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营养代谢病检测技术第七章本章目的：本章要求了解营养代谢病检测技术的基本知识。
本章重点：１、血糖、蛋白质和脂肪代谢及微量元素测定。
２、消化吸收代谢过程本章难点：维生素测定。
第一节蛋白质检测第二节血糖检测第三节脂肪代谢的检测第四节微量元素检测第五节维生素营养的检测主要内容一、血清总蛋白测定二、血清白蛋白测定三、血清蛋白电泳四、血红蛋白测定五、肌红蛋白测定第一节蛋白质检测（Ketosis in dairy cows）一、血清总蛋白测定原理：碱性溶液中蛋白质分子的肽键与铜离子作用，形成紫红色的复合物。
这与两个尿素分子缩合生成缩二脲，在碱性条件下与铜离子作用形成紫红色反应相似，故称为双缩脲反应。
一、血清总蛋白测定试剂：6mol/L氢氧化钠溶液：溶解120g氢氧化钠于去离子水中，稀释至500ml，置聚乙烯瓶内盖紧保存。
双缩脲试剂：称3 g CuSO4•5H2O和9g酒石酸钾钠（KNaC4H4O4•4H2O），先分别溶于蒸馏水，加入碘化钾5g，待完全溶解后混合，加入6mol/L氢氧化钠100ml，最后以蒸馏水加至1L置聚乙烯瓶内盖紧贮存。
蛋白标准液：收集混合血清，用凯氏定氮法测定蛋白质含量，亦可用定值参考血清或标准蛋白作标准。
一、血清总蛋白测定操作：取三支试管按下表加入式样，混匀37摄氏度水浴放置十分钟，以空白管调零，540nm波长测定吸光度。
项目测定管标准管空白管血清/ml 1.00 －－蛋白质标准液/ml － 1.00 －理生盐水/ml －－1.00双缩脲试剂/ ml 5.00 5.005.00二、血清白蛋白测定原理：在pH=4.2环境中，带正电荷的白蛋白（pI=4.9）可以与阴离子染料溴甲酚绿（BCG）结合，溶液由黄变蓝，在波长630nm具有最大光吸收，并与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，可求得血清中白蛋白含量。
二、血清白蛋白测定试剂：溴甲酚绿（BCG）试剂：于1L容量瓶中盛蒸镏水约400ml，加琥珀酸缓冲贮存液100ml，用吸管准确吸取BCG贮存液8ml加入，并将内壁沾的染料冲洗入液体中，加叠氮钠存液2.5 ml，聚氧化乙烯月桂醚贮存液2.5ml，最后用蒸馏水稀释至刻度，配好的BCG试剂pH应为4.15 ±0.05。
实验名称：牛的生理学实验实验目的：1. 了解牛的基本生理结构和生理功能。
2. 掌握牛的生理实验方法。
3. 培养学生的实验操作技能和观察能力。
实验时间：2021年X月X日实验地点：动物实验中心实验材料：1. 牛只：一头成年牛2. 实验仪器：生理记录仪、血压计、心电图机、呼吸机、注射器等3. 实验试剂：生理盐水、葡萄糖、肝素等实验方法：一、牛的基本生理结构和生理功能观察1. 观察牛的外貌特征，记录牛的品种、年龄、体重、性别等基本信息。
2. 观察牛的消化系统，记录口腔、食管、胃、小肠、大肠等器官的位置、形态和功能。
3. 观察牛的呼吸系统，记录鼻腔、气管、支气管、肺等器官的位置、形态和功能。
4. 观察牛的循环系统，记录心脏、血管、淋巴等器官的位置、形态和功能。
5. 观察牛的泌尿系统，记录肾脏、输尿管、膀胱等器官的位置、形态和功能。
6. 观察牛的生殖系统，记录生殖器官的位置、形态和功能。
二、牛的生理实验1. 牛的血压测量（1）将牛固定在实验台上，确保牛处于安静状态。
（2）用血压计测量牛的血压，记录收缩压和舒张压。
2. 牛的心电图记录（1）将心电图机连接到牛的胸前，确保电极与皮肤良好接触。
（2）开启心电图机，记录牛的心电图波形。
3. 牛的呼吸频率和潮气量测量（1）将呼吸机连接到牛的鼻孔，确保牛呼吸平稳。
（2）观察呼吸机记录的呼吸频率和潮气量。
4. 牛的血糖测量（1）采集牛的血液样本。
（2）用血糖仪测量血糖浓度。
5. 牛的肝功能检测（1）采集牛的血液样本。
（2）用肝素抗凝，分离血清。
（3）检测血清中的肝功能指标，如ALT、AST等。
实验结果：1. 牛的基本生理结构和生理功能观察结果：（1）牛的品种：XXX（2）年龄：XXX岁（3）体重：XXXkg（4）性别：雄性（5）消化系统：口腔、食管、胃、小肠、大肠等器官形态正常，功能良好。
（6）呼吸系统：鼻腔、气管、支气管、肺等器官形态正常，功能良好。
（7）循环系统：心脏、血管、淋巴等器官形态正常，功能良好。
柠檬酸稀土对锦江黄牛瘤胃体外发酵特性的影响柏峻;文露华;瞿明仁;李艳娇;许兰娇【期刊名称】《中国饲料》【年(卷),期】2018(0)15【摘要】为研究柠檬酸稀土对锦江黄牛瘤胃体外发酵特性的影响,试验选用3只安装有永久性瘤胃瘘管的健康锦江黄牛作为瘤胃液供体动物,以柠檬酸稀土为试验材料,采用单因子试验设计,在日粮中添加稀土的水平分别为0、200、400、600、800、1000、1200 mg/kg,体外培养24 h后,测定干物质消化率(IVDMD)、产气量、MCP和NH3-N等发酵相关参数.结果表明:(1)添加柠檬酸稀土组与对照组之间干物质消化率(IVDMD)、产气量差异均不显著(P>0.05),而且,在稀土添加水平过高时,均有抑制作用;(2)MCP和NH3-N均呈现先升高后下降的趋势,在800、1000 mg/kg组中,MCP含量分别显著提高了21.05％、21.9％(P<0.05),而与之对应的NH3-N浓度呈现较低水平,但400 mg/kg组的NH3-N含量较对照组显著提高了15.17％(P<0.05).综合而言,适量添加柠檬酸稀土对锦江黄牛的瘤胃发酵具有促进作用,可提高微生物利用NH3-N合成MCP的能力,但添加稀土水平过高会抑制瘤胃MCP合成.【总页数】4页(P65-68)【作者】柏峻;文露华;瞿明仁;李艳娇;许兰娇【作者单位】江西农业大学江西省动物营养重点实验室/饲料工程研究中心,江西南昌 330045;江西农业大学江西省动物营养重点实验室/饲料工程研究中心,江西南昌330045;江西农业大学江西省动物营养重点实验室/饲料工程研究中心,江西南昌330045;江西农业大学江西省动物营养重点实验室/饲料工程研究中心,江西南昌330045;江西农业大学江西省动物营养重点实验室/饲料工程研究中心,江西南昌330045【正文语种】中文【中图分类】S816.7【相关文献】1.烟酸、果寡糖及柠檬酸稀土组合对肉牛瘤胃体外发酵特性及菌群结构的影响 [J], 梁欢;赵向辉;许兰娇;文露华;陈作栋;赵二龙;瞿明仁2.添加不同发酵菌剂的完全混合发酵日粮对延边黄牛瘤胃微生物体外发酵特性的影响 [J], 张旭;郭盼盼;严昌国;高青山;金锡九3.日粮添加甜菜碱对锦江黄牛瘤胃体外发酵特性的影响 [J], 李美发;辛均平;丁鹏举;王世辉;王江北;汪弯弯;瞿明仁;许兰娇4.复合功能性寡糖对锦江黄牛瘤胃微生物体外发酵特性的影响 [J], 潘珂;戈婷婷;瞿明仁5.功能性寡糖组合对锦江黄牛瘤胃发酵特性的影响 [J], 潘珂因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Veterinary clinical science | 兽医临床科学100 ·2021.080 引言牛营养代谢性疾病会造成牛生长发育迟缓、发育缓慢、卧地不起等多种不良症状，严重影响养殖业健康发展。
临床上造成牛营养代谢性疾病的种类多种多样，发病机理十分复杂，发病后虽然造成的死亡率不高，但对牛群的正常生长生产造成极大影响。
在营养代谢性疾病诊治过程中，需要做到准确的鉴别和分析，然后采取针对性措施治疗，减少不必要的经济损失。
1 酮血病1.1 诊断方法酮血病是牛养殖产业特别是高产奶牛和肉牛养殖中的一种主要代谢性疾病。
由于体质代谢出现异常产生酮体，使血液、尿液和乳汁中携带大量酮体。
酮血病临床上划分为原发性酮血病和继发性酮血病，原发性酮血病多发生于生产后的10～50 d 。
牛养殖期间由于缺乏豆科类牧草，饲料搭配不合理，营养物质供给不足，造成酮血病的发生。
患病牛采食量逐渐下降，黏膜苍白或黄染明显，体温下降到正常范围以下，呼出的气体和排出的尿液存在大量丙酮气味，尿液、血液、乳汁检查呈现酮体阳性，可以对病情做出确诊[1]。
1.2 科学防治防范该种疾病，应加强营养供给，春季饲料中可加入适量的干草或精饲料，冬季要加强防寒保暖，在饲料中可以加入适量的甜菜根、胡萝卜等营养物质，确保维生素、矿物质、微量元素供给充足。
确诊后将患病牛单独隔离，选择使用25%的葡萄糖溶液1 000 mL ，一次静脉注射，每天在饮用水中添加1 000 g 红糖，分2次饮用。
肉注射地塞米松注射液，使用剂量为1 mg/kg 体重。
同时静脉注射5%的碳酸氢钠注射液250 mL 。
症状较为严重的患病牛配合肌肉注射胰岛素200 IU ，能取得很好的治疗效果。
取红糖、白糖200 g 、生姜50 g 、大枣10枚煎汤灌服，早晚各使用1次，连续使用10 d 左右，患病牛能恢复健康2 软骨病2.1 诊断方法软骨病又被称为佝偻病，是指牛生长发育过程中由于缺乏维生素D ，再加上钙磷缺乏、代谢障碍，造成骨细胞钙化不足而出现持续性的软骨肥大的病理变化。
不同微贮制剂处理油菜秸秆对肉牛生产性能及养分消化率影响作者：许兰娇，王亮，刘明珠等来源：《江西饲料》 2017年第1期摘要：本试验旨在研究不同微贮制剂处理油菜秸秆对肉牛生产性能及养分消化率影响。
试验选用选择体重范围450±30kg，发育正常，健康无病的锦江黄牛公牛共91头，分七组，每组13头，分别饲喂经不同微贮制剂处理油菜秸秆，试验期2月。
根据饲养试验结果，选择饲养效果最好的微贮制剂组进行消化试验，测定营养物质消化率。
结果表明：（1）经过不同微贮制剂处理油菜秸秆饲喂肉牛，有改善其生产性能的作用，以A+C组的干物质采食量、日增重最大，料重比最低，即经过EM和粗饲料降解剂联合处理的油菜秸秆，饲喂锦江黄牛效果最好。
但各种差异均不显著（P＞0.05）。
（2）与对照组相比，用EM和粗饲料降解剂联合处理的油菜秸秆饲喂锦江黄牛有提高日粮CP（P=0.06）、能量（P=0.06）与ADF（P=0.06）的全消化道表观消化率的趋势，但不影响日粮NDF的消化率。
上述结果提示：在本试验条件下，经过不同微贮制剂处理油菜秸秆饲喂肉牛，有改善其生产性能的作用，其中以A+C试验组即油菜秸秆经过EM和粗饲料降解剂联合处理后，饲喂锦江黄牛效果最好，并可提高其GE、CP、ADF的表观消化率。
关键词：微贮制剂；油菜秸秆；锦江黄牛；生产性能；消化率中图分类号：S816.32 文献标识码：A 文章编号：1008-6137（2017）01-0001-030 引言油菜是我国重要的油料作物之一，其副产物——油菜秸秆产量每年约为1500～1800万t。
目前，对油菜秸秆的处理方式仍以焚烧为主要手段，不仅造成资源的浪费，而且对环境构成了严重的威胁。
在饲料资源日益紧缺的形势下，如何充分利用这一资源，提高资源的利用率，发展包括肉牛在内的反刍动物生产具有重要意义。
本课题旨在探讨不同微贮制剂处理油菜秸秆对锦江黄牛生产性能影响，为充分科学利用油菜秸秆，发展肉牛养殖业提供技术依据。
动物营养学报2012，24(3)：557-562C hi n es e J ournal oy A ni m al N ut ri t i ondoi：10．3969／i．i s sn．1006-267x．2012．03．024功能性寡糖对锦江黄牛瘤胃发酵及微生物生长效率的影响戈婷婷瞿明仁。
张晖黎观红钟志勇刘光斌(江西农业大学，南昌330045)摘要：本试验旨在研究不同水平的功能性寡糖对锦江黄牛瘤胃发酵及微生物生长效率的影响。
采用体外批次培养法，在精粗比为20：80的基础饲粮中添加甘露寡糖、果寡糖和大豆寡糖。
各组功能性寡糖的添加水平分别为0(对照组)、0．80％、1．00％和1．20％。
结果表明，饲粮添加功能性寡糖对锦江黄牛瘤胃pH无显著影响(P>0．05)，但显著增加培养液挥发性脂肪酸和茵体蛋白浓度(P<0．05)；每日微生物氮产量也有提高的趋势，但差异不显著(J P>0．05)。
建立微生物生长效率与功能性寡糖添加水平之间的二次曲线模型，当甘露寡糖添加水平为1．17％时。
微生物生长效率最大，为59．72g／kg；当大豆寡糖添加水平为1．03％时，微生物生长效率最大，为59．50g／kg。
综合本试验结果，功能性寡糖的添加水平在1．00％～1．20％之间更有利于锦江黄牛瘤胃微生物的生长。
关键词：功能性寡糖；体外培养；锦江黄牛；微生物生长效率中图分类号：S823文献标识码：A文章编号：1006-267X(2012)03旬557旬6功能性寡糖也叫非消化性寡糖(N D O S)，是指不被人和动物肠道吸收，并能促进有益菌的增殖，有益于肠道健康的一类寡糖。
功能性寡糖被认为是一种具有多种功能的营养生理活性物质，由于其难以被动物体内分泌的消化酶分解，因此在畜牧业中被看作是一种很有开发潜力的绿色饲料添加剂。
寡糖作为新型的饲料添加剂，是近年来国内外学者关注的热点。
许多报道已表明功能性寡糖能提高猪、家禽和水产动物的生产性能【l。
“高温条件下不同日粮对肉牛养分消化代谢的影响”
研究方案
实验目的：研究在高温条件下不同日粮配方对锦江黄牛养分消化代谢的影响。
试验方法：
1、材料与方法
1.1 实验动物及分组设计10头12月龄，300kg左右的锦江黄牛，按体重、年龄等相似的原则分成两个组别，分别为日粮1组，日粮2组，每组5头。
1.2 试验时间及地点
本实验于2011年8月11日-2010年8月18日在江西省高安裕丰农牧有限公司完成，其中分预试期4天，正式期4天。
1.3消化代谢试验
全收粪法、全收尿法。
收集各组实验牛连续4天的粪便，各组选取3头收集连续4天的尿液。
1.3.1 饲料的采集与制备
在试验期间随机五次采集试验用的6种混合精料各200 g，每组的混在一起各1000g，带回实验室用烘箱65摄氏度烘干，制成半干样品，经40目粉碎后努封保存。
在试验过程中试验牛吃的每批稻草采集干草500 g，带回实验室用烘箱65摄氏度烘干，制成半干样品，经40目粉碎后努封保存。
在正试期的每天早上分别收集各试验牛的全部剩料，称重后放入已编号样品袋中，阴干后常温保存，其余步骤同上。
1.3.2粪尿的采集与制备
粪样的收集：每头牛每天24小时的粪样随时收集（每天收集的时间段为早上晨饲时到第二天晨饲前止），每次收集的粪便放入各自编好号的塑料桶中并及时盖好桶盖，防止混入其它杂物。
尿样的收集：收集尿液用中国农大莫放团队改进发明的收尿装置进行收集，每头牛每天24小时的尿样全部收集（每天收集的时间段为早上晨饲时到翌日晨饲前止），尿样通过集尿袋全部用导管导入集尿壶中。
粪样的保存与制备：消化代谢试验的每头牛每天收集的全部粪便称总重并做好记录，称重完之后把粪便拌均匀。
取50g入装一斤蜂蜜的广口塑料瓶中，加入浓度为10%的H2SO425ml，固定鲜粪中的氮，4。
C下保存；取250g，晒干，回潮，待实验结束后带回实验室后烘箱65。
C烘干，测定初水分，制成风干粪样，把同一头牛4天粪样在粉碎机中粉碎拌均匀，以备分析。
尿样的保存与制备：尿液准确称量记录，并用量筒准确测定其体积。
用6~8层粗纱布过滤，量取每头牛每天排尿总量的1/10左右置于矿泉水瓶中，按每100ml 尿液加入10%的H2SO410ml，瓶口用2到3层塑料薄膜包好，再拧紧瓶盖，达到密
闭的效果，置于-20。
C下保存。
待实验结束后，带回实验室测定尿中营养物质含量。
（然后搅拌均匀，取总尿量的1%作为尿样，放入瓶中，加入一定量的硫酸固氮和防腐，放入冰箱内保存。
实验结束，将试验期内的尿样常温下解冻、混匀后取样测定尿中的氮、能量、钙磷等含量。
）
1.4测定的指标与方法
1.4.1 牛舍环境温湿度记录
试验期间在试验牛群的中间和两端与牛体等高处(距地面约1.5 m)挂温湿度表，记录07:00、14:00及20:00的温度和相对湿度。
根据Drackley等方法计算牛舍环境温湿指数(temperature humidity index, THI)，THI=td-(0.55-0.55RH )× (td-58)，其中td为华氏温度，RH为相对湿度(td=T*9/5+32)。
当牛舍THI<72时表示无热应激；72≤THI≤79时为轻度热应激；79<THI≤88时为高度热应激；THI>88时为重度热应激。
1.4.2饲料及粪样的常规指标检测与方法：
干物质（DM）、CP、有机物（OM）、ADF、NDF、NFE根据杨胜（1993）描述的方法测定。
尿中总氮量得测定，吸取3 ml尿液样注入凯氏烧瓶中，加入10 ml浓硫酸和2 ml10%的硫酸铜溶液，烧灼混合液，直至液体呈淡蓝色或无色，而后继续烧灼约1h，冷却，其它步骤同初蛋白的测定。
饲养样品、粪样以风干物形式采用全自动氧氮侧热议进行测定总能、粪能，尿样取10 ml与以知能值的塑料袋50。
C烘干后再测。
部分指标的计算方法
养分表观代谢率=（饲料中某养分含量-粪尿中某养分含量）/饲料中某养分含量食入总能(MJ/d)=试验牛每日饲喂总能量—剩料总能量
消化能(MJ/d)=食入总能—粪能
代谢能(MJ/d)=食入总能—粪能—尿能—甲烷能
总能消化率(%)=(消化能/食入总能)*100
总能代谢率(%)=(代谢能/食入总能) *100
消化能代谢率(%)=(代谢能/消化能) *100
进食氮(g)=食入氮=(试验牛每日饲喂总蛋白—剩料总蛋白)/6.25
可消化氮(g)=食入氮—粪氮
沉积氮(g)=消化氮—尿氮
氮表观消化率(%)=(可消化氮/进食氮) *100
试验准备材料：
1、10%的H2SO4 10L，买个10L的油壶。
（2瓶就可以了）
2、一斤蜂蜜的广口塑料瓶10个。
3、塑料桶10个，装粪便的放在垃圾桶的垃圾袋80个；牢固的垃圾袋60个；封口袋装大号的一袋。
4、20L油壶8个。
5、温度湿度计1个。
6、台秤两个，一个称料，一个称粪便。
（实验室借）10kg和5kg，精确到g。
7、自行车轮胎8个。
8、大注射器10个。
9、浓硫酸2瓶。
10、矿泉水瓶24个
11、油性MARK三支笔，标签纸10张.
尿的处理采用导尿管收集尿液，即全收尿法。
每日9时左右将一天内收集的尿准确称重并记录。
然后搅拌均匀，取总尿量的1%左右作为尿样，放入瓶中，加入一定量的硫酸固氮和防腐，放入冰箱内保存。
实验结束，将试验期内的尿样常温下解冻、混匀后取样测定尿中的氮、能量、钙磷含量。
