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ＨＨＶ・８潜伏期相关核抗原的研究进展
李振飞综述普雄明审校
摘要人类疱疹病毒８型（ＨＨＶ一８）又称为Ｋａｐｏｓｉ肉瘤相关疱疹病毒，与Ｋａｐｏｓｉ肉瘤相关疾病关系密切。ＨＩ－ＩＶ一８潜伏期相关核抗原（Ｉ．ＡＮＡ）是ＨＨＶ一８的开放阅读框架７３（ＯＲＦ７３）编码的一种病毒衣壳蛋白，潜伏感染状态病毒稳定表达ＬＡＮＡ，它在病毒基因整合到宿主基因组的过程中起重要作用，且因其较好的表达稳定性和特异性常用来检测ＨＨＶ一８的感染状态。特别是对其在Ｋａｐｏｓｉ肉瘤发病中的作用研究文献较多。关键词人类疱疹病毒８型；ＯＲｆ７３；ＬＡＮＡ
人类疱疹病毒８型（Ｈｕｍａｎｈｅｒｐｅｓｖｉｍｓ８，ＨＨＶ一８）也称为Ｋａｐｏｓｉ肉瘤相关疱疹病毒（Ｋａｐｏｓｉｓｓａｒｃｏｍａ—
ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ，ＫＳＨＶ）是Ｋａｐｏｓｉ肉瘤（Ｋａｐｏｓｉ’ｓ
ｓａｒｃｏｌｎａ，ＫＳ）、原发性渗出型淋巴瘤（Ｐｒｉｍａｒｙｅｆｆｕｓｉｏｎｌｙｍｐｈｏｍａ，ＰＥＬ）以及多中心性Ｃａｓｔｌｅｍａｎ病（ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｉｃ
Ｃａｓｔｌｅｍａｎｄｉｓｅａｓｅ，ＭＣＤ）的重要病因。ＨＨＶ一８感染的ＫＳ包括潜伏感染状态和裂解感染状态。且其编码的
抗原分别为潜伏期抗原和裂解期抗原。近年来的许
多研究已经验证了ＨＨＶ一８抗原的实用性。１其中，四
种蛋白存在于潜伏感染细胞里，ｋａｐｏｓｉｎ（ＯＲＦＫ１２编
码的若干亚型），ｖ—ＦＬＩＰ（ＯＲＦ７１），ｖ—Ｃｙｃｌｉｎ（ＯＲｆ７２）和ＬＡＮＡ（Ｏ肿３）。Ｏ肿３编码的ＬＡＮＡ，ＯＲｆ７２编码
的ｖＣｙｃｌｉｎ和ＯＲＦ—Ｋ１３编码的ｖＦＬＩＰ这三个基因被认为是表达于同一个启动子。２大量研究表明，这些基因可促进宿主细胞的增殖，抑制凋亡，使病毒更容易
发生免疫逃逸，并且在不断的细胞分裂之间保存着染
色体外的病毒基因。这对Ｉ（Ｓ发生机制非常重要，因
此理解基因族如何被调控，阐述每个蛋白的分子功能至关重要。３其中，较为有用的是抗原源于ＯＲＦ７３。本文结合相关文献对ＨＨＶ一８的Ｌ心Ａ研究进展作一综
述。
１Ｌ蝌Ａ的结构
ＨＨＶ一８０８Ｆ７３编码的主要潜伏期相关核抗原
（“埘Ａ），也被称为ＬＡＮＡ一１，ＬＮＡ，ＬＮＡ一１，它是潜伏
感染的ＫＳ肿瘤纺锤状细胞和ＰＥＬ细胞里的一个病毒蛋白。４在大量受限的潜伏基因之间，ＯＲＦ７３基因编码
的ＬＡＮＡ可能对于通过病毒基因维持的潜伏ＨＩ－ＩＶ一８
感染的建立至关重要。它是一个大的核蛋白（２２２—２３４ｋＤａ，以十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析为依据）。５基于氨基酸的组成，ＬＡＮＡ分为三个区域，
一个脯氨酸和富含残余碱基Ｎ末端（ＬＡＮＡｉ），一个强
酸性的和重复的中央区域，一个Ｃ末端（ＬＡＮＡｃ），它
作者单位：新疆维吾尔自治区人民医院附属皮肤性病医院，乌鲁木齐，８３０００ｌ・综述・
浓缩于带电荷的和疏水的残基里，６即一个富含脯氨
酸的可能为核定位信号的Ｎ一末端区域，一个长的富
含谷氨酸内部重复序列，以及一个包含了假定的核定位信号的Ｃ末端区域。５而且，由于编码ＬＡＮＡ的ＯＲＦ７３高度变化的内部重复序列，因此，它在不同的
细胞株里具有多态性。７
２ＬＡＮＡ的功能Ｌ悄Ａ是一个多功能蛋白，可与各种不同的细胞
蛋白如肿瘤抑制因子ｐ５３和Ｒｂ蛋白等相互作用，即
ＩＡＮＡ通过肿瘤抑制因素直接与ｐ５３和ｐＲｂ相互作用参与肿瘤抑制途径，从而调控病毒和细胞基因的表
达。８ＬＡＮＡ—Ｉ也可与其他许多细胞转录因子如
ＡＴＦ４／ＣＲＥＢ２和ＣＲＥＢ一连接蛋白相互作用，并调节它们的转录活动。９最近研究表明，ＬＡＮＡ与一个新的转
录抑制剂即ＫＬＩＰｌ相互作用并且减缓它的转录抑制活动。ＬＡＮＡ可以通过连接负调节蛋白糖原合酶激酶
３ｐ及促进糖原合酶激酶３ｐ的一个细胞周期依赖性核蓄积作用使８一连环蛋白（细胞骨架蛋白的一种）途径
失调。据报道，含有ＬＡＮＡ的转导常可促进原发人类脐内皮细胞增殖并且延长细胞的生命期０２ＬＡＮＡ是一
种可在所有潜伏期感染细胞中表达的一种转录调节因子，除了调节病毒和细胞基因的表达外，它也可通
过ｐ５３和视网膜神经胶质瘤一ＥｌＦ通路结合原癌基因的作用转导啮齿类动物细胞。通过免疫荧光抗体测
试。显示了ＨＨＶ一８感染细胞核里一个斑点状的图形（这个图形表明了ＬＡＮＡ参与了潜伏感染细胞里ＨＨＶ
一８基因的复制和保存），ＬＡＮＡ仅仅对于含有末端重复序列（ＴＲ）的质粒的保存，复制，分离起作用，即通过
连接其Ｃ末端重复区域到质粒的ＴＲ序列，然后ＬＡ．ＮＡ的Ｎ末端区域整合到细胞同源染色体上。这些研
究结果证实ＬＡＮＡ在ＨＨＶ一８基因的保存中起重要作用。近来，在哺乳动物细胞里突变病毒检查中也证实
了这一论据。９最新研究表明，ＨＨＶ一８的ＬＡＮＡ可与
糖原合成酶３（ＧＳＫ一３）相互作用，并且以一种方式重
新配置ＧＳＫ一３，ＬＡＮＡ使核ＧＳＫ一３失活并且改变
万方数据ＧＳＫ一３底物的蛋白功能。加
３Ｉ．ＡＮＡ在ｌ（Ｓ发病中的机制ＬＡＮＡ对ＨＨＶ一８的潜伏感染状态的基因复制和保存起重要作用。ＨＨＶ一８的佻（末端重复序列）和
ＬＡＮＡ分别为病毒潜伏期复制的顺式作用元件和反式
作用元件。¨ＬＡＮＡ一１通过Ｃ一末端的ＤＮＡ一连接区域连接Ｔｉｔ里的序列（即顺式作用元件），Ｎ一末端染
色体连接序列与宿主细胞同源染色体相连结。１２据
Ｇａｒｂｅｒ等研究表明，ＬＡＮＡ的ｃ一末端结构区域对于特定区域ＤＮＡ的结合是足够的，且它是通过抑制一
个单一的ＴＲ连接区转录的。它并不像ＥＢＮＡ一１那样通过ｏｒｉＰ的连接来激活转录，因此，ＬＡＮＡ与ＥＢＮＡ
一１的功能相似，但它们是以完全不同的机制所完成的。另外，ＬＡＮＡ并不结合自己的启动子，而是具体结
合ＨＨＶ一８末端重复序列里的一个不完全的２０ｂｐ的回文结构的序列。１３
近来，ＶｉｅｊｏｊＢｏｒｂｏｌｌａ等发现ＩＡＮＡ的Ｃ末端里的—个最小区域，它对于连接并复制基因ＤＮＡ，激活异
源性启动子，与有丝分裂异染色质相互作用，产生二聚作用是必须的，但它不是充足的。“据Ｙｏｕ等研究表
明，与ＬＡＮＡ的Ｃ基端相互作用的有Ｂｒｄ４，证实为在
基因转录方面发挥作用的一种蛋白。并且显示ＲＩＮＧ３／Ｂｒｄ２和Ｂｒｄ４在ＬＡＮＡ连接方面具有不同的作
用。同时，他们提出，Ｂｒｄ４可能通过调节由ＬＡＢＩＡ所转换的ＣＤＫ２启动子发挥作用。１５另外，Ｌｉｍｉｔｅｄ等的实
验证实，ＬＡＮＡ的Ｎ末端在瞬时转染２９３和２９３Ｔ细胞系里抑制ＨＨＶ一８和ＥＢＶ瞬时复制系统，而ＬＡＮＡ—ｌＣ末端仅特异地抑制其他细胞里的ＨＩ－ＩＶ一８瞬时复
制系统。这与之前的报道相符合，进一步强调了ＬＡ．
ＮＡＮ末端的在ＨＨＶ一８潜伏期ＤＮＡ复制的起始端方面的重要性。¨而且，Ｋａｔｏ—Ｎｏａｈ等应用共免疫沉淀实
验证实，Ｋ—ｂｚ巾在ＢＣＢＬ一１细胞里与ＬＡＮＡ相互作用，且Ｋ—ｂＺＩＰ和Ｋ—Ｒｔａ对于起点依赖性ＤＮＡ复制
是必须的。Ｋ—ｂＺＩＰ是ＯＲＦＳ０编码的反式作用因子，即裂解期开关蛋白，被认为是ＥＢＶＺｔａ的同系物，且
对于ＤＮＡ复制是必须的，另外，Ｋ—ｂＺＩＰ与Ｋ—Ｒｔａ相互作用，可以抑制某些病毒启动子转活效能。坫Ｇｒｕｎｄ．
ｈｏｆｆ等报道ＬＡＮＡ的表达与可供选择细胞里的基因稳定结合表明，ＬＡＮＡ可能促进潜伏期ＤＮＡ复制。＂
此外，ＬＡＢＩＡ可以诱导ＨＨＶ一８潜伏感染的核累积，也可以用于Ｈ１Ｆ—ｌａ抑制蛋白的抑制因素。ＨⅡ’一ｌａ是一个无处不在的表达的转录调节因子，它存在于血管发生和肿瘤生长的大量基因的诱导里。ｌ（Ｓ是
一个高度血管化内皮细胞源性肿瘤。埔ＬＡＮＡ可直接
与一个低氧反应者结合，即低氧诱导因子ＨＩＦ—ｌａ。
据报道，ＬＡＮＡ不仅增强ＨＩＦ—ｌａ的转录活动，而且增强它的ｍＲＮＡ水平。据Ｃａｉ等用免疫共沉淀和免疫荧１１３光实验表明，低氧诱导的哪一８裂解性复制至少部
分受控于ＬＡＮＡ和ＨＩＦ—ｌａ协同作用。侉在ＨＩ－ＩＶ一８感
染的细胞里，ＬＡＮＡ可以与核有丝分裂器蛋白（Ｎ１ｔＭＡ）结合，且ＮｕＭＡ对于子细胞里ＨＨＶ一８基因的保存是
必须的。而且，ＮｕＭＡ和ＬＡＮＡ之间的相互作用对于ＨＨＶ一８基因的分离和保存是关键的。据报道，它是
通过一个有丝分裂特异相期间的连接和释放时序控制机制所完成。∞Ｉｄ（ＤＮＡ连接蛋白的抑制因素）在体
内外的ｌ（ｓ肿瘤细胞的高水平表达，表明ＨＨｖ一８的ＬＡＮＡ可能至少部分是负有责任的。其结果为ＨＨＶ
一８允许ＫＳ肿瘤细胞逃避正常细胞周期的调节，以促进它们的增殖。
４ＬＡＮＡ在临床流行病学中的应用由于ＨＨＶ一８细胞培养不容易被分离出来，因
此，感染通常是由ＰＣＲ或者血清学所决定。虽然ＰＣＲ几乎在所有的Ｉ＜Ｓ损害组织可以探测到ＨＩ－ＩＶ一８的ＤＮＡ，但在外周血单核细胞里，病毒ＤＮＡ载量常常不
足以探测到。为了补充ＰＣＲ和更好理解ＨＩ－ＩＶ一８感染的过程，许多血清学试验已被建立。如免疫荧光试
验，酶联免疫吸附试验，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ等。为了增加敏感性和特异性，许多研究已经验证了ＨＨｖ一８抗原的
实用性。最有用的抗原是源于ＯＲＦ６５，ＯＲＥｌ３，和
Ｋ８．１。１另外，据研究表明病毒血症并不是ＨＨＶ一８感染的必须组成部分，经ＰＣＲ检测有５０％的Ｋｓ患者外周
血单核细胞中可检测到ＨＩ－ＩＶ一８ＤＮＡ。用血清学方
法检测ＨＨＶ一８编码蛋白的特异性抗体时，发现该抗体在感染后可长期存在，比ＰＣＲ敏感性好。且在ＫＳ
患者中，无论在潜伏期还是裂解期，ＨＨＶ一８编码的蛋
白在血清学检测时可以作为有效抗原，７０％一１００％
ｌ（Ｓ可检测出此种抗原。由ＯＲＦ７３编码的Ｉ．ＡＮＡ和ＯＲＦ６５编码的小衣壳蛋白，是ｌ（ｓ患者潜伏感染血清
检测的两个关键核抗原。然而，二者的检出率的高低有待进一步探讨。
５结语自从１９９４年ＨＨＶ一８被确定为ｌ（Ｓ的感染因素
后，几乎所有类型的ｌ（ｓ中观察到ＨＨＶ一８感染。之后，人们对ＨＩ－ＩＶ一８的病毒学，致病机制及Ｉ临床预后进行了广泛深入地研究。ＨＨＶ一８在ＫＳ的发病机制
涉及到许多方面，如病毒基因，细胞因子及机体免疫
状态失调等，ＬＡＮＡ是其中的一个方面，然而它对于ｌ（ｓ的发生发展是必须且重要的，因此，它的作用机制及其在临床诊断方面具有重要的意义，有待进一步研
究。
参考文献
１ＣｏｒｃｈｅｍＪＬ，Ｅ唱一ｃｈｕｎＭａｒ，ＳｐｉＩａ可，ｅｌ
ａ１．ｃ０唧咖ｏｆｓｅｒｏ－
万方数据
