斑马鱼胚胎发育的不同阶段

斑马鱼饲养及繁殖孵化过程研究摘要：斑马鱼是一种重要的脊椎动物模式生物，因其胚体全透明，繁殖速度快，使用样品量少，饲养成本低，而被作为一种理想的模式动物广泛的应用于科学试验。

本实验通过对斑马鱼生长条件研究，探究斑马鱼可以生长的适宜条件，并在一定条件下使斑马鱼产卵，探究斑马鱼孵化及鱼苗生长条件，建立斑马鱼的养殖平台，为之后进行斑马鱼毒性急性急性实验奠定良好的基础。

关键词：斑马鱼；生长发育；繁殖；胚胎发育孵化；鱼苗斑马鱼（学名：Barchydanio rerio var，别名：蓝条鱼）是一种重要的低等脊椎动物模式生物，因其具有个体小、生殖周期短、繁殖能力强及胚胎透明便于观察等优点，被广泛应用于发育生物学、环境毒理学、免疫学等领域[1]。

斑马鱼在基因水平上87%与人类同源，早期发育也与人类极为相似，这使得斑马鱼及其胚胎在人类疾病的研究中有重要的应用价值[2，3]。

其胚胎、幼鱼和成鱼最早是被用来检测水中的有毒物质和致畸物[4]。

Streisinger 等[8]于 1981 年首次将斑马鱼与遗传学和生物学领域划上联系，使其研究领域得以拓展和延伸。

目前，斑马鱼已被广泛用于遗传学、生态毒理学、药物药效活性物质筛选、药物代谢、药物毒性物质筛选等方面[9]。

该实验通过观察斑马鱼的形态特征，生活习性，繁殖发育，调节孵化条件，熟悉并建立斑马鱼养殖、繁殖、孵化、鱼苗养殖等一系列养殖平台，为之后开展斑马鱼相关生理药理实验奠定基础。

1实验材料1.1 实验用鱼成年AB系斑马鱼，六月龄，来源于斑马鱼科研服务中心1.2 仪器与设备T-240F9L水族箱（宝潮水族专营店）；产卵缸（南京一树梨花生物科技有限公司）培养皿若干、斑马鱼饲料（斑马鱼科研服务中心）、控温棒（斑马鱼科研服务中心）、生化培养箱（上海坤天实验室仪器有限公司）、6孔板、电子分析天平（万分之一赛多利斯科学仪器有限公司）。

1.3 实验试剂无水乙醇、500ml硝化细菌菌液、260ml水质稳定剂（上海寸景水族用品有限公司）、250ml胚胎培养液、亚甲基蓝（分析纯，成都市科龙化工试剂场2斑马鱼形态及习性2.1外形及雌雄鱼分辨AB型斑马鱼（野生型）体长为4～6cm，最大体长可达8cm。

斑马鱼两种转基因方法的比较柳晓瑜;王豪博;仇雪梅;于旭蓉;刘洋;王秀利【摘要】对斑马鱼(Danio rerio)的两种转基因方法进行比较,分别采用显微注射和电脉冲导入法将携带有GFP报告基因的表达载体质粒导入斑马鱼受精卵,得出电脉冲最佳导入条件为最适电压125 V/cm,电阻50 Ω,最佳导入时期为1-2细胞期(40-50 min),以及最佳外源基因浓度为300 ng/μL.利用两种方法均得到转GFP基因的斑马鱼,而两种方法对比的结果表明,显微注射法耗时费力,但转基因阳性率高；电脉冲法一次可以处理大批量受精卵,但转基因阳性率远低于显微注射法.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2011(000)012【总页数】5页(P205-209)【关键词】斑马鱼;显微注射;电脉冲导入法;转基因效率【作者】柳晓瑜;王豪博;仇雪梅;于旭蓉;刘洋;王秀利【作者单位】大连海洋大学生命科学与技术学院,大连116023;大连海洋大学生命科学与技术学院,大连116023;大连海洋大学生命科学与技术学院,大连116023;大连海洋大学生命科学与技术学院,大连116023;大连海洋大学生命科学与技术学院,大连116023;大连海洋大学生命科学与技术学院,大连116023【正文语种】中文自20世纪80年代首批转基因鱼诞生以来［1］，世界范围内掀起了转基因鱼研究的热潮，很多实验室都进行了一系列的转基因鱼的研究［2］。

目前，已有多种转基因技术应用于转基因鱼的培育和品种改良。

其中显微注射应用的最为广泛，1984年，我国科学家朱作言［1］应用显微注射的方法将人的生长激素基因注射到了鱼的受精卵原核，获得了生长速度快的转基因鱼。

之后显微注射技术被广泛应用，并日益改进和完善。

其次，电脉冲基因导入法和精子介导法在鱼类转基因的研究中也被大量使用。

Aliye等［3］应用电脉冲基因导入法将Cecropins基因导入青鳉受精卵中，得到了少量的转基因个体，但检测结果显示，这些阳性个体的抗菌活性明显高于对照组。

姓名：谭克强专业：生物技术学号：2009211803斑马鱼模式生物简介斑马鱼是在印度和巴基斯坦河里发现的一种鲤鱼。

成年3~4cm 长，有漂亮的花纹，群居生活。

在实验室里，斑马鱼广泛用于标准毒理学检验。

1996年，一系列论文报道斑马鱼胚胎发育的突变体的筛选及鉴定[1]，揭开了斑马鱼广泛应用于基因组功能分析、获得与脊椎动物发育和疾病相关的新基因研究的序幕。

斑马鱼(Danio rerio)作为水生脊椎动物的代表, 是现代遗传学、细胞生物学及发育生物学等研究的常用模式动物。

生物信息学预测认为, 斑马鱼基因组可能编码超过 400 种 miRNAs[2]。

通过构建不同发育阶段斑马鱼的小 RNA cDNA 文库发现, 斑马鱼miRNAs总数已经达到217个[2], 其中一些miRNAs在斑马鱼中的功能已经被解析。

miRNAs整体缺失对斑马鱼胚胎发育的影响研究结果表明, 缺失 miRNAs 的斑马鱼胚胎早期发育过程明显缓慢, 最初的 24 h 发育进程就被延迟了 3~4 h。

在原肠胚发育过程中, 突变胚胎不能进行正常的外包和内卷, 正常胚胎的索前板迁移发生在 80%外包时期, 而突变胚胎由于外包的推迟, 索前板迁移发生在 50%~60%外包时期。

此后, 由于体轴延伸减少导致胚胎缩短和脑部区域细胞的积累。

而在发育晚期, Dicer 突变胚胎后部卵黄延伸的范围也减少[3]。

Dicer 突变严重影响了神经胚形成。

由神经板发育成神经管的过程不能正常完成, 使神经管变成一个实心的棒状结构。

Dicer 突变胚胎脑内缺乏脑间隔而导致脑室数减少, 神经管腔的缺失和神经底板的减少表明脊髓发育也被干扰。

另外, 视网膜的发育也受到影响。

尽管神经系统发育畸形, 基因表达分析却发现, 神经管的前-后轴和背-腹轴图示均没有被完全破坏, 说明胚胎神经系统的图式形成和命运决定过程受到 miRNAs 的影响较少, 而脑的正常发育和神经细胞分化却需要 Dicer 酶的作用[3]。

“斑马鱼的培养及TALENs技术的应用”预习报告一、实验原理1、TALENs实验技术原理类转录激活因子效应物核酸酶(Transcription activator-like effector nuclease, TALEN)是最近发展起来的一类新型的人工核酸内切酶, 它由特异性的 TALE DNA 结合结构域和非特异性的 FokⅠ核酸内切酶切割结构域组成。

TALEN 能够根据用户需要切割特定的核苷酸靶序列, 造成 DNA 双链断裂, 从而诱导该靶序列产生 indel突变。

2、斑马鱼的生活习性以及作为模式生物的优势斑马鱼是生长在印度、巴基斯坦淡水河流中的一种硬骨鱼（鲤鱼），成年鱼全身仅长4－5厘米，因全身横向分布着一道一道褐色的斑马线而得名。

斑马鱼很容易在实验室饲养，一般3个月就可以达到生殖成熟期，雌鱼每次产卵200枚左右，一生可产卵数千枚，斑马鱼所产之卵经24小时即可胚胎发育成熟，仔鱼期只有1个月。

更独特的是，斑马鱼的卵是透明的，整个胚胎发育在体外完成，也是透明的。

优势：显著优势在于体积小( 3cm～4 cm)，可在较小的空间大量繁殖；产卵量高(每周200多个)；发育快，许多组织在受精后24 h开始形成；成熟周期短；体外受精且胚胎透明，可在体视解剖镜下观察；单倍体、雌核发育二倍体的制作和突变体的获得均较容易；精子可以冷冻保存。

所有这些特点都使斑马鱼非常适合于遗传学的研究。

斑马鱼的基因组中大约含有30000个基因，这个数目与人类差不多，而且它的许多基因与人类存在一一对应的关系。

它的神经中枢系统、内脏器官、血液以及视觉系统，在分子水平上85%与人相同。

二、实验目的通过本实验可以了解TALENs实验技术的基本原理，熟悉其几个关键实验步骤的操作，学习显微注射技术，从而能够独立应用这些技术进行相关学术研究。

三、实验器材1、实验仪器超净工作台(细菌操作用)、细菌培养摇床、台式离心机、凝胶电泳仪、凝胶电泳槽、凝胶成像仪、水浴锅、恒温培养箱、漩涡振荡器(Vortex) 、 NanoDrop(ND-1000 Spectro pho tometer)、PCR 仪，体视显微镜、恒温培养箱、配鱼缸、台式冷冻离心机 1.3.2 耗材细菌培养皿、移液枪、移液枪枪头、Eppendorf 离心管、PCR 管、显微操作仪，倒置显微镜，拉针仪，胶头滴管，胶固定板。

斑马鱼胚胎发育过程中的基因调控机制研究斑马鱼是一种高度透明、易于研究的水生生物，因此成为了研究生物学的理想模型。

在斑马鱼的胚胎发育过程中，基因调控机制扮演着关键的角色，控制着发育的每个阶段。

本文将介绍斑马鱼胚胎发育过程中的基因调控机制的研究现状和研究进展。

一、基因调控网络的建立要研究斑马鱼胚胎发育过程的基因调控网络，首先需要识别和鉴定参与发育调控的关键基因。

通过全基因组筛选和高通量测序技术，科研人员可以在斑马鱼中鉴定出数千个关键基因并建立基因调控网络。

实例研究：一项研究使用了大规模chIP（染色质免疫共沉淀）测序技术，在斑马鱼胚胎中鉴定了数千个与基因转录调控相关的转录因子和DNA结合蛋白基因。

这项研究为构建斑马鱼基因调控网络提供了基础数据。

二、基因表达调控机制的研究与其他多细胞生物一样，斑马鱼的基因表达调控机制包括转录后修饰、microRNA调控等多种方式。

这些调控机制之间相互交织、紧密联系，共同控制着斑马鱼胚胎发育过程。

实例研究：基因表达调控机制的研究需要集成多种技术手段，如RNA测序、原位杂交、Western blot等。

一项研究通过整合这些技术手段，发现成纱突即成胆突转化过程中，转录因子sox32通过调控mir-21基因的表达，促进了细胞转化的过程。

三、非编码RNA调控机制的研究非编码RNA（non-coding RNA）是指不具有编码蛋白的RNA分子，包括有机体内丰富的microRNA、small interfering RNA等。

在斑马鱼胚胎发育过程中，非编码RNA发挥着重要的调控作用，参与调控基因表达、细胞分化等过程。

实例研究：研究人员使用转录组测序技术，发现在斑马鱼的转变腹盘（metamorphic olfactory placode）转化过程中，miR-130b的表达量显著上调。

miR-130b通过抑制蛋白质转录调节因子Dlx3b的表达，从而协调着细胞转化过程。

四、基因表达时序调控机制的研究在斑马鱼胚胎发育过程中，基因表达的时序也是关键的。

斑马鱼的品种介绍-斑马鱼怎么样？斑马鱼的品种介绍-斑马鱼怎么样？斑马鱼的简介斑马鱼，是一种常见的热带鱼。

斑马鱼性情温和，小巧玲珑，几乎终日在水族箱中不停地游动，易饲养，可与其他品种鱼混养。

饲养水温20～23℃，在水温11～15℃时仍能生存。

斑马鱼体型纤细，孵出后约3个月达到性成熟，成熟鱼每隔几天可产卵一次。

卵子体外受精，体外发育，胚胎发育同步且速度快，胚体透明。

发育温度要求在25-31℃之间。

斑马鱼由于个体小，养殖花费少，能大规模繁育。

由于斑马鱼基因与人类基因的相似度达到87%，这意味着在其身上做药物实验所得到的结果在多数情况下也适用于人体，因此它受到生物学家的重视。

鱼胚胎突变体是研究胚胎发育分子机制的优良资源，有的还可做为人类疾病模型，斑马鱼已经成为最受重视的脊椎动物发育生物学模式之一，在其它学科上的利用也显示很大的潜力。

斑马鱼怎么样？斑马鱼体色为银色或金色，覆盖著一些蓝色或紫色的横纹，这些横纹从头部延伸至尾鳍的后端，臀鳍和尾鳍上同样也有这种条纹，背部呈浅橄榄黄。

雄鱼比雌鱼更修长，但略小一些。

体长可达3.8厘米。

有许多人工培养的品种。

华盛顿大学西雅图一直在对斑马鱼进行研究，试图解决人类听力丧失的问题。

和许多其他水生生物一样，斑马鱼在身体表面长有毛细胞。

这些毛细胞的作用是探测水中的振动，其原理与人类内耳中的毛细胞相似。

但是，与人类不同的是，斑马鱼的毛细胞在受损后还可以再生。

研究人员希望他们的工作可以揭开谜底，保护人类的毛细胞免受损伤、并推动毛细胞的再生。

斑马鱼的品种介绍蓝斑马、红斑马、黄斑马、喷点斑马、电光斑马、闪电斑马、豹纹斑马、虹带斑马、火红金线斑马、银河斑马、蓝带斑马、虎纹斑马等。

斑马鱼是研究发育生物学的新兴模式动物。

斑马鱼由于具有饲育容易、胚胎透明、体外受精、突变种多、遗传学工具成熟等诸多优点，已成为研究脊椎动物发育与人类遗传疾病的新兴模式动物。

2023级医学实验技术专业《细胞生物学实验技术》课程实验报告学号姓名成绩实验16-18 综合实验（具体实验内容）一．实验原理在规定的条件下，使鱼接触含不同浓度受试物的水溶液，以120h为一个实验周期。

期间记录实验鱼的存活率、畸形率、22h、27h自主摆尾、48h心率、72h孵化率、120h体长，以此评估重金属／中药单体的安全浓度范围。

通过鱼类急性毒性试验可以评价受试物对水生生物可能产生的影响，以短期暴露效应表明受试物的毒害性。

鱼类急性毒性试验不仅用于测定化学物质毒性强度、测定水体污染程度、检查废水处理的有效程度，也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供环境依据。

我国可采用的实验鱼有四大养殖淡水鱼（青鱼、草鱼、鲢鱼和鳞鱼）、金鱼、鲫鱼、野生的食蚊鱼、斑马鱼等。

本实验选用斑马鱼作为实验材料。

二．实验器材斑马鱼胚胎，重金属三．实验试剂二甲基亚飙，超纯水，E3培养基（5 mM NaCl 、0.17 mM KCI 、0.33 mM CaCI2、0.3mMMgSO4)四．实验步骤1．暴露浓度配制重金属1、10、100pg/ L2．斑马鱼胚胎培养及暴露取性成熟斑马鱼所产正常胚胎，于受精后2h内在解剖显微镜下观察，随机挑选发育正常处于囊胚期的胚胎约5000颗，重金属不同度组、共暴露5d，对照组为0.01%DMSO( v / v ）或超纯水＋E3培养基暴露，不做任何处理。

每天更换暴露液。

各组斑马鱼胚胎／幼鱼以14h/10h的光暗周期培养于（28.0±0.5)" C 的稳定环境中，实验组暴露至受精后120h。

3．暴露期间观察指标每日定时于倒置显微镜下观察并记录各组斑马鱼各项生长指标，包括胚胎孵化率，畸形率（畸形包括原肠胚终止、脊柱畸形、心包囊水肿等），存活率，22h、27h自主摆尾，48h心率。

4．收样在收集样本当天，检测斑马鱼的体重和体长将斑马鱼仔鱼于0.03%MS-222中麻醉，样本收集于EP 管中，-80℃冷冻保存。

温度对斑马鱼胚胎发育的影响李忻林;董洪坪;王婷;黄四洲;蔡佩玲【摘要】目的探讨温度对斑马鱼胚胎发育速度及器官分化的影响.方法将带绿色荧光的转基因斑马鱼胚胎分配至3个培养皿中,各放160个胚胎,分别放置于28.5℃(标准发育温度)、31℃(高温)和25℃(低温)3个不同温度中进行孵育,孵育至3h、6h、10 h、24h和48 h时进行观察拍照,并在36 h、48 h和72 h时用荧光显微镜观察胚胎的心脏和血管,比较不同温度对胚胎发育进程及各器官发育的影响.结果3种温度下,胚胎存活率分别为92.5％、89.4％和91.25％,没有显著性差异.相同发育时间内,与标准温度中发育的胚胎相比,31℃中的胚胎发育较快,而25℃的胚胎发育所处的时期较早.发育到相同分期,31℃所需时间比标准温度短,而25℃所需时间长.3个不同温度下,胚胎心脏和血管的发育均不受影响.结论高温促进胚胎发育,低温延迟发育,但高温或低温均不影响胚胎器官正常发育.结合实际科研需要,可通过调控温度来调节斑马鱼胚胎的发育进程.【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2014(033)006【总页数】7页(P829-835)【关键词】温度;斑马鱼;胚胎;发育【作者】李忻林;董洪坪;王婷;黄四洲;蔡佩玲【作者单位】成都大学医护学院,成都610106;成都医学院基础医学院,发育与再生四川省重点实验室,成都610500;成都医学院基础医学院,发育与再生四川省重点实验室,成都610500;成都大学医护学院,成都610106;成都医学院基础医学院,发育与再生四川省重点实验室,成都610500;成都大学医护学院,成都610106【正文语种】中文【中图分类】Q132.4斑马鱼(zebrafish, Danio rerio)有诸多优点，1)有近似人类的各种器官系统，如心血管系统、神经系统(Schmidt et al., 2013)等，适合研究胚胎及器官发育；2)体外受精且早期胚胎透明，利于观察发育中完整的形态变化；3)养殖设备简单且成本低；4)性成熟周期短，繁殖能力强，3～4个月即发育成熟，每周可交配一次，每次产卵100～300枚；5)易进行诱发突变及转基因操作来研究基因功能。

斑马鱼的繁衍和饲养技术1 斑马鱼斑马鱼（Zebra fish,Danio rerio）,又名蓝条鱼，花条鱼，斑马担尼。

斑马鱼，是淡水水族箱观赏鱼，原产于亚洲，体长约4公分，具暗蓝与银色纵条纹。

斑马鱼体型纤细，成体长3-4cm，对水质要求不高。

斑马鱼的雌雄不难区分：雄斑马鱼鱼体修长，鳍大，体色偏黄，臀鳍呈棕黄色，鱼纹显著。

雌鱼鱼体教肥大，体色较淡，偏蓝，臀鳍呈淡黄色，胚卵期鱼腹膨大明显。

斑马鱼属卵生鱼类，4月龄进入成熟期，一般用5月龄繁衍较好。

2 斑马鱼饵料及其营养成份斑马鱼对饵料的要求不高，人工配合饵料及各类鲜活饵料都可。

但为保证斑马鱼较好的繁衍和生长，最好多种饵料结合投喂，人工饵料能够用软颗粒饲料或全价硬颗粒饵料。

所用配合饵料的蛋白质含量要高于40%，粗脂肪高于%，水分低于4%，钙、磷含量别离为%%和%%。

若是培育亲鱼，配合饵料中应添加一些增进性腺发育的元素，如Va、Vd、Ve和微量元素锌、铁等。

在不同的发育时期选用鲜活饵料的种类不同。

在斑马鱼仔鱼阶段，能够投喂草履虫、轮虫、酵母等作为其开口饲料；在幼体阶段，能够投喂卤虫的无节幼体；随着斑马鱼的长大，饵料也变得丰硕起来，能够投喂大型的浮游动物类和桡（rao）足类，或是蝇幼虫、摇蚊幼虫、水蚯蚓等，也能够投喂捣碎的小鱼小虾。

活体饵料对斑马鱼的性腺发育能够起到必然的增进作用，因此在亲鱼培育时，适量增加活体饵料会缩短其性腺发育周期。

3 斑马鱼的繁衍斑马鱼亲卵亲鱼的培育：斑马鱼在繁衍时通过光周期作用，在日出后产卵，为增进斑马鱼的成熟，咱们在水族箱内依照雌雄1：2-1：3的比例放入斑马鱼，控制光周期为14：10（光照14h,黑暗10h），如有必要能够用黑布水族箱罩住，增加水体温度至摄氏度，增加投喂次数，能够由原来的天天投喂2-3次增加为4次，而且增加鲜活饵料的投喂。

（1）自然产卵：斑马鱼一般10-12周可达到性成熟，但最好用17-18周的亲鱼进行大规模繁衍，斑马鱼为异体体外受精，繁衍周期短（一般7d左右），温度适合时一年四季都可产卵，卵量300-1000粒，为非粘性沉型卵。

重金属对斑马鱼的毒性效应及作用机制研究一、概述重金属，如铅、汞、镉、铬等，是环境污染物中的一类重要成分，其广泛存在于工业废水、汽车尾气、农药使用等环境中。

这些重金属具有不易降解、生物累积性强等特性，对生态环境和生物健康构成了严重威胁。

斑马鱼作为一种重要的水生生物模型，因其繁殖周期短、基因组小、易于饲养和观察等特点，在环境毒理学研究中被广泛应用。

近年来，随着环境问题的日益突出，重金属对斑马鱼的毒性效应及作用机制成为了环境科学、生态学、生物学等多个领域的研究热点。

重金属对斑马鱼的毒性效应主要表现在生长发育、繁殖、行为、生理机能等多个方面。

研究表明，重金属暴露会导致斑马鱼生长迟缓、体长减小、繁殖力下降等现象。

同时，重金属还会影响斑马鱼的行为，如游泳速度、逃避反应等。

在生理机能方面，重金属会导致斑马鱼氧化应激、免疫抑制、基因表达异常等。

重金属对斑马鱼的毒性作用机制十分复杂，主要涉及重金属在斑马鱼体内的吸收、分布、转化和排泄等过程。

重金属进入斑马鱼体内后，会通过食物链、水体等途径进入体内，与蛋白质、核酸等生物大分子结合，导致生物大分子结构和功能的改变。

重金属还会干扰斑马鱼体内的信号传导、基因表达等生物学过程，进而引发一系列毒性效应。

深入研究重金属对斑马鱼的毒性效应及作用机制，对于评估重金属对水生生态系统的影响、制定环境保护措施、推动环境科学的发展具有重要意义。

本文将围绕重金属对斑马鱼的毒性效应及作用机制展开研究，以期为相关领域的研究提供理论支持和实践指导。

1. 斑马鱼作为生物毒性测试模型的优势斑马鱼（Danio rerio）作为生物毒性测试模型，在环境毒理学领域具有显著的优势。

斑马鱼生命周期短，繁殖速度快，便于进行大规模实验。

成年斑马鱼在适宜条件下可以每日产卵，每对成年斑马鱼每周可产卵数百枚，这为毒性测试提供了充足的研究材料。

斑马鱼胚胎透明，便于观察胚胎发育过程中的毒性效应。

在重金属暴露实验中，可以通过显微镜直接观察胚胎发育异常，如心率变化、脊柱弯曲等，这些直观的观察结果有助于评估重金属的毒性。

繁殖斑马鱼后代流程1.配鱼：头一天晚上将鱼配上，每个配种盒里放1条雄鱼，1～2条雌鱼。

同品系的鱼自交至少需要配10对，这样保证至少有5对产卵，以保证后代的基因库。

不同品系的鱼（比如与野生型交配）配5对以上，保证至少有3对产卵。

2.收集胚胎：当天早上收集胚胎，挑去其中异物，再用embryomedia 清洗2-3次，放入培养箱。

3.挑选胚胎：胚胎发育4-5小时，移去未受精的卵及死胚。

第二天早上观察，若胚胎发育异常（不是突变体）比率较高（>10%），则丢弃整盘胚胎。

正常的胚胎中每盘取10～20枚左右，混成一盘，再分装成若干盘，每盘20～25枚（这样以后每缸鱼里面都有不同亲本的后代，以保证基因库的大小）。

以后的四天内每日检查胚胎一次，去掉死胚。

4.培养鱼苗：第5天的小鱼放入鱼房烧杯中，加入约200ml 鱼缸水（system water）, 放在标记为（5～12天）架子上。

鱼苗进食有3个阶段：第一阶段草履虫，第二阶段丰年虫+草履虫，第三阶段丰年虫，每一阶段都放在不同的架层上。

放进去后头两天观察一下鱼是否正常进食（可从鱼的肚子来观察），并且注意食物是否过多过少。

在完全换成丰年虫之前要确认小鱼是否已经能吞食丰年虫（肚子是否变红），确认大部分都能吞食丰年虫之后再放到相应的架层上，否则应相应地增加或缩减第二阶段。

经常检查（尤其是刚开始喂食阶段和不同阶段转换的时候一定要检查），用吸管吸除垃圾及死鱼。

5.转入系统：满20天并且绝大多数小鱼能够吃丰年虫3～5天之后，将小鱼转到鱼缸中。

鱼缸上贴上标签，并贴红标签（红标签是提醒阿姨少喂食）。

用深蓝色细网孔后背板，确认后背板与鱼缸之间紧密接触，小鱼不会轻易跑到后背板后面。

转入系统头两天关闭水流，2～3天之后水流成连续滴状为宜，以防小鱼被冲走。

一周之后（此时鱼一个月大），水流进一步增加，但仍要比较小，水流基本垂直落下为宜。

去红标签。

6.分缸：当鱼满1.5个月，视其生长情况可以分缸，分成每缸10条鱼为宜。