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沼泽红假单胞菌培养条件研究【最新】沼泽红假单胞菌培养条件研究摘要:对光合细菌沼泽红假单胞菌(B9)的培养条件及培养基配方进行了研究。
新筛选的培养基配方具有成分少、易配制、价格低的特点。
试验结果表明,沼泽红假单胞菌(B9)是一株较耐低营养的微耗氧的菌株,在500~5000lx光照下能良好生长,最适的生长温度为30e,培养周期为4d。
关键词:光合细菌;沼泽红假单胞菌;培养条件A Study on Conditions of Culture of Photosynthetic BacteriaAbstract:This paper studied on conditions and prescriptions ofculture ofphotosynthetic bacteria with Rhodopseudomonas palustris B9.New media is low cost and very simple. The results showed that suitable conditions of PSB were at 30e,4000~5000lx and 4days.Kew words:photosynthetic bacteria; Rhodopseudomonas palustris; conditions andprescriptions of culture随着光合细菌在水产养殖、污水净化等领域的应用,对光合细菌菌剂的需求量增加,本试验对光合细菌沼泽红假单胞菌(B9)的主要培养条件进行研究,为光合细菌菌剂生产提供可靠依据。
1材料与方法1.1菌种光合细菌(PSB)沼泽红假单胞B9菌株,由沈阳农业大学微生物教研室光合细菌课题组分离提供。
活菌数测定方法,见参考文献[4]。
1.2营养条件对PSB生长的影响按照表1设计培养基配方,配制培养基。
EDTA和微量元素配制成母液。
分装500mL滴流瓶,每瓶400mL,胶塞封口, 121e,灭菌30min。
Chenmical Intermediate ・ ・38 2013年第02期科研开发张浩 白红娟摘要：采用单因素及正交试验考察了光合细菌沼泽红假单胞菌生长及降解黑索今(RDX)的最适宜环境条件。
结果表明：影响沼泽红假单胞菌降解RDX效果的各因素主次关系为：RDX初始浓＞P H＞温度＞接种量；菌体细胞的最佳生长和对RDX的最佳降解条件为：RDX初始浓度为20mg/L，pH 7.0， 温度为30℃， 接种量 20％；在最佳条件下， RDX的去除率可达73％。
关键词：黑索今 沼泽红假单胞菌中图分类号：X 965 文献标识码：A 文章编号: T1672-8114(2013)02-038-06(中北大学化工与环境学院，山西太原，030051)1 引言黑索今（RDX）是毒性较大的炸药，在其制造和装弹过程中排出大量废水污染环境，对人体及动植物均有毒害作用，同时又具有燃烧爆炸危险[1]。
因而，RDX废水需经处理达标后方能排放。
目前处理黑索金炸药废水的方法主要有超临界水氧化法[2]、电化学法[3]、臭氧双氧水法[4]等化学方法。
化学法存在处理费用高、工艺条件复杂、过程不易控制、容易产生二次污染等缺点。
微生物法具有工艺设备简单、耗能少，菌体可综合利用，不产生二次污染等优点。
国内外报道微生物白腐真菌[5]、黑曲霉(Aspergillus niger)[6]、红球菌（Rhodococcus strain DN22）[7]等都可以降解RDX， 通过微生物的代谢来降低其对自然界的危害。
光合细菌(photosynthetic bacteria，PSB) 是具有原始光能合成体系的原核生物的总称。
它们不仅能在厌氧光照条件下以低级脂肪酸、多种二羧酸、醇类、糖类等低分子有机物作为光合作用的电子供体进行光能异养生长，而且沼泽红假单胞菌降解黑索今的实验研究能在黑暗有氧条件下以有机物为呼吸基质进行好氧异养生长[8]。
基于此，国内外对光合细菌进行了广泛的研究，并对农药、TNT、含氯苯酚、氯苯等[9-12]废水做了成功处理。
沼泽红假单胞菌富硒发酵条件的研究刘丽梅;赵红卫;傅春蓉;黄亮;狄姗姗;方为茂【摘要】通过对沼泽红假单胞菌富硒发酵条件的研究,确定最优的富硒培养方式.采用单一因素变量法,利用微波消解与紫外分光光度法测定沼泽红假单胞菌在不同发酵条件下的生物量变化与富硒效果,确定其最佳培养方式.结果表明,最佳富硒培养条件为:培养温度30 ℃,环境硒浓度100 μg/mL,培养基初始pH为7,硒添加方式应为梯度分次添加,添加时间应为培养周期的第3天、第4天.利用得到的富硒菌种,在最优条件下培养7 d后,测得环境硒浓度下降为10.9 μg/mL,硒的转化率为89.1%,菌体富硒量可达到73.54 mg/g(干菌种),其中有机硒含量为97.1%.利用沼泽红假单胞菌生产有机硒具有可行性,富硒菌体可以作为动物饲料添加剂,也可以为人类提供富含有机硒的食品.在以后的实验中,将进一步进行验证和工业化应用.【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2010(030)005【总页数】6页(P96-101)【关键词】沼泽红假单胞菌;富硒;微波消解;紫外分光光度法【作者】刘丽梅;赵红卫;傅春蓉;黄亮;狄姗姗;方为茂【作者单位】四川大学,化学工程学院,四川,成都,610064;四川大学,化学工程学院,四川,成都,610064;四川大学,化学工程学院,四川,成都,610064;四川大学,化学工程学院,四川,成都,610064;四川大学,化学工程学院,四川,成都,610064;四川大学,化学工程学院,四川,成都,610064【正文语种】中文【中图分类】Q939.97以微生物为载体富集人体及动物所必需的微量元素以求有机形态、制造成本较低廉而富有多种营养的微量元素产品越来越引起人们的关注。
研究表明,许多光合细菌具有一定的耐硒和富硒能力,如深红红螺菌(Rhodospirillum rubrum)、沼泽红假单胞菌(Rhodopseudom onas palustris)等[1-4]。
1.8mm ol ΠL Mg2+,20ng 模板DNA ,ddH 2O 12.55μL。
图3引物s298对居群A8的扩增结果1~10为居群A8的10个样品,M 为DNA M arker 。
Fig.3PCR am plified patterns by primer s298in 10sam ples from A81~10are the codes of sam ples ,M is DG L 2000DNA marker.3讨论RAPD 分子标记技术基于PCR 反应,受反应条件和扩增程序变化以及物种不同的影响。
本试验结果证明,采用不同的浓度组合对星星草的RAPD -PCR 扩增结果差异很大。
Mg 2+浓度是影响PCR 结果的重要变量之一。
Taq DNA 聚合酶是Mg 2+依赖性酶,对Mg 2+浓度非常敏感。
选择合适的Mg 2+浓度,对PCR 反应至关重要。
引物与模板的双链杂交体的解链与退火温度受二价阳离子的影响,特别是其中的Mg 2+浓度能影响反应的特异性和扩增片段的产率。
在一般的PCR反应中,1.5~2.0mm ol ΠL Mg 2+是比较合适的。
本实验发现1.8mm ol ΠL Mg 2+浓度是适合的。
底物dNTP 浓度过高,会导致聚合酶错误地掺入,浓度过低,又会影响合成效率,甚至会因dNTP 过早消耗而使产物单链化,影响扩增效果。
在PCR 反应中,dNTP 浓度应在1.0~2.0mm ol ΠL 。
本研究设置了1.2、1.4、1.6mm ol ΠL 三个浓度梯度,结果表明,在1.6mm ol ΠL 时,PCR 反应的稳定性最好。
Taq 酶的使用量也是影响实验的一个重要因素。
使用高浓度的Taq 酶不仅成本过高,而且容易产生非特异性扩增产物;Taq 酶浓度过低则会导致产物的合成效率下降。
一般随机扩增反应中,Taq 酶的用量在0.2~1U 之间。
本实验设置了0.25U 、0.3U 、0.35U 三个T aq 酶含量梯度。
沼泽红假单胞菌沼泽红假单胞菌，是地球上最古老的具有光能合成体系的原核生物，沼泽红假单胞菌是广泛自然界的微生物，是一类易广能为能源，利用自然界中的有机物、硫化物等为营养体，并能进行光合作用的生物。
在生物学分类中属于真细菌纲、红螺菌目红螺菌科、红假单细胞菌属。
当前广泛应用于以下几个方面，○1高浓度工业有机废水的处理及资源化；○2水质净化剂，水产养殖的调控及促进健康生长；○3高营养饲料添加剂；○4农业生产中的高效活性菌肥。
沼泽红假单胞菌，别名：红假菌，是研究和应用较为广泛地一种光合细菌，属于外硫红螺菌科红假单细胞菌属，年幼单个的细胞呈杆状到卵形偶见稍弯，细胞直径0.6-0.9um,极生鞭毛运动或不运动，生长有极性，不对称出芽分裂。
革兰氏染色阴性。
厌氧液体培养物最初呈淡红色，后来变成红至褐红色，老培养物为暗棕红色。
好氧培养物无色到粉红色。
光能异氧菌，兼性好氧。
可以在光下营厌氧生活，或在黑暗下好养生长。
大多数菌种能长在洋菜平板或斜面上，虽然最初分离时，许多菌株表现对氧敏感，能在有简单的有机底物和碳酸氢钠及以对-氨基苯甲酸盐为生长素的无机盐培养基上生长。
有的菌株还需要加入生物素。
酵母膏有明显刺激生长的作用。
PH范围，5.5-8.5；脂肪酸在PH7.0以下会抑制生长。
最是生长范围30-37℃。
作为碳源或光合作用的电子供体的底物，乙醇，脂肪酸，C4二羧酸，氨基酸，苯甲酸盐，环己烷羧酸，甲酸盐，分子氢和硫代硫酸盐只能在少量酵母膏时才能利用。
不利用单糖类和糖醇类，硫化物。
光合色素为叶绿素a、h和胡萝卜素。
最佳生长方式是利用各种有机化合物作碳源和电子供体进行光照厌氧。
厌氧条件下以氢、硫代硫酸硫酸钠、硫化氢等做电子供体可光自养生长。
G+Cmol%为64.8-66.4.并具有适应性强，能耐受高浓度的有机废水和较强的分解转化能力，对酚、氰等毒物也有一定的耐受和分解能力等特点可用于水质净化、污水处理、饲料级微生物添加剂等。
在琼脂培养基上培养，菌落形态为草帽性或圆形，表面光滑，少隆起，边缘整齐，棕红色显微镜下观察形态为短杆状或卵圆形，款0.5um-0.9um，长1.2um-2.0um，无芽孢无荚膜，单极鞭毛，可运动。
沼泽红假单胞菌的生物学特性与研究进展摘要：沼泽红假单胞菌，是地球上最古老的具有原始光能合成体系的原核生物，沼泽红假单胞菌是广泛存在于自然界的微生物，是一类以光为能源，利用自然界中的有机物、硫化物等为营养体，并能进行光合作用的生物。
在生物学分类中，属于真细菌纲、红螺菌目、红螺菌科、红假单胞菌属。
当前广泛应用于以下几个方面：①高浓度工农业有机废水的处理及资源化；②水质净化剂，水产养殖的水质调控及促进健康生长；③高营养饲料添加剂；④农业生产中的高效活性菌肥。
本文针对沼泽红假单胞菌的生物学特性、发酵条件或培养的情况（培养基、培养条件）、生化特征、生理特性、应用及研究进展进行先关阐述。
关键字：光合细菌沼泽红假单胞菌生物学特性生理生化实验研究进展光合细菌：光合细菌(PhotosyntheticBacteria，简称PSB)是自然界最广泛存在的比较古老的、能进行光合作用而不产氧的特殊生理类群的原核微生物的总称，具有原始光能合成体系，能在厌氧条件下进行不放氧的光合作用，是水体兼性厌氧层中主要的初级生产者，并在自然界的碳素、氮素、硫素转化循环中起重要作用。
它包括有红螺菌科(Phodospirillaceae)、着色菌科(Chromati-aceae)、绿杆菌科(Chlorobiaceae)、绿色丝状菌科(Chlo-roflexaceae)4科。
光合细菌广泛分布于水田、湖沼、江河、海洋、活性污泥、土壤、极地或温泉(包括高热水体)以及高盐、高有机质含量等不同生态环境中，它可以光能异养、化能异养、光能自养方式生活，存在着好氧、厌氧和兼性厌氧类型，能利用多种基质。
光合细菌细胞内含有细菌色素(如类胡萝卜素、菌绿素)、卟啉类化合物、泛醌等多种有效的自由基清除物质，可保护细胞膜、DN等自身细胞的重要组份不受损伤。
光合细菌具有多重代谢方式，尤其在对高浓度有机废水的净化处理中，表现出负荷低、效率高及投资少的优点；在禽畜养殖方面，光合细菌可作为一种饲料蛋白补充，还可以起到益生菌的作用。
