黑木耳二级菌种培养料配方筛选研究

预实验：黑木耳液体发酵培养黑色素培养基优化1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 菌种：黑木耳1.1.2 主要试剂土豆KH2PO4 MgSO4葡萄糖蔗糖麦芽糖可溶性淀粉蛋白胨酵母膏硫酸铵尿素盐酸1.1.3 主要仪器摇瓶培养箱分析天平150r/min 摇床分光光度计离心机水浴锅真空冷冻机1.2 培养基的制备1.2.1 PDA培养基土豆汁20%+葡萄糖2%+琼脂2%，pH值自然。

1.2.2 发酵液液体种子培养基PDB土豆汁20%+葡萄糖2%，pH值自然。

1.2.3 摇瓶发酵实验培养基1）碳源筛选试验培养基：土豆汁20%+KH2PO4 0.3%+MgSO4 0.15%+蛋白胨0.15%+碳源2%2）氮源筛选试验培养基：土豆汁20%+KH2PO4 0.3%+MgSO4 0.15%+葡萄糖2%+氮源2%3）无机盐试验培养基：土豆汁20%+葡萄糖2%+蛋白胨0.15%+不同配比的微量元素4）pH试验培养基：土豆汁20%+KH2PO4 0.3%+MgSO4 0.15%+蛋白胨0.15%+葡萄糖2%+不同pH条件5）转速：土豆汁20%+KH2PO4 0.3%+MgSO4 0.15%+蛋白胨0.15%+葡萄糖2%+不同转速6）正交试验培养基：设计采用四因素三水平正交表1.3 实验方法1.3.1 黑木耳菌丝发酵培养1) 菌种培养（活化菌种）:从母种试管中取菌丝块接种于PDA平板中，于25℃培养7d2) 液体种子培养（扩大并制备液体菌种）:将活化的菌种切割成黄豆大小的菌丝块，接种入装有100mL液体培养的250mL三角瓶中，30℃，150r/min培养7d，备用。

3) 发酵培养（单因素实验）:摇瓶中装入不同的摇瓶发酵实验培养基100mL，接种量为10%，于30℃,150r/min培养4d。

1.3.2 黑色素的分离与提纯①将培养一段时间的发酵液取出，过滤除菌体；②用1moL/L的HCl调节滤液的pH为2,10000r/min离心15min；③去上清，取沉淀，在沉淀物中加蒸馏水震荡混匀，用1mol/L的HCl调节pH为2，10000r/min离心10min；④反复三次后，去上清，沉淀用蒸馏水洗离心3次；⑤取沉淀冷冻干燥，即为黑色素纯品。

黑木耳二级菌种成活率低的成因及改进措
施
二级菌种成活率低的问题,一直困扰着很多黑木耳栽培者。

这种现象比较普遍,其主要原因是培养基酸度太大。

由于木屑紧缺,很多栽培者夏季购进木屑,贮藏期内由于微生物发酵产酸,或者是生产时料堆过大,装瓶时间过长,再加上八、九月份气温高,微生物在料中繁殖过多,产生的酸使培养基中酸度过大,造成菌种成活率低,甚至全部不成活。

所以,在生产菌种时,应根据培养料的具体情况,来调节酸碱度。

如果是陈木屑一般都偏酸,应加适量的石灰调节,拌料后用PH试纸测试,PH值应在7左右,不能小于6,大于7.5;如果石灰过量PH 值达8以上,菌种也无法成活。

根据我们多年的生产经验,陈木屑每麻袋应加石灰3两,石膏4两;新鲜木屑每麻袋应加石灰2两,石膏5两。

另外应做到当天拌料,当天装瓶灭菌。

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- .XX市农业技术规XHNZXX019-2013黑木耳栽培技术规XXX市农业局制定XX省农业厅批准实施发布日期：2013年月日黑木耳栽培技术规X为规X黑木耳栽培技术，制定本规X。

1 栽培场所1．1产地环境生态环境良好，水质优良，无有毒有害气体，周围无工业“三废”、禽畜舍、垃圾（粪便）场、各种污水及其他污染源（如大量扬灰的水泥厂、石灰厂等），并且远离医院，尽可能避开学校、公共场所和居民住宅区。

产地环境应符合NY5358的要求。

1．2场地布局生产区应布局合理，生产区与生活区严格分离，生产区料场、制种、发菌及出菇区衔接合理。

可分为堆料场、仓库、灭菌区、培养区、栽培区等。

还应防止因菇场培养料堆制发酵及废弃物处理对周围环境产生不良影响。

1．3原料场地原料的贮藏场地必须具有一定的隔离条件，不许接触或混杂有含有害物质或超标准的物质。

1．4菌种培养区按100立方米空间，配3匹冷暖空调2台，温度开始控制在28～30℃之间，后期降至24～25℃，培养料含水量为60％～65％左右，空气相对湿度为70％左右。

1．5菇房1．5．1选择阴凉、通风良好、砖混结构的房屋。

1．5．2菇房宜坐北朝南，具有保温、保湿和空气交换功能。

1．5．3菇房的内墙和房顶宜用6厘米厚的挤塑泡沫粘贴上，增强保温能力。

1．5．4 菇房制冷要求安装制冷机，制冷机的风机处安排两个大小为0.3米×0.3米的窗口，每个窗口安装一台排气风扇。

1.6保鲜库：按一间存放5000公斤鲜菇标准设计，库房面积32平方米,容积80立方米，每间配7.5匹紧扣压缩机、DD60冷凝器各一套，库板采用48公斤级聚胺酯板拼成，要求库温保证在0～4℃之间。

2原料要求各种原料应符合NY 5099 规定。

2.1 水应符合GB5749 规定。

2.2 原辅材料2.2.1新鲜、干净、干燥、无虫、无霉、无异味。

2.2.2基质应符合NY 5099规定的要求。

2.2.3 秸秆、棉籽壳等作为无公害食用菌生产原辅材料的作物在收获之前一个月不能施用高毒农药。

第三章第一节黑木耳常用三级菌培养基配方季占军黑木耳三级菌包也就是我们常说的出耳棒，三级菌是直接用来出耳的，所以在制作过程中的每一个细节都能直接影响到后期木耳的产量，而且在出耳期的很多病害也是菌棒制作期留下的隐患，所以菌棒制作至关重要，广大种植户一定要认真对待。

一句话菌壮耳肥，具体操作细节如下：一、常用三级菌培养基配方因黑木耳属木腐菌所以常用的培养基配方多为木屑配方，但因各地资源不一样，加之近年来天然林禁伐政策的实施，所以在零八年开始我们进行了黑木耳代料培养基的筛选实验，下面我把具体的培养基配比介绍一下：1. ⑴木屑培养基，木屑86%，麦麸10%，豆粕2%，石膏1%，石灰0.5%-1%。

⑵木屑81%，麦麸5%，稻糠10%，石膏1%，豆粕2%，石灰0.5%-1%。

以上木屑培养基配方中求大片不添加防腐剂，稻糠要求用磨米下来的精糠，石灰的添加量应以PH值为标准，要求拌完料后PH值7.5-8之间，石膏应该用食用菌专用石膏粉。

2.木屑加玉米芯配方：木屑：58%，玉米芯30%，麦麸8%，豆粕2%，石膏1%，磷酸二氢钾0.1%，石灰1%。

木屑：56%，玉米芯30%，稻糠10%，豆粕2%，石膏1%，磷酸二氢钾0.1%，石灰1%。

以上配方中要求玉米芯大小不超过0.6CM，木屑应为粗细各一半为好，特别注意两点：1，玉米芯使用前要充分预湿。

2，PH值在拌料后应在8左右，而且料要现拌现用。

3.木屑加棉壳配方：木屑48%，棉籽壳40%，麦麸10%，石膏1%，石灰0.5%-1%。

木屑43%，棉籽壳40%，麦麸5%，稻糠10%，石膏1%，石灰0.5%-1%。

在以上配方中，棉壳要求用中壳中绒的而且要提前预湿，因棉绒吸水性强所以在拌料过程中要格外注意含水量。

4.木屑加豆秸配方：木屑58%，豆秸30%，麦麸8%，豆粕2%，石膏1%，石灰0.5%-1%，磷酸二氢钾0.1%。

木屑53%，豆秸30%，麦麸5%，稻糠8%，玉米面2%，石膏1%，石灰扫码查看本文高清电子版0.5%-1%，磷酸二氢钾0.1%。

黑木耳栽培技术黑木耳又名木耳、耳子、光木耳、云耳。

隶属真菌门,担子菌亚门,层菌纲,木耳目,木耳科,木耳属。

黑木耳不仅有独特得味道,而且有很高得营养价值。

它得营养成分仅次于肉、蛋、鱼、豆,而为其她任何蔬菜所不及。

因此,人们把黑木耳比作“素中之荤”得保健食品。

一、主要生物学特性(一)形态特征黑木耳就是一种胶质菌,半透明、深褐色、有弹性,一般直径5 cm～6cm,大者可达10 cm～12cm。

初为耳状、杯状,后渐变为叶状,花瓣状。

表面光滑或有脉状皱纹。

子实层覆盖在子实体得下表面,红褐色,干后收缩,变为橙黄色、深褐色或暗黑色,上表层表面褐色至黑褐色,密生短毛,无子实层。

(二)营养特性黑木耳生长对养分得要求以碳水化合物与含氮物质为主,还需要少量得无机盐类。

1.碳源碳源就是黑木耳生长发育所需能量得主要来源。

木耳得菌丝能利用葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉、纤维素等各种碳源,木屑中得各种营养成分只有处于溶解于水得状态时,木耳菌丝才能吸收利用。

菌丝先利用培养料中可溶状态得碳水化合物,同时分泌大量得酶把木屑中得纤维素、木质素等碳水化合物分解成可溶性物糖,再进一步利用。

栽培中碳源主要由阔叶锯沬、玉米芯、棉籽壳与甘蔗渣等来提供。

2.氮源含氮物质就是构成黑木耳细胞原生质必需得物质,黑木耳能利用得氮源有蛋白质、氨基酸、尿素、铵盐、硝酸盐等,栽培中一般以添加麦麸来提供。

3.矿质元素矿质元素钙、磷、钾、铁、镁就是木耳体内蛋白质与酶得重要组成部分,需量不大,但不可缺少。

一般木屑中就可以提供,栽培中可加入石膏、磷酸二氢钾。

(三) 环境条件1.温度温度就是影响黑木耳生长速度、产量、质量得主要因子。

黑木耳属中温型菌类,它得菌丝体在5℃～35℃之间均能生长发育,但以22℃～28℃之间为最适宜,28℃～32℃生长速度虽快,容易老化。

黑木耳得子实体在15℃～30℃之间都可以形成与生长,但以22℃～28℃之间生长得耳片大、肉厚、质量好。

28℃以上生长得木耳肉稍薄、色淡黄、质量差。

黑木耳不同培养基配方及养菌方式的效果比较
文冬华;盛立柱;叶晓菊
【期刊名称】《食药用菌》
【年(卷),期】2018(026)001
【摘要】采用不同麸皮含量配制黑木耳培养基，与传统配方进行栽培比较试验，并对同一培养基的菌株进行“1”型和“#”型码放养菌方式比较，结果以配方2（木屑83．5％，麸皮14．7％，碳酸钙1．8％，含水量58．8％）的平均产量较高，平均每支菌棒产干耳64．25克；而以“#”型码放养菌方式的平均产量较“1”型码放方式的略高。

【总页数】2页(P44-45)
【作者】文冬华;盛立柱;叶晓菊
【作者单位】龙泉市农业局,浙江龙泉323700;龙泉市农业局,浙江龙泉323700;龙泉市农业局,浙江龙泉323700
【正文语种】中文
【中图分类】S646
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