检测痰中结核杆菌几种方法的对照

比较PCR结核分枝杆菌DNA检测与常规痰涂片中结核菌的对比效果作者：李慧萍来源：《中西医结合心血管病电子杂志》2020年第26期【摘要】目的探究在进行结核菌的培养时，选择PCR结核分枝杆菌DNA检测与常规痰涂片的效果，分析临床可用性。

方法将2019年1月～2019年12月作为本次研究实验时段，在该时段内进行数据整理后，录入我中心数据库中资料登记有效的肺结核患者31例作为本次研究实验对象。

所有患者取其痰液样本后，分别进行常规痰涂片以及PCR结核分枝杆菌DNA 检测，分析两种检测方式对结核菌的确诊率，探究临床可用性。

结果在本次实验结果中显示常规痰涂片的痰液培养阳性率为18（58.06%），相较于PCR结核分枝杆菌DNA检测的阳性率28（90.32%）来说明显更高，数据对比差异显著（P【关键词】PCR结核分枝杆菌DNA检测;常规痰涂片;结核菌;对比分析;检验方案【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095.6681.2020.26..02结核病是一种临床上十分常见的慢性传染性疾病，这种病症会对人类的健康造成极大的威胁，这种病这主要是由流行结合分歧杆菌所导致的，在患者发病后会累积患者的多个脏器，最为严重的患病损伤为患者的肺脏，大约有80%～90%的患者在出现疾病后，主要以肺部结合为主[1]。

常规痰涂片检验方式是临床上应用于肺结核患者结核菌培养的主要手段，这种培养方式具有特异性高企操作简便易行的特点，而随着近年来医疗技术的不断发展，PCR结核分枝杆菌DNA检测检验方式在临床上也逐渐凸显头角[2]。

这种检测方式不仅操作更为简便且具有更高的准确率，能够在较短时间内明确患者的结核菌感染状况，对于肺结核患者的病症确诊以及疗效确认来说都有积极意义。

本次研究中探究在进行结核菌的培养时，选择PCR结核分枝杆菌DNA检测与常规痰涂片的效果，分析临床可用性，以下为实验结果。

1 资料与方法1.1 一般资料将2019年1月～2019年12月作为本次研究实验时段，在该时段内进行数据整理后，录入我中心数据库中资料登记有效的肺结核患者31例作为本次研究实验对象，年龄介于36～79岁范围内，平均年龄（52.4±5.3）岁。

三种抗酸染色法检测痰结核分枝杆菌结果分析郑浩;柳晓金;齐海亮;冯建纯;朱桂云;郑立恒【摘要】Objective:To assess the value of applying three diverse techniques(direct smear method,flotation smear,centrifuging the liquored sputa and collecting bacteria method) to detection of the mycobacterium in sputum for diagnosis of pulmonary tuberculosis.Methods:The sputum samples were ob-tained from 1 500 suspected tuberculosis patients and respectively detected by the direct smear ,flotation smear and centrifuging the liquored sputa and col-lecting bacteria method for comparison of the positive sputum .Results:Direct smear,flotation smear,and centrifuging the liquored sputa and collecting bac-teria method revealed positive rate of 22.0% (244/1 500),22.0% (330/1 500) and 22.4% (336/1500),respectively.The difference was significant between direct smear and flotation smear,and direct smear and centrifuging the liquored sputa and collecting bacteria method .Of the three techniques,flo-tation smear and centrifuging the liquored sputa and collecting bacteria method led to higher detection rate (χ2 =78.68,P<0.001 for the former;χ2 =2.50,P>0.05 for the latter).However,the positive results were not significant between flotation smear and centrifuging the liquored sputa and collecting bacteria method(χ2 =2.50,P>0.05).Co nclusion:Centrifuging the liquored sputa and collecting bacteria method can be rapid and simple in detection of the mycobacterium in sputum with higher positive findings,thus it is worthy of wider clinical recommendation for diagnosis of pulmonary tuberculosis.%目的：探讨涂片法、漂浮集菌法和夹层杯法三种方法检测痰中结核分枝杆菌对于肺结核的诊断价值。

等。所有操作均在无菌条件下进行 。（ ） １临床标本前处理 ： 加 等倍体积 ４ ａ Ｈ前处理液 ，涡旋震荡混匀 ，０ｍｎ后 ， ％Ｎ Ｏ ２ ｉ 加
入 １ ＬＣ液 （ Ｐ Ｂ增 强 培 养基 ） 充 分 混匀 ，００ ０ｒ ｆ ， ５ｍ ＦＴ 。 １ ０ ｎｎ ／ｉ
离心 ２ ｉ ０ｍ ｎ弃去 上 清 液 。沉 淀物 加 １ ＬＣ液 混 匀 ， 移 ０５ ｍ 转 ．
孙 东建 ）
［】 午 昭， ３ ｔ 黄德征 ， 一军． 罗 组织瓣 一期移植 外 同定支架治疗 小腿
创伤组织缺损ｆ ＿ Ｊ 中华显微外科杂志 ，９ ８ １３ ： １２ ２ １ １９ ． （ ） ２ — ２ ． ２ ２
（ 文 编辑 本
噬菌体法快速检测痰 中结核分枝杆菌的临床应用
李志媛
关键词 痰 分枝杆菌， 结核 细菌噬菌体
计 数 资料 行 检验 。
Ｐａ ｈ Ｂ法快速检测结核分枝杆菌标准株和肺 结核患者 的痰标
本 ， 取得 了理 想结 果 ， 与 Ｂ Ｃ Ｅ 一 ６ 法 进 行 对 比 ， 告 均 并 Ａ Ｔ Ｃ ９０ 报
如 下
２ 结果
２ 标 准菌株 ． １
标 准菌株 Ｈ ７ ｖ ３ Ｒ 结核 分枝 杆菌应用 Ｐ ａ ｈ Ｂ 对４ ０份肺结核 患者 的痰标本
冯
爽
张
立
李 晓珉
结核， 肺
结核病细菌学检查是诊 断肺结核及判定疗程 的金标准，
快 速 有 效 的 细 菌 学检 测 是 国 内外 研 究 的重 点 ， 是结 核 病 诊 也
Ｐａｕ Ｂ 标 本 柃 测 ， 果应 该 在 如 下 范 围 ， ｌｑｅＴ 结 阳性 结 果 ≥２ Ｏ 个噬 菌 斑 ， 阴性 结 果 ≤ １ 噬 菌斑 。 ９个

结核分枝杆菌痰培养方法结核病是一种大家较为熟知的慢性传染性疾病，由结核分枝杆菌感染引起。

可通过空气传播，且感染剂量很低，人吸入很少的结核分枝杆菌即可引起感染。

该疾病会在任何年龄发病，而免疫力低下的患者更容易感染结核分枝杆菌。

近年来，随着艾滋病发病率的增加，耐药性结核分枝杆菌的出现，吸毒人群的增多以及免疫抑制剂的应用等，我国结核病发病率仍然较高。

结核病已成为威胁人类健康的全球性的严重的公共卫生问题。

如何知道自己得了结核病呢？当人体感染结核杆菌后，因感染的部位不同，会出现不同的临床症状。

例如肺结核患者主要会表现出咳嗽，咳痰，咯血，胸痛，低烧，盗汗，乏力等一些呼吸道疾病症状。

而感染肾脏时，患者会出现尿急，尿痛，血尿等泌尿系统症状。

大部分患者感染结核杆菌后会出现不同程度的低热，盗汗，虚弱等等。

当人体出现以上症状时，即可高度怀疑为结核病。

出现自觉症状后，就医后医生首先会建议患者进行影像学诊断，以此来确定结核分枝杆菌感染的脏器部位，同时也会进行体液培养来进一步确定患者是否感染了结核杆菌，通常会采取患者的痰液来进行检验。

让我们进一步来了解一下吧。

一、什么是结核杆菌？结核杆菌即为结核分枝杆菌。

它是引起结核病的病原体，而结核杆菌是一种较为古老的细菌，早在4500年前的古埃及，人们就已经发现了这种细菌的存在。

古代时大家将肺结核患者称为肺痨患者。

在1882年，该病菌由一名德国的细菌学家郭霍发现后，才被正式命名为结核菌。

结核分枝杆菌是一类专性需氧菌，它生长较为缓慢。

对干燥，冷，酸碱等抵抗力非常的强，在紫外线的照射下，痰液中的结核杆菌需要经过六个小时左右才会被彻底杀死。

目前痰培养是确定结核杆菌感染的主要检查项目，经过痰液培养分离细菌可以发现，结核分枝杆菌革兰染色不易着色，需用特殊染色方法荧光染色或萋—尼抗酸染色。

经抗酸染色后菌体为红色细长直或略弯的杆菌，该细菌没鞭毛，无芽孢，有荚膜，多数有异染颗粒。

荧光染色、抗酸染色如图：从致病性角度分析可见，结核杆菌本身不会产生内外毒素，其致病物质主要是他的荚膜、脂质以及蛋白质。

磁珠法在痰液结核分枝杆菌核酸检测中的应用研究目的应用配体包被磁珠技术富集痰液中的结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB）以用于实时荧光定量PCR检测。

方法采用磁珠法富集提取107例临床痰液样本中结核分枝杆菌的DNA，采用ABI 7500 Real-time PCR仪进行核酸定量分析，结果和传统提取方法进行比较。

结果采用磁珠法富集提取的结核分枝杆菌DNA（阳性率66.36%）高于普通DNA抽提方法（阳性率62.62%），也高于罗氏培养（阳性率38.32%），明显高于痰涂片结果（阳性率31.78%）。

结论磁珠法对提高结核分枝杆菌的核酸定量检测阳性率有积极作用，特别对他其他方法检测为弱阳性或者假阴性的病人效果显著。

标签：配体包被磁珠；结核分枝杆菌；核酸第一简介：张时良，男，（1980-05），汉族，籍贯：江苏宜兴，学历：本科，职称：主管技师，研究方向：分子生物学临床工作。

通讯作者：周红，Email：hongzhou0123@。

结核病（Tuberculosis，TB）是当今世界范围内最为重要的传染性疾病之一。

我国是结核病高负担国家之一，患病人群数量巨大，面临着严峻的结核病流行形势[1-2]，目前缺乏有效的早期、快速、特异的诊断手段。

因此，加强结核病的实验室诊断技术研究，对及时发现确诊疾病、有效治疗控制传染源、从而控制结核病的流行具有极为重要的意义。

近年来，随着分子实验诊断技术的不断发展，聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术以其简单快速，成本低廉，灵敏度和特异度高等特点而被广泛应用于传染病的诊断。

相比于传统的临床诊断方法，分子实验诊断技术可以弥补传统临床诊断方法的某些缺陷，能够通过应用PCR技术而缩短临床标本（呼吸系统标本和肺外标本）中检测和鉴别结核分枝杆菌的时间，提高结核分枝杆菌的检出率，从而提高病人的发现率[3-4]。

目前国内一般都是通过优化核酸提取这一过程来提高PCR的阳性率[5]，国外已经开始通过配体包被磁珠技术（Ligand-coated magnetic bead technology）来富集痰液中的结核分枝杆菌[6，7]，以提高痰涂片的阳性率。

4种方法在检测痰内结核分枝杆菌结果的比较分析发表时间：2013-02-22T09:44:06.387Z 来源：《医药前沿》2012年第34期供稿作者：李雪1 漆兆李1 尹铭2[导读] 比较4种不同的痰内结核分枝杆菌的检测方法灵敏度，以寻找一种更准确、快速的检测结核分枝杆菌的方法。

李雪1 漆兆李1 尹铭2（1大英县疾病预防控制中心 629300；2大英县人民医院 629300）【摘要】目的比较4种不同的痰内结核分枝杆菌的检测方法灵敏度，以寻找一种更准确、快速的检测结核分枝杆菌的方法。

方法收集112例县人民医院2010年2月-2011年4月期间确诊为肺结核的患者痰标本，分别采用罗氏培养法、涂片法、免疫磁珠分离（IMS）-涂片、免疫磁珠分离（IMS）-PCR法对结核分枝杆菌进行检测，比较4种检测方法的敏感度。

结果IMS-PCR法对结核分枝杆菌的敏感度最高，为71.4％, 罗氏培养法为68.2%，两者无明显差异（P>0.05）；IMS-涂片法检测敏感度为28.6%，涂片法最低，仅21.4%，两者均明显低于IMS-PCR法（P<0.01），具有统计学意义。

结论IMS-PCR法可快速、准确检测痰内结核分枝杆菌，对肺结核患者早期诊断具有重要意义。

【关键词】结核分枝杆菌免疫磁珠分离罗氏培养法 PCR 涂片法肺结核是我国严重的公共卫生问题，其具有传播广、早期症状少、疫苗免疫效果不佳等特点，检出痰中含有结核分歧杆菌是临床诊断肺结核重要依据。

然而，目前结核分枝杆菌感染的检测诊断虽有推荐标准，但最佳标准尚有待探讨。

传统的痰中肺结核分枝杆菌的检测方法包括痰涂片和痰培养，但痰涂片的阳性率低，痰培养的周期太长，一般需要4-8周[1]，且阳性率也较低，给临床诊断带来一定的困难。

PCR检测较传统的痰直接涂片和痰培养法敏感、更快速，但也存在假阳性、假阴性现象[2]。

免疫磁珠分离技术(IMS)是近年快速发展的一种有效的免疫分离手段，其分离速度快、操作简单，目前已经广泛用于各种细胞的分离、核酸及蛋白质的纯化[3]。

痰涂片查结核分枝杆菌3种方法分析比较摘要目的：探讨操作简单、阳性率高的痰涂片查结核分枝杆菌方法。

方法：采用离心集菌法、漂浮集菌法和直接涂片法检测78例疑似肺结核患者痰内结核分枝杆菌，并进行比较。

结果：结核分枝杆菌检出率，沉淀集菌法为14.1%，漂浮集菌法为6.4%，直接涂片法为5.1%。

结论：离心沉淀集菌法痰内结核分枝杆菌阳性检出率明显高于其他两种方法。

关键词结核分枝杆菌离心集菌法漂浮集菌法直接涂片法资料与方法试剂：萋-纳二氏染色液（按文献配制）。

研究对象：78例本院临床疑似的肺结核病人，男51例，女27例，年龄20～71岁。

以隔夜痰为佳，即晨起清水漱口后用力咳嗽，以獲得下呼吸道来自空洞的痰液，量3～5ml。

若咳痰极少，亦可留取24小时痰。

装于一次性塑料瓶内送检。

痰液的消化：将标本数毫升，加入倍量或数倍量（根据标本的粘稠度）的40g/L氢氧化钠，震荡数分钟，使标本充分消化，或121℃20分钟高压消化（也有采用`100℃15分钟），利于结核杆菌集中，并保证安全。

直接涂片法：用内径为3mm的接种环，选取标本一环，约为0.01ml，均匀涂于玻片上，涂抹范围为100mm2，待其自然干燥，通过火焰（3次）固定，然后进行抗酸染色，镜检。

漂浮集菌法：取数毫升消化后痰液，加入数倍量20g/L的盐水，进行混匀稀释，而后再加汽油1～2ml（或二甲苯0.3～0.4 ml），持续震荡后静置0.5小时，用吸管吸取泡沫层接近油层部分，滴在载片上，反复数次，待干，用乙醚1～2滴脱脂，通过火焰固定，染色，镜检。

沉淀集菌法：取10 ml左右消化后痰液，3000转/分离心0.5小时，（不得少于3000转/分，否则抗酸菌不能沉淀下去），用其沉渣涂片，染色，镜检。

结果判定：油镜下观察3种涂片，按规定的标准判断结果。

未发现抗酸杆菌/300个油镜视野为（-），1～2个抗酸杆菌/300个油镜视野为（±），3～9个抗酸杆菌/100个视野为（+），10～99个抗酸杆菌/100个油镜视野为（++），1～10个抗酸杆菌/每个油镜视野为（+++），多于10个抗酸杆菌/每个油镜视野为（++++）。

关键 词 ：肺 结 核 ： 结 核 分 枝 杆 菌 ：诊 断 中图分类号：Ｒ ４ ４ ６ ． ５ 文献标识码 ：Ａ
文章编号：１ ６ ７ １ — ５ ８ ３ ７ （ ２ ０ １ ５ ） ４ — ０ ２ ７ ３ — ０ １
结核病 的传染源一般 为痰菌 阳性患者，所 以， 菌 阳患者 的早发现与早治疗对于结核病 的控制 具有十 分重要的价值 ， 其中结核分枝杆菌为诊断 、治疗结核病的重要依据Ｌ ｌ Ｊ 。为 了 进 一步对直接涂片法 、罗 氏培养法、Ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｃ法及沉淀集菌法 在比较研究 ，现 总结报道如下 ： １资料与方法 １ ． １一般资料 以我 中心 ２ ０ １ ４年 １月￣２ ０ １ ５ 年 １月收治的 ６ ０ ０份肺 结
核 患 者 的痰 液 标 本 做 为研 究对 象 。 １ ． ２检验方法 １ ． ２ ． １ 检验 仪 器 及 试 剂 Ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ４ ６ ０ Ｔ Ｂ仪 （ 美 国 Ｂｅ ｃ ｔ ｏ ｎ Ｄｉ ｃ ｋ ｉ ｎ ｓ ｏ ｎ公司 ） ， Ｐ Ａ ＮＴ Ａ
四种方法中 ， Ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ 法 的阳性检 测率最高，明显高 于其 他 三种方法 ，Ｐ ＜ ０ ． ０ ５ ，差异具有统计学意义 ，罗 氏培养法 、 沉淀集 菌法的阳性率 明显高于直接涂片法 ，Ｐ ＜ ０ ． ０ ５ ，差异具 有统计学意义 ， 罗 氏培养法 、 沉淀集菌法 的阳性率 的差 异不 具 备 统 计 学 意 义 ，Ｐ ＞ ０ ． ０ ５ ，结 果 如 表 １ 所示 。 表 １ ４种方法 的阳性检 出率对 比
抑菌剂 （ 美国 Ｂ ｅ ｃ ｔ ｏ ｎ Ｄｉ ｃ ｉｎ ｋ ｓ ｏ ｎ公司） ，１ ２ Ｂ培养基 （ 美国 Ｂｅ ｃ ｔ ｏ ｎ Ｄ ｉ ｃ ｋ ｉ ｎ ｓ ｏ ｎ公司） ，Ｌ Ｇ１ ０ ． ２ ． ４ Ａ 高速 离心 机 （ 北京医用 离心机 厂 ） ，Ｌ Ｒ Ｈ． ２ ５ ０ Ａ 生 化培养箱 （ 广东 医疗器械 厂 ） ， ＷＺ Ｒ ． Ｄ ９ ５ １型电子振荡器 （ 苏州医用 电子仪器厂 ） 。 按照操作规程 ［ ２ 】 制 备酸性罗 氏培养基 ， Ｎ． 乙酰． Ｌ半胱氨 酸消化液为 ５ ０ ｍＬ柠檬酸钠溶 液 （ ２ ． ９ ４ ％） ， 加入 ５ ０ ｍＬ Ｎ ａ ＯＨ 溶液 （ ４ ％） ，混合均匀 。在使用之前加入 Ｎ． 乙酰． Ｌ 半胱氨 酸０ ． ５ ｇ ，于室温条件 下 ２ ４小时 内使用 。

肺结核属于肺部慢性传染疾病，临床发病率高，该病的主要致病菌为结核分枝杆菌，病程相对较长，会向全身多个脏器累及。

菌阴肺结核指的是通过一次结核杆菌培养以及三次痰涂片检查，结果均显示为阴性的肺结核患者，具有较低的传染性。

大多数患者不了解菌阴肺结核的相关性知识，如果没有采取及时有效的诊断、治疗，患者的病情就会延误，继而转变为阳性，对患者的预后造成不利影响。

目前，临床中对于菌阴肺结核的特异性诊断措施相对缺乏，最常用的方法就是痰或呼吸道采集标本中结核分枝杆菌的检验。

近年来，结核病的发病率及死亡率呈现逐年上升的趋势。

筛选出一种能有效确诊早期结核病的检验方法十分重要。

目前临床上应用于辅助结核病诊断的检验方法以结核分枝杆菌培养和抗酸染色涂片为主，其中培养法作为结核疾病诊断的金标准具有准确性高、特异性高的优势。

结核分枝杆菌痰的分离培养，消耗时间较长，如果利用固体改良罗氏培养基进行培养，一般会需要至少20d，最长可需要60d，如果使用先进的全自动分枝杆菌进行检测，至少需要7d，至多需要20d。

实验室一般会通过痰涂片法进行检测，该方法的操作相对简单，价格较低，但是，操作费时，在基层痰检实验室涂片量过大的时候，一天内无法得到实验结果，这种现象无法满足目前的结核病防治工作。

近些年来，随着染色技术的逐渐先进，荧光染色技术作为新型的实验手段，已经在医学科学领域中广泛应用。

目前，涂片染色法已经成为无菌体液的主要检查方法，但是，通过传统制片以及染色法的检出率相对较低，误诊率以及漏诊率较高。

主要是因为染色时制片以及标本固定环节容易出现误差，而细胞沉淀仪法、改良的抗酸染色法、萋-尼氏抗酸染色法、金胺O荧光染色法、PCR等技术的应用越来越多。

传统方法：获取痰标本后，排除口水痰，然后纳入研究范围，确认纳入的当天，需要在每份痰标本相同位置，取两份，制成痰涂片。

离心处理标本，再在洁净的玻片上涂抹沉渣，涂完一层之后，使其自然干燥，再次涂抹，形成厚涂片，先使用萋尼抗酸染色法进行染色，随后使用石炭酸复红溶液初染，再使用盐酸酒精脱色，然后用美兰复染，寻找红色区域，待涂片干燥后置于显微镜镜检，于蓝色背景中寻找红色的杆状、分枝状细菌。

痰涂片抗酸染色、结核抗体试验、荧光PCR、T-SPOT.TB在肺结核诊断中的临床意义秦庆;胡瑛;吕永强【摘要】目的比较痰涂片抗酸染色、结核抗体试验、荧光PCR和结核感染T细胞斑点试验在肺结核诊断中的价值.方法 96例经肺结核诊断和治疗指南标准确诊为肺结核患者设为实验组,56例其他肺部疾病(非肺结核)患者设为对照组,用上述四种方法同时进行检测.计算每种方法的灵敏度、特异度、准确性,并进行四种检测方法之间的配对X2检验.结果痰涂片抗酸染色、结核抗体试验、荧光PCR、T-SPOT.TB检测的灵敏度分别为11.46％、44.80％、38.54％和93.75％,特异度分别为98.96％、82.14％、94.64％、91.10％,准确性分别为43.42％、58.55％、59.21％、92.76％,四种方法两两之间比较差异均有统计学意义.结论每种方法各有优缺点,综合评价T-SPOT.TB检测方法优于其他三种方法.工作中,应多种检测方法联合使用,以便对肺结核做出正确的诊断.【期刊名称】《中国医药科学》【年(卷),期】2017(007)021【总页数】4页(P130-133)【关键词】抗酸染色;结核抗体试验;TB-DNA;T-SPOT.TB;肺结核【作者】秦庆;胡瑛;吕永强【作者单位】中国人民解放军第210医院检验科,辽宁大连116021;中国人民解放军第210医院检验科,辽宁大连116021;中国人民解放军第210医院检验科,辽宁大连116021【正文语种】中文【中图分类】R521结核病是由于结核分枝杆菌感染人体各个器官而引起的一种慢性传染病，其主要侵袭的是肺部脏器，作为危害人类健康的传染病之一，是中青年人的重要死因[1]。

结核病之所以得到全世界的重视，不仅仅是发病率高，其死亡率长期以来一直居高不下，最主要原因是缺少快速有效的检测方法[2]。

结核病的临床表现复杂多样，对临床医生诊断该病带来了很大的障碍。

目前结核病的普查方法是结核菌素试验，该方法在全世界广泛的应用，但在我国由于非结核分枝杆菌感染率较高，因此TST 出现了较多的假阳性，而免疫力低下的患者，又会出现一定的假阴性[3]。

PCR技术、培养法、夹层杯法用于结核杆菌检测中的临床价值摘要：目的分析聚合酶链反应（PCR）技术、培养法、夹层杯法用于结核杆菌检测中的临床价值。

方法选取攸县人民医院在2021年2月至2022年2月期间收治的208例临床诊断为肺结核、肺部感染、咳嗽、咯血的患者，采集患者痰液标本后分别进行PCR、痰培养、夹层杯涂片试验技术检测，比较三种技术阳性检出率及检测时间。

结果PCR技术对结核杆菌阳性检出率40.87%，痰培养法检出率23.08%，夹层杯痰涂片法检出率19.23%；PCR技术法检出率高于夹层杯涂片法、痰培养法（P＜0.05），痰培养法检出率略高于夹层杯涂片法，但差异无统计学意义（P>0.05）。

从样本进入实验室到发出报告时间，夹层杯涂片法、PCR技术明显短于痰培养法，且夹层杯涂片时间短于PCR技术（P＜0.05）。

结论 PCR技术、培养法、夹层杯涂片法检测结核杆菌均有一定价值，其中夹层杯涂片法、PCR技术检测时间短、检出率高，且夹层杯涂片法检测时间更短，但夹层杯涂片法检出率略低，故需要临床更进一步研究。

关键词：PCR技术；培养法；夹层杯涂片法；结核杆菌结核病是结核分枝杆菌引起的严重慢性传染性疾病，随着人口频繁流动，使感染结核人数明显增加；另外随着耐多药结核杆菌的出现，使结核病成为公共卫生组织重点关注问题。

目前，早期诊断、隔离传染源、切断传播途径是控制结核传播、传染病防控的重要任务。

因此提高结核病的早期诊断率，选择操作简单、准确率高的方法显得尤其重要。

当前结核病的诊断主要依靠影像学、细菌学技术，以痰培养、痰涂片为最常用技术，随着免疫学、分子生物学技术的发展，聚合酶链反应（PCR）技术逐渐用于临床，并取得一定效果。

现本文分析PCR技术、培养法、夹层杯涂片法用于结核杆菌检测中的临床价值，旨为结核病的诊断提供参考，报道如下。

1资料与方法1.1临床资料选取我院在2021年2月至2022年2月期间收治的208例临床诊断为肺结核、肺部感染、咳嗽、咯血的患者[1]；参与研究前未服用影响结果的药物；其中男性118例，女性90例；年龄28~68（52.31±3.82）岁。

比较PCR结核分枝杆菌DNA检测与常规痰涂片中结核菌的对比效果摘要：目的观察在进行结核菌检测过程中开展PCR结核分枝杆菌DNA检测与常规痰涂片检测的效果。

方法选入2021年2月至2022年5月本院进行结核菌检测病例256例为对象，对其痰液样本采集，均进行PCR结核分枝杆菌DNA检测与常规痰涂片检测。

分析检查结果。

结果结合临床最终诊断，本组病例中46例确诊，在检查阳性率上，PCR结核分枝杆菌DNA检测明显高于常规痰涂片检验，P<0.05。

统计两种检查方式灵敏度、特异性以及准确性，PCR结核分枝杆菌DNA检测明显高于常规痰涂片检验，P<0.05。

结论临床在进行结核菌检查过程中按照PCR结核分枝杆菌DNA检测，可以有效保障对该部分患者的检查效果，促使患者可以尽快确诊。

关键词：PCR结核分枝杆菌DNA检测；常规痰涂片；结核菌结核类病症在临床一直保持有较高的发生率，病症具备有一定传染性，对患者健康所造成的负面影响较大。

临床在对结核病患者进行治疗时，在严格按照规定进行用药的基础上，更需要做好对应的消毒隔离治疗工作，降低结核病菌的传播效率。

在对疑似结核病患者进行诊断的过程中，需及时采取有效的诊断方式，促使患者可以尽快得到确诊[1]。

当前，按照PCR结核分枝杆菌DNA检测与常规痰涂片进行结核菌检测为临床最为常用的检查方式。

本次研究就主要对以上两种检测方式的具体效果进行分析。

1资料与方法1.1一般资料选入2021年2月至2022年5月本院进行结核菌检测病例256例为对象，对其痰液样本采集，均进行PCR结核分枝杆菌DNA检测与常规痰涂片检测。

本组对象中，男性150例，女性106例，年龄分布在44—74岁间，均值为（58.55±1.83）。

在开展检查前，均告知本组患者对比检测的目的，在其自愿参与的情况下开展后续研究。

1.2方法痰液样本采集：需对患者清晨第一口痰液样本进行采集。

以常规螺旋盖弹屏对痰液样本采集，随后使用塑料袋开展密封操作，登记好痰液样本的患者信息。

结核杆菌的检测方法结核病是一种由结核杆菌引起的严重传染病，对人类健康造成了巨大威胁。

早期、准确地检测出结核杆菌对于结核病的诊断、治疗和控制至关重要。

下面我们就来详细了解一下结核杆菌的检测方法。

一、涂片镜检法涂片镜检法是最常用的结核杆菌检测方法之一。

通过采集患者的痰液、脓液、脑脊液等标本，经过涂片、染色处理后，在显微镜下观察是否有抗酸杆菌。

这种方法简单、快速、成本低，但敏感性相对较低，容易出现漏诊。

而且，它无法区分结核杆菌和其他非结核分枝杆菌。

二、细菌培养法细菌培养法是检测结核杆菌的金标准。

将标本接种到特定的培养基上，在适宜的条件下培养，观察是否有结核杆菌生长。

培养法的优点是准确性高，能够确定菌株的类型和药敏情况，为治疗提供依据。

但培养周期较长，通常需要 2 8 周，不利于早期诊断。

三、分子生物学检测法1、聚合酶链反应（PCR）技术PCR 技术通过扩增结核杆菌的特定基因片段来检测结核杆菌。

具有敏感性高、特异性强、检测速度快等优点，能够在短时间内得出结果。

但 PCR 技术对实验条件和操作人员要求较高，容易出现假阳性和假阴性结果。

2、基因芯片技术基因芯片技术可以同时检测多个结核杆菌的基因靶点，实现快速、高通量的检测。

它能够对结核杆菌进行菌种鉴定和耐药基因检测，为临床治疗提供更全面的信息。

四、免疫学检测法1、结核菌素皮肤试验（TST）TST 是通过在皮内注射结核菌素，观察皮肤反应来判断是否感染结核杆菌。

但 TST 结果易受卡介苗接种和其他分枝杆菌感染的影响，特异性不高。

2、结核抗体检测检测患者血清中的结核抗体，判断是否感染结核杆菌。

但抗体检测在结核病早期和免疫功能低下的患者中敏感性较低。

五、影像学检查胸部 X 光和 CT 检查可以发现肺部的结核病灶，如渗出、增殖、干酪样坏死、空洞形成等。

但影像学检查不能直接确诊结核杆菌感染，需要结合临床症状和其他检测方法进行综合判断。

六、其他检测方法1、噬菌体生物扩增法利用噬菌体对结核杆菌的特异性感染和扩增来检测结核杆菌，具有操作简便、快速的特点。

结核杆菌的三种实验方法的应用评估目的比较痰涂片法、荧光定量PCR法和结核抗体检测法对结核病的诊断意义。

方法选取2014年7月～10月在我院诊疗疑似或确诊患者172例，进行涂片抗酸染色、荧光（PCR）检测和采集血样进行结核抗体检测。

结果172例检样中，抗酸染色痰液标本阳性例只有20例阳性率为11.6%。

荧光PCR法阳性率55例，阳性率31.2%，结核抗体阳性例为87例；阳性率为50.6%。

结论三种方法中，以结核抗体阳性率最高，荧光PCR法次之，抗酸染色法阳性率最低，如果三种方法联合运用，相互佐证，可提高准确性。

标签：结核杆菌；检测方法结核杆菌又称分枝杆菌，是引发结核病的病原菌，可能对全身的各大器官造成侵害，临床中以肺结核最为常见。

结核杆菌细胞含有大量分枝菌酸，染色后能抵抗强脱色剂盐酸乙醇的脱色，故又称抗酸杆菌，结核杆菌是引起结核病的病原菌，可侵犯全身器官，但以肺结核为多见。

结核病至今仍为重要的传染病，近年来，因艾滋病、吸毒等社会原因及免疫制剂的应用，其发病呈上升趋势。

鉴定结核杆菌的方法有很多[1]。

本研究应用痰涂片染色法、PCR-荧光法、结核分枝杆菌抗体检测，对172例标本同时进行比较和评价。

1资料与方法1.1一般资料收集自2014年7月～10月在我院诊疗疑似或确诊的患者标本172例。

所有患者均通过痰涂片抗酸结核杆菌检验、胸部X线片、临床表现以及结核菌素试验等诊断为肺结核。

涂片法和荧光PCR为痰标本。

嘱患者留取晨痰2～5ml（结核患者需停抗结核药3d）。

结核抗体检测则采静脉血2ml。

1.2方法1.2.1涂片染色镜检是临床常用的简易快速的检查方法：取痰或其他已外理好的标本0.1ml，于载玻片上均匀涂抹成2cm×2.5cm椭圆形范围，以自然干燥和火焰固定后，进行抗酸染色，采用珠海贝索生物技术有限公司的结核染色液。

染色步骤：①石碳酸复红溶液染色20min；②5%盐酸酒精脱色3min；③亚甲基蓝溶液染色30S。

痰找结核杆菌方法
找到结核杆菌的方法主要包括以下几个方面：
1. 痰涂片检查：通过观察痰液中的细菌形态、染色性质等来判断是否存在结核杆菌。

痰涂片检查是一种常用而快捷的初筛方法。

2. 结核菌涂片培养：将痰液中的结核杆菌培养在适宜的培养基上，通过观察培养结果来确认是否存在结核杆菌。

结核菌涂片培养是确定结核杆菌感染的标准方法。

3. 结核杆菌DNA检测：通过PCR技术，检测痰液中结核杆菌的DNA，从而准确诊断结核病。

这种方法可以快速、敏感地检测出结核杆菌的存在。

4. 胸部X线检查：结核杆菌感染常导致肺部病变，通过胸部X线检查可以观察肺部是否有结核病灶的存在，但该方法不能直接检测结核杆菌。

5. 结核菌素试验：注射结核菌素（PPD），通过观察皮肤反应判断是否感染了结核杆菌。

这是一种常用的结核菌感染筛查方法。

需要注意的是，以上方法都是在医疗机构进行的专业检查，只有经过医生的诊断才能确认是否感染了结核杆菌。

如果有相关症状或疑似感染，建议及时就医。

第 １ １ 期 Ｃ ｈ ｉ ｎ Ｊ Ｎｏ ｓ ｏ ｃ ｏ ｍｉ ｏ ｌ Ｖｏ １ ． ２ ２ Ｎ０ ． １ １ ２ ０ １ ２
・
论 著 ・
４种 结 核 分 枝杆 菌检 测 方法 的 比较
王 华 钧 ，孙 小 军 ， 金 法祥 ， 诸 雪 萍
（ 绍兴 市第 六 人 民 医 院呼 吸 内科 ， 浙江绍兴 ３ １ ２ ０ ｏ ｏ ）
摘 要 ：目的
建立更快速 、 准 确 的痰 结 核 分 枝 杆 菌 检 测 方 法 。方 法 收 集 ８ ３份 肺 结 核 病 患 者 的 痰 标 本 ， 分 别 采
Ｌ ＡＭＰ试 验 结 核 分 枝 杆 菌 检 出 率 为 ７ ２ ． ６ ， 高 于 罗 氏培 养 法 的 ５ ７ ． ８ （ ｙ 。 ：１ １ ． ４ ，
ｓ ｔ ａ ｉ ｎ ｏ ｆ Ａｕ ｒ ａ ｍｉ ｎ ｅ Ｏ ａ ｎ ｄ Ｚ ｉ ｅ ｈ ｉ － Ｎｅ ｅ ｌ ｓ ｅ ｎ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｂ ｙ ｓ ｍｅ ａ ｒ ，Ｌ ｏ ｗｅ ｎ ｓ ｔ ｅ ｉ ｎ — Ｊ ｅ ｎ ｓ ｅ ｎ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ａ ｎ ｄ ｌ ｏ ｏ ｐ — ｍｅ ｄ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ ｉ ｓ ｏ ｔ ｈ ｅ ｒ ｍａ ｌ
中华 医 院感 染 学 杂 志 ２ ０ １ ２年 第 ２ ２ 卷第 １ １ 期Ｃ ｈ ｉ ｎ Ｊ Ｎ ｏ ｓ ｏ ｅ ｏ ｍｉ ｏ ｌ Ｖｏ １ ． ２ ２ Ｎｏ ． １ １ ２ ０ １ ２
式 染色 ， 金胺 。染色镜 检 ， 罗 氏培养及 Ｌ ＡＭＰ试验 。
１ ． ３ ． １ 萋一 尼式 染色 显微镜 检查 涂片 、 染色、 显微 镜检 查操作 参照《 中 国结 核 病 防 治规 划 一 痰 涂 片镜 检查标 准化操 作 及 质量 保 证 手册 》 进 行 。荧 光染 色

PCR法与直接涂片镜检法检查结核杆菌的比较摘要：目的：对结核杆菌采用PCR法和直接涂片镜检法进行检查，分析两种方法在诊断上的效果。

方法：选择2022年3月-2023年3月本院收治的结核病患者50例患者作为主要分析对象，对所有的患者分别采用PCR法和直接涂片镜检法进行检查，统计检查结果。

结果：采用PCR法对患者进行检查，阳性检出率为37例（74.0%）；采用直接涂片镜检法进行检查，阳性检出率为17例（34.0%），前者检出率明显高于后者，存在显著差异和统计学意义（P＜0.05）。

结论：在结合杆菌的检验中，采用PCR法具有良好的诊断和鉴别效果，有较高的应用价值。

关键词：结核杆菌；PCR法、直接涂片镜检法引言：结核杆菌极是导致结核病发生的重要因素，该病具有较高的传染性，对人类健康有着较大的威胁，在导致死亡发生的传染性疾病中排名靠前。

据相关数据统计，全球人口中感染结核分支杆菌的人数约有三分之一，且每年约有1000万新发病例，且具有较多死亡人数；发展中国家发生该病的数量较大，约占95%。

我国是结核病发生率较高的国家之一[1]。

合理地使用地使用药物对结核病进行控制是重要的方法之一，除此之外还要对尽早地进行实验室诊断，只有这样才能够对该病进行早期干预，并其提高治疗效果。

对于结核病的检查中，基本方法为痰涂片直接镜检法，其也是临床实验室应用较为广泛的方法之一。

就荧光定量PCR法而言，其是一种新型检查方法，属于核酸定量技术，在临床中的应用也越来越广泛[2]。

为了分析两种方法的检验效果，本研究选择部分患者，分别接受两种检查方法，统计相关结果后，对以下报道进行分析。

1资料与方法1.1一般资料本研究选择2022年3月-2023年3月收治的结核病患者50例作为主要分析对象，采用不同的检查方法，所有的患者中男性28例，女性22例，最低年龄18岁，最高年龄81岁，年龄平均值为（45.19±4.23）岁。

1.2方法1.2.1PCR法选择中山大学达安基因股份有限公司提供的PCR试剂盒和相关引物，在检验的过程中对采集的标本进行预处理，首先取患者晨起时深咳痰液，之后进行送检。