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早期肾功能损伤检验方法的探讨摘要目的：探讨尿微量白蛋白、血清胱抑素C水平对高血压、糖尿病早期肾功能损害的临床诊断价值评价。
方法：将研究对象分为高血压组、糖尿病组、阳性对照组及阴性对照组。
取晨尿，免疫透射比浊法检测尿微量白蛋白；乳胶增强散射免疫比浊法检测血清胱抑素C；酶法检测血清肌酐和尿素氮。
结果：高血压组及糖尿病组患者尿微量白蛋白，血清胱抑素C水平均显示高于正常对照组（P＜0.01），尿微量白蛋白和血清胱抑素C检出率显著高于阴性对照组。
结论：尿微量白蛋白和血清胱抑素C水平是肾功能损害的早期标志物；联合检测可提高糖尿病和高血压早期肾功能损害检出率。
关键词尿微量白蛋白血清胱抑素C 肾小球滤过率采用免疫透射比浊法和乳胶增强散射免疫比浊法分别检测UMA和SCysC 浓度，和传统的肾功能指标检测指标血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）做比较，探讨UMA、SCysC以及它们的联合检测在诊断高血压和糖尿病继发肾功能损伤时的应用价值。
资料与方法一般资料：高血压组2008年河南省舞钢市人民医院门诊和住院病人中，尿常规检测蛋白为阴性的临床确诊原发性高血压患者264例，男153例，女111例；年龄40～75岁，平均57.5±17.5岁。
高血压诊断标准为2004年WHO/ISH高血压诊断标准，收缩压≥140mmHg，舒张压≥90mmHg，排除肥胖、冠心病、糖尿病、严重的肝肾功能不全及继发性高血压。
糖尿病组：尿常规检测尿蛋白为阴性的临床确诊糖尿病患者225例，男121例，女104例，年龄38～75岁。
平均56.5±18.5岁，糖尿病诊断标准为2001年10月中国糖尿病学会颁布的标准；空腹血糖≥7.1mmol/L，餐后2小时血糖≥11.1mmol/L，随机血糖>11.1mmol/L。
阳性对照组：临床诊断为肾功能不全、尿检验常规检测蛋白为阳性、肌酐和尿素均升高的患者108例，其中男70例，女38例；年龄20～70岁，平均45.0±25.0岁。
胱抑素C检测作业指导书1 检验目的规范胱抑素C（CYS-C）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。
2 测定方法比浊法。
3 检测原理抗体胶乳颗粒发生凝集反应，样品中的CYS-C与试剂中抗人CYS-C抗体胶乳颗粒发生凝集反应，凝集反应形成抗原抗体复合物而产生浊度，形成抗原抗体复合物而产生浊度，其浊度高低在一定量抗体存在时与样品中CYS-C成正比。
通过测定特定波长的吸光度值，参照校准曲线即可计算出血清中 CYS-C 的含量。
4 样本血清、肝素或EDTA抗凝血浆，处理方法见生化标本采集程序。
5 仪器和试剂5.1 仪器：美国贝克曼-库尔特DXC800、AU5811全自动生化仪。
5.2 试剂：由武汉元景商贸公司提供原装贝克曼-库尔特试剂（详见试剂说明书），超过失效期的试剂不能使用。
5.3 校准物：厂家配套校准品，符合WHO标准，贮存、准备严格遵照其说明书。
5.4 质控物：Rodan正常值及病理值质控品，符合WHO 标准，贮存、准备严格遵照说明书。
6 校准6.1 仪器校准：每年由该仪器维修工程师参照厂方的技术规范对仪器进行一次校准。
6.2 项目校准：试剂盒在仪器上放置稳定期后；试剂批号更换后；由质控结果随时决定。
7 操作步骤上机操作，操作程序、质量控制程序见相应生化仪操作程序。
8 参考范围0.5～1.26 mg/L。
9 警告/危急值未规定。
10 性能指标10.1 线形上限：8mg/L。
10.2 精密度：批内（n=20）CV≤8.0％、批间相对极差≤10.0％。
10.3 准确度:测得值在质控品规定的偏差范围内。
10.4 试剂贮存:密闭避光贮存2～8℃可稳定12个月。
11 干扰因素及变异的潜在来源溶血会产生干扰。
12 临床意义CYS-C是一种理想的反映肾小球滤过率的标志物。
CYS-C 可作为肾移植中肾功能的监测指标。
CYS-C检出糖尿病肾病的灵敏度为40%,特异性为100%。
所以,在刚患糖尿病而无肾病患者中, 血CYS-C是一个比较敏感和实用的指标。
血清胱抑素C测定的临床意义胱抑素C（cystain C）是一种低分子量蛋白质，可作为肾小球滤过功能指标。
近年来有关胱抑素C测定的临床应用及方法报道日渐增多，充分肯定了其临床应用价值。
一、生化特征胱抑素C，以前也被称为γ-微量蛋白及γ-后球蛋白，是一种低分子量、碱性非糖化蛋白质，分子量为13kD，有120个氨基酸残基组成，是一种分泌性蛋白质。
胱抑素C广泛地存在于各种体液中，如脑脊液、血液、唾液、精浆等。
研究发现胱抑素C 是半胱氨酸蛋白酶抑制物超家族的成员之一，是目前发现的对组织蛋白酶B抑制作用最强的抑制物，对木瓜酶、无花果蛋白酶、组织蛋白酶H/L也有抑制作用。
二、标本血清标本三、测定方法由于血清中胱抑素C浓度较低，故其测定方法需较高的分析灵敏度及特异性。
最初Lofberg等用RID及EIA对胱抑素C含量进行测定，不仅费时，而且检测限也差。
随后又有较简单且灵敏的放射、荧光及各种酶免疫测定（RIA、FIA及EIA）的方法报道，由于均属于非均相测定方法，很难自动化，因此限制了胱抑素C的广泛临床应用。
胶乳免疫比浊法是一种均相测定方法，在胶乳颗粒上包被抗体，与抗原结合时颗粒发生凝集沉淀，形成的浊度可用一定波长比浊，与同样处理的系列标准比较，计算出标本中胱抑素C浓度。
参考值：0.7～1.38mg/L，新生儿血清胱抑素C浓度较高（1.64～2.59mg/L），4个月以后则明显下降，1岁以后至18岁都较恒定，与成人接近。
四、临床意义肾小球滤过功能（GFR）的内源性标志物由于胱抑素C基因属“管家基因”，能在几乎所有的有核细胞表达，无组织学特异性，故机体胱抑素C产生率相当恒定。
因胱抑素C是一种低分子量蛋白质，可经肾小球自由滤过，在近曲小管被重吸收并降解，肾脏是清除循环中胱抑素C的唯一器官，所以血清胱抑素C浓度主要由GFR决定，由此可见胱抑素C是一种理想的反映GFR变化的内源性标志物。
Grubb及Simonsen等首先研究了血中低分子量蛋白质（β2-微球蛋白、视黄醇结合蛋白、胱抑素C）浓度与GFR（51Cr-EDTA 清除率）的相关性，发现血清胱抑素C、β2-微球蛋白及视黄醇结合蛋白浓度的倒数与GFR的相关系数r分别为0.75、0.70及0.39，血清肌酐浓度倒数与GFR的相关系数r为0.73。
血清胱抑素C在糖尿病肾病早期诊断中的临床意义作者：刘琴来源：《中外医学研究》2012年第11期【摘要】目的：探讨检测血清胱抑素C对糖尿病肾病的早期诊断价值。
方法：检测60例早期糖尿病肾病患者、60例单纯糖尿病患者及60例正常成人的血清胱抑素C，并进行对比分析。
结果：早期DN组血清Cys C水平显著高于正常对照组及单纯DM组(均P【关键词】胱抑素C；糖尿病肾病；早期诊断中图分类号 R587.1 文献标识码 B 文章编号 1674-6805(2012)11-0041-02糖尿病肾病(DN)是糖尿病(DM)患者重要致死、致残的病因[1]。
尿微量白蛋白曾被公认为早期DN临床诊断分期的重要参考指标，但因影响因素较多，准确性不尽人意[2]。
近年研究发现，血清胱抑素C(Cystain C，Cys C)可敏感反映肾功能损害[3]。
本研究探讨Cys C在DN早期诊断中的应用价值，现将结果报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取笔者所在医院内分泌科收治的2型糖尿病患者120例，男68例，女52例，平均年龄(51.3±9.2)岁。
糖尿病诊断符合1999年WHO糖尿病诊断标准，尿白蛋白排泄率(UAER)均0.05)，具有可比性。
1.2 方法1.2.1 标本采集标本采集前所有对象均素食、避免剧烈运动≥3 d，抽取清晨空腹静脉血3~5 ml，留取24 h尿液，记录尿量，防腐处理后取混匀尿液50 ml送检。
1.2.2 检测方法使用贝克曼公司LX20型全自动生化分析仪，Cys C检测使用北京利德曼公司提供的试剂采用乳胶颗粒增强免疫透射比浊法进行，UAER采用放免法，血肌酐(Scr)采用酶促动力法，血尿素氮(BUN)采用肌酐酶法。
1.3 统计学分析使用SPSS 13.0软件，计量数据以均数±标准差(x±s)表示，采用t检验，计数资料采用字2检验，P2 结果2.1 三组检测结果比较早期DN组患者血清Cys C水平显著高于正常对照组及单纯DM组(均P0.05)。
浅谈血清胱抑素C检测方法的研究进展摘要:胱抑素C.是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂,也被称为γ-微量蛋白及γ-后球蛋白，广泛存在于各种组织的有核细胞和体液中,是一种低分子量、碱性非糖化蛋白质，分子量为13.3KD,由122个氨基酸残基组成,可由机体所有有核细胞产生，产生率恒定。
胱抑素C与肾小球滤过率的线性关系优于尿素、肌酐和内生肌酐清除率，在各种疾病造成肾脏早期损害的诊断、治疗及预防方面的应用越来越广，并且在其他疾病的诊断、治疗和预防上也不断的得到应用。
循环中的胱抑素 c仅经肾小球滤过而被清除，是一种反映肾小球滤过率变化的内源性标志物,并在近曲小管重吸收，但重吸收后被完全代谢分解，不返回血液，因此，其血中浓度由肾小球滤过决定，而不依赖任何外来因素，如性别、年龄、饮食的影响，是一种反映肾小球滤过率变化的理想同源性标志物。
因此，其血清浓度主要由GFR决定，Cys C理所当然的成为反映肾小球滤过情况的重要指标[1]。
现将其检测方法综述如下。
关键词：胱抑素C；方法学；进展胱抑素C的测定方法：胱抑素C主要临床应用是作为肾小球滤过率标志物，其测定方法很多，包括单向免疫扩散法、酶联免疫测定法、荧光免疫法、时间分辨荧光免疫法、放射免疫法、胶乳颗粒法、胶乳增强免疫比浊法等。
目前临床多选择胶乳增强免疫比浊法作为常规检测胱抑素C的测定方法[2]。
1酶联免疫测定法(ELISA)：使抗原或抗体吸附在某种固相支持物表面，并保持其免疫活性，酶标抗体或抗原在液相中催化底物显色，根据颜色反应的深浅来进行胱抑素C含量的定量分析。
本法为手工操作，不需要昂贵的仪器，试剂成本低，临床应用较广，但不适合急诊样本的检测。
2胶乳增强透射免疫比浊法(PETIA)：在胶体溶液中，抗原胱抑素C与其抗体特异性结合，生成不溶性抗原一抗体复合物粒子，使反应溶液浊度增加，在特定波长下检测吸光度改变，与标准品比较可计算出胱抑素C的浓度。
本法可以利用生化分析仪进行比浊测定，整个分析过程只需要几分钟。
免疫比浊法与免疫荧光定量分析法测量血清降钙素原比较目的：比较免疫比浊法和免疫荧光定量分析法在测量血清降钙素原时的结果。
方法：选取把在笔者所在医院进行降钙素检测的202例浓度不同的血清降钙素，分别用浙江兰森生物科技有限公司生产的乳胶增强免疫比浊法和广州万孚生物公司生产的免疫荧光定量分析法同时进行监测，并对结果和数据进行统计学的分析。
结果：经比较，这两种方法在轻度升高组、低风险组、阴性组的浓度值方面比较，差异无统计学意义（P>0.05）；在高度和中度升高组的浓度值方面比较，差异有统计学意义（P＜0.05），免疫比浊法结果稍高于免疫荧光定量分析法的结果；总阳性率的比较方面，差异无统计学意义（P>0.05）。
结论：免疫比浊法和免疫荧光定量分析法均可用于临床血清降钙素原的检测，且免疫荧光法操作比较简便。
[Abstract] Objective：To compare the results of the immune turbidimetric method and immunofluorescence quantitative analysis method in the measurement of serum calcitonin original.Method：202 cases of different concentrations of serum calcitonin were selected，they were all checked by zhejiang ransom biotechnology co.，LTD.Production of latex enhanced immune turbidimetry and guangzhou Wan Fu biological immunofluorescence quantitative analysis production company at the same time，the results and data statistics were analyzed.Result：the concentration values of the two methods in elevated group，the low risk group，negative group had no statistically significant（P>0.05）；the concentration values of the two methods in highly group and moderately elevated group concentration had significant difference （P＜0.05），immune turbidimetry results were slightly higher than the analysis results of immunofluorescence quantitative.The total positive rate of two methods had no significant difference（P>0.05）.Conclusion：Immune turbidimetry and immunofluorescence quantitative analysis can be used for clinical serum calcitonin original detection，and immunofluorescence operation is more simple.[Key words] Immune turbidimetry；Immune fluorescence quantitative analysis；Serum calcitonin original降钙素原（PCT）就是降钙素的前体，是116个氨基酸所组合成的糖蛋白[1]，主要是神经内分泌细胞（主要包括肺、甲状腺、胰腺组织里面的C细胞）来表达，正常生理的情况下，在血液中是检侧不到的，属于一种脓毒的诱导蛋白，可以作为炎症新的指标，在感染性疾病的鉴别、诊断、抗生素临床应用指导、病情的检测中广泛的应用。
龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn 免疫透射比浊法与散射比浊法检测血清胱抑素C的方法学比较 作者：刘雯 龚玲 曹伟 俞莹 应筱雯 鲍彩丽 杜山青 来源：《中国现代医生》2017年第21期
[摘要] 目的 对免疫透射比浊法测定血清胱抑素C的方法学性能行初步评价，并与免疫散射比浊法进行比较。 方法 应用Rohe Modular P全自动生化分析仪与SIEMENS BN ProSpec特定蛋白仪分别对血清胱抑素C进行初步的方法学评价，包括精密度、线性回归试验、回收试验、干扰试验。 结果 免疫透射比浊法和免疫散射比浊法无论是批内还是批间精密度均符合要求，CV均0.95；免疫透射比浊法与免疫散射比浊法的回收率均>96%；干扰物试验结果显示血红蛋白、三酰甘油及胆红素均对测定无明显影响。 结论 免疫透射检验的灵敏度较高，检测范围广，与免疫散射试验的结果基本一致，系统误差小、抗干扰能力强，且更加快速、实用和便利。
[关键词] 免疫透射比浊法；免疫散射比浊法；血清胱抑素C；方法学；检验 [中图分类号] R446.6 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2017）21-0096-03 Methodological comparison of transmitted immunoturbidimetric assay and scatter turbidimetric assay in the determination of serum cystatin C
LIU Wen GONG Ling CAO Wei YU Ying YING Xiaowen BAO Caili DU Shanqing Clinical Laboratory， Yangpu Hospital Affiliated to Tongji University， Shanghai 200093， China
[Abstract] Objective To initially evaluate the methodological properties of serum cystatin C by transmitted immunoturbidimetric assay and compare it with scatter turbidimetric assay. Methods Methodological evaluation was carried out for the serum cystatin C by Rohe Modular P automatic biochemical analyzer and SIEMENS BN ProSpec specific protein instrument， including precision， linear regression test， recovery test and interference test. Results Transmitted immunoturbidimetric assay and scatter turbidimetric assay both conformed to the requirements of intra-or inter-batch precision， and CV was 0.95； the recovery rates of transmitted immunoturbidimetric assay and scatter turbidimetric assay were both>96%； interferent test results showed that hemoglobin， triglyceride and bilirubin had no significant effects on the determination. Conclusion The sensitivity of immune transmission test is high， the detection range is wide， which is consistent with the result of scatter turbidimetric assay. The system error is small， the anti-interference ability is strong， and it is more rapid， practical and convenient. 龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn [Key words] Transmitted immunoturbidimetric assay； Scatter turbidimetric assay； Serum cystatin C； Methodology； Test
胱抑素C（CysC）又称为半胱氨酸蛋白酶抑制剂C。近年来，由于高血压、糖尿病发病率的上升，其作为理想的反映肾小球滤过率的灵敏指标日益受到临床重视，国外对CysC的临床应用报道较多，认为其血浓度能够较准确地反映GFR[1-3]。目前已建立的多种测定方法，包括免疫荧光测定（FIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫透射比浊法（PETIA）与免疫散射比浊法（PENIA），我们应用Rohe Modular P全自动生化分析仪与SIEMENS BN ProSpec特定蛋白仪对CysC进行了初步的方法学比较[4-5]，现将结果报道如下。
1 材料与方法 1.1 仪器 免疫透射比浊法使用Rohe Modular P全自动生化分析仪、免疫散射比浊法使用SIEMENS BN ProSpec特定蛋白仪。
1.2 试剂 均为仪器配套试剂，其中BN-P的质控品来源于配套试剂盒；Modular P的质控品来源于上海市临床检验中心。罗氏与西门子的CysC校准品值可溯源至ERM-DA472。
1.3 标本来源 标本均来自2016年1～10月的我院住院患者标本。 1.4 方法 1.4.1 两种方法的批内精密度测定 将Modular P生化分析仪上的CysC低值、高值质控品及BN ProSpec特定蛋白仪上的CysC低值、高值质控品连续测定20次用于计算批内精密度。
1.4.2 两种方法的批间精密度测定 将Modular P生化分析仪上的CysC低值、高值质控品以及BN ProSpec特定蛋白仪上的CysC低值、高值质控品每天测定5次，每次间隔>1 h，连续测定4 d用于计算批间精密度。
1.4.3 两种方法的线性分析 取2种不同方法的低浓度（接近于检测下限）和高浓度标本，按5/5 L+0/5 H、4/5 L+1/5 H、3/5 L+2/5 H、2/5 L+1/5 H、1/5 L+4/5 H、0/5 L+5/5 H的比例配置样本，对样本进行检测，每个样本检测3次，取均值作为最终结果。根据配置关系计算预期样本量，并以之为横轴，实际平均值为纵轴制作回归分析模型。 龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn 1.4.4 两种方法的回收试验 取混合血清样本加入等体积、不同浓度的CysC标准液，加入标准液浓度分别为1/2原标准液浓度，计算回收率。
1.4.5 两种方法的干扰试验 采用新鲜全血配置成干扰物，分为5.0 g/L、10.0 g/L两种血红蛋白浓度；胆红素干扰物直接使用罗氏Cfas冻干标准品；三酰甘油酯干扰物直接使用脂肪注射液，用0.9%NACL直接配制成浓度为4.7 mmol/L和9.5 mmol/L干扰物，分别用免疫透射比浊法和免疫散射比浊法进行干扰试验。
1.5 统计学分析 使用SPSS13.0统计软件包进行数据处理，采用描述性分析，偏态分布计量资料用中位数表示，计数资料用%表示，两种检验方案分别采用CysC线性试验分析并绘制线形图，检验值α=0.05。
2 结果 2.1 免疫透射比浊法和免疫散射比浊法的批内精密度评价 批内对比显示，散射比浊法的低值质控品和高值质控品的CV值均略高于透射比浊法，但两组对比差异无统计学意义（P>0.05）。
2.2 免疫透射比浊法和免疫散射比浊法的批间精密度比较 批间对比显示，散射比浊法的低值质控品和高值质控品的CV值均略高于透射比浊法，但两组对比差异无统计学意义（P>0.05）。
2.3 免疫散射比浊法检测CysC线性试验分析 散射比浊法的CysC线性试验R2=0.99197，透射比浊法的CysC线性试验R2=0.99231 2.4 回收试验（免疫散射比浊法） 取混合血清标本（CysC浓度为1.12 mg/L）加入0.176 mg/L、0.885 mg/L、1.764 mg/L、浓度的标准液，并加入50%浓度的标准液，平均回收率为97.0%。
2.5 回收试验（免疫透射比浊法） 取混合血清标本（CysC浓度为0.966 mg/L）加入0.377 mg/L、1.510 mg/L、3.525 mg/L浓度的标准液，并加入50%浓度的标准液，平均回收率为98.2%。
2.6 干扰试验 龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn 3 讨论 散射比浊法和透射比浊法的原理有所差异，前者是利用光线被液体粒子折射后的偏转角度来判断相关成分的含量，而后者则主要是检测复合物成分对光线的吸收率来分析成分[6-7]。以往认为免疫透射检验虽然具有一定优势，但存在检验范围狭窄、灵敏度较低的缺陷，主要是由于检验复合物并不能完全阻挡光线的通过或复合物过少导致浊度变化难以体现。近年来，随着检验医学的日趋发展，全自动生化仪目前的技术已非常成熟[8-9]。
以往普遍认为免疫透射比浊法的灵敏度不够理想，检测范围不够宽，原因是免疫复合物颗粒太小阻挡不了光线的通过；或是免疫复合物的数量太少，其浊度变化对光通量的透过影响不大，特别是在低浓度时更加明显[10-11]。而在抗原过量情况下，透射比浊法易出现钩状效应而导致结果偏低。而在速率散射比浊法检测时，仪器设计有抗原过量检测系统，抗原过量时会提示样本稀释，从而达到检测结果的准确性和精密度[12-13]。由此，在比较实验中，速率散射比浊法在低浓度和高浓度测定中可以得到较为准确的结果。但是，在基层医疗单位，常常没有条件满足使用散射比浊法测定特定蛋白，应用免疫透射比浊法检测就显得更加重要。其次，随着检验医学的日趋发展，检验质量管理已规范化，实验室应重视不同检测方法之间检测结果是否存在一致性的问题[14]。从本文数据来看，可以看出免疫透射比浊法与免疫散射比浊法的相关性好，R2>0.95。其回归方程，斜率均接近于1，截距均接近于0；免疫透射比浊法无论是批内精密度还是批间精密度都非常好，CV均
