一株产D-海因酶菌株的鉴定及离子束诱变选育

某理工大学《微生物学教程》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（230分，每题5分）1. 微生物有极广的碳源谱，它不论对整个微生物界整体或对个别微生物种来说，都是一致的。

（）答案：错误解析：碳源谱是把所有微生物当作一整体时其可利用的碳源范围，而不是针对某个别微生物种。

2. 当今研究表明：所有的细菌都是肉眼看不见的。

（）答案：错误解析：费氏刺尾鱼菌的细胞长度可以达到200～500μm，是肉眼可见的大型细菌。

3. 转座子可自主复制，因此在不同细胞间传递时不需要载体。

（）答案：错误解析：转座子在细胞内可进行自主复制，但在不同细胞间传递时也需要载体。

4. 呼吸链中的细胞色素系统只能传递电子而不能传递质子。

（）答案：正确解析：呼吸链中的细胞色素系统能传递电子，不能传递质子。

5. 在补体结合试验中，指示系统中的溶血素实为一红细胞的特异抗体。

（）答案：正确解析：补体结合试验中指示系统包括绵羊红细胞和溶血素，其中溶血素是绵羊红细胞的特异抗体。

6. 以明胶作凝固剂的固体培养基中，明胶的含量在2左右。

（）答案：错误解析：以明胶作凝固剂的固体培养基中，明胶的含量在5～12，以琼脂作凝固剂的固体培养基中，琼脂的含量在1～2。

7. 在对厌氧菌进行液体培养时，常在培养基中加入铁屑或铁丝等成分，借以保证它们对无机元素的需要。

（）答案：错误解析：在对厌氧菌进行液体培养时，常在培养基中加入铁屑或铁丝等成分是作为还原剂。

8. 环丝氨酸和青霉素抑制肽聚糖生物合成的机制，都属于代谢类似物对酶的活性中心发生竞争性抑制作用这一类。

（）答案：正确解析：环丝氨酸和青霉素抑制肽聚糖的生物合成是因为代谢类似物对酶的活性中心发生了竞争性抑制。

9. 利用E花结试验（E玫瑰花环试验）就可方便地检测外周血中T 细胞的数目及其比例。

《一株产普鲁兰酶菌的筛选鉴定及其酶学活性研究》一、引言普鲁兰酶是一种重要的工业酶制剂，广泛应用于淀粉糖、酿酒、生物能源等工业领域。

近年来，随着生物技术的不断发展，对普鲁兰酶的来源和性质研究越来越深入。

本文旨在筛选一株高产普鲁兰酶的菌株，并对其进行鉴定和酶学活性研究，为普鲁兰酶的工业化生产提供理论依据。

二、材料与方法1. 材料（1）样品来源：从不同环境样品中采集菌种样本。

（2）培养基：采用淀粉培养基、酵母膏蛋白胨培养基等。

（3）试剂：包括酶活性检测试剂、DNA提取试剂等。

2. 方法（1）菌种筛选：通过平板划线法、富集培养法等方法，从样品中筛选出产普鲁兰酶的菌株。

（2）菌种鉴定：采用形态观察、生理生化试验、分子生物学方法等对筛选出的菌株进行鉴定。

（3）酶学活性研究：通过测定酶活性、酶动力学参数等，研究普鲁兰酶的酶学性质。

三、实验结果1. 菌种筛选结果经过多次筛选和纯化，从采集的样品中成功筛选出一株高产普鲁兰酶的菌株，命名为“XX菌”。

该菌株在淀粉培养基上生长良好，产酶能力强。

2. 菌种鉴定结果通过形态观察、生理生化试验和分子生物学方法对XX菌进行鉴定。

结果显示，XX菌属于一种革兰氏阳性菌，具有较好的耐热性和耐酸性。

通过16S rRNA基因序列比对，发现XX菌与某已知菌种具有较高的相似性，但存在一定的差异。

综合分析表明，XX菌是一种新型的产普鲁兰酶菌株。

3. 酶学活性研究结果通过测定普鲁兰酶的活性、最适pH值、最适温度等参数，发现XX菌产生的普鲁兰酶具有较高的活性，最适pH值为5.0~6.0，最适温度为50℃左右。

此外，该酶的动力学参数Km值和Vmax值也表明其具有较高的催化效率。

四、讨论本研究成功筛选出一株高产普鲁兰酶的菌株XX菌，并对其进行了鉴定和酶学活性研究。

结果表明，XX菌具有较好的产酶能力和酶学性质，为普鲁兰酶的工业化生产提供了新的资源。

同时，对普鲁兰酶的性质研究有助于进一步了解其催化机制和工业应用价值。

一株好氧反硝化细菌的筛选、鉴定及紫外诱变邵颖;陈安徽;董玉玮【摘要】从牛蒡(Arctium lappa L.)根际土壤中分离到1株具有较高反硝化能力的好氧细菌YB000,对该菌株采用生理生化及分子生物学方法进行了鉴定,并且对该菌株进行了以提高反硝化性能为目的的紫外诱变.结果表明,分离自牛蒡根际的反硝化细菌经鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),该菌株于距离30W紫外灯30 cm处照射240 s可获得具有较强脱氮能力且遗传性状稳定的诱变菌株YB004和YB005,其脱氮能力分别达到93.43％、92.03％.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2016(000)013【总页数】5页(P3305-3309)【关键词】好氧反硝化细菌;牛蒡(Arctium lappa L.);根际土壤;筛选;鉴定;紫外诱变【作者】邵颖;陈安徽;董玉玮【作者单位】徐州工程学院食品(生物)工程学院,江苏徐州221008;徐州工程学院食品(生物)工程学院,江苏徐州221008;徐州工程学院食品(生物)工程学院,江苏徐州221008【正文语种】中文【中图分类】X172随着水产养殖业的迅猛发展、含氮工业废水的排放及农业中化肥的过量施用，导致水体氮素含量严重超标而影响水体的使用安全［1，2］。

氮素超标是导致水体富营养化的重要原因之一，生物脱氮可有效去除水体中的氮元素［3］。

传统的生物脱氮包括硝化和反硝化两个过程，反硝化脱氮能将硝酸盐氮或亚硝酸盐氮转化为气态氮，从根本上解决水体中氮素超标的问题。

反硝化细菌是能够引起反硝化作用的细菌，多为异养、兼性厌氧细菌［4］，但近期研究表明，一些微生物在较高的氧分压条件下也能表现出反硝化能力［5-8］。

好氧反硝化作用实现了硝化和反硝化作用的同时进行，不仅简化了生物脱氮流程、降低了投资成分，而且还表现出了传统废水处理方法所无法比拟的优势，如硝化过程无需加碱中和、脱氮效率高、对氨态氮耐受能力强等［9］。

重离子辐照诱变选育纤维素酶高产菌株及其发酵工艺的
研究
重离子辐照诱变选育纤维素酶高产菌株及其发酵工艺的研究
纤维素酶是一种能够水解纤维素的酶，对于纤维素资源的利用具有十分重要的意义。

然而，目前纤维素酶的高产菌株及其发酵工艺仍然存在一些问题。

为此，研究人员利用重离子辐照技术选育高产纤维素酶的菌株，并优化了其发酵工艺，以提高纤维素酶的产量和效率。

重离子辐照是一种强化辐射技术，通过高能量离子的碰撞和电离产生DNA单链断裂和点突变，从而诱发菌株的突变。

研究人员选取了纤维素酶producing Streptomyces sp. S41作为研究对象，进行了重离子辐照，筛选得到了一系列纤维素酶高产菌株。

进一步的研究表明，这些高产菌株的纤维素酶产量相比原菌株提高了2~3倍。

为了进一步提高纤维素酶产量和效率，研究人员对高产菌株的发酵工艺进行了优化。

他们发现，在发酵培养基中添加玉米粉、豆粉和蛋白胨等多种碳源和氮源，可以显著提高纤维素酶的产量和效率。

此外，在发酵过程中，应适当调节发酵温度、pH值和搅拌速度等因素，以优化菌株的生长和代谢过程，从而进一步提高纤维素酶的产量和质量。

总之，重离子辐照技术可以有效地用于纤维素酶高产菌株的诱变选育。

而优化的发酵工艺则可以提高纤维素酶的产量和效率，从而更好地利
用纤维素资源。

未来，这些研究成果有望被应用于实际生产中，为纤
维素酶产业的发展提供支持。

发酵工程复习1.什么是微生物工程？微生物工程也称之为微生物发酵工程。

微生物工程学是以微生物学、生物化学和生物工程学为基础，又与工程技术紧紧联系在一起而建立的一个完整的科学与工程技术体系。

它是研究利用微生物（包括“工程微生物”在内）及其代谢产物与工艺生产过程原理的科学。

2.了解微生物工程发展的4个阶段及每个阶段的特点？（1）微生物工程的孕育时期——天然发酵（或自然发酵）；（2）第一代微生物发酵技术——纯培养技术的建立，柯赫，发明固体培养基建立了纯培养；（3）第二代（近代）微生物发酵技术——深层培养技术，如抗生素工业生产带动了生化工程的建立；（4）第三代微生物发酵技术——微生物工程，主流发展方向为工程菌；（5）第四代微生物发酵技术——微生物工程。

3.微生物代谢产物的三种类型？（1）初级代谢产物：微生物通过代谢活动所产生的、自身生长和繁殖所必需的物质。

（2）次级代谢产物：微生物生长到一定阶段才产生的化学结构十分复杂、对该微生物无明显生理功能，或并非是微生物生长和繁殖所必需的物质。

（3）转化产物：以外源物质为底物，通过微生物细胞的酶或酶系对底物某一特定部位进行化学反应，使它转变成结构相类似但更具有经济价值的化合物。

4.工业菌种必须满足的条件是什么？（1）生产力：能在廉价的培养基上迅速生长，所需的代谢产物的产量高，其它代谢产物少（2）操作性：培养条件简单，发酵易控制，产品易分离（3）稳定性：抗噬菌体能力强，菌种纯粹，不易变异退化（4）安全性：是非病源菌，不产有害生物活性物质或毒素5.掌握实验室及工厂常用的微生物培养方法。

（1）固体培养实验室常见的固体培养方法；生产中常见的固体培养基：小麦麸皮（2）液体培养实验室常见的液体培养：试管液体培养，浅层液体培养，摇瓶培养，发酵罐培养；生产中常见的液体培养：浅盘培养，发酵罐深层培养，连续培养（恒化培养：通过控制培养基中营养物的浓度，使微生物在低于最高生长速率的条件下生长繁殖；恒浊培养：可控制微生物在最高生长速率与最高细胞密度的水平上生长繁殖，达到高效率培养的目的；多级连续培养；固定化细胞连续培养），补料分批培养，混合培养。

一株产植酸酶酵母菌株的分类鉴定与诱变育种马忠友;程飞;邱亮;包佳源;樊美珍;黄勃【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2011(037)004【摘要】根据酵母形态学特征、生理生化特性和ITS区序列的测定结果把产植酸酶酵母RCEF4907菌株分类鉴定为东方伊萨酵母Issatchenkia orientalis.利用亚硝基胍、紫外线、亚硝酸和氯化锂4种诱变剂对酵母RCEF4907菌株进行复合诱变处理,将经过处理的菌悬液用植酸钙琼脂平板进行初筛,然后取发酵上清液在37℃,pH2.5的条件下,利用钒钼酸铵比色法测定植酸酶活力进行复筛.经过多次诱变处理后,最终从大量的突变菌株中筛选出高产植酸酶的G3297突变株,其植酸酶活性达到409 U/mL,是出发菌株RCEF4907的5.76倍.【总页数】5页(P21-25)【作者】马忠友;程飞;邱亮;包佳源;樊美珍;黄勃【作者单位】安徽农业大学安徽省微生物防治重点实验室,安徽,合肥,230036;安徽科技学院生命科学学院,安徽,蚌埠,233100;安徽科技学院生命科学学院,安徽,蚌埠,233100;安徽科技学院生命科学学院,安徽,蚌埠,233100;安徽农业大学安徽省微生物防治重点实验室,安徽,合肥,230036;安徽农业大学安徽省微生物防治重点实验室,安徽,合肥,230036;安徽农业大学安徽省微生物防治重点实验室,安徽,合肥,230036【正文语种】中文【相关文献】1.一株产庆大霉素B的绛红小单孢菌的分类鉴定 [J], 王飞;高辉;涂国全2.一株产黑色素链霉菌的分类鉴定 [J], 赵昌会;叶德赞3.一株产植酸酶菌株的分离鉴定及其产酶特性 [J], 李丽娟;张殿昌;苏天凤;龚世园;江世贵4.一株产虾青素酵母菌株的鉴定 [J], 马爱瑛;张琇;刘晓飞5.一株产紫杉醇的丝状真菌的系统分类鉴定 [J], 程龙;马奇明;陶冠军;陶文沂;王荣明;杨静;过晓磊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

一株产纤维素酶真菌的筛选和诱变蒋琼凤; 张金金; 周斌; 谢达平; 黄光文【期刊名称】《《湖南农业科学》》【年(卷),期】2010(000)011【总页数】4页(P24-27)【关键词】纤维素酶; 菌种选育; 产纤维酶真菌【作者】蒋琼凤; 张金金; 周斌; 谢达平; 黄光文【作者单位】湖南农业大学生物科学技术学院湖南长沙 410128; 湖南科技学院生命科学与化学工程系湖南永州425100【正文语种】中文【中图分类】Q933纤维素是植物材料的主要成分，也是地球上最丰富的可再生资源，它曾被指望用于解决人类的食品、能量和环境问题，但目前这些生物量除了用于燃烧和造纸等以外很少有其它的用途[1]。

将纤维素物质转变为糖、乙醇、甲烷等容易利用的小分子有机物是国际上重大课题之一[2]。

国内外科研工作者已先后筛选和培育了许多产纤维素酶的菌种，其中木霉属菌株产生的纤维素酶活力较高。

由于其粗酶制剂中含有较高活力的酶，因而成为当前生产上应用较多的菌种。

但与淀粉酶和蛋白酶相比，其生产规模小，酶的活力也较低，酶解效率不高[3-4]。

因此，筛选酶活力高且稳定的野生菌株，以及对筛选的菌株进行诱变处理提高其酶活力具有重要的现实意义。

笔者拟从自然环境筛选具有较好产纤维素酶活力的野生菌株，诱变出酶活提高较大的菌株。

1 材料与方法1.1 材料1.1.1 土样菜地、造纸厂、枯木、竹林土、树林树叶土，牛粪、腐烂的谷壳和秸秆下的腐殖土，废弃蘑菇培养基、苗圃土。

1.1.2 试剂 0.1 mol/L、pH值 4.8柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液：称取柠檬酸21.014g、柠檬酸钠29.412 g溶于500 mL去离子水中，待溶解之后定容至1 000 mL，再用pH计调节其pH值至4.8。

羧甲基纤维素钠（CMC-Na）：称取10 g CMCNa 溶于 500 mL、pH 4.8（0.1 mol/L）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中，待溶解之后用缓冲液定容至1 000 mL。

微生物学大实验实验指导编者：生物技术教研室2007.3目录实验一酵母菌的培养与分离‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥2实验二酵母菌的鉴定‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥7实验三酵母菌耐受能力的测定‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥19实验四酵母菌发酵工艺条件的优化‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥22实验五耐高温酵母菌株的诱变选育‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥24实验六酿酒酵母细胞固定化与酒精发酵‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥‥27耐高温酒精酵母菌的选育及发酵条件的研究实验一酵母菌的培养与分离一、实验目的学习培养和分离酵母菌的技术和方法二、基本原理大多数酵母菌为腐生，其生活最适pH为4.5－6，常见于含糖分较高的环境中，例如果园土、菜地土及果皮等植物表面。

酵母菌生长迅速，易于分离培养，在液体培养基中，酵母菌比霉菌生长得快。

利用酵母菌喜欢酸性环境的特点，常用酸性液体培养基获得酵母菌的培养液（这样做的好处是酸性培养条件则可抑制细菌的生长），然后在固体培养基上用划线法分离之。

三、实验主要内容和要求（一）本次实验的方案由同学们自己制定，实验包括：1．马铃薯葡萄糖培养基, 乳酸马铃薯葡萄糖培养液的配制。

2.菌株的筛选,根据一定的生产目的并从特定的样品筛选出高产酒精的适宜的酵母菌株。

3.酵母菌的分离,要求接种一次, 28-30℃，培养24小时，转接一次，28-30℃，培养24小时，并用镜检的方法独立判定所分离菌株是否为酵母菌。

4.用划线分离法对酵母菌进行纯化，要求每组挑取单个菌落，连续划线分离4代，镜下为单一纯菌株，每组扩繁10支斜面菌种，备用。

四、实验的准备1、甘蔗、成熟葡萄或苹果等果皮、0.1%美蓝染液、1ml的无菌吸管、无菌培养皿等。

2、马铃薯葡萄糖琼脂培养基：原料：马铃薯（200克）、葡萄糖（20克）、琼脂（15-20克）、蒸馏水（1000ml）。

配制方法：（1）先将马铃薯去皮，切片，称200克并加蒸馏水1000ml，煮沸半小时，用纱布过滤，补足蒸馏水量至1000ml ，制成20%的马铃薯汁。

离子束诱变木聚糖酶产生菌AspergillusnigerA3筛选方法的比较研第12卷第2期2003年4月激光生物学报A CTA LA SERB I OLO GY S I N I CAV o l.12N o.2A p r.2003离子束生物工程?离子束诱变木聚糖酶产生菌(A sp erg illus n ig er A3)筛选方法的比较研究Ξ李市场1,白爱枝2,姚建铭1,潘仁瑞1,余增亮1(1.中国科学院离子束生物工程学重点实验室,等离子体物理研究所,中国安徽合肥2300312.内蒙古大学,中国内蒙古,呼和浩特010021)摘要:木聚糖酶产生菌株的初筛方法主要分为平板法和液体发酵法。

它们都有一定的优点和不足。

找出适宜于离子束诱变育种的初筛方法,是必要而且是必须的。

本文就木聚糖酶产生菌的几种初筛方法做了比较研究,以便找出适宜于离子束诱变高产木聚糖酶菌株育种的初筛方法。

关键词:离子注入;木聚糖酶;透明圈;摇瓶发酵中图分类号:Q691文献标识码:A文章编号:100727146(2002)022*******A Com para tive Study on Severa l Screen i ng M ethods to H ighXylana se-produc i ng Stra i n s by Ion I m plan ta tionL I S h i2chang1,B A I A i2z h i2,YA O J ian2m ing1PA N R en2ru i1,YU Z eng2liang1(1.Key L abo rato ry of I on Beam B i oengineering of Ch ineseA cadem y of Sciences,H efei230031,A nhu i,Ch ina;2.Inner M ongo lian U n iversity,H uheho t010021,N ei m enggu,Ch ina)Abstract:Screen ing m ethods of h igh xylanase-p roducing strain s have a p late iso lati on techn ique and shake-flask ferm en tati on techn ique.It is necessary and indispen sab le fo r u s to find ou t an op ti m al screen ing m ethod.In th is article,several screen ing techn iques w ere studied,in o rder to find ou t a good m ethod that fits fo r xylanase2 p roducing strain s by I on i m p lan tati on.Key words:i on-i m p lan tati on,xylanase,the tran sparen t halo s,shake-flask cu ltu res半纤维素是一种异质多糖,在植物性材料中占15-30%,是陆生植物细胞壁的一种主要组分[1]。