实验十 桡足类

黄、东海几种桡足类的遗传多样性研究图２－１基因组ＤＮＡ提取结果Ｆｉｇ．２－１ＧｅｎｏｍｉｃＤＮＡｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｆｏｕｒｓｐｅｃｉｅｓＭ：ＤＮＡｍａｋｅｒ，卜纷别为平滑真刺水蚤、精致真刺水蚤、普通波水蚤、细真哲水蚤基因组ＤＮＡ２．３．２ＰＣＲ产物检测从扩增产物电泳检测图谱上可以看出，四种桡足类ｍｔＣＯＩ基因片段大小均在７５０ｂｐ左右。

图２—２是扩增产物电泳图谱。

图２—２四种桡足类ｍｔＣＯＩ基因片段扩增产物Ｆｉｇ．２－２ＰｒｏｄｕｃｔｓｏｆｍｔＣＯＩｇｅｎｅｆｒａｇｍｅｎｔａｍｐｌｉｆｉｅｄｆｒｏｍｔｈｅｆｏｕｒｓｐｅｃｉｅｓＭ：ＤＮＡｍａｋｅｒ，卜８分别为平滑真刺水蚤、精致真刺水蚤、普通波水蚤、细真哲水蚤基因组ＤＮＡ各两个平行２．３．３克隆产物检测扩增产物经过纯化后克隆，然后分别用载体通用引物与特异性引物扩增检黄，东海几种桡足类的遗传多样性研究测，确定无误后测序。

图２－３为平滑真刺水蚤ｍｔＣＯＩ基因片段克隆后扩增产物检测电泳图，克隆后目的条带大小与克隆前一致，使用载体通用引物扩增产物作对照，其大小比目的条带大ｌＯＯｂｐ左右，验证克隆成功。

图２—３平滑真刺水蚤ｍｔＣＯＩ基因片段克隆后扩增产物检测Ｆｉｇ．２－３ＤｅｔｅｃｔｉｏｕｏｆｍｔＣＯＩｇｅｎｅｆｒａｇｍｅｎｔａｆｔｅｒｃｌｏｎｅｉｎＥｕｃｈａｅｔａｐｌａｎａＨ．ＤＮＡｍａｋｅｒ，ｌ一８：特异性引物扩增产物，０：载体通用引物扩增产物２．３．４四种桡足类ａｒＣ０１基因片段序列分析图２－４为扩增到的四种桡足类ｍｔＣＯｌ基因片段序列，大小均为６５８ｂｐ。

其中普通波水蚤与ＮＣＢＩ中已报道的普通波水蚤ｍｔＣＯＩ基因片段序列（索引号ＡＦ４６２３１８）比对，其碱基相似性约９４％。

因此，本实验所得序列确定为普通波水蚤的ｍｔＣＯｌ基因片段序列。

另外三种桡足类基因片段扩增产物序列在ＮＣＢＩ中ＢＬＡＳＴ比对之后，与其同源性最高的均为桡足类，平滑真刺水蚤与已报道的ＰａｒａｃａｌａｎｕｓｐＢ２＂ｖｕ８的ｍｔＣＯｌ基因片段序列索引号（ＡＦ４７４１１１）同源性达９７％，精致真刺水蚤与报道的普通波水蚤ｍｔＣＯｌ基因片段序列（索引号ＡＦ４６２３１８）同源性最高达９６％，细真哲水蚤与报道的ＮａｎｎｏｃａＩａｎｕｓｍｉｎｏｒｍｔＣＯＩ基因片段序列（ＡＦ３３２７９２）同源性最高，达９０％。

桡足亚纲—内部构造
消化系统：口、食道、盲囊、胃、 中肠 、直肠、肛门 循环系统：心脏

桡足亚纲—繁殖与发育
有性生殖 间接发育：受精卵—无节幼（6期）--桡足 幼（5期） 繁殖敏感期：
受精卵→无节幼1 无节幼3→无节幼4：开口摄食 无节幼6→桡足幼1：食性转变
桡足亚纲—食性
甲壳纲--桡足亚纲
Crustacea-Copepoda
桡足亚纲--概述
无头胸甲，无复眼 分节明显，节数不固定 胸部有双肢型附肢，腹部无附肢 间接发育（无节幼、桡足幼）
桡足亚纲—形态构造
一般形态：体形、色彩 身体分部、分节：头胸部、腹部，活动关 节，前体部、后体部，体节愈合，不超过 11节。
头部：前额、额角、侧钩、晶体 胸部：节数、后侧角 腹部：节数、生殖节、生殖突起、尾节尾叉、尾 刚毛
桡足亚纲—形态构造
附肢
A1：单肢型，营感觉，雌雄有别 A2：双肢型，与摄食有关 M：双肢型，口器附肢 M1：双肢型，口器附肢，结构因食性而异 M2：单肢型，简单，缺外肢 Mp：单肢型，缺外肢，细长 P：双肢型，用于游泳
桡足亚纲—生态分布与意义
分布
海水多，淡水少 垂直分布：上层种、深水种 季节分布：狭温普生种 昼夜垂直移动现象
意义
重要饵料 水团 、海流指标种 食物链重要环节 危害：捕食鱼苗等
滤食性 捕食性 兼食性
桡足亚纲—分类
哲水蚤目：自由生活，前后体部分界明显， 活动关节位于胸、腹之间，A1长于身体， ♂常右A1特化为执握肢，P5不对称
哲水蚤属 胸刺水蚤属 唇角水蚤属 纺锤水蚤属
桡足亚纲—分类
猛水蚤目：自由生活，前后体部分界不明 显，活动关节位于末两胸节之间，A1极短， ♂左右A1均特化为执握肢，P5对称 剑水蚤目：自由生活，前后体部分界明显， 活动关节位于末两胸节之间，A1短于身体， ♂左右A1均特化为执握肢，P5对称

长江口几种优势桡足类对微型浮游动物的摄食研究汤宏俊;孙松【摘要】利用现场海水培养实验,结合浮游动物网样数据,研究长江口邻近海域几种优势桡足类(中华哲水蚤、背针胸刺水蚤、太平洋纺锤水蚤和精致真刺水蚤)对微型浮游动物的摄食影响.结果表明,精致真刺水蚤虽然属于肉食性种类,但几乎不摄食微型浮游动物;其余三种杂食性桡足类中华哲水蚤、背针胸刺水蚤和太平洋纺锤水蚤对微型浮游动物(纤毛虫+异养甲藻)的摄食率分别为0.66、0.09和0.59μgC/(ind.d),分别占其日总摄食量的29％、24％和37％.其中,异养甲藻在初始生物量和对桡足类饵料贡献上分别占整个微型浮游动物的30％和28％,是微型浮游动物中一个重要的组成类群.中华哲水蚤对微型浮游动物的摄食率与初始食物浓度有显著的正相关关系,并且对体长＞20μm纤毛虫的清滤率要明显高于对体长＜20μm的纤毛虫(P＜0.01)的清滤率,表明其偏好摄食较大个体的食物.通过Chesson选择性指数显示,尽管微型浮游动物在生物量上远小于浮游植物,但桡足类能优先选择摄食微型浮游动物;进一步结合网采浮游动物数据,获得各站三种优势桡足类丰度平均占桡足类总丰度的77％,但它们对微型浮游动物现存生物量的摄食压力仅为0.8％,表明桡足类对微型浮游动物群落的下行控制作用并不明显,仍有大部分微型浮游动物生物量未通过摄食途径进入到桡足类群落中.【期刊名称】《海洋与湖沼》【年(卷),期】2015(046)001【总页数】9页(P148-156)【关键词】桡足类;微型浮游动物;摄食;长江口【作者】汤宏俊;孙松【作者单位】中国科学院海洋研究所海洋生态与环境科学重点实验室青岛266071;中国科学院大学北京 100049;中国科学院海洋研究所海洋生态与环境科学重点实验室青岛 266071【正文语种】中文【中图分类】Q178微型浮游动物是对一类体长小于200μm的异养和混养浮游动物的总称, 它是海洋浮游食物网的重要组成部分(Dussart, 1965)。

桡足类在刺参育苗、保苗中的防治近几年，刺参增养殖在我国沿海地区迅速发展，增养殖面积逐年扩大，苗种市场供不应求，因而给苗种生产企业带来巨大商机。

但是，许多育苗企业在刺参育苗、保苗生产过程中受桡足类及其他病害影响，产量不稳定，有些甚至导致育苗、保苗失败。

现对其防治方法总结如下，以供参考。

一、桡足类大量繁殖的季节桡足类繁殖较快的季节在每年的4～10月份，大量繁殖是在每年6～8月，此时正是刺参育苗、保苗的关键时期，当水温达20℃时，桡足类即可大量繁殖，其繁殖很快，活动力较强。

二、桡足类的危害桡足类对刺参苗的危害主要表现在两个方面：一是桡足类与稚参争夺饵料生物与生存空间，如猛水蚤可以利用发达的口器撕裂、捕食稚参，其大量繁殖后可以造成稚参数量的锐减；二是桡足类对稚参的伤害，可以导致稚参皮肤的细菌感染、溃烂，如果不能及时处理可以导致刺参大面积死亡。

三、桡足类大量产生的原因1、育苗用水的处理育苗用水的水质非常关键，有些育苗单位为了增大流水量，有意减少了沙滤池中细沙层厚度，结果导致滤水效果下降，使桡足类卵和桡足类大量进入育苗池。

2、保苗用水的处理有些保苗单位存在模糊认识，认为刺参苗肉眼都可以看见，而保苗用水不经过任何处理就直接被使用，导致桡足类大量进入保苗池，致使保苗池桡足类大量繁殖，对保苗工作造成极大危害。

四、桡足类的防治1、附着基严格消毒可用0.5%氢氧化钠浸泡并用10mg/L高锰酸钾消毒处理，然后用清水洗刷干净，使用前10ml/m3的菌克27浸泡4-6小时（用过的稀释液可撒入池塘中），或放入网片后泼洒菌克27（10ml/m3）。

池塘中长期泼洒“菌克27”，保证噬菌蛭弧菌的数量优势。

2、育苗用水的处理育苗用水必须经过严格沙滤，才可进行使用，沙滤层的厚度必须保证在60cm以上。

沙滤层中沙粒大小范围的平均值是0.15～0.30mm。

一般而言，过滤速度越慢，水质越高。

提水泵必须远离近岸，伸入深海。

有条件的可把育苗用海水经紫外线消毒后，再经过滤棉过滤入育苗池，以减少桡足类卵和桡足类的进入。