山楂片中黄酮类物质的提取与检测

山楂叶中黄酮类提取工艺与质量标准的研究一、实验目的1 掌握从山楂叶中提取总黄酮的原理、方法及操作要点。

2掌握正交试验的原理及方法。

3 掌握UV含量测定、TLC的原理和方法。

二、实验原理利用正交试验法筛选最佳提取工艺，以总黄酮量为指标，芦丁为对照品进行含量测定，以得出的最佳工艺做验证实验，TLC的结果做质量标准的研究。

三、材料与仪器材料：山楂叶、芦丁标准品、聚酰胺板试剂：95%乙醇、甲酸、NaOH、NaNO2、Al(NO3)3、AlCl3仪器：UV2550紫外可见分光光度计(日本岛津)、循环水式真空泵、旋转蒸发仪、抽滤装置、圆底烧瓶、冷凝管、层析缸、电子天平四、实验步骤1 山楂叶总黄酮的提取用剪刀将干燥的山楂叶剪碎，准确称取5.0g置于烧杯中，称取9份用来做正交试验，根据正交试验要求加入一定浓度、体积的乙醇回流提取一定时间。

趁热抽滤，用50ml 50%乙醇洗涤，合并滤液，减压浓缩至体积小于100ml，用60%乙醇定容至100ml，作为待测液。

2 标准曲线的制备将芦丁于120℃干燥至恒重，精密称取芦丁标准品9.28mg，用60%乙醇溶解，定容于50ml，得浓度为0.186mg/ml芦丁标准液。

准确吸取芦丁标准液0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml于25ml容量瓶中，每瓶加去离子水至6ml，加5% NaNO2溶液1ml，摇匀，放置6min 后加入10% Al(NO3)3溶液1ml，摇匀，放置6min后加入4%NaOH溶液10ml，去离子水定容，摇匀，15min后于500nm处测定吸光度A，得芦丁含量与A之间的回归方程。

3 山楂叶总黄酮的测定准确吸取待测液0.4ml于25ml容量瓶中，步骤同上，测定其在500nm 处吸光度，计算每组山楂叶中总黄酮含量。

算出正交试验中的K和R 值，从而得出最佳工艺。

4 验证实验根据最佳工艺，做验证实验，提取、含量测定方法如上。

5 TLC鉴定吸附剂：聚酰胺板展开剂：乙醇-甲酸-水（4:0.01:1 v/v/v）以最佳工艺提取出的溶液为供试品溶液，另取配好的芦丁对照品溶液各2-3μl，分别点于同一聚酰胺板上，以乙醇-甲酸-水（4:0.01:1 v/v/v）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，热风吹干，置紫外光灯(365nm)下检视。

大山楂丸中总黄酮的含量测定【摘要】目的建立大山楂丸中总黄酮的含量测定方法。

方法采用分光光度法，以槲皮素为对照品，对其进行络合显色，在510 rnn波长处测定吸收度，从而测定大山楂丸中总黄酮的含量。

结果线性范围在0.020 004〜0.100 02mg • ml-1 (r=0. 999 3)之间，平均回收率为 96. 02%，RSD= 1.22% (n=5 )。

结论该法简便易行、重现性好、结果可靠，可用于该制剂的质量控制。

【关键词】大山楂丸总黄酮分光光度法Abstract：ObjectiveTo establish ultraviolet spectrophotometry for the content determination of Total Flavones in DashanzhaPill. MethodsQuercetin was selected as reference material, and the samples were determined at 510 nm. ResultsThe linear range for quercetin was 0.020 004 〜0.100 02 mg • ml-1 (r= 0.999 3). The recovery rate was 96.02%; RSD= 1.22% (n=5 ). ConclusionThis method is easy to handle with good accuracy and reproducibility, and issuitable for the quality control of Dashanzha Pill.Key words： Dashanzha Pills; Total Flavones; Spectrophotometry大山楂丸由山楂、神曲、麦芽组成，具有开胃消食的功能，用丁•食积内停所致的食欲不振、消化不良、脘腹胀闷。

山楂总黄酮提取工艺、提取物活性及指纹图谱研究的开题报告一、研究背景及意义山楂是一种常见的中药材，被广泛地应用于中药制剂和保健品中。

其中，山楂总黄酮是一种主要的有效成分，具有降血压、降血脂、抗氧化等多种生物活性。

因此，开发有效的山楂总黄酮提取工艺，对于提高山楂的利用价值具有重要意义。

目前，山楂总黄酮的提取方法有很多种，如超声波法、酶法、微波法、超临界流体萃取法等。

但是，不同的提取方法会对提取物的活性和质量产生不同的影响。

因此，本研究旨在探究不同工艺条件下山楂总黄酮的提取率、纯度，以及提取物的生物活性，为山楂总黄酮的优化提取提供理论依据。

二、研究内容和方法本研究将采用超声波法、酶法、微波法和超临界流体萃取法四种方法对山楂总黄酮进行提取，并对所得的提取物进行生物活性测试，如抗氧化活性、降血压、降血脂等。

同时，利用高效液相色谱法对不同提取工艺下的山楂总黄酮提取物进行化学成分分析，建立山楂总黄酮的指纹图谱。

三、研究预期成果本研究将探讨不同工艺条件下山楂总黄酮的提取率、纯度，以及提取物的生物活性，建立山楂总黄酮的指纹图谱。

预计能够获得以下成果：1. 不同提取工艺条件下山楂总黄酮的提取率和纯度差异。

2. 不同提取工艺条件下山楂总黄酮提取物的抗氧化、降血压和降血脂等生物活性差异。

3. 建立山楂总黄酮的指纹图谱，为山楂总黄酮的质量控制提供依据。

四、研究意义本研究将为山楂总黄酮的优化提取提供理论依据，同时也能够为山楂总黄酮的生物活性研究提供数据支持。

同时，建立山楂总黄酮的指纹图谱，能够为山楂总黄酮制品的质量控制提供依据，具有很高的实用价值。

机 中离 心 ， 使之快速分相 ， ５ ｍｉ ｎ后取 出 。用 胶 头 滴 管 分 别 吸 取 上、 下相溶液进行分 析 ， 分别测 定上 、 下相体 积 ， 双 水 相 中 山 楂
总黄酮的含量 。 １ ． ５ 山楂 中 总 黄酮 含 量 的测 定
具有 良好 的调节 作用 ； 而且 黄酮 还具有 防癌 的作用 ， 对一 些冠 状 动 脉 心 脏疾 病 相 关 的症 状 有 一 定 的 预 防 作 用 。因 此 这 些 化 合物能够广泛应用 在医 药、 保 健食 品添加剂 和杀虫 剂 等领域 ， 于是在国 内外越来越成为人们研 究的热点。
１ ． ０ ｍＩ 、 ３号 管 中加 人 ２ ． ０ ｍＩ 、 ４号 管 中加 入 ３ ． ０ ｍＩ 、 ５号 管 中
加入 ４ ． ０ ｍＬ 、 ６号 管 中 加 入 ５ ． ０ ｍＩ ， 分别 加入 ５ Ｏ 乙 醇 使 成 ５ ｍＬ； 精密加入 ５ Ｎａ Ｎ Ｏ２ 溶液 ０ ． ３ ｍＩ ， 摇匀 ， 放置 ６ ｍｉ ｎ ； 加 入１ Ｏ Ａｌ （ Ｎ ０３ ） ３ 溶液０ ． ３ ｍＩ ， 摇匀 ， 放置 ６ ｍｉ ｎ ； 加入 １ ｍｏ ｌ ／ Ｉ Ｎａ ＯＨ 溶 液 ４ ｍＩ ； 用５ ０ ％ 乙 醇加 到 １ ０ ｍＬ处 ， 混 合 均匀 。 向 １号 管 中 加 入 ５ Ｎ ａ ＮＯ ｚ 溶液 ０ ． ３ ｍｉ ， 摇匀， 放 置
入 １ ｍｏ ｌ ／ Ｉ Ｎａ Ｏ Ｈ 溶液 ４ ｍＩ ； 用５ ０ 乙 醇 定容 到 １ ０ ｍＩ 处， 混
芦丁对照 品（ 批号 １ ０ ０ ０ ８ ０ — ２ ０ ０ ７ ０ ７ ） 购 自中国食 品药 品检定
研究院 ， 山楂 购 白国药 控股 福 建 有 限公 司 中药 部 。
１ ． ４ 双 水 相 体 系 的配 制 将 一 定 量 的聚 乙二 醇 、 硫 酸铵 、 ３ ｍＩ 粗 提液 ， 加 入 一 部 分 蒸馏水 ， 用０ ． １ ｍｏ ｌ ／ Ｌ 的 Ｎａ ＯＨ 和 ０ ． １ ｍｏ ｌ ／ Ｉ 的 ＨＣ １ 调节 ｐ Ｈ，