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SHH-N基因腺相关病毒表达载体的构建及其对神经干细胞增殖相关基因的影响刘东升;崔岩;申仑;杜延平;李桂林;王任直;王岩;张波【摘要】Objective To construct and identify SHH-N gene adeno-associated virus vector and to detect its effect on genes controlling to proliferation in neural stem cells(NSCs). Methods The neural stem cells in the subventricular zone of postnatal rat brain were used to collect SHH-N. pSNAV2. 0-CMV-SHH-N-IRES-EGFP was established by enzyme cutting and ligation , and then transfected packaging cell line 293T. Real time PCR was performed after SHH-N transfection of neural stem cells by rAAV-SHH-N-EGFP vector for 48 hours, SHH-N gene expression of infected cells after 2 week examined by fluorescence microscopy. Results ( 1 ) SHH-N gene was coincident with NCBI report. (2) pSNAV2. 0-CMV-SHH-N-IRES-EGFP expression vector and rAAV-SHH-N-EGFP vector was successful established and packaged. (3)Real time PCR was performed after SHH-N infection for 48 hour, induction of Nmyc and Glil in rAAV-SHH-N-EGFP-treated group was enhanced compared to control group. Conclusion rAAV-SHH-N-EGFP vector has been successfully established and it can stably express in neural stem cells. Forced expression of SHH-N in NSCs resulted in enhanced induction of Nmyc and Glil.%目的构建rAAV-SHH-N-EGFP载体并检测其对神经干细胞增殖相关基因影响.方法分离并培养大鼠脑室下区神经干细胞,提取RNA、反转录、PCR得到SHH-N的cDNA,克隆入pSNAV2.0-CMV-IRES-EGFP,包装得到腺相关病毒rAAV-SHH-N-EGFP,感染神经干细胞48 h后,采用实时定量PCR检测SHH信号通路下游相关基因的mRNA水平变化,并观察rAAV-SHH-N-EGFP载体在神经干细胞内的表达情况.结果 (1)克隆得到SHH-N基因,测序结果与NCBI报道序列一致.(2)成功构建pSNAV2.0-CMV-SHH-N-EGFP表达载体并鉴定,包装得到rAAV-SHH-N-EGFP.(3)实时定量PCR 分析rAAV-SHH-N-EGFP感染神经干细胞48 h后,rAAV-SHH-N-EGFP处理组较感染rAAV-EGFP的对照组,Glil和Nmyc的mRNA水平上调.(4)rAAV-SHH-N-EGFP可有效感染神经干细胞,在感染14 d后稳定表达SHH-N.结论成功构建rAAV-SHH-N-EGFP过表达载体并使其在神经干细胞内稳定表达.过表达SHH-N 可使神经干细胞内SHH信号通路相关基因Glil转录水平上调,并使细胞增殖相关基因Nmyc转录水平上调.【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2011(031)003【总页数】6页(P291-296)【关键词】神经干细胞;SHH信号通路;Nmyc基因【作者】刘东升;崔岩;申仑;杜延平;李桂林;王任直;王岩;张波【作者单位】大连医科大学附属第一医院,神经外科,辽宁,大连,116011;大连医科大学附属第一医院,神经外科,辽宁,大连,116011;大连医科大学附属第一医院,神经外科,辽宁,大连,116011;大连医科大学附属第一医院,神经外科,辽宁,大连,116011;中国医学科学院北京协和医院,神经外科,北京,100730;中国医学科学院北京协和医院,神经外科,北京,100730;清华大学玉泉医院,神经外科,疼痛病区,北京,100730;大连医科大学附属第一医院,神经外科,辽宁,大连,116011【正文语种】中文【中图分类】R394.3音猬蛋白(sonic hedgehog,SHH)分泌蛋白在神经系统的发育时期中调节神经管腹侧的发育和脑背侧部神经管前体的增殖发育[1]。
腺病毒介导的BDNF基因脊髓内转移对神经根损伤后神经元内酶的影响张海鸿;廖维宏;孙正义;伍亚民;张正丰【期刊名称】《第三军医大学学报》【年(卷),期】2003(25)5【摘要】目的观察神经根损伤后进行BDNF基因治疗对神经元的保护作用。
方法在神经根缝合基础上 ,通过无创注射将复制缺陷重组腺病毒载体直接转移至大鼠神经根损伤部相应的脊髓腹角。
分别于术后 1、3、7、14、2 8d比色法测定AChE和ACP酶活性的变化。
结果AXCA BDNF组伤后AChE活性高于损伤组 ,而ACP活性均低于损伤组。
AXCA BD NF能够降低酶的变化幅度。
结论神经根重建结合BDNF基因治疗可明显减轻神经元的损伤程度。
【总页数】3页(P388-390)【关键词】腺病毒;BDNF;基因脊髓内转移;神经根损伤;基因治疗;脑源性神经生长因子【作者】张海鸿;廖维宏;孙正义;伍亚民;张正丰【作者单位】第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第三研究室;兰州医学院附属第二医院骨科【正文语种】中文【中图分类】R741.02;R651.3【相关文献】1.腺病毒介导脑源性神经营养因子基因转移对神经根损伤后神经元的保护和促轴突再生作用 [J], 张海鸿;廖维宏;孙正义;王栓科;伍亚民2.腺病毒介导脑源性神经营养因子基因转移对神经根损伤后再生相关基因的影响[J], 张海鸿;孙正义;廖维宏;王栓科;伍亚民3.腺病毒介导的脑源性神经营养因子基因脊髓内转移对神经根损伤后细胞凋亡的影响 [J], 张海鸿;王栓科;孙正义;夏亚一;廖维宏4.抗BDNF血清对小鼠坐骨神经损伤后脊髓前角运动神经元内GAP-43表达的影响 [J], 李昌琪;杨德森;刘丹;张建一;伍校琼;罗学港5.腺病毒介导BDNF基因转移对大鼠创伤性脑损伤后iNOS表达及细胞凋亡的影响 [J], 王国强;廖维宏;沈岳;李芳;张微微因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小胶质细胞胞葬作用在新生儿缺氧缺血性脑病中的研究进展2024（全文）摘要新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic ischemic encephalopathy，HIE)是围生期窒息引起的新生儿脑缺氧缺血性损害，是婴幼儿神经系统病变及新生儿死亡的主要原因，其特征性的病理生理改变为神经元的大量凋亡。
小胶质细胞作为中枢神经系统中的吞噬细胞，在新生儿HIE发生发展过程中发挥着重要功能。
胞葬作用是近年来被发现的一种吞噬细胞特异性吞噬过程。
在新生儿HIE中，小胶质细胞能够通过胞葬作用清除凋亡细胞，防止凋亡细胞进一步坏死而引发炎症反应和脑损伤。
了解小胶质细胞胞葬在新生儿HIE中的作用有助于阐明其发病机制和探究潜在的治疗方法。
该文就小胶质细胞胞葬作用在新生儿HIE中的研究进展进行综述。
新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic ischemic encephalopathy，HIE)是一种由围生期窒息引起的脑缺氧和血流量减少为特征的新生儿脑损伤性疾病，除亚低温疗法外，目前尚无切实有效的治疗药物[1,2]。
据报道，新生儿HIE的发病率约2‰~6‰，病死率约10%~20%，其中25%的患儿遗留不同程度的中枢神经系统后遗症[3]。
然而，新生儿HIE的发病机制仍有许多争议，尚需进一步研究明确。
胞葬(efferocytosis)是吞噬细胞从组织中及时有效清除凋亡细胞的生理过程，可防止凋亡细胞继发性坏死及炎症反应[4]。
此过程被学者们形象地称之为"凋亡细胞埋葬"，简称"胞葬"。
新生儿HIE主要的病理特征之一为大量神经元细胞凋亡，大脑中主要的吞噬细胞——小胶质细胞通过胞葬作用清除凋亡的神经元[5,6]。
小胶质细胞胞葬通过吞噬凋亡细胞及吞噬后调节炎症因子抑制炎症反应发挥着脑保护作用，而当小胶质细胞的胞葬功能发生异常时，大量凋亡细胞蓄积并进一步坏死，导致过度炎症反应及免疫失调，进而加重脑损伤[7]。
低氧与神经干细胞发育
吴丽颖;朱玲玲;范明
【期刊名称】《青海医学院学报》
【年(卷),期】2005(26)2
【摘要】由于氧在能量代谢和内环境稳定中起重要调节作用，所以地球上绝大多
数生命都离不开氧(Yun Zhong，2002)。
作为重要的生理病理调节因素，氧浓度
改变的影响可以贯穿整个生命过程：从胚胎发育到成体正常功能的维持，多种病变，衰老退变等等。
【总页数】6页(P128-133)
【作者】吴丽颖;朱玲玲;范明
【作者单位】军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850;军事医学科学院基础
医学研究所,北京,100850;军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850
【正文语种】中文
【中图分类】R364.4;R322.85
【相关文献】
1.低氧促进神经干细胞增殖分化过程中低氧诱导因子-1α表达的变化 [J], 郑丹;戴
冀斌;田毅浩;陆蔚天;黄娟;王晓芸
2.骨发育中低氧感应及低氧诱导因子-1的调节作用 [J], 朱勋兵;邓廉夫
3.低氧分压通过低氧诱导因子(HIF)影响卵母细胞的体外成熟和早期胚胎的发育 [J], 刘晓淋;杜凤娇;雷钏;阮秋燕;吴柱连;孙洪亮;赵鑫;邓彦飞;陆凤花
4.不同剂量血管内皮生长因子在低氧环境下可保护神经干细胞 [J], 周经霞;陈琳;陈
擘璨;邢槐杰;闫丽敏;曾超胜;吴海荣;黄裕盛;陈接桂
5.低氧联合GDNF诱导大鼠神经干细胞分化为TH阳性神经元的实验研究 [J], 杜娟;刘昌红;梁辉;吕晓红
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学位论文独创性说明本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的成果。
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研究生签名：时间：年月日导师签名：时间：年月日前言前言小儿脑性瘫痪是目前小儿时期最主要的运动功能伤残疾病，且终生存在[1]。
发达国家20世纪50年代以后曾做过不少有关脑瘫的患病率调查[2]，患病率为1‰~4‰，多集中在2‰~3‰之间，我国1998年“九五”攻关课题报道[3]，全国0－6岁脑瘫患儿有31万，平均患病率1.86‰。
近年来脑瘫的发生率无明显降低，在某些地区甚至有上升的趋势[4-5]。
其主要病因[6-10]是由于早产、产伤、围产期窒息及核黄疸等原因造成脑组织的缺血缺氧。
在新生儿期尤其是出生后一个月内，脑白质极易因脑缺血缺氧而受损[11]。
神经系统的功能单位-神经元，在缺血缺氧损伤后不可再生，从而严重影响神经功能[12]。
对于脑瘫的治疗，人们采用了各种办法和手段，目前尚无较好的治疗方法。
Vescoyi等[13]利用实验鼠的胚胎干细胞成功培育出能分泌多巴胺的神经细胞，并将其移植到无分泌多巴胺功能的实验鼠脑中，这项研究成果有望被用于治疗帕金森氏症等疾病；Oves等[14]通过对鼠类的研究证实，胚胎干细胞可使成年动物体内一种被称为髓磷脂的神经组织再生。
在受损伤的发育期脑内，干细胞可向损伤部位移行并替代缺失的神经细胞[15]。
神经干细胞（NSC）移植在缺氧缺血性脑病治疗中的应用缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE）是围生期危及患儿生命并严重影响预后的疾病。
近年来，神经干细胞（NSC）移植在新生儿缺氧缺血性脑病治疗中的应用为这一疾病治疗带来了希望。
标签：脑缺氧；脑缺血；干细胞一、NSC在新生儿缺氧缺血性脑病治疗中的应用缺氧缺血性脑病（hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE）是围生期危及患儿生命并严重影响预后的疾病。
[1]中重度HIE患儿可发展为呼吸衰竭、心跳骤停，部分患儿远期遗留脑瘫、癫痫等，近年来国内外倾注大量人力、物力，对此进行相关研究，但对重度HIE病例而言，在阻断再灌注损伤、抑制凋亡等方面还未取得突破性进展，也缺乏有效的治疗手段。
实验研究已证实NSC广泛存在于胚胎及成人神经系统内，并且在体内或体外能分裂、繁殖、成熟、分化形成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞，对损伤的脑组织表现出较大的修复作用。
主要应用于帕金森病、脊髓损伤、脑血管疾病等的治疗。
[2]尹晓娟、封志纯等[3]观察了新生7日龄SD大鼠HIE病程中NSC 随着HIE病变的变化而发生着改变，NSC基本上随病程的延长而减少。
支持NSC 的早期干预治疗有希望成为临床治疗HIE的重要手段。
屈素清[4]、栾佐[5]等经过多年的研究发现缺氧缺血性脑损伤及脑瘫患儿在移植人胚胎脑神经干细胞的存活、迁移及分化情况。
结果显示人胚胎神经干细胞经脑室移植至缺氧缺血性脑损伤的鼠脑后能存活、迁移，并依迁移域的不同分化为神经元和星形胶质细胞。
损伤时内源性神经干细胞（NSC）从脑室沿胼胝体、外囊向外迁移到损伤区修复损伤，而外源性NSC在宿主体内是在内源性NSC的引导下完成迁移的。
Satoshi 等[6]相关实验观察到损伤对侧脑室移植后移植细胞能迁移至全脑，并到达损伤区。
也表明经侧脑室移植的可行性。
以上研究提示：NSC脑移植在新生动物实验中取得了疗效，为临床应用提供了实验数据和理论基础。
FOXO1和FOXO3a基因靶向转导对缺氧/复氧小鼠心肌细胞的作用研究发布时间：2021-04-23T06:00:02.788Z 来源：《医药前沿》2020年35期作者：李继红1 阿尔祖古丽?米尔阿卜杜拉1 金晓倩1 黄莺1（通讯作者）马依彤1 马翔1 刘芬2 陈邦党2 刘成1 [导读] 研究FOXO1与FOXO3a基因靶向转导对缺氧/复氧小鼠心肌细胞的作用。
（1新疆医科大学第一附属医院冠心病二科新疆乌鲁木齐 830054）（2新疆心血管病研究所新疆乌鲁木齐 830054）【摘要】目的：研究FOXO1与FOXO3a基因靶向转导对缺氧/复氧小鼠心肌细胞的作用。
方法：将H9C2小鼠的心肌细胞先缺氧(H)3 h 后，复氧(R)6h，然后建立缺氧/复氧损伤模型；然后随机分为5个组：A组为Control组，B组为H/R组，C 组为H/R+FOXO1组，D组为H/R+FOXO3a组，E组（H/R+FOXO1+FOXO3a组）。
检测FOXO1与FOXO3a蛋白表达、检测氧化应激相关指标水平、测定细胞凋亡情况、细胞增殖活力。
结果：H9C2细胞中转染 FOXO1和FOXO3a后的E组与B、C、D三组相比，FOXO1和FOXO3a蛋白较前上调，细胞增殖活力提高，凋亡率也显著降低，抗氧化应激指标升高。
结论：FOXO1与FOXO3a基因转导能够减轻心肌细胞缺氧/复氧导致的氧化应激反应造成的心肌损伤，改善心肌细胞的存活、增殖功能，为缺血性心力衰竭的靶向治疗指出了新方向。
【关键词】重组腺病毒；FOXO1；FOXO3a；心肌细胞；缺氧/复氧；SOD活性；T-AOC活性；ROS活性【中图分类号】R542.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2020）35-0087-03心肌梗死是心力衰竭是主要原因之一。
研究其发病机制，有助于寻找新的干预措施，来提高预防及治疗效率，达到提高患者的生存率及生活质量、改善冠心病心肌梗塞预后的目的。
