益母草药材中水苏碱成分应用高效液相色谱法的检测结果分析

HPLC法测定益母草不同制剂中水苏碱严优芍1,李卫民1*,高　英1,李其凤2,伍淑华2X(1.广州中医药大学新药开发研究中心,广东广州　510405; 2.广州中医药大学科技产业园,广东广州　510445) 益母草为唇形科植物益母草L eonurus j ap o-nicus Ho utt.的干燥全草,是中医妇科常用药。

益母草中主要有效成分为水苏碱、益母草碱等生物碱类成分[1]。

含益母草制剂大多以水苏碱作为定量指标,其测定方法有雷氏盐剩余比色法(《中国药典》2005年版一部益母草项下)、雷氏盐沉淀溶解比色法(《中国药典》1977年版一部)、紫外分光光度法[2]、薄层扫描法[3]、HPLC法[4,5]等。

本实验采用HPLC法对含益母草制剂中的盐酸水苏碱进行测定,结果表明,该方法较其他方法精确可靠,从而为益母草及其制剂的质量控制提供了参考方法。

1　仪器与试药 W aters高效液相色谱系统:Waters2695泵, Waters2996二极管阵列检测器,Empow er色谱处理系统。

Aglient8453—E紫外分光光度计。

盐酸水苏碱对照品(批号110712—200306,中国药品生物制品检定所),益母草药材购于广州中医药大学大药房,各种益母草制剂均为市售,乙腈为色谱纯,其他试剂为分析纯,水为重蒸水。

2　方法与结果2.1　色谱条件:色谱柱为Water s-NH2色谱柱(250 mm×4.6m m,5L m),流动相为乙腈-水(80∶20),检测波长为202nm,体积流量为1.0mL/m in,柱温为25℃。

2.2　溶液的配制2.2.1　对照品溶液的制备:精密称取105℃干燥至恒重的盐酸水苏碱对照品10mg,置10mL量瓶中,加甲醇使溶解,并加至刻度,摇匀,即得。

2.2.2　供试品溶液的制备:取一定量样品(益母草药材6g、益母草流浸膏10mL、益母草膏10g、益母草颗粒15g、益母草片0.6g、益母草胶囊1g、复方益母草膏4g、调经益母片6g、慈航片36g、抗宫炎片12g),除益母草流浸膏、益母草膏和复方益母草膏外,益母草药材粉末(过3号筛)、益母草颗粒(研细)、益母草胶囊内容物和益母草各种片剂(去包衣后研细),均置具塞锥形瓶中,精密加入10倍量乙醇,称定质量,超声处理30min,放冷,再称定质量,用乙醇补足减失的质量,摇匀,滤过,精密量取半量续滤液,回收溶剂,残渣加水溶解。

HPLC法测定益母草颗粒(无蔗糖型)中盐酸水苏碱的含量李政海;苏作林;廖展苇;阮碧芳【摘要】Objective: To develop a method for determination of Stachydrine Hydrochloride in Herba Leonuri Granules (sugar free). Methods: The analytical column of reversed-phase high performance liquid chromatography (HPLC) method was Ultimate Column XB-NH2 (250mm×4.6 mm, 5 μm). The mobile phase was a mixture of acetonitrile-water (90:10), the flow rate was 1 ml/min. The detector wavelength was set at 192 nm. Results: The calibration curve was linear over the range of 0.964-19.280 μg for Stachydrine Hydrochloride (r=0.999 3). The average recovery of Stachydrine Hydrochloride was 97.7％, RSD=1.23％ (n=6). Conclusion: The method is convenient, economical, it is adapted for use in the quantitative analysis of Stachydrine Hydrochloride.%目的:建立益母草颗粒(无蔗糖型)中盐酸水苏碱含量的测定方法.方法:采用反相高效液相色谱法,Ultimate Column XB-NH2(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,乙腈-水(90∶10)为流动相,检测波长为192 nm,流速为1.0 ml/min.结果:盐酸水苏碱在0.964～19.280 μg范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 3),盐酸水苏碱平均加样回收率为97.7%,RSD为1.23%(n=6).结论:本方法可靠性高,准确性和重复性好,适用于益母草颗粒(无蔗糖型)中盐酸水苏碱的含量测定.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2011(008)026【总页数】3页(P70-72)【关键词】盐酸水苏碱;反相高效液相色谱法;益母草颗粒(无蔗糖型)【作者】李政海;苏作林;廖展苇;阮碧芳【作者单位】美国东方生物技术有限公司,广东深圳,518034;广西灵峰药业有限公司,广西贺州,542800;广西灵峰药业有限公司,广西贺州,542800;美国东方生物技术有限公司,广东深圳,518034【正文语种】中文【中图分类】R285益母草颗粒是由益母草单味药材经提取精制而成，用于血瘀所致的月经不调、产后恶露不绝；经量少、淋漓不净、产后出血时间过长；产后子宫复旧不全见上述证候者[1]。

HPLC测定复方益母草流浸膏中盐酸水苏碱含量王英姿;韩春超;赵瑞东【期刊名称】《山东中医药大学学报》【年(卷),期】2009(33)2【摘要】目的:建立复方益母草流浸膏中盐酸水苏碱的含量测定方法,为其质量控制提供依据。

方法:采用高效液相色谱法对复方益母草流浸膏中盐酸水苏碱的含量进行测定,色谱柱:scx强阳离子柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:0.5 mol磷酸二氢钾-三乙胺(1 000∶1.5)(磷酸调pH值2.25～2.3);检测波长:192 nm;流速1.0 ml.min-1;柱温:25℃。

结果:水苏碱的浓度在0.2～2.0 mg.ml-1范围内线性关系良好,r=0.9995,平均回收率为98.63%,RSD=1.21%(n=5)。

结论:该法简便、灵敏、准确,可用于复方益母草流浸膏的质量控制。

【总页数】2页(P157-158)【关键词】复方益母草流浸膏;HPLC;盐酸水苏碱【作者】王英姿;韩春超;赵瑞东【作者单位】北京中医药大学中药学院;山东中医药大学;山东中医药大学附属医院【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.HPLC法测定复方杜仲丸中盐酸水苏碱与黄芩苷的含量 [J], 赵磊;于丹;赵宾2.HPLC测定益母草流浸膏中水苏碱的含量 [J], 陈洪涛;蔡丹昭;林立波;李娜3.HPLC-ELSD法测定益母草流浸膏中盐酸水苏碱的含量 [J], 林冬杰;张会球4.RP-HPLC-ELSD同时测定复方益母草胶囊中阿魏酸、盐酸水苏碱、梓醇、麦角甾苷的含量 [J], 钟颖5.HPLC法测定复方益芪颗粒中盐酸水苏碱的含量 [J], 费广明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

益母草颗粒中水苏碱与益母草碱检测分析
张霞;邓芳
【期刊名称】《临床合理用药杂志》
【年(卷),期】2017(10)14
【摘要】目的系统检测分析益母草颗粒中水苏碱与益母草碱含量。

方法采用液相色谱仪—质谱仪(HPLC-MS)检测盐酸水苏碱与盐酸益母草碱的含量。

结果水苏碱与益母草碱浓度分别在1.125~281.45 ng/ml与1.043~260.5 ng/ml范围有较好的线性关系,精密度、重复性均达标,溶液在40 h内相对稳定,本方法回收率达标,益母草中水苏碱与益母草碱的浓度分别为6.688~12.411 mg/g、0.686~3.637 mg/g,5批益母草颗粒中盐酸水苏碱与盐酸益母草碱的含量分别为2.167~8.866 mg/g、0.039~0.211 mg/g。

结论采用HPLC-MS检测益母草与益母草颗粒中盐酸水苏碱与盐酸益母草碱的含量科学有效,值得药品质量检测部门推广使用。

【总页数】3页(P5-6)
【作者】张霞;邓芳
【作者单位】湖南省郴州市食品药品检验检测中心;湖南省衡阳市食品药品检验检测中心
【正文语种】中文
【中图分类】R286.0
【相关文献】
1.脑脉利颗粒中芍药苷、益母草碱、黄芪甲苷及盐酸水苏碱含量测定
2.反向离子对色谱法测定益母草药材中水苏碱和益母草碱的含量
3.益母草颗粒中盐酸水苏碱与盐酸益母草碱的含量测定
4.益母草颗粒中盐酸水苏碱的HPLC分析
5.HPLC法测定益母草药材、益母草颗粒及复方益母草膏中益母草碱的含量
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HPLC测定益母草片中盐酸水苏碱含量周立伟;张赞【摘要】目的:建立益母草片中盐酸水苏碱含量的测定方法.方法:运用HPLC对盐酸水苏碱含量进行测定,色谱柱:强酸型阳离子交换色谱柱（200 mm×4.6mm,5μm）,流动相:0.1％三乙胺的0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液,用磷酸调节pH值2.3,检测波长:192 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温:室温.结果:盐酸水苏碱的量在25 ～300 μg· mL-1浓度同峰面积呈良好的线性关系.平均加样回收率为100.92％,RSD =0.43％.结论:所建立的方法可靠,可用于益母草片的质量控制.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2011(013)007【总页数】2页(P33-34)【关键词】益母草片;盐酸水苏碱;高效液相色谱法【作者】周立伟;张赞【作者单位】哈药集团三精制药股份有限公司,黑龙江哈尔滨 150069;哈药集团三精制药股份有限公司,黑龙江哈尔滨 150069【正文语种】中文益母草片是哈药集团三精制药股份有限公司生产的活血调经的中药制剂，其质量标准中盐酸水苏碱含量测定为沉淀称重法[1],但该法操作繁琐、测定周期长，误差较大，通过检索对其他含益母草的药品检测方法的文献发现，盐酸水苏碱含量测定方法较为常见的有薄层色谱法[2]、高效液相色谱法[2,3]、HPLC-ELSD法[5]，本文应用高效液相色谱法测定益母草片中盐酸水苏碱含量并对其进行方法学考察，结果表明该法简便、快速、准确。

岛津2550紫外分光光度计、岛津LC20A高效液相色谱仪(DGU-20A5脱气机，LC-20AT高效泵，SPD-20A检测器，SIL-20A自动进样器)Lc-solution工作站软件，梅特勒电子分析天平。

三乙胺(分析纯，天津科密欧)，磷酸二氢钾(分析纯，天津科密欧)，磷酸(天津科密欧)，0.45 μm微孔滤膜(津腾)，溶剂过滤器。

81--加工贮藏•检测分析　引用格式： 王秋萍，杨邦祝，宋善敏，等. HPLC-RID 法测定不同厂家益母草药材中盐酸水苏碱含量[J]. 湖南农业科学，2024（2）：81-84.　DOI:10.16498/ki.hnnykx.2024.002.016益母草（Leonurus japonicus Houtt.）为唇形科益母草属植物的新鲜或干燥地上部分，别名益母艾、野麻、坤草等，全国大部分地区均有种植[1]。

益母草中主要有效成分为益母草碱和盐酸水苏碱[2]。

药理作用研究表明，益母草中的生物碱具有显著的兴奋子宫、镇痛抗炎、改善血液流变学、抗血栓等多种药理活性[3-5]，为治疗月经不调、胎漏难产、产后恶露不尽、瘀血腹痛等妇科病及抗心肌缺血临床治疗的常用良药[6-8]。

目前市面上以益母草为单一原料制成有糖型或无糖型益母草颗粒的国药准字号厂家多达185家，益母草原药材中盐酸水苏碱的含量检测是益母草颗粒生产中的必要步骤。

由于各厂家生产的益母草颗粒中盐酸水苏碱含量的差异，临床和药理试验发现，有病人在服用常规或过量益母草药材后，人体出现过敏、腹泻等不良反应，有的甚至出现严重的肝、肾等脏器损伤[9-12]。

因此，益母草药 H PLC-RID 法测定不同厂家益母草药材中盐酸水苏碱含量  王秋萍1,2，杨邦祝1，宋善敏1，甘梦兰1，李满香 1，何珺2，雷阳1 （1. 贵州农业职业学院，贵州 清镇 551400；2. 贵州大学贵州省生化工程中心，贵州 贵阳 550025）摘要：建立了测定益母草中盐酸水苏碱含量的HPLC-RID 方法，并测定分析了14家药厂的益母草中盐酸水苏碱的含量。

结果表明：以Mercury 益母草专用柱（250 mm × 4.6 mm，5 μm）为色谱柱，以70%乙腈溶液为流动相、流速1.0 mL/min、柱温45℃的条件下采用示差检测器进行检测，盐酸水苏碱在0.100~0.523 mg/mL 浓度范围内呈良好的线性关系；回归方程为y =91 519 x +1 342.2 （R 2=0.991 6），平均回收率100.07 %，RSD 为0.71 %，且该方法具有重复性好、操作简便、快速、稳定、易于普及等优点；各厂家的益母草药材中盐酸水苏碱含量差异较大，14家厂家中仅有1367和8656这2家的益母草药材符合药典标准；盐酸水苏碱含量与益母草药材性状具有关联性，市民、药企和中药商等在购买益母草药材时，建议选择性状为叶多、青绿、茎细的益母草药材。

复方益母口服液中水溶性生物碱-盐酸水苏碱的HPLC法测定研究目的建立复方益母口服液中水溶性生物碱-盐酸水苏碱的含量测定方法。

方法用雷氏盐沉淀法处理样品，对提纯出的盐酸水苏碱采用HPLC法测定含量。

色谱柱为Agela Venusil XBP NH2柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-醋酸溶液（用少量醋酸调节溶液的pH值至3.00±0.15）（77∶23）为流动相，流速为1.0 mL/min，柱温为35℃，检测波长200 nm。

结果复方益母口服液中盐酸水苏碱的进样量在1.083 1～32.491 8 μg范围内线性关系良好（r = 0.999 9），平均回收率为91.1%，RSD = 3.7%（n = 6）。

结论该方法精确可靠，专属性强，可作为复方益母口服液中盐酸水苏碱的质量控制方法。

[Abstract] Objective To establish a method for the content determination of water soluble alkaloids-stachydrine hydrochloride in Complex Yimu Oral Liquid. Methods The sample solution was prepared with the method of Reinecke salt precipitation and was determined the content by HPLC. The column was Agela Venusil XBP NH2 column (4.6 mm×250 mm，5 μm) and CH3CN-H2O (pH was adjusted to 3.00±0.15 by acetic acid) (77∶23) was used as the mobile phase, with the flow rate of 1.0 mL/min. The column temperature was at 35℃and the detection wavelength was 200 nm. Results The good linear ranges were between 1.083 1-32.491 8 μg for stachydrine hydrochloride (r = 0.999 9, n = 6) and the average rate of recovery was 91.1% with RSD = 3.7% (n = 6). Conclusion The method is accurate, reliable, specific and with good reproducibility. It can be used for the quality control of stachydrine hydrochloride in Complex Yimu Oral Liquid.[Key words] Complex YimｕＯｒａｌLiquid; Stachydrine hydrochloride; HPLC; Reinecke salt precipitation复方益母口服液是由益母草、当归、川芎等药经加工制成的口服液，具有活血行气，化瘀止痛的功能，用于气滞血瘀所致的痛经，原为国家药品标准新药转正标准第19册收载品种[1]。

HPLC-ELSD法测定益母草流浸膏中盐酸水苏碱的含量林冬杰;张会球【期刊名称】《亚太传统医药》【年(卷),期】2009(5)2【摘要】目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)检测法测定益母草流浸膏中盐酸水苏碱含量的方法.方法:采用高效液相色谱法,以蒸发光散射检测器检测,采用外标二点法对数方程计算含量.色谱柱为KromasilNH2(250mm×4.6mm,5μm,S/N:22N25110),以甲醇-乙腈(50∶50)为流动相,流速:1.0mL/min,柱温:30℃,蒸发光散射检测器:雾化器温度:60℃,漂移管温度:90℃,气体(氮气)流速:1.0L/min.结果:盐酸水苏碱进样量在0.16～1.6μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9990,平均回收率为98.73%,RSD=0.93%(n=6).结论:本方法快速简便,结果准确可靠,重现性好,可用于益母草流浸膏的质量控制.【总页数】2页(P45-46)【作者】林冬杰;张会球【作者单位】梧州食品药品检验所,广西,梧州,543002;桂林医学院,广西,桂林,541004【正文语种】中文【中图分类】R914【相关文献】1.HPLC-ELSD测定益母颗粒中盐酸水苏碱的含量 [J], 冯旭;杜成智;梁臣艳;侯小涛;王胜波;覃洁萍2.HPLC-ELSD法测定产妇安胶囊中盐酸水苏碱的含量 [J], 聂金媛;何燕;曾祥腾;徐孟文3.HPLC-ELSD法测定益母草颗粒中盐酸水苏碱的含量 [J], 王晓燕;王舒4.HPLC测定复方益母草流浸膏中盐酸水苏碱含量 [J], 王英姿;韩春超;赵瑞东5.HPLC-ELSD法测定产后逐瘀片中盐酸水苏碱的含量 [J], 况艳;李志浩;郑芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定前列泰胶囊中盐酸水苏碱的含量摘要：目的建立测定前列泰胶囊中盐酸水苏碱含量的方法。

方法利用高效液相色谱-蒸发光散射检测法，采用Venusil HILIC (4.6mm ×250mm，5μm) 色谱柱；流动相为甲醇-0.2%冰醋酸(95∶5)，流速为1.0mL/min，柱温25℃；漂移管温度80℃，气体流速为2.5L/min，增益值为2。

结果盐酸水苏碱在5.5850～27. 9250μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系，r=0.9999；平均加样回收率为100.03%，RSD为1.63%（n=9）。

结论实验方法准确灵敏，重复性好，能有效地控制产品质量。

关键词：前列泰胶囊；高效液相色谱-蒸发光散射检测法；盐酸水苏碱【中图分类号】R618.9【文献标识码】A【文章编号】1001-5213(2016)09-0380-02 前列泰胶囊由益母草、萹蓄、红花、油菜蜂花粉、盐知母、盐黄柏六味药材组成，具有清热利湿，活血散结，用于慢性前列腺炎湿热挟淤症。

[1] 前列泰胶囊全国有11家生产企业，现前11家企业生产前列泰胶囊的执行标准中，益母草中有效成分盐酸水苏碱的含量测定用的是高效液相色谱法，色谱柱用的是磺酸基团键合硅胶(SCX)阳离子交换柱，用紫外检器(检测波长192nm)测定，由于盐酸水苏碱的最大紫外吸收为192nm，在紫外吸收的边缘采用紫外检测器检测，杂质干扰严重，重现性差，基线不稳定，影响检测结果。

其次，益母草为前列泰方中的君药，盐酸水苏碱是其主要有效成分，11家企业现行的标准，均采用硅胶和活性炭按一定比例作为吸附剂，对样品进行处理，样品峰形依然很差。

本次实验改用三乙胺作为扫尾剂对活性炭进行改性。

由于盐酸水苏碱极性很大，传统的反相色谱对它的保留和分离能力较弱，通常在死时间流出而无法得到分离，而采用亲水作用色谱（HILIC）能为强极性的化合物提供合适的保留，在强极性的化合物测定上应用逐渐广泛，所以选择亲水作用色谱模式，并使用ELSD作为检测器进行检测，最终对原含量测定方法进行了改进，经试验，结果具有分离效果好、灵敏、准确等优点，更好地控制了前列泰胶囊的质量，确保临床的疗效。