实验三

皮肤刺激强度分级
皮肤局部反应
无刺激性 轻度刺激性
无异常改变 充血、红斑
中等刺激性
红斑，少量小出血点，水肿， 少量丘疹以及小水疱
强刺激性
红斑，皮下出血，水肿，有很 多小水疱并有可能合并成大水 疱，糜烂，表皮剥落，有溃疡 形成等
评分 0 <2
2~6
>6
方法评价
皮肤刺激试验的结果不仅与检测技术有关， 也与试验过程中的质量控制相关。
经4~8h后，除去斑贴物，每24h观察一次各小区皮肤的局部 反应，连续观察4d，按皮肤刺激反应评分（表1），定量地 评定受试化学物对皮肤局部刺激作用的强度。红斑通过肉眼 观察，水肿通过轻轻触摸的方法来评分。
表1 皮肤刺激强度反应评分
皮肤反应强度
评分
无红斑

极轻微红斑（勉强可见）
1
A.红斑和 边界清晰的红斑（明显红斑，淡红至鲜红色） 2
本法与局部全封闭斑贴法不同之处在于： 1.每组的白色家兔数不应少于3只； 2.采用纱布作斑贴物，在无刺激作用的前提下，用半封
闭敷料固定； 3.斑贴不需要在擦伤皮肤上进行； 4.斑贴4h，然后去掉斑贴并清洗皮肤，观察0.5h、1h、
24h、48h和72h后的皮肤反应。 皮肤刺激反应评分同全封闭法。
结果分析
皮肤刺激试验又称皮肤原发性刺激试验。
试验目的
了解受试化学物对皮肤的直接刺激作 用以及刺激强度。
试验材料——实验动物
实验动物：成年白色家兔或白色豚鼠， 首选白色家兔。
在皮肤刺激试验中，动物品种的选择 很重要。目前多选用兔和豚鼠，对于 强刺激或无刺激作用的化学物选用家 兔检测效果好，但对作用缓和的刺激 性化学物，选用豚鼠所获得的试验结 果较准确。

第1篇一、实验目的1. 探究声音的传播途径。

2. 了解不同介质（气体、液体、固体）对声音传播速度的影响。

3. 验证声音能否在真空中传播。

二、实验器材1. 音叉2. 水槽3. 玻璃钟罩4. 抽气机5. 橡皮筋6. 钢尺7. 闹钟8. 塑料袋9. 纸屑10. 计时器三、实验步骤1. 实验一：声音在空气中的传播- 将音叉轻轻敲击，使其发声。

- 将耳朵靠近音叉，观察并记录听到声音的时间。

- 将耳朵远离音叉，保持相同距离，观察并记录听到声音的时间。

2. 实验二：声音在水中的传播- 将音叉轻轻敲击，使其发声。

- 将音叉放入水槽中，观察并记录听到声音的时间。

- 将耳朵靠近水中的音叉，观察并记录听到声音的时间。

- 将耳朵远离水中的音叉，保持相同距离，观察并记录听到声音的时间。

3. 实验三：声音在固体中的传播- 将音叉轻轻敲击，使其发声。

- 将音叉的尖端轻轻接触橡皮筋，观察并记录听到声音的时间。

- 将音叉的尖端轻轻接触钢尺，观察并记录听到声音的时间。

4. 实验四：声音在真空中的传播- 将闹钟放入玻璃钟罩内，确保闹钟完全封闭。

- 使用抽气机逐渐抽出玻璃钟罩内的空气。

- 观察并记录听到闹钟声音的变化。

5. 实验五：声音传播速度的比较- 将橡皮筋紧绷在钢尺上，使其产生振动。

- 用手指轻轻挠动桌面或桌腿，观察并记录听到声音的时间。

- 将耳朵贴在桌面上，继续挠动桌面或桌腿，观察并记录听到声音的时间。

四、实验现象1. 实验一：随着耳朵与音叉距离的增加，听到声音的时间逐渐延长。

2. 实验二：将音叉放入水中，听到声音的时间明显缩短；将耳朵靠近水中的音叉，听到声音的时间也明显缩短；将耳朵远离水中的音叉，听到声音的时间略微延长。

3. 实验三：将音叉的尖端轻轻接触橡皮筋和钢尺，都能听到声音，但声音的传播速度和强度有所不同。

4. 实验四：随着玻璃钟罩内空气的逐渐抽出，听到闹钟声音的时间逐渐缩短，直至完全听不到声音。

5. 实验五：用手指挠动桌面或桌腿，听到声音的时间明显缩短；将耳朵贴在桌面上，继续挠动桌面或桌腿，听到声音的时间进一步缩短。

实验三糖浆剂、煎膏剂的制备3．糖浆剂的制备（1）单糖浆【处方】蔗糖42.5g蒸馏水适量全量50mL【制法】取蒸馏水20mL煮沸，加入蔗糖搅拌溶解后，继续加热至沸，用多层纱布或脱脂棉趁热过滤，自滤器上添加适量蒸馏，使其冷至室温时为50mL，搅匀，即得。

【用法与用量】本品含糖量为85%(g/mL)或65%(g/g)，可用于制备其他含药糖浆，或作为液体口服制剂的矫味剂。

也可作片剂、丸剂的粘合剂。

作包糖衣物料时，浓度应为74%（g/g）左右。

（2）远志糖浆【处方】远志流浸膏（Extractum Polygalae Liquidum）5mL浓氨溶液（Ammonia Water）0.1mL苯甲酸钠（Sodium Benzoate）0.05g单糖浆（Simple Syrup）加至25mL 【制法】将浓氨溶液稀释成10%稀氨水，与远志流浸膏混合均匀，静置1天～2天备用，再将单糖浆在60℃以下加入远志流浸膏中至规定体积，混合均匀，即得。

【作用与用途】同远志流浸膏。

【用法与用量】口服，一日三次，每次2 mL～5mL。

【贮藏】密封。

4.煎膏剂的制备益母草膏【处方】益母草（小段）50g 红糖50g【制法】取益母草加水煎煮两次，第一煎沸后1小时，第二煎沸后30分钟，用纱布过滤，挤压残渣，滤液合并，浓缩，不断捞去泡沫，浓缩成清膏（比重为1.21～1.25，80~85℃热测），通常浓缩至1:1〈mL:g〉）。

另将红糖置小烧杯中，加入1/2量的开水，加热至全溶，用纱布滤过，置蒸发皿中，继续用文火炼至糖成深红色时，停止加热，慢慢将清膏加入其中，搅拌均匀，继续用文火加热收膏，待取少许能平拉成丝，或滴于纸上不见水迹，即得。

【性状】本品为棕黑色稠厚的半流体，气微，味苦、甜。

【鉴别】取本品10g，加水20ml，搅匀，加稀盐酸调节pH值至1～2，离心，取上清液，通过001´7型（732）Na－型强酸性阳离子交换树脂柱（内径0.9cm，柱高12cm）上，以水洗至流出液近无色，弃去水液，再以2mol/L氨溶液40ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。

【实验原理】 实验原理】
溶菌酶(lysozyme) 溶菌酶 又称胞壁质酶， 又称胞壁质酶，或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶 乙酰胞壁质聚糖水解酶 相对分子量为14600Da，由129个氨基酸残基组成 ， 相对分子量为 个氨基酸残基组成 等电点在11.0附近 附近 等电点在 最适pH 6-7，最适温度为 ℃ 最适 ，最适温度为50℃ 切断细菌细胞壁多糖中NAM和NAG之间的 1,4糖 和 之间的β- 糖 切断细菌细胞壁多糖中 之间的 苷键
【思考题】 思考题】
1. 离子交换层析法分离纯化蛋白质具有哪些优缺点？ 离子交换层析法分离纯化蛋白质具有哪些优缺点？ 2. 概述蛋白质分离提纯的基本原理和一般流程。 概述蛋白质分离提纯的基本原理和一般流程。
CM Sepharose FF（快速羧甲基琼脂糖凝胶） （快速羧甲基琼脂糖凝胶）
弱酸性阳离子交换剂 物理化学性质稳定、交换容量大、流速快、 物理化学性质稳定、交换容量大、流速快、洗脱条件温和
琼脂糖凝胶— 琼脂糖凝胶 O—CH2COO+
琼脂糖凝胶— 琼脂糖凝胶 O—CH2COONaCl
+
+
琼脂糖凝胶— 琼脂糖凝胶 O—CH2COO- Na+
实验原理溶菌酶lysozyme又称胞壁质酶或n乙酰胞壁质聚糖水解酶最适ph67最适温度为50切断细菌细胞壁多糖中nam和nag之间的14糖等电点在110附近实验原理实验原理溶菌酶的粗提溶菌酶耐热性较高而其它杂蛋白在高温下变性沉淀鸡蛋清液酸性条件85溶菌酶带正电荷与酸根负离子生成可溶性盐使溶菌酶与其他蛋白质分开得到溶菌酶的粗提液离心离子交换层析iec是基于待分离物质的酸碱性极性等差异它们与离子交换剂的亲和力不同通过离子之间的吸附和脱吸附而将各组分依次从层析柱中洗脱下来从而达到分离目的