２１Ｏ 江苏农业学报（Ｊｉａｎｇｓｕ ｏｆＡｇｒ．Ｓｃｉ．），２００８，２４（２）：２１０～２１２
转基因棉花对斜纹夜蛾生长发
羧酸酯酶活性的影响
杨进， 杨益众， 包杨滨， 陆佩玲
（扬州大学园艺与植物保护学院，扬州２２５００９） 畜菩 罔、 养指标及ｃｔ－ＮＡ
关键词：转基因棉花；斜纹夜蛾；营养指标；生长发育；０【 ＮＡ羧酸酯酶
中图分类号：￥４３３．４￥５６２ 文献标识码： Ａ 文章编号： １０００￣．４４０（２００８）０２－０２１０－０３
Ｅｆｆｅｃｔｓ Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ Ｃｏｔｔｏｎ Ｖａｒｉｅｔｉｅｓ ｏｎ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ａ－ＮＡ
Ｃａｒｂｏｘｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｐｒｏｄｅｎｉａ ｌｉｔｕｒａ（Ｆａｂｒｉｃｉｕｓ）
ＹＡＮＧ Ｊｉｎ， ＹＡＮＧ Ｙｉ—ｚｈｏｎｇ， ＢＡＯ Ｙａｎｇ—ｂｉｎ，ＬＵ Ｐｅｉ—ｌｉｎｇ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ ２２５００９，Ｃｈｉｎａ）
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｃｏｔｔｏｎ ｖａｒｉｅｔｙ；Ｐｒｏｄｅｎｉ ｌｉｔｕｒａ（Ｆａｂｒｉｃｉｕｓ）；ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ ｉｎｄｅｘ；ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ；０【－ ＮＡ ｃａｒｂｏｘｙｔｅｓｔｅｒａｓｅ
斜纹夜蛾Ｐｒｏｄｅｎｉａ ｌｉｔｕｒａ（Ｆａｂｒｉｃｉｕｓ）又名莲纹夜蛾，属
鳞翅目夜蛾科，为世界性分布的多食性害虫，在我国各地均
有分布，尤以长江流域受害较重。受害农作物主要有棉花、
烟草、薯类、豆类、桑、瓜类、蔬菜等９９科２９０多种植物…。
随着上世纪９０年代后期棉花种植品种的多元化和蔬菜作物
设施栽培的推广，斜纹夜蛾等原先在蔬菜作物上常发性的害
虫开始向棉田转移，常造成棉花叶片的百孔千疮，严重影响
棉花学报Ｃｏｔｔｏｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２００２，１４（６）：３３６～３３９
棉蚜羧酸酯酶同工酶ｃＤＮＡ片段的基因克隆与序列分析
李飞，韩召军 ，王荫长
（南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室，南京２１００９５）
摘要：采用简并引物和降落ＰＣＲ技术，克隆了棉
蚜２个羧酸酯酶同工酶基因的ｃＤＮＡ片段，分别
命名为Ａｇ．ｅｓｔｌ和Ａｇ．ｅｓｔ２。其中Ａｇ．ｅｓｔｌ为
４７９ ｂｐ，编码１６Ｏ个氨基酸；Ａｇ．ｅｓｔ２为４７６ ｂｐ，
编码１５９个氨基酸。序列同源分析表明，ＰＣＲ扩
增获得的Ａｇ．ｅｓｔｌ和Ａｇ．ｅｓｔ２基因与其他昆虫
的羧酸酯酶具有较高的相似性。２个羧酸酯酶同
工酶基因ｃＤＮＡ片段的ＧｅｎｅＢａｎｋ登录号分别
为：ＡＦ５０２０８３、ＡＦ５０２０８４。
关键词：棉蚜；羧酸酯酶；基因克隆；序列分析
中图分类号：￥５６２．０３５．３ 文献标识码：Ａ
文章编号：１００２—７８０７（２００２）０６—０３３６—０４
Ｃｌｏｎｅ ａｎｄ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ０ｆ
Ｃａｒｂ０ｘｖｌｅｓｔｅｒａｓｅ Ｇｅｎｅ ＣＤＮＡ
Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｆｒｏｍ Ａｐｈｉｓ ｇｏｓｓｙｐｉｉ
Ｇｌｏｖｅｒ
ＬＩ Ｆｅｉ，ＨＡＮ Ｚｈａｏ—ｊｕｎ，ＷＡＮＧ Ｙｉｎ—ｃｈａｎｇ
（Ｋｅｙ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ ａｎｄ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ
ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｄｉｓｅａｓｅｓ ａｎｄ Ｐｅｓｔｓ， Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００９５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｗｏ ｃａｒｂｏｘｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ ｇｅｎｅ ｅＤＮＡ
ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｃｌｏｎｅｄ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ ｆｒｏｍ ｃｏｔｔｏｎ
ａｐｈｉｄ，Ａｐｈｉｓ ｇｏｓｓｙｐｉｉ Ｇｌｏｖｅｒ ｗｉｔｈ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｅ
溴氰菊酯和辛硫磷亚致死剂量对甜菜夜蛾酶活性的影响
张元建;王真;竹傲;朱福兴
【摘 要】研究了溴氰菊酯和辛硫磷亚致死剂量处理后,甜菜夜蛾羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、乙酰胆碱酯酶(ACHE)的活性变化规律,结果表明:经辛硫磷亚致死剂量5.20 mg/kg和溴氰菊酯亚致死剂量0.73 mg/kg处理后,甜菜夜蛾体内Care和GST均被不同程度的抑制,辛硫磷处理后24 h时与对照相比AChE活性下降了24.87%,而溴氰菊酯对AChE活性没有明显抑制作用.
【期刊名称】《天津农业科学》
【年(卷),期】2009(015)005
【总页数】4页(P37-40)
【关键词】甜菜夜蛾;亚致死剂量;羧酸酯酶;谷胱甘肽S-转移酶;乙酰胆碱酯酶
【作 者】张元建;王真;竹傲;朱福兴
【作者单位】华中农业大学,植物科学技术学院,湖北,武汉,430070;华中农业大学,植物科学技术学院,湖北,武汉,430070;华中农业大学,植物科学技术学院,湖北,武汉,430070;华中农业大学,植物科学技术学院,湖北,武汉,430070
【正文语种】中 文
【中图分类】S433.5;Q965.9
甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)，属鳞翅目夜蛾科灰翅夜蛾属（曾归贪夜蛾Laphygma），其别名贪夜蛾，是一种世界性杂食性害虫，极易产生抗药性，防治难度较大[1]。杀虫剂亚致死剂量处理昆虫后，除了对昆虫的抗性、行为以及生长发育等产生影响外，还会对昆虫体内的重要靶标酶如乙酰胆碱酯酶（AChE）、羧酸酯酶（CarE）以及谷胱甘肽S-转移酶（GST）等产生一定的影响[2]。本试验通过研究溴氰菊酯和辛硫磷剂亚致死剂量对甜菜夜蛾体内羧酸酯酶、谷胱甘肽S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活性的影响，为深入研究甜菜夜蛾的抗性以及科学合理用药提供理论依据。
1.1 供试昆虫
供试甜菜夜蛾采自湖北，在实验室内人工饲养多代。在光周期L14:D10，温度（27±1）℃，湿度70%的条件下饲养，幼虫用人工饲料饲养[3]，所用容器为24孔盘和120孔盘，成虫羽化后放置于罩有白色纱布的交配器中用5%的白糖水饲喂，白色纱布供成虫产卵。
ＯＣＣＵＰＡＴＩＯＮ126 2010 8 自１９９３年，瑞典发现ＤＤＴ对家蝇具有明显滞留杀虫作用以来，各类农药在世界范围内广泛应用于农业和卫生害虫的防治，对除害灭病确保人体健康起到了非常显著的作用，也曾经挽救过成千上万人的生命。但是许多用巨额开发出的新型杀虫剂由于使用不当，几年中就导致药效减退或是失效现象，这不仅直接影响了杀虫剂的工业发展前途，而且威胁到人类的健康，日益引起世界各国的重视。在过去的几年中，Ｒａｔｈｍａｎ等人做了四种品系鸟蝇科拟寄生虫的生测实验，发现杀线威和灭多威对抗性品系及敏感品系的最大抗性比分别达２０和２１；高希武等人发现，北京地区马连洼种群对抗蚜威和未曾使用过的灭多威、呋喃丹均产生了高抗性，抗性倍数为３９～２４５倍。可见昆虫对部分杀虫剂的抗性已很强，研究昆虫的抗药性机理及提出可行的解决办法成为当务之急。一、抗药性的产生机理关于昆虫抗药性的产生机理分为选择学说和诱变学说。选择学说认为昆虫对杀虫剂的抗性发展是昆虫在杀虫剂的选择下，带有抗性基因的个体存活下来衍繁后代的结果；诱变学说认为是昆虫种群中某些个体的抗性基因并不是先天存在的，而是由于杀虫剂的直接作用，使得种群中的某些个体发生了突变，因而产生了抗性基因。所以他们认为昆虫的抗药性是一种后适应现象，杀虫剂不是选择剂而是诱变剂。但是，无论是选择学说还是诱变学说，在抗药性的形成是由于杀虫剂作用的结果这一点上是相同的。昆虫的抗药性机理大致可分为行为抗药性和生理生化抗药性。行为抗性国内外研究均较少，而对生理生化抗性研究相对较多。关于昆虫的生理生化抗性主要有以下三个方面：表皮穿透作用的降低，代谢解毒作用的加强，靶标敏感性降低。 1.表皮穿透作用的降低降低穿透速率的原因至今尚不完全清楚，Ｓａｉｔｏ认为抗三氯杀螨醇的螨对该药穿透速率较慢是由于几丁质较厚引起的，Ｖｉｎｓｏｎ则认为抗ＤＤＴ的烟芽夜蛾幼虫，ＤＤＴ穿透较慢是由于凡丁质内蛋白质与脂类物质较多而骨化程度较高而引起的。2.代谢解毒作用的增强抗性昆虫中代谢解毒作用增强，它是抗性昆虫的主要抗性机制，代谢解毒作用又分为氧化代谢和水解代谢。氧化代谢是由多功能氧化酶ＭＦＯ催化的，这是有关抗性最重要的解毒酶。因为它对多种杀虫剂都能起降解作用（氧化或羟化作用），因而它也是各种药剂间产生交互抗性的原因。对氧化酶类的多功能氧化酶（ＭＦＯ）而言，抗性个体中活力升高。Ｒ．Ａ．Ｍｏｒｔｏｎ等人将果蝇对马拉息昂的敏感系与抗性系做了比较，发现高水平的ＭＦＯ与果蝇对该药的抗性增长紧密相关。杀虫剂的水解代谢主要由酯酶（ＥＳＴ）引起，羧酸酯酶是最重要的一种水解酶，酯酶活性增加，水解代谢增强。加拿大学者Ｄｏｗｎｅ和Ｗａｌｋｅｒ （１９８７），在研究马拉松抗性库蚊种群代谢时发现，羧酸酯酶的活性是敏感种群活性的５５倍，淀粉电泳显示出羧酸酯酶高峰是敏感种群的６倍；Ｐｒａｂｈａｋａｒａｎ等研究了德国蟑螂复合抗性品系（抗氨基甲酸酯类和抗有机磷）的ＥＳＴ同工酶，其Ｅ５、Ｅ６、Ｅ７、Ｅ８比敏感品系高２～５倍。3.靶标敏感性降低靶标抗性是大多数昆虫对杀虫剂的抗性的重要机理之一。氨基甲酸酯、拟除虫菊酯等种类杀虫剂都可作用于神经兴奋传导过程，作用于各自的标靶物质。大量的实验证据表明，拟除虫菊酯和滴滴涕的主要毒理靶标是钠通道，它们导致钠通道的持续开放，从而产生神经毒性。Ｎａｒａｈａｓｈｉ研究表明拟除虫菊酯除影响Ｎａ＋通道外，还可作用于中枢系统谷氨酸（Ｇｌｕ）和γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）递质信号系统。昆虫对化学杀虫剂的抗性产生机理及防治对策文/刘 艳摘
