稳定的生长状态。

酵母菌的分离与纯化酵母菌的分离与纯化⼩组组员: ⼀、实验⽬的1.学习分离纯化酵母菌的技术与⽅法2.了解培养基的配置与灭菌技术3.增强⽆菌操作技术的意识⼆、基本原理从混杂的微⽣物群体获得只含某⼀种某⼀株微⽣物的过程叫做微⽣物分离与纯化，酵母菌常见于含糖份⽐较⾼的环境中，如果园⼟、菜园⼟及果⽪等的表⾯。

多数酵母菌喜欢偏酸条件，最适pH为4.5-6.0.酵母菌⽣长迅速，容易分离培养。

马丁⽒培养基是⼀种⽤来分离真菌的选择性培养基。

此培养基是由葡萄糖、蛋⽩胨、KH2PO4、MgSO4·7H2O、孟加拉红(玫瑰红，Rose Bengal)和链霉素等组成。

其中葡萄糖主要作为碳源，蛋⽩胨主要作为氮源，KH2PO4和MgSO4·7H2O作为⽆机盐，为微⽣物提供钾、磷和镁离⼦。

⽽孟加拉红和链霉素主要是细菌和放线菌的抑制剂，对真菌⽆抑制作⽤，因⽽真菌在这种培养基上可以得到优势⽣长，从⽽达到分离真菌的⽬的。

三、实验材料及⽤具1.⽤品：苹果、葡萄糖、琼脂、⽔、1%孟加拉红⽔溶液、马铃薯2.设备与器材：1ml的⽆菌吸管、⽆菌培养⽫等.四、实验步骤1、马铃薯培养基的配置培养基成分:马铃薯 40克、蔗糖（葡萄糖） 4克、琼脂 4克、⽔ 200毫升、 pH ⾃然。

配置⽅法:（1）配制20%马铃薯浸汁：取去⽪马钓薯40g，切成⼩块，加⽔200ml.加热煮游30 min ，⽤纱布过滤，然后补⾜失⽔互所需体积。

121Pa灭菌30min.即成20%马铃馨漫汁，贮存备⽤。

（2）配制时，按每100ml 马铃薯浸汁加⼊2g蔗糖，加热煮沸后加⼊4克琼脂，继续加热融化并补⾜失⽔。

（3）分装、加塞，包扎。

（4）⾼压蒸汽灭菌：121Pa灭菌30min（5）将灭菌培养基放⼊37C°的温室中培养24-48⼩时，观察是否有菌落⽣成，以检查灭菌是否彻底。

2、倒平板：将马铃薯培养基加热融化，冷却⾄55--50C°时，倒平板，倒三⽫3、制备苹果悬液（1）⾸先将1g苹果在研钵中磨细，放⼊装有10ml⽣理盐⽔和玻璃珠的100ml三⾓瓶中去。

酵母菌生长繁殖的条件1. 引言酵母菌是一类单细胞真菌，广泛存在于自然界中。

它们以其独特的代谢能力和生长特性而受到科学家们的广泛关注。

了解酵母菌生长繁殖的条件对于酿酒、发酵食品制作以及基础科学研究都具有重要意义。

本文将探讨影响酵母菌生长繁殖的各种因素。

2. 温度温度是影响酵母菌生长繁殖的重要因素之一。

不同种类的酵母菌对温度的适应范围有所差异，但大多数酵母菌在25-30摄氏度之间能够较好地生长。

过低或过高的温度都会抑制酵母菌的生长。

低于15摄氏度时，许多酵母菌无法正常进行细胞分裂和代谢活动；而高于40摄氏度时，细胞膜会受到损伤，导致细胞死亡。

3. pH值pH值是指溶液的酸碱性程度，也是影响酵母菌生长繁殖的重要因素之一。

大多数酵母菌对中性或微酸性环境适应能力较强，pH值在4-6之间是它们生长的最佳范围。

过高或过低的pH值都会抑制酵母菌的生长。

在极端酸性或碱性环境下，细胞膜和细胞器会受到损伤，影响细胞代谢活动。

4. 氧气浓度氧气是酵母菌进行呼吸作用所必需的物质。

不同种类的酵母菌对氧气浓度有不同的要求。

某些酵母菌属于厌氧菌，它们只能在缺氧条件下进行代谢活动；而其他一些酵母菌则需要充足的氧气供应才能正常生长繁殖。

在培养酵母菌时需要根据不同种类的需求来调节培养条件中的氧气浓度。

5. 营养物质酵母菌需要合适的营养物质才能进行正常的生长繁殖。

它们对碳源、氮源、矿物质等营养物质有不同的需求。

常见的碳源包括葡萄糖、果糖等，而氮源则可以是氨基酸、尿素等。

酵母菌还需要一定量的维生素和微量元素来维持其正常代谢活动。

在培养酵母菌时，需要提供适当的营养物质来满足其生长繁殖的需求。

6. 水分水分是细胞生长所必需的，也是影响酵母菌生长繁殖的重要因素之一。

适度的水分含量有利于细胞内外物质交换和代谢活动，但过高或过低的水分含量都会对酵母菌的生长产生不利影响。

过高的水分含量会导致培养基液化或发霉，而过低的水分含量则会导致细胞脱水和死亡。

酵母菌的分离纯化-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN酵母菌的分离纯化、固定化和酒精发酵第一部分酵母菌的分离纯化一、实验目的应用酵母菌的生理生化和生态学的特点，从自然环境中分离酵母菌，并掌握微生物分离纯化的基本方法。

二、实验原理酵母菌常见于含糖份比较高的环境中，如果园土、菜园土及果皮等的表面。

多数酵母菌喜欢偏酸条件，最适pH为酵母菌生长迅速，容易分离培养。

在液体培养基中，酵母菌比霉菌生长快，利用酸性条件则可以抑制细菌的生长。

因此常用酸性液体培养基获得酵母菌的加富培养，然后在固体培养基上划线分离纯化。

三、器材和用品1、甘蔗、苹果皮、葡萄皮、果园土、菜园土等。

2、马铃薯葡萄糖琼脂培养基：马铃薯200g（煮开10min后过滤取汁），葡萄糖20g，琼脂20g，水1000ml，pH自然。

分装三角瓶；试管斜面1支/组3、乳酸马铃薯葡萄糖培养液：配方同上，不加琼脂加乳酸，按1000ml培养基加入5ml乳酸，pH为左右，再分装试管9ml2支/组。

4、无菌吸管3支/组、无菌培养皿、100ml无菌水1瓶/组、涂棒、美兰染液、显微镜、接种环等。

四、实验方法1、接种：取果皮（不需冲洗）或土壤5克，加入到100ml无菌水中，充分搅拌后，用无菌吸管取1ml接入到9ml乳酸马铃薯葡萄糖培养液中，在28-30℃培养箱中培养24h，可见培养液变浑浊。

2、加富培养：用无菌吸管取上述培养液1m l，注入另1管乳酸马铃薯葡萄糖培养液中，在28-30℃培养箱中培养24h。

3、镜检：用无菌操作法用接种环取少量菌液置于载玻片上，中央滴一滴美兰染液，混合均匀后制成水浸片，在高倍镜下观察酵母菌的形态及出芽方式，并可根据菌体是否染色来区分酵母菌的死活细胞，因活细胞使美兰染液还原，故菌体不着色。

4、涂皿：用马铃薯葡萄糖琼脂培养基溶化后制成平板，用无菌吸管取加富培养液到平板中，用涂棒涂匀后培养24h。

5、分离纯化：用接种环挑取单个酵母菌菌落，在平板上四区划线，培养后分离得到单个菌落。

酵母菌的培养条件
你知道不？酵母菌这家伙，培养起来可有讲究啦！首先说温度，酵母菌喜欢暖和的地儿，就像咱冬天喜欢待在暖和的屋里一样。

一般来说，二十多摄氏度到三十摄氏度左右，那是酵母菌的舒适区。

比如说你烤面包的时候，要是温度太低，酵母菌就不乐意干活啦，面包就发不起来，那可急死人！温度太高呢，酵母菌也会受不了，就像人在大夏天被暴晒一样，会中暑的。

再说说营养，酵母菌得有吃的呀！糖分就是它们的美食。

就好比人饿了要吃饭，酵母菌没了糖也没力气干活。

你要是做酒酿，那得放足够的糯米啥的，让酵母菌有得吃，它们才能欢快地繁殖。

还有个重要的点，那就是湿度。

酵母菌不能太干也不能太湿。

太干了，它们会渴死；太湿了，又会被淹死。

就像咱在沙漠里会渴得不行，在洪水里又会有危险。

培养酵母菌就得像照顾小宝宝一样细心。

给它们合适的温度、充足的营养和恰当的湿度。

这样，它们才能好好地为咱干活，做出好吃的面包、酒酿啥的。

咱可不能马虎，不然就白忙活一场啦！我觉得培养酵母菌得用心，这样才能成功。

水果表皮酵母菌的分离和鉴定理论说明1. 引言1.1 概述:酵母菌是一类单细胞真菌，广泛存在于自然界中的各种环境中。

其中，水果表皮是一种容易寄生、繁殖和生长的适宜环境之一。

水果表皮酵母菌指的是那些在水果表面附着并且以水果作为营养基质的酵母菌。

随着食品工业和农业领域的发展，对于水果表面酵母菌的分离和鉴定以及其在水果保存中作用与影响的研究变得愈加重要。

1.2 文章结构:本篇文章将分为五个主要部分来进行阐述。

首先，引言部分将在本节中提供一般背景，并对文章内容进行概述。

第二部分将重点介绍水果表皮酵母菌的分离和鉴定方法，包括方法原理、实验步骤和结果分析等内容。

第三部分将探讨酵母菌在水果保存过程中对水果品质的影响以及其发酵机制。

第四部分将介绍食品工业和农业领域中酵母菌的应用案例、研究进展，并对其未来发展方向进行展望。

最后，结论部分将总结研究结果，提出存在问题并给出改进建议，并对未来酵母菌研究的发展趋势进行展望。

1.3 目的:本篇文章旨在探讨水果表皮酵母菌的分离和鉴定方法，深入了解其对水果品质及保存过程产生的影响与机制，并探索酵母菌在食品工业和农业领域中的应用前景和趋势。

通过此次研究与分析，我们希望为相关领域提供一定的理论指导和实际参考，从而推动酵母菌研究的进一步发展和应用。

2. 水果表皮酵母菌的分离和鉴定2.1 分离水果表皮酵母菌的方法：要分离水果表皮上的酵母菌，可以采用以下步骤：步骤1: 准备样品选择新鲜的水果作为研究对象，如苹果、葡萄、香蕉等。

确保水果表面干净，并且没有明显的腐烂或受损。

步骤2: 表皮去污使用无菌棉花球蘸取70%乙醇或其他消毒液，轻轻擦拭水果表皮，以去除外部细菌和霉菌。

步骤3: 分离样品使用无菌刀具将水果表皮剥离下来，并将其放入含有适当培养基（如琼脂）的培养皿中。

步骤4: 培养孵育将培养皿密封并置于适宜温度下（通常为25-30摄氏度），并在黑暗环境中培养孵育一段时间，通常为24-48小时。

酵母菌生长繁殖的条件引言酵母菌是一类微生物，可以进行无氧和有氧代谢，并在碳源充足的条件下进行繁殖。

酵母菌广泛应用于食品工业、酒业和药物生产等领域。

了解酵母菌生长繁殖的条件，有助于优化对酵母菌的培养和利用。

本文将探讨影响酵母菌生长繁殖的主要因素。

二级标题1：温度酵母菌的生长繁殖受到温度的较大影响。

不同酵母菌对温度的要求有所不同，一般可以分为三类：低温酵母、中温酵母和高温酵母。

根据酵母菌的类别和应用领域的不同，选择适合的温度范围可以促进酵母菌的生长和繁殖。

三级标题1：低温酵母低温酵母一般生长于0-15摄氏度范围内。

常见的低温酵母包括酿酒酵母和面包酵母。

在低温下，酵母菌生长速度较慢，但适合进行发酵过程。

1.温度控制：低温酵母的培养需要控制好温度，一般在10-15摄氏度条件下进行。

2.酵母菌的选择：选用适合低温生长的酵母菌品种，如酿酒酵母。

三级标题2：中温酵母中温酵母的生长范围一般在20-30摄氏度。

中温酵母在药物生产、酒品酿造和食品工业中应用广泛。

1.适宜温度范围：中温酵母的适宜温度范围在20-30摄氏度，实际温度根据具体酵母菌的要求而定。

2.温度控制：酵母菌的培养需要在适宜的温度条件下进行，过高或过低的温度都会影响其生长和繁殖。

三级标题3：高温酵母高温酵母生长的温度一般在30-40摄氏度范围内。

高温酵母在热带地区或高温环境下有一定的优势。

1.温度适应性：选择适应高温环境的酵母菌株进行培养和利用。

2.温度控制：在高温条件下培养酵母菌需要控制好温度，防止过热导致酵母菌的死亡。

二级标题2：pH值除了温度，酵母菌的生长繁殖还受到环境pH值的影响。

不同酵母菌对pH值的适应范围有所不同，适宜的pH值有助于维持酵母菌的生长和繁殖。

三级标题1：酵母菌的pH适应性酵母菌对pH值的适应能力较强，不同酵母菌菌株对pH值的要求不同，一般适应范围在4-8之间。

1.酸性环境：某些酵母菌能够在酸性环境下生长和繁殖，例如面团中的酵母菌。

酵母菌培养操作一、引言酵母菌是一类单细胞真菌，广泛存在于自然界中的土壤、水体、植物和动物体内。

它们在生物学、医学和工业领域中具有重要的应用价值。

为了研究酵母菌的生理特性和生物学功能，科研人员经常需要进行酵母菌的培养操作。

本文将介绍一种常用的酵母菌培养方法。

二、材料和试剂准备1. 培养基：选择适合酵母菌生长的培养基，如YPD培养基（1%酵母粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖）。

2. 培养器具：培养皿、试管、离心管等。

3. 酵母菌菌株：选择所需的酵母菌菌株。

三、酵母菌的分离和接种1. 从酵母菌菌株保存液中取出所需的菌株。

2. 在无菌条件下，将菌株转移到含有YPD培养基的试管中。

3. 进行适当的稀释，使培养液中的菌落数量适中。

4. 震荡培养液，使菌落均匀悬浮于培养基中。

四、酵母菌的培养条件1. 温度：酵母菌的生长温度一般为28-30摄氏度，根据不同的菌株和实验目的可以进行调整。

2. pH值：酵母菌的最适生长pH通常在5-6之间，也可以根据具体要求进行调整。

3. 培养时间：酵母菌的培养时间根据实验目的和菌株的生长速度而定，一般为24-48小时。

五、酵母菌的培养方法1. 平板培养法：将适量的酵母菌培养液均匀倒在培养皿中，待其凝固后，将所需的酵母菌菌株接种在培养基表面，然后在恰当的温度下培养一段时间，观察菌落形态和数量。

2. 液体培养法：将适量的酵母菌培养液倒入无菌的离心管中，加盖后在恰当的温度下培养一段时间，观察菌液浑浊度和细胞数量的变化。

3. 摇瓶培养法：将适量的酵母菌培养液倒入无菌的摇瓶中，盖紧盖子后在恰当的温度下进行摇床培养，可以获得大量的酵母菌菌液。

六、酵母菌的保存1. 冷冻保存：将酵母菌培养液加入等体积的甘油溶液中，混匀后分装在无菌冷冻管中，置于-80摄氏度的冷冻箱中保存。

2. 高温保存：将酵母菌培养液均匀涂布在含有蔗糖的平板培养基上，置于30-37摄氏度的恒温箱中保存。

七、实验注意事项1. 所有实验操作必须在无菌条件下进行，避免外界细菌和真菌的污染。

酵母菌纯培养的工艺流程酵母菌的纯培养工艺流程包括以下几个步骤：选择菌株、预处理、接种、培养、鉴定和保存。

下面将详细介绍每个步骤。

首先是选择菌株。

酵母菌是一类单细胞真菌，具有广泛的应用和研究价值。

在选择菌株时，需要根据研究目的或应用需求来确定，常见的有酒精酵母菌（Saccharomyces cerevisiae）、乳酸酵母菌（Candida utilis）等。

菌株的选择应考虑到其生长速度、产酒或产酶性能以及适应环境的能力等因素。

接下来是预处理。

预处理主要是为了提高菌株的活力，减少杂菌的污染。

预处理包括以下几个步骤：首先，从保存菌株的冷冻管中取出菌株，迅速匀浆于含有营养成分的琼脂培养基上。

然后，将培养基平板置于培养箱内，在25-30下孵育一段时间，一般为24-48小时。

最后，选择单个菌落进行接种。

接种是将预处理好的菌株接入到适宜的培养基中。

接种有两种常用的方法：平板法和液体法。

平板法即将接种菌株均匀涂布在琼脂固体培养基的表面，利用孵育箱保持适宜的温度和湿度，待菌落生长形成后，可进行下一步操作。

液体法则是直接将菌株接入到含有适宜营养成分的液体培养基中，然后在转轴式摇床或培养箱中进行搅拌和培养。

培养是酵母菌纯培养的核心步骤，培养条件的选择对菌株的生长和代谢活性有直接影响。

通常，培养条件包括温度、pH值、浓度和类型的碳源和氮源等。

对于大规模的酵母菌培养，通常会在发酵罐中进行，控制发酵温度、pH值和各种营养物质的供应。

此外，还可以通过添加载体来提高酵母菌的产酶能力。

鉴定是为了确认所培养的菌株是否为纯培养。

鉴定常用的方法包括形态学观察、生理生化检测和分子生物学方法。

形态学观察是通过显微镜观察菌落的形状、大小和结构特征。

生理生化检测则是通过测定酵母菌在不同环境条件下的生长情况、代谢产物和酶活性等。

分子生物学方法则是通过提取酵母菌的DNA并进行PCR 扩增和序列比对来确认菌株的种属。

最后是保存。

为了保持酵母菌的活性和稳定性，需要进行保存。

酵母生产工艺酵母是一种单细胞真菌，广泛应用于食品工业、酿酒业和生物医药等领域。

酵母的生产工艺是指通过人工方法培养和繁殖酵母菌，以获得高产酵母产品的过程。

本文将介绍酵母生产工艺的基本流程和关键技术。

一、酵母菌的培养与筛选酵母菌的培养是酵母生产工艺的第一步。

通常采用液体培养基或固体培养基来培养酵母菌。

液体培养基中含有碳源、氮源、矿物盐和微量元素等营养物质，为酵母菌提供生长所需的养分。

固体培养基则是在液体培养基中加入一定量的琼脂或明胶等凝胶剂，使其凝固成为固体状态，以方便酵母菌的分离和筛选。

在培养过程中，酵母菌需要在适宜的温度、pH值和氧气条件下进行生长和繁殖。

温度过高或过低都会抑制酵母菌的生长，pH值的变化也会对酵母菌的生长产生影响。

此外，氧气对酵母菌的生长和代谢也有重要作用，适量的氧气可以提高酵母菌的产酶能力和细胞生长速率。

在培养过程中，可以通过一系列的筛选方法来选择出具有良好性状的酵母菌株。

常用的筛选方法包括抗生素筛选、色素筛选、产酶筛选等。

通过这些筛选方法，可以获得具有高产酵母产品能力的酵母菌株，为后续的工艺提供基础。

二、酵母的发酵工艺酵母的发酵工艺是酵母生产工艺的核心环节。

发酵是指在适宜的条件下，利用酵母菌进行代谢反应，产生所需的产物。

在酵母发酵工艺中，最重要的是控制发酵条件，包括温度、pH值、氧气供应和培养基成分等。

温度是控制酵母发酵速率的重要因素，不同的酵母菌株对温度的要求也有所不同。

pH值的变化会影响酵母菌的代谢产物和酶活性，适宜的pH值可以提高发酵产物的质量和产量。

氧气供应是影响酵母发酵效果的关键因素，适量的氧气可以提高酵母代谢的效率和产酶能力。

培养基成分的合理配比也是确保酵母发酵效果的重要条件。

在发酵过程中，酵母菌会产生大量的二氧化碳和酒精等产物。

为了保证发酵过程的顺利进行，需要采取相应的措施来控制二氧化碳的排放和酒精的积累。

常用的方法包括增加通气量、控制发酵温度和调整培养基成分等。

实验一微生物(酵母)的培养基优化(指导教师:汪文俊熊海容王海英肖新才实验员: 张继泰) 一．实验目的：掌握微生物斜面培养基、种子培养基及发酵培养基确定方法，学会对已确定菌种确定实验室发酵工艺。

二．实验原理生物量的测定方法有比浊法和直接称重法等。

由于酵母在液体深层通气发酵过程中是以均一混浊液的状态存在的，所以可以采用直接比色法进行测定。

三．仪器与试剂全恒温振荡培养箱，分光光度计、电热恒温水浴槽、天平、电炉。

试剂为葡萄糖、蔗糖、酵母浸粉、KH2PO4。

四．实验方法(1)、培养基的配制(见表1,2)表1 正交表试验设计因素水平葡萄糖蔗糖酵母膏KH2PO41 1.0 0.0 0.5 0.52 2.0 1.0 1.0 1.03 3.0 2.0 2.0 2.0表2 正交表实验方案编号葡萄糖(A) 蔗糖(B)酵母膏(C)KH2PO4（D）生物量（OD）h12h24h36h48h60h1 (1) (1) (1) (1)2 (1) (2) (2) (2)3 (1) (3) (3) (3)4 (2) (1) (2) (3)5 (2) (2) (3) (1)6 (2) (3) (1) (2)7 (3) (1) (3) (2)8 (3) (2) (1) (3)9 (3) (3) (2) (1)（2）将上述培养基配制好以后，每250 ml三角瓶装入培养基100 ml，于121℃下灭菌30 min，冷却。

（3）冷却后接种（接种量为5％），置于28℃培养箱进行培养。

（4）测OD值：将接种0 h、12 h、24 h、36 h、48 h、60 h不同时间的菌悬液摇均匀后于560nm波长、1cm比色皿中测定0D值。

比色测定时，用以未接种的培养基作空白对照，并将0D值填入表中，最终确定最佳培养基的组成及发酵时间。

五．思考题(1)比浊计数在生产实践中有何应用价值?(2)本实验为什么采用560nm波长测定酵母菌悬液的光密度？如果你在实验中需要测定大肠杆菌生长的OD值，你将如何选择波长?实验二紫外线的诱变育种(指导教师:汪文俊熊海容王海英肖新才实验员: 张继泰) 一．目的要求通过实验，观察紫外线对枯草芽孢杆菌的诱变效应，并学习物理因素诱变育种的方法。

酵母菌的分离筛选方法(总7页)--本页仅作为文档封面，使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--酵母菌的分离筛选方法酵母菌多数为腐生，一般生长在含糖较高，偏酸的环境中，在通气条件下，液体培养比霉菌快。

菌落与细菌相似，较大而厚，多数不透明，菌落光滑湿润粘稠，乳白色，少数干皱，边缘整齐，呈红色或粉红色，圆形椭圆卵形，液体培养基生长会生成沉淀或菌膜。

含高糖浓度（45%），分离蜂蜜酵母，球拟酵母属等嗜高渗透压的酵母。

1.培养基：葡萄糖 50g/L 尿素1g/L （NH4）2SO41g/L L L MgSO41g/L FeSO4 L 酵母膏 L 孟加拉红 L （富集用）★乳酸-马铃薯-葡萄糖培养基：马铃薯200g/L 葡萄糖（霉菌用蔗糖）20g/L 乳酸5ml马铃薯去皮切片200g，加水煮沸30min，纱布过滤，补足蒸馏水1L，PH自然。

（去掉乳酸可用于酵母菌和霉菌培养用）（富集用）★麦芽汁培养基：1：4水60-65℃水浴3-4小时，4-6层纱布过滤，可加一个蛋清加水20mL调均生泡沫，倒入糖化液中，煮沸过滤，10-15波林，氯霉素L 121℃ 20min （分离保存用）灭菌后加入300u/ml硫酸链霉素（集菌用）★虎红（孟加拉红）培养基：蛋白胨L 葡萄糖10g/LL L 孟加拉红L 氯霉素L 琼脂15g/L PH自然（分离纯化用）★豆芽汁培养基：黄豆芽100g/L 葡萄糖50g/L PH自然。

100g黄豆芽，加水煮沸30min，纱布过滤，补足蒸馏水1L察氏培养基：主要培养霉菌观察形态用蔗糖30g/L 硝酸钠3g/L 磷酸氢二钾1g/L 氯化钾L 硫酸镁L 硫酸亚铁L 琼脂15-20g/L 121℃ 20min PH自然一般分离黄酒酵母酒精酵母使用曲汁培养基，啤酒酵母用酒花麦汁培养基，葡萄酒酵母用葡萄汁培养基。

2.集菌：研究酵母菌生态和某种基物或样品中的酵母菌区系，一般不进行集菌，以免改变其中不同种类数量间的对比，将样品制成菌悬液按常规法分离。

酵母菌培养研究报告
酵母菌培养研究报告
酵母菌是一类单细胞真菌，广泛存在于自然环境中，常见的有面包酵母与啤酒酵母等。

本次研究旨在通过培养酵母菌，研究其生长繁殖特性及对不同环境因素的适应性。

材料与方法：
1. 实验材料：酵母菌培养基、酵母菌菌种
2. 实验仪器：培养皿、显微镜、恒温箱等
步骤：
1. 制备酵母菌培养基：按照相关文献提供的方法，配制酵母菌培养基，并将其倒入培养皿中。

2. 接种酵母菌：在酵母菌培养基上均匀涂布一层酵母菌菌种，使其均匀生长。

3. 培养条件：将培养皿放入恒温箱中，设置合适的温度和湿度，培养一定时间。

结果与讨论：
通过观察培养皿中的酵母菌生长情况，可以得出以下结论：
1. 酵母菌在适宜的培养条件下生长迅速，一般在24小时内即
可形成较大的菌落。

2. 酵母菌菌落呈圆形或不规则形状，表面光滑。

在其周围可观察到一定的胞子形成。

3. 酵母菌在不同环境因素下具有不同的适应性。

例如，温度过高或过低都会抑制酵母菌的生长，而适宜的温度范围可以促进
其繁殖。

本研究的结果显示，酵母菌是一类生长快速、适应性强的微生物。

通过进一步的研究，我们可以探究酵母菌的代谢特性、抗逆性以及在食品工业、医药领域的应用前景。

同时，酵母菌的培养技术也具有重要的应用价值，可以为微生物学研究提供良好的实验模型。

酵母菌的分离筛选方法酵母菌多数为腐生，一般生长在含糖较高，偏酸的环境中，在通气条件下，液体培养比霉菌快。

菌落与细菌相似，较大而厚，多数不透明，菌落光滑湿润粘稠，乳白色，少数干皱，边缘整齐，呈红色或粉红色，圆形椭圆卵形，液体培养基生长会生成沉淀或菌膜。

含高糖浓度（45%），分离蜂蜜酵母，球拟酵母属等嗜高渗透压的酵母。

　1.培养基：1.1葡萄糖50g/L 尿素1g/L （NH4）2SO41g/L KH2PO42.5g/LNa2HPO40.5g/L MgSO41g/L FeSO4 0.1g/L 酵母膏 0.5g/L 孟加拉红 0.03g/L PH4.5-5.0 （富集用）★1.2乳酸-马铃薯-葡萄糖培养基：马铃薯200g/L 葡萄糖（霉菌用蔗糖）20g/L 乳酸5ml马铃薯去皮切片200g，加水煮沸30min，纱布过滤，补足蒸馏水1L，PH自然。

（去掉乳酸可用于酵母菌和霉菌培养用）（富集用）★1.3麦芽汁培养基：1：4水60-65℃水浴3-4小时，4-6层纱布过滤，可加一个蛋清加水20mL调均生泡沫，倒入糖化液中，煮沸过滤，10-15波林，氯霉素0.1g/L PH6.0-6.4 121℃20min（分离保存用）灭菌后加入300u/ml硫酸链霉素（集菌用）★1.4虎红（孟加拉红）培养基：蛋白胨5.0g/L 葡萄糖10g/LKH2PO41.0g/L MgSO40.5g/L 孟加拉红0.033g/L 氯霉素0.1g/L 琼脂15g/L PH自然（分离纯化用）★1.5豆芽汁培养基：黄豆芽100g/L 葡萄糖50g/L PH自然。

100g黄豆芽，加水煮沸30min，纱布过滤，补足蒸馏水1L1.6察氏培养基：主要培养霉菌观察形态用蔗糖30g/L 硝酸钠3g/L 磷酸氢二钾1g/L 氯化钾0.5g/L 硫酸镁0.5g/L 硫酸亚铁0.01g/L 琼脂15-20g/L 121℃ 20min PH自然一般分离黄酒酵母酒精酵母使用曲汁培养基，啤酒酵母用酒花麦汁培养基，葡萄酒酵母用葡萄汁培养基。

富硒酵母菌的筛选及其富硒条件的优化朱威;高兆建;李勇;焦魏;曹泽虹;孙会刚【摘要】[目的]选育高富硒酵母菌株,优化发酵培养条件,以提高酵母生物富集、转化有机硒的能力.[方法]以耐受亚硒酸钠强的菌株为出发菌株,研究该菌株在培养过程中的亚硒酸钠添加量、添加时间、酵母菌接种龄、培养温度等参数,从而达到最优的酵母生物量及富硒量.[结果]研究表明,酵母菌FX5菌株具有较高的耐受性和富硒能力.发酵条件优化表明,FX5菌株在亚硒酸钠添加量为20 g/L、添加硒的时间为6 h,富硒效果最好.在最佳的摇瓶培养条件下(初始硒浓度20μg/mL,接种量10%,装液量50/250 mL,温度28℃,初始pH 6.0,摇床转速160 r/min,接种龄84 h,培养60 h后),该酿酒酵母的生物量及富硒量分别达到40.1 g/L、1120 mg/L.[结论]该研究可为富硒农牧业生产提供一种安全的有机硒源.%[Objective]To select high selenium enriched yeast strains and optimize fermentation conditions to improve yeast bioaccumulation and transformation ability of organic selenium.[Method]With sodium selenite tolerance strong strain as the starting strain, the strain in the training process of sodium selenite adding amount and adding time, yeast inoculation age, culture temperature and other parameters, so as to achieve the optimal amount of biomass and selenium enriched yeast.[ Result] The results showed that yeast FX5 strain had high tolerance and selenium accumulation ability.The optimization of fermentation conditions showed that the addition of sodium selenite was 20 g/L and the time of adding selenium was 6 h, and the effect of selenium enrichment was best for FX5 strain.In the best shake flask culture conditions ( initial selenium concentration 20 g/mL, inoculum size 10%,medium volume 50/250 mL, temperature 28 ℃, initial pH 6, rotation speed of 160 r/min, 84 h age of inoculation, after cultured for 60 h), biomass and Se content of the yeast were respectively 40.1 g/L, 1120 mg/L. [ Conclusion] The study can provide a safe organic selenium source for the production of selenium enriched agriculture and animal husbandry.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2017(045)033【总页数】4页(P87-89,92)【关键词】生物富硒;酵母;有机硒【作者】朱威;高兆建;李勇;焦魏;曹泽虹;孙会刚【作者单位】江苏智荟生物科技有限公司,江苏徐州221100;徐州工程学院食品(生物)工程学院,江苏徐州221008;徐州工程学院食品(生物)工程学院,江苏徐州221008;邳州市金大地肥料有限公司,江苏徐州221100;徐州工程学院食品(生物)工程学院,江苏徐州221008;徐州工程学院食品(生物)工程学院,江苏徐州221008【正文语种】中文【中图分类】TS201.3硒是人和动物所必需的微量元素，在生物体内是谷胱甘肽过氧化物酶的活性中心元素，该酶能够清除人体中的自由基并防止细胞膜氧化受损[1]。

酵母菌表面展示的影响因素及优化方法酵母菌表面展示是一种广泛应用于生物技术的技术手段，可用于展示外源蛋白、产生抗体、完成蛋白质互作等功能。

酵母菌表面展示的效果受多种因素的影响，并可通过一些优化方法进行改善。

本文将探讨酵母菌表面展示的影响因素及优化方法。

影响因素：1. 表面展示载体的选择酵母菌表面展示需要使用具有表面定位信号的载体，如肽酶酪蛋白酶处理信号序列。

不同载体的选择可能导致表达效率、细胞毒性和表面展示效果的差异。

因此，在选择载体时，需要考虑目标蛋白的性质和预期表达效果，并进行系统的筛选和优化。

2. 目标蛋白的结构和大小目标蛋白的结构和大小会影响其在酵母菌表面的展示效果。

一些大型、复杂的蛋白质可能无法有效地在酵母菌表面展示，因此需要选择合适的目标蛋白进行展示。

此外，目标蛋白的结构稳定性也会影响其在酵母菌表面的折叠和稳定性。

3. 培养条件的优化培养条件对酵母菌表面展示的效果有重要影响。

适当调节培养温度、培养时间、培养基成分和pH值等因素，可以提高酵母菌的生长速度和表面展示效果。

此外，对培养基的适当补充和培养条件的综合优化也可以增强酵母菌的表面展示能力。

4. 锚定位点的选择酵母菌表面展示依赖于特定的锚定位点，该位点可决定目标蛋白在细胞表面的定位和暴露度。

选择合适的锚定位点能够提高蛋白在酵母菌表面的稳定性和表达效率。

因此，在进行酵母菌表面展示时，需要仔细选择合适的锚定位点，并进行相应的优化。

优化方法：1. 重组载体的优化通过改变载体的结构和序列，可以优化酵母菌表面展示的效果。

例如，可以增加目标蛋白与载体之间的链接序列，以提高目标蛋白在酵母菌表面的折叠和稳定性。

此外，还可以通过引入新的表面定位信号序列或调整原有信号序列的长度和组成，来提高表面展示效果。

2. 突变酵母菌株的筛选通过对酵母菌株进行基因突变或引入外源基因，可以改变其表面展示能力。

例如，可以通过突变目标蛋白与酵母菌细胞壁结合的位点，来增强表面展示效果。