大蒜提取液抑菌活性的探究活动
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资料范本本资料为word版本,可以直接编辑和打印,感谢您的下载大蒜细胞SOD酶的提取分离与活性测定地点:__________________时间:__________________说明:本资料适用于约定双方经过谈判,协商而共同承认,共同遵守的责任与义务,仅供参考,文档可直接下载或修改,不需要的部分可直接删除,使用时请详细阅读内容大蒜细胞SOD酶的提取分离与活性测定目的1.掌握SOD酶的提取、分离、检测一般步骤。
2.了解酶在提取过程中的两个参数:回收率、纯化倍数。
试剂大蒜,磷酸缓冲液(PH7.8, 0.05mol/l)(PH8.3),氯仿—乙醇混合液冷丙酮,邻苯三酚,浓盐酸方法1.SOD提取:称取5g大蒜蒜瓣,加入石英砂研磨破碎细胞,加入15mlPH7.8、0.05mol/L的磷酸缓冲液,研磨搅拌20分钟,使SOD充分溶解,6000rpm离心,弃去沉淀,得上清液。
(留出1ml备用,准确量取剩余上清液体积,记录)2.除杂蛋白:提取液加入1/4体积的氯仿-乙醇混合液搅拌10分钟,6000rpm离心15min去沉淀,得粗酶液。
(取1ml粗酶液备用,精确测量剩余粗酶液体积)3.SOD酶的沉淀分离:剩余的粗酶液中加入等体积的冷丙酮,搅拌15min,6000rpm离心15min,得到SOD酶沉淀。
将沉淀先加2ml磷酸缓冲液,溶解后在加3ml混匀。
6000rpm离心15min,取上清得到SOD酶液。
取1ml备用,其余量取体积。
2. 大蒜SOD的提取液活性测定提取液、粗酶液、酶液中SOD活力检测,1)溶液中可溶性蛋白含量测定:分别从1ml 备用的提取液、粗酶液、酶液各取0.3ml按以下倍数稀释,260nm/280nm测定吸光值,按公式计算蛋白质浓度.提取液稀释:50 ×粗酶液稀释:20 ×酶液稀释:10 ×蛋白质浓度(mg/ml)=(1.45A280 – 0.74A260) ×稀释倍数计算酶活力单位U/ml=2(OD1-OD2)×5/0.1(1ml反应液中,每分钟抑制邻苯三酚自氧化速率达到80%时的酶量) 总活力U=活力单位×总体积比活力U/mg=活力单位/蛋白质浓度纯化倍数=粗酶液(酶液)比活力/提取液比活力回收率=粗酶液(酶液)总活力/提取液总活力试验结果记录:1)2)蛋白质含量的测定:3)提取液:酶活力单位U/ml = 4.0总活力 U = 41.2蛋白质浓度(mg/ml)= 6.09比活力 U/mg = 0.6568粗酶液: 酶活力单位U/ml = 1.3总活力 U = 12.78蛋白质浓度(mg/ml)= 3.542比活力 U/mg = 0.3670酶液: 酶活力单位U/ml = 6.8总活力 U = 65.96蛋白质浓度(mg/ml)= 0.719比活力 U/mg = 9.45764)粗酶液: 纯化倍数 = 0.56回收率 = 0.31酶液: 纯化倍数 = 14.40回收率 = 1.60实验结果讨论:粗酶液的实验结果较为正确,操作较为得当,试剂添加较为合理。
资料范本本资料为word版本,可以直接编辑和打印,感谢您的下载大蒜细胞SOD酶的提取分离与活性测定地点:__________________时间:__________________说明:本资料适用于约定双方经过谈判,协商而共同承认,共同遵守的责任与义务,仅供参考,文档可直接下载或修改,不需要的部分可直接删除,使用时请详细阅读内容大蒜细胞SOD酶的提取分离与活性测定目的1.掌握SOD酶的提取、分离、检测一般步骤。
2.了解酶在提取过程中的两个参数:回收率、纯化倍数。
试剂大蒜,磷酸缓冲液(PH7.8, 0.05mol/l)(PH8.3),氯仿—乙醇混合液冷丙酮,邻苯三酚,浓盐酸方法1.SOD提取:称取5g大蒜蒜瓣,加入石英砂研磨破碎细胞,加入15mlPH7.8、0.05mol/L的磷酸缓冲液,研磨搅拌20分钟,使SOD充分溶解,6000rpm离心,弃去沉淀,得上清液。
(留出1ml备用,准确量取剩余上清液体积,记录)2.除杂蛋白:提取液加入1/4体积的氯仿-乙醇混合液搅拌10分钟,6000rpm离心15min去沉淀,得粗酶液。
(取1ml粗酶液备用,精确测量剩余粗酶液体积)3.SOD酶的沉淀分离:剩余的粗酶液中加入等体积的冷丙酮,搅拌15min,6000rpm离心15min,得到SOD酶沉淀。
将沉淀先加2ml磷酸缓冲液,溶解后在加3ml混匀。
6000rpm离心15min,取上清得到SOD酶液。
取1ml备用,其余量取体积。
2. 大蒜SOD的提取液活性测定提取液、粗酶液、酶液中SOD活力检测,1)溶液中可溶性蛋白含量测定:分别从1ml 备用的提取液、粗酶液、酶液各取0.3ml按以下倍数稀释,260nm/280nm测定吸光值,按公式计算蛋白质浓度.提取液稀释:50 ×粗酶液稀释:20 ×酶液稀释:10 ×蛋白质浓度(mg/ml)=(1.45A280 – 0.74A260) ×稀释倍数计算酶活力单位U/ml=2(OD1-OD2)×5/0.1(1ml反应液中,每分钟抑制邻苯三酚自氧化速率达到80%时的酶量) 总活力U=活力单位×总体积比活力U/mg=活力单位/蛋白质浓度纯化倍数=粗酶液(酶液)比活力/提取液比活力回收率=粗酶液(酶液)总活力/提取液总活力试验结果记录:1)2)蛋白质含量的测定:3)提取液:酶活力单位U/ml = 4.0总活力 U = 41.2蛋白质浓度(mg/ml)= 6.09比活力 U/mg = 0.6568粗酶液: 酶活力单位U/ml = 1.3总活力 U = 12.78蛋白质浓度(mg/ml)= 3.542比活力 U/mg = 0.3670酶液: 酶活力单位U/ml = 6.8总活力 U = 65.96蛋白质浓度(mg/ml)= 0.719比活力 U/mg = 9.45764)粗酶液: 纯化倍数 = 0.56回收率 = 0.31酶液: 纯化倍数 = 14.40回收率 = 1.60实验结果讨论:粗酶液的实验结果较为正确,操作较为得当,试剂添加较为合理。
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2.了解酶在提取过程中的两个参数:回收率、纯化倍数。
试剂大蒜,磷酸缓冲液(PH7.8, 0.05mol/l)(PH8.3),氯仿—乙醇混合液冷丙酮,邻苯三酚,浓盐酸方法1.SOD提取:称取5g大蒜蒜瓣,加入石英砂研磨破碎细胞,加入15mlPH7.8、0.05mol/L的磷酸缓冲液,研磨搅拌20分钟,使SOD充分溶解,6000rpm离心,弃去沉淀,得上清液。
(留出1ml备用,准确量取剩余上清液体积,记录)2.除杂蛋白:提取液加入1/4体积的氯仿-乙醇混合液搅拌10分钟,6000rpm离心15min去沉淀,得粗酶液。
(取1ml粗酶液备用,精确测量剩余粗酶液体积)3.SOD酶的沉淀分离:剩余的粗酶液中加入等体积的冷丙酮,搅拌15min,6000rpm离心15min,得到SOD酶沉淀。
将沉淀先加2ml磷酸缓冲液,溶解后在加3ml混匀。
6000rpm离心15min,取上清得到SOD酶液。
取1ml备用,其余量取体积。
2. 大蒜SOD的提取液活性测定提取液、粗酶液、酶液中SOD活力检测,1)溶液中可溶性蛋白含量测定:分别从1ml 备用的提取液、粗酶液、酶液各取0.3ml按以下倍数稀释,260nm/280nm测定吸光值,按公式计算蛋白质浓度.提取液稀释:50 ×粗酶液稀释:20 ×酶液稀释:10 ×蛋白质浓度(mg/ml)=(1.45A280 – 0.74A260) ×稀释倍数计算酶活力单位U/ml=2(OD1-OD2)×5/0.1(1ml反应液中,每分钟抑制邻苯三酚自氧化速率达到80%时的酶量) 总活力U=活力单位×总体积比活力U/mg=活力单位/蛋白质浓度纯化倍数=粗酶液(酶液)比活力/提取液比活力回收率=粗酶液(酶液)总活力/提取液总活力试验结果记录:1)2)蛋白质含量的测定:3)提取液:酶活力单位U/ml = 4.0总活力 U = 41.2蛋白质浓度(mg/ml)= 6.09比活力 U/mg = 0.6568粗酶液: 酶活力单位U/ml = 1.3总活力 U = 12.78蛋白质浓度(mg/ml)= 3.542比活力 U/mg = 0.3670酶液: 酶活力单位U/ml = 6.8总活力 U = 65.96蛋白质浓度(mg/ml)= 0.719比活力 U/mg = 9.45764)粗酶液: 纯化倍数 = 0.56回收率 = 0.31酶液: 纯化倍数 = 14.40回收率 = 1.60实验结果讨论:粗酶液的实验结果较为正确,操作较为得当,试剂添加较为合理。
大蒜\生姜复配提取液抑菌防腐及其对果蔬保鲜效果的研究作者:王珺吴晓霍乃蕊来源:《现代农业科技》2011年第02期摘要对大蒜、生姜提取液复配,以苯甲酸钠为对照,测定对指示菌的抑菌效果,结果表明:复配提取液的抑菌效果优于苯甲酸钠;耐热性测定表明复配提取液的抑菌成分对高温不稳定;并通过对果蔬保鲜进一步观察,用复配提取液浸泡后可延长货架期。
关键词大蒜;生姜;复配提取液;抑菌防腐;保鲜效果中图分类号TS201.3;Q93-3文献标识码A文章编号 1007-5739(2011)02-0363-01StudyonTheAntimicrobialandAntisepticEffectsoftheExtractionMixturefromGarlicandGingerandIt sEffectofFresh-keepingonFruitsandVegetablesWANG JunWU XiaoHUO Nai-rui*(College of Food Science and Engineering,Shanxi Agricultural University,Taigu Shanxi 030801)AbstractBy the extraction mixture from garlic and ginger,the antimicrobial actions to indicators were determined with sodium benzoate as contrast.The results showed that the antimicrobial effects of extraction mixture were better than sodium benzoate.Determination of heat tolerance showed that the antimicrobial ingredients of extraction mixture didn’t have a high temperature resistance. Further observation showed that fruits and vegetables which soaked into extraction mixture would prolong the shelf life.Key wordsgarlic;ginger;extraction mixture;antimicrobial and antiseptic actions;the effect of fresh-keeping大蒜(A.sativum L.)为百合科葱属植物,其鳞茎奇特的功效很早以前就被发现和利用,被誉为天然广谱抗生素。
大蒜水提物抑菌作用的研究赵璇【期刊名称】《《中国调味品》》【年(卷),期】2019(044)011【总页数】3页(P198-200)【关键词】大蒜; 提取方式; 抑菌作用【作者】赵璇【作者单位】河北化工医药职业技术学院石家庄050026【正文语种】中文【中图分类】TS201.3大蒜是一种长期以来在食品生产中,用来提高食品风味的风味增强剂。
随着人们对大蒜研究的不断深入,大蒜除了挥发性化合物外,还含有丰富的维生素(尤其是B族维生素和维生素C)、抗氧化剂、黄酮类和矿物质[1],同时被认为是其他非挥发性营养素的丰富来源,具有较强杀菌能力的活性成分、有机硫化合物及其前体(大蒜素、二烯丙基硫醚和二烯丙基三硫化物)[2-4]。
大蒜以其药用特性和抗微生物活性而闻名[5-7]。
对多种微生物有抑制作用。
现今的研究表明,大蒜提取物的抑菌作用主要表现为大蒜中提取的大蒜油、大蒜素等[8-18]。
用生物技术和食品工业的其他加工方法,例如烫漂、煮沸、油炸和微波,对大蒜抑菌活性的含量有显著影响,然而,家庭烹饪方法可能会显著降低生物活性化合物和蛋白质中的大蒜含量,从而降低抗氧化活性,尤其是在100 ℃下长时间暴露(>20 min)后,本研究用水对大蒜进行提取,研究通过水提取大蒜抑菌成分的最优提取条件,为大蒜水提物抑菌成分的提取提供了理论依据。
1 实验1.1 实验材料实验用大蒜样品:购于河北某超市;蛋白胨培养基、菌种(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌):购自盛天忆生物公司。
1.2 实验方法1.2.1 大蒜水提物的制备将购买的大蒜进行消毒,用酒精对带皮大蒜进行擦拭,用食品级粉碎机同时进行酒精消毒,之后对大蒜进行去皮、粉碎,称取搅碎后的蒜末50 g,加入5 mL灭菌后的水搅拌,使用1 mol/L HCl和1 mol/L NaOH进行pH的调节,设置pH为2,4,6,8,10的5个梯度,在不同温度的水浴锅中控制不同温度进行提取,设置温度梯度组为20,30,40,50,60 ℃ 5个梯度,控制不同的提取时间为20,40,60,80,100 min,在不同条件下提取的滤液即为大蒜水提物。
大蒜中SOD活性的测定一、实验目的:(1)掌握SOD酶的提取、分离、检测一般步骤。
(2)了解酶在提取过程中的两个参数:回收率、纯化倍数。
(3)掌握离心机的使用。
二、实验原理:邻苯三酚在碱性条件下,能迅速自氧化,释放出O2-,生成带色的中间产物,中间物的积累在滞留30~45s后,与时间成线性关系,一般线性时间维持在4min的范围内,中间物在420nm波长处有强烈光吸收。
当有SOD存在时,由于它能催化O2-与H+结合生成O2和H2O2,从而阻止了中间产物的积累,因此,通过测定光吸收即可求出SOD的酶活性。
三、实验试剂:大蒜、冷丙酮、磷酸缓冲液(PH7.8,0.05mol/L)、氯仿-乙醇混合液、邻苯三酚、浓盐酸、天平、石英砂、研钵、冷冻离心机、50mL离心管8个、紫外-可见分光光度计、250mL三角瓶8个、玻璃棒8根、试剂瓶250mL 3个、500mL 3个、250mL烧杯16个、试管带胶塞80根、移液管各5根四、实验步骤:(1)SOD提取:称取5g大蒜蒜瓣,加入石英砂研磨破碎细胞,加入15mL的PH7.8 0.05mol/L的磷酸缓冲液,研磨搅拌20分钟,使SOD充分溶解,6000rpm离心,弃去沉淀,得上清液。
(留出1mL备用,准确量取剩余上清液体积,记录)(2)除杂蛋白:提取液加入1/4体积的氯仿-乙醇混合液搅拌10min,6000rpm离心15min去沉淀,得粗酶液。
(取1mL粗酶液备用,精确测量剩余粗酶液体积)(3)SOD酶的沉淀分离:剩余的粗酶液中加入等体积的冷丙酮,搅拌15min,6000rpm离心15min,得到SOD酶沉淀。
将沉淀先加2mL磷酸缓冲液,溶解后再加3mL混匀。
6000rpm离心15min,取上清得到SOD酶液。
取1mL备用,其余量取体积。
(4)粗酶液活性测定:提取液、粗酶液、酶液中SOD活力检测,具体步骤如下。
加入邻苯三酚后迅速混匀,准确计时4min,加一滴浓盐酸停止反应,420nm测吸光值。
大蒜中SOD活性的测定一、实验目的:(1)掌握SOD酶的提取、分离、检测一般步骤。
(2)了解酶在提取过程中的两个参数:回收率、纯化倍数。
(3)掌握离心机的使用。
二、实验原理:邻苯三酚在碱性条件下,能迅速自氧化,释放出O2-,生成带色的中间产物,中间物的积累在滞留30~45s后,与时间成线性关系,一般线性时间维持在4min的范围内,中间物在420nm波长处有强烈光吸收。
当有SOD存在时,由于它能催化O2-与H+结合生成O2和H2O2,从而阻止了中间产物的积累,因此,通过测定光吸收即可求出SOD的酶活性。
三、实验试剂:大蒜、冷丙酮、磷酸缓冲液(PH7.8,0.05mol/L)、氯仿-乙醇混合液、邻苯三酚、浓盐酸、天平、石英砂、研钵、冷冻离心机、50mL离心管8个、紫外-可见分光光度计、250mL三角瓶8个、玻璃棒8根、试剂瓶250mL 3个、500mL 3个、250mL烧杯16个、试管带胶塞80根、移液管各5根四、实验步骤:(1)SOD提取:称取5g大蒜蒜瓣,加入石英砂研磨破碎细胞,加入15mL的PH7.8 0.05mol/L的磷酸缓冲液,研磨搅拌20分钟,使SOD充分溶解,6000rpm离心,弃去沉淀,得上清液。
(留出1mL备用,准确量取剩余上清液体积,记录)(2)除杂蛋白:提取液加入1/4体积的氯仿-乙醇混合液搅拌10min,6000rpm离心15min去沉淀,得粗酶液。
(取1mL粗酶液备用,精确测量剩余粗酶液体积)(3)SOD酶的沉淀分离:剩余的粗酶液中加入等体积的冷丙酮,搅拌15min,6000rpm离心15min,得到SOD酶沉淀。
将沉淀先加2mL磷酸缓冲液,溶解后再加3mL混匀。
6000rpm离心15min,取上清得到SOD酶液。
取1mL备用,其余量取体积。
(4)粗酶液活性测定:提取液、粗酶液、酶液中SOD活力检测,具体步骤如下。
加入邻苯三酚后迅速混匀,准确计时4min,加一滴浓盐酸停止反应,420nm测吸光值。
大蒜细胞SOD酶的提取分离与活性测定目的1.掌握SOD酶的提取、分离、检测一般步骤。
2.了解酶在提取过程中的两个参数:回收率、纯化倍数。
试剂大蒜,磷酸缓冲液(PH7.8, 0.05mol/l)(PH8.3),氯仿—乙醇混合液冷丙酮,邻苯三酚,浓盐酸方法1.SOD提取:称取5g大蒜蒜瓣,加入石英砂研磨破碎细胞,加入15mlPH7.8、0.05mol/L的磷酸缓冲液,研磨搅拌20分钟,使SOD充分溶解,6000rpm离心,弃去沉淀,得上清液。
(留出1ml备用,准确量取剩余上清液体积,记录)2.除杂蛋白:提取液加入1/4体积的氯仿-乙醇混合液搅拌10分钟,6000rpm 离心15min去沉淀,得粗酶液。
(取1ml粗酶液备用,精确测量剩余粗酶液体积)3.SOD酶的沉淀分离:剩余的粗酶液中加入等体积的冷丙酮,搅拌15min,6000rpm 离心15min,得到SOD酶沉淀。
将沉淀先加2ml磷酸缓冲液,溶解后在加3ml混匀。
6000rpm离心15min,取上清得到SOD酶液。
取1ml备用,其余量取体积。
2. 大蒜SOD的提取液活性测定提取液、粗酶液、酶液中SOD活力检测,1)溶液中可溶性蛋白含量测定:分别从1ml 备用的提取液、粗酶液、酶液各取0.3ml按以下倍数稀释,260nm/280nm测定吸光值,按公式计算蛋白质浓度.提取液稀释:50 ×粗酶液稀释:20 ×酶液稀释:10 ×蛋白质浓度(mg/ml)=(1.45A280– 0.74A260) ×稀释倍数计算酶活力单位U/ml=2(OD1-OD2)×5/0.1(1ml反应液中,每分钟抑制邻苯三酚自氧化速率达到80%时的酶量) 总活力U=活力单位×总体积比活力U/mg=活力单位/蛋白质浓度纯化倍数=粗酶液(酶液)比活力/提取液比活力回收率=粗酶液(酶液)总活力/提取液总活力试验结果记录:1)2)蛋白质含量的测定:3)提取液:酶活力单位U/ml = 4.0总活力 U = 41.2蛋白质浓度(mg/ml)= 6.09比活力 U/mg = 0.6568粗酶液: 酶活力单位U/ml = 1.3总活力 U = 12.78蛋白质浓度(mg/ml)= 3.542比活力 U/mg = 0.3670酶液: 酶活力单位U/ml = 6.8总活力 U = 65.96蛋白质浓度(mg/ml)= 0.719比活力 U/mg = 9.45764)粗酶液: 纯化倍数 = 0.56回收率 = 0.31酶液: 纯化倍数 = 14.40回收率 = 1.60实验结果讨论:粗酶液的实验结果较为正确,操作较为得当,试剂添加较为合理。
大蒜的酒精浸提工艺及产品开发研究概述大蒜作为一种常见的调味品和药用植物,具有广泛的健康益处,包括抗菌,抗炎和抗氧化特性。
酒精浸提是一种常见的方法,用于提取蒜中的活性成分,提高其生物活性。
本文旨在探讨大蒜的酒精浸提工艺,并介绍几种常见的基于酒精浸提的大蒜产品开发。
酒精浸提工艺酒精浸提工艺是一种通过将大蒜浸泡在酒精中提取大蒜中的有效成分的方法。
该工艺的关键是选择合适的酒精浓度和浸提时间。
一般来说,大蒜中的活性成分可在不同的酒精浓度下被提取。
在较低的酒精浓度下,大蒜中的可溶性成分,如大蒜素和大蒜糖蛋白,可被提取出来。
而较高浓度的酒精可以提取大蒜中的脂溶性成分,如大蒜油。
因此,根据不同的需求,选择不同浓度的酒精是非常重要的。
此外,浸提时间也是影响酒精浸提工艺的关键因素。
较短的浸提时间可提取大蒜中的较少量活性成分,而较长的浸提时间则可提取更多活性成分。
在实际操作中,浸泡时间应根据所需产品的特性和品质要求进行调整。
产品开发基于酒精浸提的大蒜产品开发具有巨大的潜力。
以下是几种常见的基于酒精浸提的大蒜产品开发方向:1.大蒜精油大蒜精油是通过在酒精中浸泡大蒜,并将提取出的液体进行蒸馏而得到的。
大蒜精油具有强烈的辛辣气味和独特的风味,可用于食品调味和保健品制造。
研究表明,大蒜精油具有抗菌,抗氧化和抗炎的活性,对预防心血管疾病和癌症具有潜在的应用价值。
2.大蒜提取物大蒜提取物是通过将酒精浸提液进行浓缩而得到的。
根据浸提液的浓度和成分,大蒜提取物可以分为不同的形式,如粉末、液体和固体。
大蒜提取物富含大蒜中的活性化合物,如大蒜素和大蒜多糖。
研究表明,大蒜提取物具有很多生物活性,包括抗菌,抗炎和抗肿瘤等作用。
因此,大蒜提取物可用于制造保健品和药品。
3.大蒜口服液大蒜口服液是在酒精浸提液基础上加入适量的保健成分和辅助剂配制而成。
大蒜口服液不仅具有大蒜的保健功效,还可根据不同的需求添加其他保健成分,如维生素和矿物质。
大蒜口服液可以作为保健品,用于增强免疫力和改善心血管健康。
第1篇一、实验目的本研究旨在研发一种以天然植物抑菌活性成分为主导的植物源新农药,以解决农林植保行业细菌病害重大瓶颈问题,提高农作物的产量和品质,降低农药对环境的污染。
二、实验材料1. 天然植物原料:如大蒜、辣椒、烟草等;2. 提取溶剂:如乙醇、甲醇、水等;3. 分析仪器:高效液相色谱仪(HPLC)、紫外可见分光光度计(UV-Vis)等;4. 其他:蒸馏设备、旋转蒸发仪、恒温水浴锅、天平等。
三、实验方法1. 植物抑菌活性成分提取(1)将天然植物原料进行干燥、粉碎处理,过筛得到粉末;(2)采用溶剂提取法,以不同比例的乙醇、甲醇、水等溶剂对植物粉末进行提取;(3)提取液经过蒸馏、浓缩、结晶等步骤,得到植物抑菌活性成分。
2. 植物源农药制备(1)将提取得到的植物抑菌活性成分进行纯化处理,得到目标化合物;(2)将目标化合物与助剂、稳定剂等按一定比例混合,制备成植物源农药原液;(3)将原液经过喷雾干燥、筛分等步骤,得到粉末状植物源农药。
3. 田间试验(1)选取不同品种的农作物,如柑橘、桃树、梨树等;(2)将制备好的植物源农药按照一定浓度进行喷雾处理;(3)观察农药对农作物细菌病害的防治效果,记录数据;(4)分析数据,评估农药的防治效果。
四、实验结果与分析1. 植物抑菌活性成分提取经过多次实验,发现乙醇提取法在提取植物抑菌活性成分方面效果较好。
提取得到的活性成分含量较高,纯度较高。
2. 植物源农药制备制备得到的植物源农药粉末状,稳定性较好,便于储存和使用。
3. 田间试验通过对柑橘、桃树、梨树等农作物进行喷雾处理,观察农药对细菌病害的防治效果。
结果表明,该植物源农药对细菌病害具有显著的防治效果,与现有化学农药相比,防治效果相当,且对农作物和环境友好。
五、结论本研究成功研发了一种以天然植物抑菌活性成分为主导的植物源新农药,具有以下特点:1. 防治效果显著,与现有化学农药相当;2. 对农作物和环境友好,降低农药残留;3. 制备工艺简单,便于大规模生产。
蔡锦玲,陈品品,蓝波妙,等.大蒜精油提取、成分分析及其抑菌效果[J].江苏农业科学,2020,48(23):186-190.doi:10.15889/j.issn.1002-1302.2020.23.038大蒜精油提取、成分分析及其抑菌效果蔡锦玲,陈品品,蓝波妙,林 涛(泉州市农业科学研究所,福建泉州362200) 摘要:大蒜除了含有丰富的营养物质,还具有良好的药用功效,提取出的大蒜精油对人体、作物和环境安全。
通过分析4种不同大蒜品种的出油量,气相色谱-质谱法分析大蒜精油的成分和抑菌成分的相对含量,并利用体外直接接触的方式研究对粉红单端孢菌、链格孢菌、灰葡萄孢菌、意大利青霉和匍枝根霉菌的抑菌效果。
结果表明:不同品种的出油量存在显著差异,白皮大蒜出油量约为紫白皮大蒜出油量的4倍;大蒜精油成分分析中,50%的成分具有抑菌作用;在对5种病原菌的抑菌试验中,大蒜精油均表现出良好抑菌效果,抑制效果为粉红单端孢菌>链格孢菌>灰葡萄孢菌>意大利青霉>匍枝根霉菌。
由此可见,大蒜精油具有良好的抑菌作用,能够用于果蔬采后保鲜中。
关键词:大蒜精油;出油量;气相色谱-质谱法(GC-MS);抑菌;保鲜 中图分类号:TS201 文献标志码:A 文章编号:1002-1302(2020)23-0186-04收稿日期:2020-04-10基金项目:福建省泉州市科技计划(编号:2018N053)。
作者简介:蔡锦玲(1989—),女,福建晋江人,硕士,助理研究员,主要从事番茄育种与栽培技术研究。
Tel:(0595)85989620;E-mail:704121193@qq.com。
通信作者:林 涛,副研究员,主要从事番茄育种与栽培技术研究。
E-mail:85856141@qq.com。
大蒜(AlliumsativumL.)属于百合科葱属,起源于亚欧大陆的中南部地区,目前全球范围均有种植[1]。
大蒜的地下鳞茎包含的化学成分复杂,如氨基酸、维生素、脂肪、微量元素及硫化合物等,不但是日常饮食中不可或缺的调味食材,还具有抑菌、保健抗癌和提高免疫力等作用[2-4]。
生物学教学2012年(第37卷)第5期 ·53·
大蒜提取液抑菌活性的探究活动
陈 琼 黄一平 陈铭德 (华东师范大学生命科学学院上海200062)
摘要本文介绍了一种探究大蒜提取液抑制蜡状芽胞杆菌(Bacillus cereus)生长的实验方法,旨在引导学生对相关公共卫生问题
的讨论。
关键词 大蒜提取液蜡状芽胞杆菌抑菌活性公共卫生
1实验原理
大蒜为百合科葱属植物的鳞茎,是人类的天然食 品,食用大蒜更是人们日常生活中防治疾病的重要手 段。大蒜除可食用外,还具有多种独特的药理特性,例 如大蒜提取液就能抑制金黄色葡萄球菌(Staphylocco. c 0 re )、大肠杆菌(Escherichia coli)等多数细菌以 及部分的真菌。研究表明,大蒜主要抑菌活性成分的 总称叫做大蒜素,它抗菌谱广,具有“天然广谱抗生 素”之美誉,其抑菌机理是大蒜素中的主要活性物质二 硫醚和三硫醚能够透过病菌的细胞膜进入细胞质中, 将含巯基的酶氧化为双硫键,不可逆地抑制巯基蛋白 酶的活性,从而抑制细胞分裂、破坏细菌代谢,使细菌 无法正常繁殖和生长…。大蒜素也因此被认为是一 种很有前途的替代品。本实验通过研磨过滤的方法获 得大蒜提取液,利用提取液中的大蒜素具有抑菌作用 的特点,在涂布了蜡状芽胞杆菌的培养基上分别滴加 等量的大蒜提取液和无菌水,通过观察滴有大蒜提取 液的周围会形成一个透明圈,来证明大蒜提取液具有 抑菌效果_2 J。 2材料与器具 2.1 实验材料蜡状芽胞杆菌、新鲜大蒜、琼脂、肉 类、糖、食盐、无菌水、75%的酒精。 2.2 实验器具搪瓷杯、烧杯、500mL的三角锥形瓶、 天平、微波炉(或高压蒸汽灭菌锅)、酒精灯、记号笔, 以及消毒灭菌过的移液管、玻璃棒、培养皿、试管、试管 塞、涂布棒、研钵、纱布、lOmL的注射器等。 3实验步骤 3.1 肉汤琼脂培养基的配制 称量150g的猪肉置于 搪瓷杯内,用20OraL沸水煮lOmin,通过纱布过滤转移 至50OraL的锥形瓶,分别加人6g糖、1.25g食盐和3. 75g琼脂,定容至250mL。用微波炉加热灭菌5rain(或 用高压灭菌锅121℃下灭菌15rain),为了避免因培养 液过热而溢出,每加热1rain需冷却15s。然后在在酒 精灯附近倒l0皿平板(每皿约25mL),放置一段时间, 使得培养基充分凝固。接着的操作要在无菌操作台内 或酒精灯附近进行。 3.2 细菌悬浮液的制备向长有蜡状芽孢杆菌的培 养基里倒人5mL无菌蒸馏水,用无菌玻璃棒捋动细 菌,再用无菌移液管移取lmL悬浮液到无菌试管里, 加入9mL无菌蒸馏水以稀释lO倍,塞好试管塞。制备
好的细菌悬浮液可在冰箱(一20℃)里至少保存2个
月。
3.3大蒜素的提取将3~4个中等蒜瓣(约5g)去
皮并用无菌蒸馏水冲洗干净。用无菌研钵碾碎大蒜,
并以1:1的比例加入等量无菌蒸馏水进行稀释,然后
在无菌的注射器内侧套上无菌纱布,利用该装置将稀
释后的大蒜提取液过滤到无菌试管中,盖好试管塞。
该提取物在4℃以下至少可存储3个月。
3.4生物活性测定测定方法如下:
3.4.1 细菌的接种将lmL的细菌悬浮液滴加到每
个肉汤琼脂培养基上,使用无菌涂布棒涂布均匀,然后
将培养基搁置在斜面上,用无菌移液管吸走多余的液
体。平置lOmin使细菌充分附着在培养基上。
3.4.2抑菌活性测定将培养基均分两侧,分别在两
侧的中央滴上一滴(约201 ̄L)大蒜提取液和等量的无
菌蒸馏水,搁置一段时间,直到液滴被培养基充分吸
收,然后将培养皿在室温下倒置培养24h(或37%下倒
置培养12h),就可观察到如图1的实验结果,则可表
明大蒜提取液确实抑制了蜡状芽孢杆菌的生长,具有
抑菌活性。最后,所有生物垃圾在废弃之前要用高压
蒸汽灭菌锅或微波炉灭菌消毒。
图1 大蒜提取液对蜡状芽孢杆菌的抑菌效果
4结果与讨论
实验操作要求正确、规范,就能观察到滴加大蒜提
取液的培养基周围形成的透明圈,与滴加无菌水的部
位不同,从而见证大蒜提取液对蜡状芽孢杆菌生长的
抑制作用。除了大蒜以外,日常食用的一些植物也具
54· 生物学教学2012年(第37卷)第5期
四大人种主要特征的比较
李洪臣 杨秀艳 (河北省沧州师范学院生命科学系o6l0o1)
现代人种形成距今至少有4万~5万年,通常分 为黄色人种(又称蒙古人种)、白色人种(又称欧罗巴 人种)、黑色人种(又称尼格罗人种)和棕色人种(又称 澳大利亚人种)等四大人种[¨,其主要特征、代表人种 和地理分布如附表。
主要参考文献
[1]李难.2005.进化生物学基础.北京:高等教育出版社,127
[2]王天仕.2010.人类生物学.北京:科学出版社,342
附表 四大人种主要特征比较表
黄色人种 白色人种 黑色人 棕色人种 性状
(蒙古人种) (欧罗巴人种) (尼格罗人种) (澳大利亚人种)
肤色 黄 浅 黝黑 棕或巧克力色
发色 黑 金黄一棕黑 黑 棕黑
发型 直而粗 波形 卷曲 较卷曲
眼色 黑或深褐 蓝色 黑 棕黑
眼大小 中等 较大 较大 大
内眦褶 . 有 无 无 无
鼻型 较低、中等宽 高且窄 宽而扁 高中等、极宽
鼻孔 卵圆形 纵径较大 横径较大 横径较大
唇厚 中等 薄 厚而外翻 厚
主 口宽 中等 小 特大 大
要 胡须
及体毛 不发达 发达 中等 较发达’
特 铲形上 多见 少见 少见 少见
门齿 征
头形 中头至短(圆) 中头至短头 长头 长头
头
颧骨突出、面扁平、 颧骨不突出、面前凸、 颧骨弱、面扁平、 颧骨稍显、面中等、 面形
眉脊不显、中颌 眉脊稍显、正颌 眉脊薄、凸颌 眉脊发达、凸颌、
变异大、从极矮 身材 中等偏低 高大 中等
到极高
四肢比例 短 适中 长 长
B高、Rh"阳性 A高B低、P,h阳 B高、P,h阳 B高、N特高、 血型
高、N高 性较低、M高 性较高、M高 M几无
弓型纹 ] 较少 中等 多 多
斗型纹 较多 中等 少 少
中国人、蒙古 北欧人、波罗 澳大利亚人、斯
代表人种 人、日本人、印 的海人、高加 中非人、东非人 里兰卡人、南印
第安人 索人、地中海人 度人
亚洲大陆东半 欧洲、北非、西 澳大利亚、新西
部、太平洋群岛 t亚、北印度、美 非洲、大洋洲、 兰、波利尼西亚、 地理分布
以及南北美洲 洲、南非和大洋 加里曼丹等地 斯里兰卡、印度
大陆等地 洲等地 南部等地
有抑菌作用。例如,鱼腥草、生姜、马齿苋、蒜苗等,适
当食用这些植物也能起到一定的防病、治病的功效。
另外,一些天然的中草药也具有广谱抗菌作用,像蒲公
英、金银花、黄连、野菊花、连翘、艾叶、芦荟等 3。学
生通过研究大蒜的抗菌活性,形成抗生素的概念,这自
然又激发学生的好奇心,激励他们进一步提出实验设
计方案,以寻找不同的“天然抗生素”。
(本文第一、二作者是201l级生物学课程与教学
论硕士研究生; 通讯作者)
主要参考文献
[1]吴宇虹.2011.大蒜素的作用机制及其在动物生产中的应用.饲
料博览,(5):52—54
[2]Fonseca砌.2011.Natural antibiotics:A hands—on activity on gar-
lic’8 antibiotic properties.The American Biology Teacher.73(6):
342~346
[3]周红.2009.身边的“天然抗生素”.医药常识(上),(9):18一
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